昆虫抗菌肽两种提取方法的比较

目的 检测用两种不同方法提取的昆虫抗菌肽对作用细胞的影响。方法 对家蝇幼虫采用针刺感染大肠埃希菌诱导产生抗菌肽，经研磨、层析提取其抗菌肽，并通过流式细胞仪测定用生理盐水或磷酸缓冲液这两种方法提取的抗菌肽对癌细胞和正常细胞的影响。结果 两种方法处理的家蝇幼虫抗菌肽对人髓样白血病细胞（K562）均有杀伤作用；而对正常人淋巴细胞，生理盐水处理的抗菌肽比缓冲液伤害作用小。结论 缓冲液可能对细胞造成高渗作用促进细胞死亡；而生理盐水无此作用，对细胞不造成伤害。     

丝光绿蝇抗菌肽的热稳定性研究

目的探讨高温处理对丝光绿蝇抗菌肽抗菌活性的影响。方法丝光绿蝇Ⅲ龄幼虫针刺体壁诱导后，48h后提取其血淋巴，分别于100、80和60℃水浴0、0．5、1、3、5min等不同时间后，观察不同温度处理不同时间后对溶壁微球菌的抑菌效果。结果丝光绿蝇幼虫经针刺诱导的抗菌肽100℃水浴1min仍有抗菌活性，100℃处理3min后活性丧失；80及60℃水浴5min后仍有抗菌活性。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽的抑菌活性具有一定的热稳定性。     

人心肌肌钙蛋白T的提取和纯化及初步鉴定

目的 从人心肌组织中提取、纯化心肌肌钙蛋白T，并进行初步鉴定。方法 采用匀浆、高盐提取、柱层析的方法。从心肌组织中分离、纯化cTnT。以凝胶电泳、免疫印迹进行鉴定。结果 cTn粗品经柱层析纯化，其第Ⅱ峰为cTnT活性峰，分子量约为34kD。结论 本实验获得纯度较高的cTnT，为进一步实验研究奠定了基础。     

圆形分布对蝇类季节变化规律的分析研究

目的：掌握蝇类季节变化规律，为蝇类防制提供依据；方法：用圆形分布法；结果：曲阜市1995--1998年城区蝇类高峰日为7月7日，高峰期4月15日—8月28日，有明显的变化及规律；结论：蝇类季节变化规律的分析，有效预防流行疾病的传播和流行。     

重组人源性肝细胞生长因子的纯化及其生物学活性的初步研究

目的：获取高纯度的重组人源性肝细胞生长因子(rhHDSSF)，并探讨rhHDSSF在体外的生物学活性。方法：收获大量培养的表达细胞，以冻融法提取蛋白质；以IMAC pH递减非变性法纯化表达的rhHDSSF；以MTT法测定其对HepG2，T24，Fibroblast和Hela细胞的增殖效应。结果:从细胞裂解物中纯化得到20kD左右的单一蛋白条带，其纯度达89％。细胞增殖实验证实这一蛋白产物对HeG2，Hela细胞有显的增殖作用，并表现出良好的量效和时效关系，而对T24，Fibroblast细胞则增殖效果不明显。结论：本研究证实，人源性肝细胞生长因于(HDSSF)转染细胞株中有20kD左右HDSSF相应蛋白表达，与HDSSF 598bp开放读码框理论值相一致，且纯度达89％，并发现其有良好的细胞增殖作用。rhHDSSF是一种非特异性促细胞增长物质，但它也有一定的选择性，这可能与不同细胞表达的细胞受体差异而导致蛋白信号传导不同有关。     

丝光绿蝇抗菌肽针刺诱导及初步电泳分离

目的探讨丝光绿蝇抗菌肽的诱导及电泳分离方法。方法丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁诱导后，第48小时提取其血淋巴，设置3、5、7、10μl不同的加样量和pH值60、6．5、7．0的琼脂平板，观察对溶壁微球菌的抑菌效果。置于100、80℃水浴30s、1、3和5min后，观察不同温度处理不同时间后的去杂蛋白效果和对溶壁微球菌的抑菌效果，并对各样品进行电泳分离。结果随加样量增加抑菌环直径增大，10μl环太大易变形，不易测量，以加7μl血淋巴对溶壁微球菌的抑菌效果最佳。平板pH值6．0时，对溶壁微球菌的抑菌环直径最大，随pH值增加而抑菌环直径减小。血淋巴100℃水浴30s、1min仍有抑菌活性，处理3和5min无抑菌活性；80℃水浴30s至5min均有抑菌活性，电泳显示100℃处理3和5min的样品与其他相比缺少2条蛋白区带。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽在酸性条件下抑菌活性更强，分离时血淋巴预处理采用80℃水浴1—3min去杂蛋白效果较好，诱导的血淋巴100℃处理3和5min即丧失抗菌活性，电泳显示缺少2条区带，此2条差异区带可能为抗菌肽组分。     

中西杀灭菊酯防制舍蝇效果观察

中西杀灭菊酯防制舍蝇效果观察辽宁省大连市西岗区卫生防疫站（邮编：１１６０００）许桂兰，李淑军近年来，我市舍蝇密度有不断上升趋势。为寻求新的有效药物，１９９５年８～９月选用灭害灵、二氯苯醚菊酯、中西除虫菊酯、中西杀灭菊酯等，对舍蝇进行了实验室与现场实验...     

特殊行业室内蚊蝇和蟑螂种群组成及数量变化的监测研究

目的：调查分析厦门市区特殊行业室内蚊、蝇和蟑螂种群和数量变动；方法：制定统一的表格，每月对市区主要的宾馆、酒店、娱乐场所等进行一次密度监测；结果：发现蚊类有1科3属4种，蝇类有5科12属15种，蟑螂有2科2属4种；结论：蚊类在5、6月密度较高，蝇类在4—11月密度较高，而蟑螂除刚开始监测的1999年密度较高外，2000—2001年都控制在较低水平。     

南昌口岸鼠、蝇、蚊及其携带病原体的调查

目的：为了摸清南昌口岸的鼠、蝇、蚊及其携带病原体的情况，对其进行了1年的本底调查。方法：用鼠夹及鼠笼捕鼠，粘蝇条诱捕法捕苍蝇，人工小时法捕蚊，浮选法收集鼠体的螨、蚤、蜱，分别用显微镜凝集试验、间接免疫荧光法检测钩端螺旋体及肾综合征出血热(HFRS)。结果：鼠类包括2目2科4属7种，以小家鼠、褐家鼠为优势鼠种，全年平均鼠密度为2．64％。鼠携带寄生虫(螨、蚤、蜱)的比例为37．50％，其中带螨率为27．50％，染蚤率为20．00％；带蜱率为7．50％。鼠肾钩端螺旋体检测为阴性。鼠血HFRS检测为阴性。蝇类有4科9属10种，以舍蝇、丝光绿蝇为优势蝇种，横带花蝇为该地首次报道。全年可监测到的蝇密度介于0．13—7．2只／(条．d)。蚊类有2亚科4属7种，淡色库蚊为优势蚊种。结论：加强灭鼠、灭蝇、灭蚊工作，有利于消除病媒动物及其携带病原体的危害。     

昆虫抗菌肽对人淋巴瘤细胞杀伤作用及筛选

目的 筛选对人淋巴瘤细胞Daudi有抑制或杀伤作用的昆虫抗菌肽.方法 针刺感染大肠埃希菌以诱导昆虫(家蝇幼虫、成虫、蛹)产生抗菌肽,再经研磨、离心、层析等步骤提取其血淋巴中抗菌肽.将所提取的抗菌肽作用于肿瘤细胞Daudi,以流式细胞仪检测其作用效果.结果 3种抗菌肽对肿瘤细胞Daudi均有杀伤力,家蝇成虫的荧光吸收率为97.86%,幼虫为85.45%.以家蝇成虫的效果更为明显.结论 家蝇成虫抗菌肽可作为潜在的抗人淋巴肿瘤药物开发.     

苏脲44号对蚊蝇的药效观察

本文试验结果表明，抗几丁质合成酶抑制剂──苏脲４４号对淡色库蚊幼虫的致死浓度（ＬＣ５０）为０．００８８５ｐｐｍ；当浓度为０．２５％时，对家蝇Ⅱ龄初期幼虫致死率达１００％；以浓度０．４％喂养家蝇成虫，对其产卵抑制率为９０．９％，卵孵化抑制率为８５．９％。     

家蝇幼虫抗菌肽对K562细胞膜的质量浓度阈值作用

目的探讨家蝇3龄幼虫抗菌肽对K562细胞膜的作用。方法通过针刺感染大肠埃希菌诱导家蝇3龄幼虫大量表达抗菌肽,然后经过研磨、离心、固相萃取、反相高效液相色谱分离纯化家蝇3龄幼虫抗菌肽,采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法和光镜观察法筛选对K562有抑制作用的抗菌肽;用不同质量浓度的峰5、峰8处理K562细胞,采用台盼蓝拒染法测定细胞存活率和生长曲线的变化;用光学显微镜和荧光显微镜检测细胞膜形态的变化;用荧光分光光度计检测细胞膜荧光素的渗漏;用激光共聚焦显微镜观察细胞膜的损伤程度。结果低质量浓度(<50μg/ml)对细胞存活率无明显影响,细胞整体形态变化不大,细胞荧光素渗漏较少[(18.95±0.05)～(22.49±0.68)],细胞损伤甚微;高质量浓度(≥50μg/ml)使细胞存活率明显下降,细胞形态变化逐渐增大,细胞荧光素渗漏较多[(62.77±4.08)～(70.81±0.18)],甚至大分子荧光素DextranFITC可以通过。结论家蝇3龄幼虫抗菌肽对K562细胞膜的作用存在质量浓度阈值,低质量浓度时可引起膜通透性增加,高质量浓度时可引起细胞膜严重损伤。家蝇幼虫抗菌肽可能通过直接杀伤作用抑制K562细胞生长,其作用机制首先是通过对膜作用,然后可能进一步对膜作用从而使膜上孔洞不断扩大或者进入细胞后经过其他途径抑制K562细胞生长。     

家蝇抗菌肽对弓形虫的抑制作用研究

目的研究家蝇抗菌肽对弓形虫速殖子的抑制作用。方法对家蝇幼虫针刺感染细菌，诱导其产生抗菌肽，以离心法提取其血淋巴中所含的抗菌肽。结果家蝇血淋巴中抗菌肽有杀伤弓形虫速殖子的作用。结论提取的血淋巴中含有抑制弓形虫的成分。     

丙烯氯菊酯水基喷射剂药效观察

目的测定0.5%丙烯氯菊酯水基喷射剂对淡色库蚊、家蝇、德国小蠊的杀灭效果。方法以淡色库蚊、家蝇、德国小蠊为试验对象,对丙烯氯菊酯水剂进行室内药效和模拟现场药效测试。结果该杀虫剂对淡色库蚊的KT50为6.65min,24h死亡率为100%;对家蝇的KT50为4.82min,24h死亡率为100%;对德国小蠊的KT50为9.26min,48h死亡率为100%。模拟现场对淡色库蚊1h击倒率为87.2%,24h死亡率为100%;对家蝇1h击倒率为91.8%,24h死亡率为100%;对德国小蠊1h击倒率为95.0%,48h死亡率为100%。结论丙烯氯菊酯水基喷射剂对淡色库蚊、家蝇和德国小蠊均有较好的击倒和杀灭效果。     

家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果观察

目的研究家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果。方法针刺感染大肠杆菌诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经研磨、离心、层析等步骤提取其抗菌肽,所提取的抗菌肽作用于肿瘤细胞K562、Daudi、109及T24,以流式细胞仪检测其作用效果。结果抗菌肽对4种肿瘤细胞的有效杀伤力M1均在85%以上。结论家蝇幼虫抗菌肽可作为潜在的抗肿瘤药物开发。     

盘式蝇香的毒性和药效研究

目的测定盘式蝇香的毒性和药效，验证蝇香的应用前景。方法应用霍恩氏法、玻璃方箱法和模拟现场法分别进行急性吸入毒性试验及室内药效试验。结果SD大鼠对测试蝇香的LG50〉10000mg/m^3，急性吸入毒性属微毒；室内药效KT50为7．77min（6．7865～8．9165），KT95为32．30min，试蝇24h死亡率为100％；模拟现场药效KT50为15．23min（14．4321～16．0910），KT50为34．66min，试蝇24h死亡率亦为100％。结论蝇香的毒性较低，药效较好，有良好的应用前景。     

家蝇成虫抗菌肽对4种肿瘤细胞的作用观察

目的观察家蝇成虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果。方法针刺感染大肠埃希菌诱导家蝇成虫产生抗菌肽,经研磨、离心、层析等步骤提取其抗菌肽,将其作用于肿瘤细胞109、K562、Daudi及T24,以流式细胞仪检测其作用效果。结果该抗菌肽对4种肿瘤细胞的有效杀伤力M1均在85%以上。结论家蝇成虫抗菌肽可作为潜在的抗肿瘤药物开发。     

六组昆虫抗菌肽的聚丙烯酰胺凝胶电泳

目的分析家蝇成虫、幼虫和蛹,淡色库蚊、美洲大蠊、德国小蠊6组昆虫的抗菌肽成分。方法通过针刺感染大肠杆菌诱导各种昆虫及各虫态产生抗菌肽,再经研磨、离心等步骤提取这些抗菌肽,用改进的聚丙烯凝胶电泳分析其组成。结果淡色库蚊成虫(5条带)、家蝇蛹(4条带)、家蝇成虫(5条带)、家蝇幼虫(7条带)、美洲大蠊和德国小蠊(各3条带)。结论家蝇幼虫的抗菌肽种类较多,可能与其抗菌、抗肿瘤效果有关。     

家蝇蛹抗弓形虫抗菌肽的分离纯化

目的从家蝇蛹血淋巴中分离纯化具有抗弓形虫作用的抗菌肽。方法通过损伤加感染的方法诱导家蝇蛹大量表达抗菌肽，然后经过研磨、离心和AKTA^TM purifier层析等步骤，将家蝇蛹抗菌肽进行分离纯化，采用血细胞计数法和MTT比色法筛选对弓形虫速殖子有抑制作用的抗菌肽。结果经ResourceS阳离子柱层析，测定280m处紫外吸收值，在保留体积为9．4ml处出现1个紫外吸收峰，经检测对弓形虫速殖子有杀伤作用，再将其用于Superdex G75凝胶柱层析后，测定280m处紫外吸收值，出现6个紫外吸收峰，发现第6个峰具有抗弓形虫作用。结论家蝇蛹血淋巴中存在抗弓形虫作用的抗菌肽。