肝癌单克隆抗体HAb23免疫组化及免疫电镜定位的研究

本研究应用经人a-干扰素处理的肝癌细胞系SMMC-7721作为免疫原，制备了抗人肝细胞癌单克隆抗体HAb23。经过对51例肝癌，38例肝硬化，33例肝炎，36例正常组织，25例肝病组织及231例各种恶性肿瘤的免疫组化染色，肝癌的阳性率为82.3%，其它组织仅个别为阳性。免疫电镜定位显著，HAb23主要定位于肝癌细胞的内质网等膜性结构。这一研究表明HAb23与人体肝癌具有较好的特异性。     

抗低分化胃癌细胞系MKN-46-9单克隆抗体的制备及免疫组化鉴定

本文报道用低分化胃癌细胞株MKN-46-9直接免疫小鼠制得抗胃癌的单克隆抗体4株即MG5、7、9、11。杂交瘤细胞株已连续培养360天,至今分泌抗体稳定,效价高。抗体能直接用于常规福尔马林固定石蜡包埋的切片染色,不需胰酶消化。经614例ABO免疫组化法染色鉴定,MG对成人正常的胃粘膜、食管粘膜、结肠粘膜以及肺癌、肝癌、胰腺癌、皮肤癌、眼部癌、卵巢癌等癌及其正常组织均呈阴性反应。MG7和MG9两种抗体在胃癌组织中的染色程度和染色阳性细胞数均显著高于结肠癌、食管癌和肺癌(p<0.01)。提示MG7及MG9所识别的抗原主要分布在胃癌组织中。由于这组抗原与CEA等常见肿瘤相关抗原无关,初步认为是一组新的胃癌相关抗原。     

抗人肝癌单抗制备的HAg18-1血清酶联免疫检测试剂在肝癌病人诊断中的初步应用

报道了用抗人肝癌单克隆抗体(McAb)制备的HAg18-1血清快速EIA检测试剂对良恶性消化系疾病血清检测结果。阳性率如下:原发性肝癌(PLC)79.63％(43/54);肝硬变9.09％(2/22);乙型肝炎4.88％(2/41);胃癌23.08％(6/26);大肠癌20％(5/25)。19例胃肠炎、16名正常人均为阴性。该试剂对PLC诊断的特异性为89.52％,HAg18-1阳性与甲胎蛋白(AFP)含量无关。两者合用对PLC诊断阳性率达94.44％。     

钆标记抗人肝癌单克隆抗体瘤内注射对荷瘤裸鼠的磁共振增强试验

探讨小剂量瘤内注射钆标记抗人肝癌单克隆抗体的磁共振增强效应。方法应用ＤＴＰＡ环酐双向偶合剂制出Ｇｄ－ＤＴＰＡ－ＭｃＡｄｓ;实验组４只荷肝癌裸鼠直接瘤内注入３０μｇ单克隆抗体量的Ｇｄ－ＤＴＰＡ－ＭｃＡｄｓ;对照射向瘤内注入３０μｇ单克隆抗体的生理盐水,１２ｈ后加权像扫描。     

恶性组织细胞增生症铁蛋白免疫组化定位及其临床意义

36例恶性组织细胞增生症铁蛋白免疫组化定位表明,恶组瘤细胞铁蛋白阳性率为100％,经图象分析证实,分化较好的瘤细胞铁蛋白含量较高,分化较差的异型组织细胞铁蛋白含量较低(P<0.01)。10例临床确诊为恶组的患者血清铁蛋白含量远高于正常,提示铁蛋白是恶组瘤细胞肿瘤相关抗原。瘤细胞合成并释放铁蛋白是恶组患者血清铁蛋白升高的原因之一,对铁蛋白的定位及血清学检测有助于恶组的诊断,并可能成为恶组复发及缓解的一个指标。     

肝癌组织中骨桥蛋白的表达与临床病理因素的相关性研究

目的探讨骨桥蛋白(OPN)在肝癌组织中的表达与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化法对70例肝癌组织、15例肝硬化组织和10例正常肝组织检测OPN的表达,并分析OPN的表达与临床病理因素之间的关系。结果 OPN在肝癌组织中的表达显著高于肝硬化组织及正常肝组织(P<0.01),而肝硬化组织与正常肝组织无明显差异(P>0.05);且OPN在肝癌组织中的高表达与肿瘤包膜不完整(P=0.044)及早期转移、复发(P=0.003)显著相关,而与其他临床病理因素无显著相关性。结论 OPN在肝癌组织中显著高表达,且与肿瘤包膜完整性、早期复发、转移相关。     

抗人重组Cu－Zn超氧化物歧化酶单克隆抗体的制备及其在纯化抗原中的应用

本研究利用重组质粒ｐＣＺＳ转化大肠杆菌，制备出入重组Ｃｕ－Ｚｎ超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ），进一步建立了３株鼠抗ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。经鉴定，它们分泌的ＭｃＡｂ分别属于ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类，能特异性地识别人ＣｕＺｎＳＯＤ，与ｐＣｚＳ空载菌蛋白无交叉反应。将此ＭｃＡｂ制备了免疫亲和层析柱，从大肠杆菌的粗提液中纯化出ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ，ＳＤＳ－ｐＡＧＥ显示单一条带，纯度＞９８％，回收率５０％，酶化活达１０９７１．３Ｕ／ｍｇ蛋白。ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ－ＭｃＡｂ的制备为ＣｕＺｎＪｉＤ产品的纯化和抗辐射等应用研究提供了有效的工具。     

登革2型病毒单克隆抗体的制备与鉴定

用登革2型病毒参考株免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞在PEG1000作用下进行融合,获得了10株分泌抗登革2型病毒单克隆抗体的杂交瘤。经间接免疫荧光鉴定,有4株杂交瘤产生的单克隆抗体对登革2型病毒是型特异的;2株对登革1型有交叉反应;1株对登革3型有交叉反应;1株对登革4型有交叉反应;另2株为黄病毒属特异的。经补体结合和血凝抑制试验鉴定,有2个单克隆抗体是黄病毒属血凝抑制特异的。这10个单克隆抗体对登革热的诊断是很有用的。     

人血清α_1抗胰蛋白酶单克隆抗体-速率散射比浊检测法的建立

随着α_1抗胰蛋白酶(α_1AT)对肝癌诊断意义的确定,需要有一种比传统检测方法更加特异、灵敏、快速、简便的测定手段。作者将自制的抗α_1AT单克隆抗体取代多克隆抗血清,运用于Beck-man-ICS检测体系,建立了血清α_1AT的单克隆抗体-速率比浊测定法,测得血清α_1AT正常值为209±46.04mg/dl((?)±S),原发性肝癌血清α_1AT水平为305.13±134.4mg/dl,显著高于正常人测得值(P<0.001)。通过各种质控指标和相关性验证,提示本法的可靠性和实用性,以及较高的特异性和敏感性。     

131I-组合单克隆抗体局部放射免疫导向治疗肝癌的临床观察

探讨13 1　I标记组合单克隆抗体S10 2、T9、CL 3(Cocktail法)局部导向治疗肝癌的近期疗效、毒副反应。采用IODO GEN法标记13 1I McAb,B超引导下经皮穿刺肿瘤局部注射 ,治疗 116例中晚期原发性肝癌 ,用量每次 5 0～ 70mCi。结果显示 ,本治疗有效率 (CR PR) 2 9 3%,总有效率(CR PR MR) 5 3 4 %,一年生存率 38 2 %,中位生存期 34 7周 ,中位疾病进展期 12周。表明13 1I标记组合单克隆抗体局部导向治疗原发性肝癌属于微创手术 ,经济、疗效确切、毒副反应小。     

纤维连接蛋白降解片段（MAD2）单抗的制备及肝细胞癌患者血浆含量检测

应用杂交瘤技术制备了纤维连接蛋白（FN）降解片段MAD2的单克隆抗体（McAb)；建立了ＭＡＤ２检测的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法；对２２７例肝细胞癌（ＨＣＣ）、７６例肝转移癌（ＨＭＣ）、９８例消化道癌（ＡＣＣ）、１５６例慢性肝病（ＣＬＤ）患者和４８例健康人体血浆ＭＡＤ２含量进行测定。结果显示，制备的ＭＡＤ２ ＭcAb属ＩgG1，与ＦＮ无交叉反应；ＨＣＣ组血浆ＭＡＤ２含量均值与ＣＬＤ组、ＨＭＣ组、ＡＣＣ组和正常对照组比较差异有显著性意义（分别Ｐ＜0.01）,以HCC患者的最低MAD2值作临界值时，仅13.5%CLD、6.6%HMC和4.1?C超过此值，而健康人体血浆MAD2含量均低于临界值；65例血清AFP正常的HCC患者其血浆平均MAD2值仍明显高于非HCC肿瘤、CLD患者和正常对照。结合以前的结果，进一步表明，血浆MAD2检测可作为HCC诊断的新标志物，并可与AFP相互补充；ＭＡＤ２ ＭcAb的制备使MAD2的检测变得易行。     

肝细胞生长因子及其c-Met受体表达与原发性小肝癌术后复发关系的初步研究

目的　探讨原发性小肝癌 (SHCC)切除术后血清肝细胞生长因子 (HGF)水平和癌组织中c Met受体表达与术后复发的关系。方法　采用ELISA对手术前后血清HGF浓度变化进行检测 ,并利用Western、Northern印迹杂交方法 ,测定肿瘤与非肿瘤组织内c Met蛋白表达量。结果　术前血清HGF浓度为 0 64± 0 15ng/ml,术后 3天为 1 41±0 2 8ng/ml,二者差异有显著性意义 (P <0 0 0 1)。术后 3天血清HGF浓度是术前的 2 3 2± 0 5 5倍。术后HGF的增长倍数与肿瘤组织内c Met蛋白的过度表达在术后复发与未复发者中差别有显著性意义(P <0 0 5 ) ,两年内复发者明显高于两年后复发及未复发者。结论　SHCC切除术后血清HGF水平明显增高 ,肿瘤组织本身c Met蛋白过度表达 ,可能与SHCC术后早期复发有关     

抗TNF—α单克隆抗体固定型免疫吸附剂的制备及其体外吸附效能

选用生物凝胶Ａ为载体，经交联，脱硫，筛选，溴化氰活化后，再共价结合抗重组人肿瘤坏死因子－ａ（ｒＨｕＴＮＦ－α）单克隆抗体，观察抗体联率及该免疫吸附剂体外吸附清除ＴＮＦ的效能。结果表明：（１）随着加入抗体量的增加，载体偶联的抗体量也逐渐增加，但当每毫升凝胶联抗体８．１２ｍｇ时，则基本达偶联量的峰值；（２）免疫吸附剂能高效清除循环中ＴＮＦ，而对正常血浆蛋白仅有少许非特异性吸附，且非特异性吸附较易洗脱。     

组织多肽特异性抗原对肝癌病人治疗和预后评价的意义

为研究血清组织多肽特异性抗原（TPS）水平在肝癌病理监测和预后判断中的价值,对96例肝癌手术病人和22例肝癌接受聚能刀（RF）治疗的平价进行6－12个月的TPS监测。接受RF治疗的病人根据疗效分为好转、稳定、恶化3组,在各个时期,恶化组的TPS水平都显著高于好转组（P＜0．01）。肝癌手术病人随访1年,TPS表现出预告复发和转移的作用,提前时间为3－6个月。无论是在手术还是接受RF治疗的病人,死亡者的血清TPS水平都显著高于生存者（P＜0．01）。提示治疗前血清TPS水平可作为评价肝癌患者预后的一个指标。