组织芯片的手工制作技术及其应用

组织芯片又称组织微阵列,是将数十个、数百个乃至数千个小的组织片整齐地排列在某一载体上(通常是载玻片)而成的微缩组织切片[1].该切片体积小,信息含量大,可以进行HE染色、特殊染色、免疫组织化学染色和原位杂交等,一次实验即可获得大量信息,大大节约了组织原材料和检测试剂,减少了实验误差,增强了可比性,操作简便[2].但组织芯片制作技术一般采用进口的组织微阵列仪或组织芯片制作机,这些仪器价格昂贵,不适于基层单位使用.为此我们尝试手工方法制作组织芯片,并取得了较好的效果.现介绍如下.     

手工制作组织芯片的体会

组织芯片技术是新近发展的可同时检测几百至上千个样本的高通量方法。它体积小、信息含量高,可根据不同的需要进行组合和设计,有省时、省力、节省经费和实验结果可比性强、实验误差小、设计灵活性大等优点。目前制作组织芯片的设备昂贵,且受专利保护,使该技术的应用与发展受到一定限制,难以普及推广。我们采用手工方法制作组织芯片取得了较为满意的效果。     

组织芯片制作及应用的体会

目的在临床和科研工作中推广使用组织芯片技术。方法利用自制打孔针、病理科常规石蜡包埋用石蜡及模具,自行手工制作组织芯片。结果制作6×8、6×9芯片各2张,共有芯点204个,HE染色无脱片、点阵移位现象,芯点完整,免疫组化及原位杂交共有4个芯点出现部分脱落现象,占1.96%。结论自制组织芯片简便、易行、经济实用,具有高效、快速、低消耗、自身内对照和可比性强的特点,值得在临床及在科研中进一步推广。     

手工制作组织芯片及其在病理实训教学中的应用

目的实现组织芯片技术在病理实训教学中的应用。方法取鳞状上皮,腺上皮,平滑肌组织等相应的正常组织,良性肿瘤,不典型增生Ⅰ～Ⅲ级和恶性肿瘤等组织,采用组织芯片技术制作组织微阵列蜡块并切片,常规HE染色后做成组织芯片教学切片;随机选择3年制临床专业2个班分实验组和对照组,实训4学时并进行双盲测验,统计优秀率并统计学分析。结果实验组优秀率明显高于对照组,并具有统计学意义。结论与传统的病理实训教学相比,组织芯片技术有带教老师易讲解,学生易理解的不可替代的优势,值得在实践中进行推广。     

高通量组织芯片制作及其免疫组化结果可靠性研究

组织芯片技术可以将数十个至上千个不同个体的临床组织标本按预先设计的顺序排列在1张玻片进行分析研究,它具有高通量节约时间、实验条件均一化、节省试剂等优点.高通量组织芯片的制作和其可靠性是研究者关注的问题,本文将对这两点进行探讨.     

组织芯片技术的进展及其应用

组织芯片技术自提出以来，发展迅速，应用前景广阔。本文对其概念、分类、构建技术；其在扩增癌基因的筛选、寻找与肿瘤的发生、发展、预后相关的生物分子标记及在免疫组化的质量监控等方面的应用作一综述。     

一种简易而精确的组织芯片制作方法

目的 为了克服现有组织芯片仪器不够先进、操作繁琐、取样点样精度低等缺点，本研究旨在探索一种简易可行的组织芯片制作新方法。方法 本研究利用病理常规切片技术和设备，查阅相关的文献报道资料，在实验中探索和改进组织芯片制作技术。结果 本研究解决了组织芯片制作过程中的技术难题，成功制作出了通量为5×7和7×9阵列，直径1．6mm的组织芯片。结论新的组织芯片制作方法具有价格低廉，定位准确，容易操作的优点。     

组织芯片技术在检测肿瘤组织抗原表达中的应用

Kononen等于1998年创立并报道的组织芯片亦称组织微阵列（tissus microarray，TMA）技术，是一项以形态学为基础的分子生物学新技术。组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片，按实验设计的需求整齐地排列在同一张载玻片上而制备成的微缩组织切片。它具有高信息量、体积小、快速、低耗、易于标准化等优点，已逐步应用于HE染色、组织化学、免疫组化、原位杂交和荧光原位杂交技术。我们使用自制的组织芯片采样器制作组织芯片，将此技术初步尝试应用于免疫组织化学，检测VEGF、nm23、Ki-67和PCNA四种抗体在108冽肿瘤标本组织中的表达，以探讨和了解组织芯片技术在临床病理诊断及科研中的实用价值。     

骨肉瘤组织芯片的制作及其免疫组织化学应用

目的：研究骨肉瘤组织芯片的制备方法及其免疫组织化学（免疫组化）应用。方法：选取脱钙骨肉瘤石蜡包埋标本36例,应用微阵列打孔仪制备组织芯片,井进行Ki67和CD34免疫组化标记。结果：制备的骨肉瘤组织芯片组织完整、排列整齐,无掉片脱片现象,免疫组化标记结果良好,无边缘效应。结论：可以联合应用组织芯片技术和免疫组化技术对脱钙骨肉瘤进行研究。     

组织芯片技术的应用方式

组织芯片（tissue chip）又称组织微阵列（tissue microarray，TMA），由Kononen等于1998年首先建立并报道，是将数十至上千个小组织整齐有序地排列在一张载玻片上而形成的缩微组织切片。它具有高效或高通量特点，并有省时、省力、节约经费和试验结果可比性强的优点，能应用于HE常规染色、免疫组化、原位杂交、基因芯片等各种技术，有广阔的应用前景。由于组织芯片技术是一项新技术，其应用价值和应用范围正处于深入探索阶段。本文初步探讨了目前组织芯片技术的主要应用方式。     

组织芯片技术及其应用

组织芯片又称组织微阵列 (Ｔｉｓｓｕｅｍｉｃｒｏａｒｒａｙ)是将数百个组织片按预先设计的需要在某种载体上排列成矩阵的微缩组织切片。组织芯片具有平行、高通量对组织进行分析研究 ,节约组织原材料 ,并由于实验条件一致而减小实验误差[1] 。天津医科大学附属肿瘤医院已经建立了肿瘤基因芯片研究中心 ,购买了一整套实验仪器。作者在实践中摸索学习并掌握了组织芯片的制作技术及一些关键环节的注意事项 ,现将组织芯片的发展、研究现状和操作汇报如下。1　生物芯片技术概述自 90年代中期出现的特别是近二年迅速发展起来的生物芯片技术是集…     

P27蛋白在不同进展期肺癌组织芯片中的表达及其生物学意义

【目的】P27蛋白是广谱CDKs抑制蛋白(CIP/KIP)家族主要成员之一,是细胞周期G1/S的限制点,本研究旨在探讨P27在肺癌及癌前病变组织芯片中的表达情况,及在原发性肺癌中其与各临床病理参数之间的关系。【方法】应用组织芯片技术,采用免疫组化SP法检测89例原发性肺癌、12例癌前病变、12例淋巴结转移性肺癌及10例正常肺组织中P27蛋白的表达。【结果】P27蛋白的阳性率在正常组和癌前病变组均高于原发性肺癌组和淋巴结转移性肺癌组(均为P<0.05);P27蛋白的表达与肿瘤有无淋巴结转移及分化程度有关,其中无淋巴结转移组高于有淋巴结转移组(P<0.05),高 中分化组高于低 未分化组(P<0.05);而且P27的表达强度与肿瘤的分化程度呈负相关关系(P<0.01)。而与患者的年龄、性别、组织学类型、肉眼类型及临床分期无关(均为P>0.05)。【结论】P27蛋白的表达水平与肺癌的发生、发展、恶性程度及侵袭性有关,可能成为判断肺癌恶性进程及临床预后的一个生物学指标。     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclin E和p21WAF1蛋白表达观察的体会

目的:探讨使用组织芯片技术,观察细胞周期的调控因子cyclin E和p21WAF1在胃癌组织中的表达的方法.方法:以124例为观察研究对象,自制组织芯片,使用S-P法观察单克隆抗体cyclin E(MAB-0019)、p21WAF1(MAB-0235)在胃癌组织中的表达情况.对其中11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色.结果:制成组织芯片2块,各含63块组织芯片,所制切片质量较满意,制片组织块完好率为95.2 %～98.4 %.所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色,与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比,阳性率、阳性表达强度结果基本一致.结论:使用自制组织芯片进行cyclin E、p21WAF1免疫组化染色分析,效果良好,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景.     

应用组织芯片技术构建细胞免疫芯片

目的 探讨应用组织芯片制作技术构建细胞免疫芯片的方法.方法 设计布有多形性胶质母细胞瘤、人脑胶质瘤SHG-44细胞、神经干细胞、裸鼠骨髓细胞共24例的细胞微阵列,应用组织芯片仪制作细胞芯片蜡块,切片后进行CDC2的"EnVision"法免疫组化染色.结果 研制的24住点细胞芯片,细胞排列整齐,免疫组化染色效果好.结论 应用组织芯片制作技术构建细胞免疫芯片简单易行,结果可靠,开创了一种制作细胞免疫芯片的新方法.     

应用组织芯片技术筛查胆道闭锁的病毒感染研究

目的应用组织芯片技术研究病毒感染与小儿胆道闭锁的关系。方法利用组织芯片技术检测42例胆道闭锁和5例对照组患者肝脏组织中的巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）感染情况。结果在42例胆道闭锁患者肝脏组织中,其中CMV阳性26例（61．9％）,EBV阳性3例（7．14％）,对照组5例中均未检测到以上病毒的存在。结论胆道闭锁与病毒感染之间存在相关性,其中以CMV感染关系最为密切,可能作为其发病机制中的一个促发因素,最终引起胆道闭锁;抗病毒治疗可能会改善CMV感染EHBA预后。     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclinE和p21~(WAF1)蛋白表达观察的体会

目的 :探讨使用组织芯片技术 ,观察细胞周期的调控因子 cyclin E和 p2 1WAF1在胃癌组织中的表达的方法。方法 :以 12 4例为观察研究对象 ,自制组织芯片 ,使用 S- P法观察单克隆抗体 cyclin E(MAB- 0 0 19)、p2 1WAF 1 (MAB-0 2 35 )在胃癌组织中的表达情况。对其中 11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色。结果 :制成组织芯片 2块 ,各含 6 3块组织芯片 ,所制切片质量较满意 ,制片组织块完好率为 95 .2 %～ 98.4 %。所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色 ,与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比 ,阳性率、阳性表达强度结果基本一致。结论 :使用自制组织芯片进行 cyclin E、p2 1WAF1 免疫组化染色分析 ,效果良好 ,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景。     

组织学考试用组织芯片制作初探

【目的】实现组织芯片在组织学教学中的应用。【方法】取正常Wistar大鼠心、肝、肾、脾等器官,采用组织芯片仪制作组织微阵列蜡块,常规切片,经苏木精 伊红染色制成组织学考试用组织芯片。【结果】芯片中组织微阵列排列整齐,各样本组织染色清晰,组织定位良好,可判断性强。【结论】与传统组织切片相比,组织学考试用组织芯片具有低消耗、可比性强、简便易行、局限性小的特点,应用前景广阔。     

应用组织芯片技术研究喉癌中人光蛋白聚糖的表达及意义

目的：探讨光蛋白聚糖（lumican）基因的表达与喉癌发生、发展,以及与病理学和临床所见之间的关系。方法：构建65对喉癌及相应癌旁正常黏膜上皮组织的组织芯片,应用免疫组化方法检测Lumican基因的表达强度,进行统计学分析。结果：Lumican基因在喉癌组织中的表达率（74.2%）显著高于癌旁正常黏膜中的表达率（27.4%）（P〈0.01）。结论：Lumican基因在正常细胞中弱表达或不表达,在喉癌细胞中表达或强表达。     

组织芯片技术及其在肿瘤病理学研究中的应用

生物芯片（biochip）是将大量特定核酸片段、多肽分子、细胞等按照一定的设计方案，通过微加工及微电子技术固定在载体（如硅片、玻片、尼龙膜等）的表面形成生物分子点阵，然后与标记好的待检核酸或蛋白分子进行反应，从而在固体芯片表面构建成微型生化分析系统，通过激光共聚焦扫描仪或电荷偶联摄像机（CCD）对各阵列荧光信号的强度进行检测，从而实现对化合物、核酸、蛋白质和细胞等进行快速、准确、并行、高效的检测分析。生物芯片可分为基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和组织芯片。以下文字将着重讲述组织芯片及其在肿瘤病理学中的应用。