高效液相色谱法测定鱼鳞中的Ⅰ型胶原蛋白的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定鱼鳞中Ⅰ型胶原蛋白含量的方法。方法以ZORBAX 300SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)为分离柱,以(A)5%乙腈+0.05%三氟乙酸(TFA)和(B)90%乙腈为流动相,线性梯度洗脱20min,流速1.0mL.min-1,紫外检测波长230nm。结果Ⅰ型胶原蛋白在56～4681μg.mL-1浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997),精密度,RSD 0.83%(n=6),加标平均回收率为100.38%,RSD1.87%。结论该方法简便快速、灵敏、准确,为鱼鳞Ⅰ型胶原蛋白的质控与定量检测提供了1种新的测定方法。     

高效液相色谱法测定星虫体壁胶原蛋白

目的建立快速检测胶原蛋白的高效液相色谱法。方法采用异硫氰酸苯酯柱前衍生反相高效液相色谱,以乙晴-醋酸盐缓冲系统梯度洗脱,于254 nm波长处根据羟脯氨酸的含量来推算星虫体壁胶原蛋白。结果羟脯氨酸衍生物与其它氨基酸较好分离,在5~200μg/mL浓度范围内有良好的线性关系(r=0.999 9),回收率为102.6%,RSD为1.58%。结论此法快速、灵敏、分辨率高,适用于动物组织中胶原蛋白含量的测定。     

三重四级杆液质联用测定胶原蛋白海绵中L-羟脯氨酸含量

目的 建立液质联用法测定胶原蛋白海绵中L-羟脯氨酸的方法。方法 采用6 mol·L^-1盐酸-0.5%苯酚酸解胶原蛋白海绵,以乙腈-0.1%甲酸(5∶95)为流动相,质谱测定特征氨基酸L-羟脯氨酸,以茶氨酸为内标定量分析。结果 方法检出限为0.02 ng,线性范围为2.04～30.6μg·m L^-1,方法的重复性RSD为2.4%,准确度为98.3%(RSD=2.3%)。结论 本方法准确可靠,可作为胶原蛋白类产品的含量测定方法。     

柱前衍生化-HPLC法测定市售3种胶类药材中L-羟脯氨酸和胶原蛋白的含量

目的:建立测定胶类药材中L-羟脯氨酸(L-Hyp)和胶原蛋白含量的方法,并比较对照药材与市售药材中两种成分的含量。方法:采用柱前衍生化法进行前处理,并采用高效液相色谱法测定样品中L-Hyp的含量:色谱柱为Kromasil C18,流动相为[乙腈-0.1 mol/L醋酸钠缓冲液(p H 6.5,7∶93,V/V)]-[乙腈-水(4∶1,V/V)](梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为254 nm,柱温为43℃,进样量为20μL;再通过折算系数计算样品中胶原蛋白的含量。结果:L-Hyp检测质量浓度线性范围为2.5~40μg/m L(r=0.999 9);定量限为0.20μg/m L,检测限为0.05μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<4.0%;加样回收率为96.03%~102.07%(RSD=2.20%,n=9)。28批市售药材中L-Hyp和胶原蛋白的含量有一定差异,其中13批市售阿胶药材与阿胶对照药材中两种成分的含量较为接近,而5批龟甲胶和7批鹿角胶药材中两种成分的含量高于其对照药材。结论:该方法准确、可靠,适用于测定胶类药材中L-Hyp和胶原蛋白的含量。     

离子色谱法测定注射用氯唑西林钠中醋酸根离子含量北大核心CSCD

目的:建立离子色谱法测定注射用氯唑西林钠中醋酸根离子的含量。方法:采用TSKgel Super IC-AP阴离子柱(4.6 mm×150 mm,6μm),流动相为6.3 mmol·L^(-1)碳酸氢钠与1.1 mmol·L^(-1)碳酸钠的混合溶液,流速为0.8 m L·min^(-1),柱温为35℃,进样体积为10μL,抑制型电导检测。结果:氟离子等常见无机离子、甲酸根离子以及强破坏(高温破坏、光照破坏、酸破坏、碱破坏及氧化破坏)降解产物均不干扰醋酸根离子的测定。醋酸根离子在0.990 0~99.00μg·m L^(-1)范围内峰面积与质量浓度线性关系良好(r=0.999 9);平均加样回收率(n=9)为99.5%,RSD为0.3%;方法最低定量限为0.002 5%。有6个厂家的22批样品采用醋酸钠作为成盐剂,相应样品中残留的醋酸根离子含量在0.07%~0.83%之间。结论:建立的离子色谱法可用于注射用氯唑西林钠中醋酸根离子的含量测定。     

反相离子对色谱法测定复方维生素片中3种水溶性维生素的含量

目的:建立反相离子对色谱法测定复方维生素片中维生素B1、维生素B2、维生素B6含量的方法。方法:以己烷磺酸钠作为离子对试剂,采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,同时测定复方维生素片中维生素B1、B2和B6的含量。结果:维生素B1、B2和B6分别在6.3～14.7μg.mL-1(r=0.999 8),7.2～16.8μg.mL-1(r=0.999 5),6.3～14.7μg.mL-1(r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.08%(RSD=0.84%,n=9),100.35%(RSD=1.26%,n=9),99.41%(RSD=1.10%,n=9)。结论:本方法快速、简便、准确,分离效果好,辅料无干扰,可用于该类制剂中维生素B1,B2和B6的含量测定及质量控制研究。     

重组人红细胞生成素胶原蛋白双层微条的制备及含量测定

目的:制备重组人红细胞生成素(rhEPO)胶原蛋白双层微条并建立其含量测定方法。方法:以胶原蛋白为包裹材料,以硫酸软骨素钠为释放调节剂,采用凝胶加压成型的方法制备双层微条;采用反相高效液相色谱法测定双层微条中rhEPO的含量。结果:rhEPO检测浓度线性范围为0 .25～20μg/ml(r=0 9998) ,平均回收率为96 .2% ,日内、日间精密度分别为0. 9%、2 .6%(n=3)。结论:rhEPO胶原蛋白双层微条制备方法简单可行,含量测定方法准确、可靠。     

离子色谱法测定木糖醇中氯离子、硫酸根离子和磷酸根离子及不同级别产品质量状况的评价

目的建立离子色谱法同时测定木糖醇中氯离子、硫酸根离子和磷酸根离子的含量,并评价不同级别木糖醇中氯离子、硫酸根离子和磷酸根离子含量的质量状况。方法采用Dionex IonPac AS19阴离子分析柱(4 mm×250 mm,5μm),以氢氧化钾为淋洗液梯度洗脱,流速为1.0 mL·min~(-1),标准曲线法测定。样品用超纯水溶解并稀释后直接进样。结果氯离子、硫酸根离子和磷酸根离子分别在0.01~2.0μg·mL~(-1)、0.02~6.0μg·mL~(-1)、0.05~4.0μg·m L~(-1)内线性关系良好,r分别为0.9998、0.9995和0.9995;加样回收率(n=6)分别为96.4%、93.8%、99.3%,RSD分别为1.6%、3.2%、1.4%。结论本方法操作简便、灵敏、高效,可用于同时测定木糖醇中氯离子、硫酸根离子和磷酸根离子的含量,为其质量控制提供保证。     

反相离子对色谱法测定三利巴布膏剂中盐酸利多卡因的含量

目的 建立反相离子对色谱法测定三利巴布膏荆中盐酸利多卡因的含量.方法色谱柱为Kromasil-C18(150 mm x4.6mm,5μm),流动相为乙腈0.02 mol·L-1磷酸二氢钠-三乙胺(48520.15),用磷酸调节PH至3.15,内含SDS 0.015 mol·L-1;检测波长220 nm;流速1.0 mL·min-1.结果盐酸利多卡因在2.01～20.10μg·mL-1线性关系良好(r=0.999 9,n=5).低、中、高三种浓度的回收率分别为(99.63±0.90)%、(99.55±0.50)%、(99.26±0.26)%.结论 建立的反相离子对色谱法适用于该制剂中盐酸利多卡因的质量控制.     

离子对色谱法测定复方西吡氯铵含片中维生素C及有关物质

目的:采用反相离子对高效液相色谱法测定复方西吡氯铵含片中维生素C及有关物质.方法:采用Shimadzu CLC-ODS柱(150mm×6.0mm,5μm),以甲醇-水(含0.005mol*L-1十六烷基三甲基溴化铵和0.050mol*L-1磷酸二氢钾)(10∶90)为流动相,流速为1.0mL*min-1,检测波长为254nm.结果:离子对高效液相色谱法测定的线性范围为5.0～200μg*mL-1,相关系数r=0.999 9;日内精密度为0.52%(n=6),日间精密度为0.86%(n=6);平均回收率为99.54%(n=9).结论:采用反相离子对高效液相色谱法测定复方西吡氯铵含片中维生素C的含量及其有关物质,方法简便、快速、准确、专属性好.