影响巢式RT-PCR反应效果的因素分析

目的 :探讨癌基因研究中影响巢式反转录聚合酶链式反应 (巢式 RT- PCR)扩增效果的因素。方法 :以巢式RT- PCR法检测 5 5例大肠癌患者门静脉血和 5 4例卵巢癌患者及 10例妇科良性肿瘤患者骨髓中细胞角化蛋白基因 - 19(CK- 19) m RNA的表达 ,并对实验方法进行了改良和优化。结果 :大肠癌中有 5 4.5 %检得 CK- 19阳性 ,卵巢癌中有 6 3.0 %检得 CK- 19阳性 ,10例妇科良性肿瘤无 CK- 19表达。结论 :经过上述三方面措施改良后的巢式 RT- PCR能够用来检测恶性肿瘤患者 CK- 19m RNA的表达 ,因而成为监测这类肿瘤患者造血及血液循环系中癌细胞分布情况的一种有效的分子生物学手段     

定量RT-PCR检测结肠癌外周血微转移的临床意义

目的：探讨结肠癌患者外周血CK-19 mRNA表达的临床价值。方法：采用荧光定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血CK-19 mRNA的表达。结果：实验组结肠癌患者的严重程度与CK-19 mRNA的表达阳性率成正相关。CK-19 mRNA平均拷贝数为32.00copies/ml;对照组50例（健康人）未见表达;远端转移的癌症患者外周血CK-19 mRNA呈高表达,而化疗后外周血CK-19 mRNA表达阳性率和表达水平下降（P〈0.05）。结论：定量RT-PCR方法检测外周血CK-19 mRNA有助于结肠癌微转移的监测,本法对外周血CK-19 mRNA的表达具有敏感性、特异性特点。因而,对结肠癌的辅助诊断、选择治疗、疗效判断、有否转移和预后有着重要的临床参考价值。     

大肠癌微转移肿瘤标记物检测的应用

大肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一.目前对大肠癌局部原发肿瘤主要采取手术治疗,但根治术后的患者有30～50%在5年内出现转移和复发.转移和复发是导致大肠癌患者死亡的主要原因,而这些患者在手术前后的常规检查(包括手术探查、B超、CT、病理切片等)并未发现转移,因此,微转移灶是客观存在的.     

大肠癌微转移检测研究的新进展

大肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一 ,术后肿瘤的转移和复发是重要的死亡原因。行根治术的患者约有 30 %～ 40 %在 5 a内出现转移或复发 ,但这些患者在手术前后的常规检查中 (包括手术探查、B超、CT、普通病理切片等 )并未发现显性转移 ,因此微小的转移灶客观存在。我们将这些微小的 ,存在于血循环、淋巴道、骨髓和其他各组织脏器中的 ,临床常规检查难以发现的转移灶称为微转移。实际上微转移是一个模糊的、不完全确定的概念 ,它随着技术的进步而有所变化 ,它适用于所有的恶性肿瘤。微转移虽小 ,但有发展形成致命的显性转移灶的可能 ,因此…     

250例大肠癌肝转移的门静脉特点

目的探讨大肠癌肝转移的门静脉的特点。方法回顾250例大肠癌肝转移患者的门静脉流速、直径及癌栓发生率,分析其门静脉的特点。结果大肠癌肝转移门静脉的直径为(10.4±1.34)mm,门静脉流速为(19.7±5.2)cm/s,门静脉癌栓发生率为0%;与原发性肝癌的门静脉癌栓发生率相比,差异有显著意义(P<0.01)。结论在大肠癌肝转移中,门静脉的流速及直径改变不显著;考虑到门静脉癌栓低发生率,推论门静脉癌栓不是影响大肠癌肝转移生存率的因素。     

大肠癌组织中Livin表达的临床意义

目的检测Livin在人大肠癌组织中的表达并分析其临床意义。方法收集45例大肠癌组织和22例正常大肠组织,用免疫组织化学方法和RT-PCR检测Livin的蛋白及mRNA表达情况。结果大肠癌组织中Livin的表达率高于正常大肠组织（P〈0.01）,Livin的阳性表达率与肿瘤的病理分化程度密切相关（P〈0.05）。结论 Livin可能成为大肠癌临床诊断、判断疗效及监测预后的可靠指标。     

大肠癌患者循环肿瘤细胞检测的研究进展

大肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤,近20年来其手术方法不断改进,但预后并未明显改善,大量患者死于手术后的肝脏转移和腹腔局部复发,而癌细胞在腹腔内、淋巴结、骨髓及外周血中的微转移则是导致大肠癌术后复发转移的重要因素。因此,及时发现微转移不仅对大肠癌复发和预后的判断有     

大肠癌患者血清层粘蛋白测定的临床意义

为探讨层粘蛋白（ＬＮ）在大肠癌发病过程中的临床意义，本文应用放射免疫法（ＲＩＡ）测定２３例有转移的大肠癌患者，２０例无转移的大肠癌２及２０例健康献血员血 ＬＮ水平。结果显示，大肠癌患者血清中ＬＮ含量为２０３±３３，显著高于健康对照组１０６±２０．８。已转移的大肠癌患者血清的ＬＮ含量为２５６±１２．８，明显高于未转移的大肠癌患者血清中蛋白含量１５４±２０．２。我们认为，血清中层粘蛋白的测定可作为大肠     

细胞角蛋白单克隆抗体免疫组织化学染色方法检测大肠癌淋巴结微转移的研究

目的为研究角蛋白克隆抗体免疫组织化学法在检测淋巴结微转移灶上的意义。方法采用三种角蛋白单克隆抗体AE1,AE3、AE1/AE3,对我院47例大肠癌术后患者331个淋巴结用免疫组织化学法重新检查。结果36个淋巴结存在微转移灶(11.9%),Duke'sC期患者微转移灶检出率高于Duke'B期患者(P<0.05)。随访显示有微转移灶Duke'B期病人肿瘤复发、远处扩散转移均较无微转移病人高(P<0.05)。结论即使是组织学检查结果为阴性的淋巴结,也很有存在微转移的可能性。免疫组织化学法栓测单克隆抗角蛋白抗体,可详细阐明临床分期,并可提供大肠癌治疗的指征。     

进展期大肠癌患者术中应用化疗药物外周血CEA、CA-199检测的临床研究

目的:检测大肠癌患者术中应用化疗药物后,手术前后血清CEA和CA19-9的变化,确定其对预防大肠癌微转移,降低术后复发率和死亡率的临床意义.方法:采用ELISA方法测定30例术中应用化疗药物大肠癌患者及30例术中未应用化疗药物大肠癌患者手术前后外周血中CEA和CA19-9含量的变化,同时选用30例非肿瘤人群作为正常对照...     

大肠癌患者肠道膜菌群检测分析

大肠癌是胃肠道常见的恶性肿瘤之一,其诊断技术虽有较大的进展,但当确诊时多已近晚期,影响预后。目前,迫切需要一些敏感的早期检筛查指标。有报道认为:肠道菌群在致癌物质     

大肠癌患者血清β_2微球蛋白检测的意义

应用放射免疫法对６５例大肠癌、３５例大肠息肉及４０例正常对照者的血清β２微球蛋白水平进行检测，其结果分别为４．４６±１．２６ｍｇ／Ｌ、２．６０±０．７６ｍｇ／Ｌ和２．３９±０．４７ｍｇ／Ｌ。表明大肠癌患者血清β＿２微球蛋白水平明显高于大肠息肉组和正常人（Ｐ＜０．０１），同时与大肠癌的临床Ｄｕｋｅ’ｓ分期、治疗效果有明显相关性。提示血清β２微球蛋白测定可作为大肠癌辅助诊断及评估病情的指标之一。     

门静脉插管滴注5-氟尿嘧啶化疗在预防大肠癌术后肝转移中的作用

目的:探讨门静脉插管滴注5-氟尿嘧啶化疗在大肠癌术后肝转移中的预防效果。方法:对32例大肠癌患者在根治切除肿瘤后(术前、术中均未发现临床肝转移),实施门静脉插管滴注5-氟尿嘧啶预防性化疗1周;观察其术后5年内肝转移的发生率。结果:预防性化疗组5年内肝转移的发生率为12.5%,对照组25.0%,两组相比较P<0.01,差异有极显著性。结论:大肠癌术后门静脉插管滴注5-氟尿嘧啶预防性化疗可预防肝转移,中西医结合治疗更有助于术后机体的恢复。     

细胞角蛋白单克隆抗体检测大肠癌淋巴结微转移的研究

为了研究角蛋白单克隆抗体在检测大肠癌淋巴结微转移灶上的意义,我们分别采用不同相对分子质量的3种角蛋白抗体,利用免疫组织化学法对47例大肠癌患者术后的淋巴结进行了检测,现将结果报告如下。1资料与方法1.1临床资料和标本:采用1992—2002年在我院和协作单位手术的47例大肠癌     

大肠癌雌、孕激素受体检测及其临床意义

目的　通过对大肠癌雌孕激素受体检测 ,了解性激素受体在大肠癌的发生过程中的机理。方法　运用酶标免疫组化法 ,我们检测了雌激素和孕激素受体在 6 0例大肠癌标本中的表达。结果　显示大肠癌ER、PR双阳性率女性与男性分别为 71%和 4 4 % ,差别显著 (P <0 0 5 )。肿瘤病理类型与受体关系密切 ,管状乳头状腺癌阳性率 6 3% ,高于印戒细胞癌及粘液细胞癌 (P <0 0 5 ) ,肿瘤体积较大受体阳性率低 (P <0 0 5 )。表明受体作用异常 ,参与大肠癌发病始于早期阶段作为致癌与促癌激化剂。结论　直肠癌ER、PR高于结肠癌 ,提示直肠癌发病与受体密度增高及粪便滞留时间过长与其他因素参与关系密切。     

染料法术中标记34例大肠癌前哨淋巴结的意义

目的探索前哨淋巴结活检（SI。NB）技术在早期大肠癌中的应用及前哨淋巴结（SI。N）微转移检测的临床意义。方法应用染料法对34例大肠癌患者，在根治术中于肿瘤周围或基底部浆膜下注射亚甲蓝溶液2mL左右，识别和定位蓝染的淋巴结（即前哨淋巴结），术后行常规HE病理和鼠抗人细胞角蛋白单克隆抗体AE1／AE3免疫组化染色法（ELIVISION二步法）检查。结果34例大肠癌患者中33例检出SLN，检出率为97．1％。由SLN状态预测其周淋巴结转移情况的准确率为93．9％（31／33），敏感性为88．9％（16／18），特异性为100．0％（16／16），假阴性率为11．1％（2／18）。免疫组化与常规HE对SLN转移的检出率相比较，差异有统计学意义（P=0．034），免疫组化法共检出12枚18例SLN存在微转移现象。结论SLN能够较准确反映早期大肠癌的淋巴转移状况，免疫组化法较常规HE病理检查更为敏感，AE1／AE3免疫组化发能提高SLN微转移的检测，对确定临床分期诊疗及判断预后有积极临床意义。     

大肠癌患者血清层粘蛋白测定的临床意义(附43例分析)

为探讨层粘蛋白(LN)在大肠癌发病过程中的临床意义,本文应用放射免疫法(RIA)测定23例有转移的大肠癌患者,20例无转移的大肠癌患者及20例健康献血员血清中LN水平.结果显示,大肠癌患者血清中LN含量(μg/L)为203+33,显者高于健康对照组106±20.8(P＜0.01).已转移的大肠癌患者血清的LN含量为256±12.8,明显高于未转移的大肠癌患者血清中该蛋白含量154±20.2(P＜0.01).我们认为,血清中层粘蛋白的测定可作为大肠癌早期诊断的手段之一,并且动态观察血清LN的水平变化是判断大肠癌转移的一个简便有用的指标.     

大肠癌患者外周血癌细胞检测的临床意义

目的 探讨大肠癌患者外周血癌细胞的检测及临床意义。方法 以CK20mRNA为靶基因，运用逆转录一聚合酶链反应方法(RT—PCR)检测20例正常人和42例大肠癌患者术前、术后外周血中CK20mRNA表达。结果 20例正常人外周血中均无CK20mRNA表达。20例大肠癌组织标本中均有CK20mRNA表达。CK20mRNA阳性检出率与Dukes分期、淋巴结转移、肝转移存在差异有显著性。结论 RT—PCR方法检测大肠癌外周血癌细胞具有高度特异性和敏感性。外周血中CK20mRNA检测可帮助综合判断疾病恶性程度和预后，以及术后早期化疗对控制大肠癌微转移具有一定作用。     

RT-PCR法检测SARS的临床诊断意义

目的 探讨早期、快速诊断严重急性呼吸综合症(SARS)的实验室诊断方法。方法 在己经确诊为SARS的100例患者中随机抽取40例作为实验组;随机抽取40例正常人作为对照组:从标本中提取RNA,经反转录和巢式PCR扩增出相应大小的DNA片段。对这些片段克隆后进行DNA序列分析,并将序列与SARS冠状病毒和其他己知冠状病毒进行同源性分析。结果 对照组的阳性率为1%,病人组的阳性率为80%,经卡方检验X2=5.1,P<0.05有显著性差异。结论 该方法对临床早期诊断有一定的意义。