4种细胞因子对K562／S及其耐药细胞株K562／A02积蓄柔红？…

目的 通过检测４种用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响。评价细胞因子在 病细胞多药耐药必贩应用前景方法 用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＩＮＦ）重组人粒－单集落刺因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２＝Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果 ＩＬ－１ ＩＮＦ、ＧＭ－ＣＳ     

磁性纳米四氧化三铁及纳米金协同柔红霉素作用于K562/A02细胞的初步研究

目的：研究磁性纳米四氧化三铁（Nano-Fe3O4）及纳米金（Nano-Au）是否具有逆转K562/A02细胞耐药的作用。方法：用MTT法测定盐酸柔红霉素（DNR）对K562/A02和K562细胞的毒性,并观察DNR与Nano-Fe3O4或Nano-Au的联合作用。结果：体积分数为25%的Nano-Fe3O4及Nano-Au能有效增强DNR的细胞毒作用,提高细胞的凋亡率,差异具有显著性。结论：Nano-Fe3O4及Nano-Au结合DNR后均能有效逆转K562/A02细胞的耐药性。     

4种细胞因子对K562/S及其耐药细胞株K562/A02积蓄柔红霉素的影响

目的通过检测４种常用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响,评价细胞因子在抗白血病细胞多药耐药性方面的应用前景。方法用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、重组人粒－单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ作用后Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对柔红霉素的积蓄无改变,而ＩＦＮ－α可显著提高耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２细胞内ＤＮＲ浓度,在１５０ｍｉｎ时升高了４.０１倍（Ｐ＜０.０５）。结论小剂量（５００Ｕ／ｍｌ） α－干扰素作用后,多药耐药细胞株 Ｋ５６２／Ａ０２对抗肿瘤药物ＤＮＲ的积蓄作用大大提高,提示ＩＦＮ－α具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用。     

ALL甲氧柔红霉素与柔红霉素治疗的比较

目的 提高成人ＡＬＬ的有效治疗,尝试应用去甲氧柔红霉素（ＩＤＡ）治疗成人ＡＬＬ。方法 初发成人病例共２８例;和标准的ＶＤＰ或ＶＤＬＰ方案：ＩＤＡ治疗组（１７组）和柔红霉素（ＤＮＲ）治疗组（１１例）;并对两组的近期疗效进行比较。结果 诱导化疗ＩＤＡ组缓解率为８２．４％（１４／１７）,早期死亡率１７．６％;ＤＮＲ）治疗组缓解率９０．９％,早期死亡率９．１％,两组无明显差异（Ｐ〉０．０５）。巩固化疗疗效     

用cDNA微阵列研究K562／A02细胞多药耐药机制

DNA芯片技术是90年代初期发展起来的一种DNA分析新技术。cDNA 微阵列是DNA芯片的一种,是将组织或细胞中经RT-PCR得到的300～500 bp的cDNA片段固定于芯片上而得到的。芯片上每一个cDNA点阵的序列和意义都是已知的,通过比较两种来源的RNA,可以判断cDNA 微阵列上每个基因在二者之间表达水平的差异。多药耐药性(multidrug resistance, MDR)的产生是化疗失败的主要原因之一。为了研究MDR产生的机制,本实验室用阿霉素对K562细胞进行了长期诱导,经筛选获得了一个MDR细胞株K562/A02。K562/A02具有典型的MDR表型,对阿霉素的…     

川芎嗪对脐带血细胞内柔红霉素浓度影响的初步研究

目的　观察川芎嗪或 和异博定与柔红霉素伍用后脐带血细胞内抗癌药物浓度 ,了解在用抗癌药物处理时川芎嗪或 和异博定的干预后抗癌症药物对正常细胞的保护或损伤作用。方法　利用柔红霉素自发荧光特点 ,以流式细胞仪测定川芎嗪或 和异博定与柔红霉素伍用体外孵育后 6例脐带血细胞内柔红霉素浓度。结果　单独使用川芎嗪能够显著降低脐带血细胞内柔红霉素浓度 ;而单独用异博定处理或异博定与川芎嗪合用时 ,对脐带血细胞内柔红霉素浓度均无显著影响。结论　川芎嗪通过降低细胞内抗癌药物浓度而发挥对正常细胞的保护作用 ,但是降低正常细胞内抗癌药物浓度机制有待研究     

苦瓜蛋白对K562／A02耐药逆转作用的研究

[目的]观察苦瓜蛋白对K562／A02细胞多药耐药的逆转及对PgP表达、功能的影响。[方法]采用CCK-8法测IC50,用流式细胞仪测定苦瓜蛋白对K562／A02细胞上P-gp表达及细胞内ADM潴留的影响。[结果]苦瓜蛋白能提高K562／A02对多种化疗药物敏感性,使P-gP蛋白表达下降,提高细胞内ADM的浓度。[结论]苦瓜蛋白能部分逆转K562／A02的耐药性,逆转机制与下调P-gP蛋白的表达有关。     

槲皮素逆转柔红霉素在耐药细胞株K562/ADR内的异常分布

目的 研究槲皮素处理前后柔红霉素(DNR)在耐药细胞株K562／ADR亚细胞结构的不同分布。方法 利用蒽环类抗生素固有的荧光，通过共聚焦激光扫描显微镜观察槲皮素作用后DNR在耐药细胞株K562／ADR内亚细胞结构分布的改变。结果 与DNR在敏感细胞株K562／S细胞核、胞浆均匀分布不同，在K562/ADR细胞，DNR主要集中在核周及周边胞浆，核内DNR荧光很少；经槲皮素处理后，可恢复DNR在K562／ADR内细胞核、胞浆中的弥漫分布。结论 DNR在耐药细胞中的异常分布与肿瘤细胞耐药的形成有关，槲皮素能逆转DNR的这种异常分布。     

多药耐药相关蛋白-2在白血病耐药细胞株K562/A02的表达

目的:研究多药耐药相关蛋白-2（MRP-2）与白血病细胞耐药的关系,并探讨其在白血病多药耐药中的意义。方法：应用RT-PCR方法检测白血病细胞株K562与耐药细胞株K562/A02中MRP-2 mRNA的差异表达,然后将MRP-2反义及正义寡核苷酸片段分别用脂质体转染至耐药细胞株K562/A02,采用MTT法、流式细胞术及RT-PCR法检测转染后细胞内阿霉素的荧光强度、耐药指数及MRP-2 mRNA的表达情况。结果：耐药细胞株K562/A02中MRP-2 mRNA表达水平明显高于白血病细胞株K562（P<0.05）。MRP-2反义寡核苷酸片段转染后耐药细胞株K562/A02细胞内的阿霉素浓度升高,耐药指数较未转染细胞明显降低（P<0.05）;转染后耐药细胞株K562/A02细胞MRP-2 mRNA表达水平较未转染细胞下降了67.5%,两者比较差异具有显著性（P<0.05）。结论：MRP-2的高表达导致白血病耐药细胞内化疗药物浓度降低,可能是其导致白血病多药耐药的机制之一。     

甲基莲心碱、红霉素对K562/A02细胞内谷胱甘肽含量的影响

目的：探讨甲基莲心碱（Nef）、红霉素（EM）对K562/A02细胞内谷胱甘肽（GSH）含量的影响,及其对白血病细胞代谢解毒系统介导的多药耐药（MDR）的逆转作用。方法：采用生物化学DTNB法测定细胞内GSH含量。结果：K562/A02细胞内GSH含量为（137.34±33.10）mg/mgprot,高于K562细胞内GSH含量（73.38±10.02）mg/mgprot（P<0.05）,且为K562细胞的1.87倍;Nef 10 mg/L,EM 100 mg/L,Nef 10 mg/L+EM 100 mg/L,维拉帕米（VRP）5 mg/L处理2 d后K562/A02细胞内GSH含量分别为（69.01±15.99）mg/mgprot,（70.57±11.93）mg/mgprot,（65.74±13.37）mg/mgprot, （70.86±16.16） mg/mgprot,均较无药组含量(137.34±33.10)减低（P<0.05）。结论：细胞内GSH含量增高是K562/A02细胞产生MDR的机制之一;Nef,EM能使K562/A02细胞内GSH含量下降可能是其逆转耐药白血病细胞MDR的机制之一。     

As2O3对耐药的白血病细胞株UF-1和K562/D细胞增殖的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对耐药的白血病细胞株UF-1和K562/D的作用.方法:采用台盼蓝拒染法计数活细胞数,并计算细胞生长率;细胞涂片经Wright-Giemsa染色,光镜下观察细胞的形态;流式细胞仪解析细胞周期.结果:As2O3对耐药的白血病细胞株UF-1和K562/D的增殖均具有明显的抑制作用,与敏感细胞株NB4和K562细胞相比均无显著性差异.2 μmol/L的As2O3能够使UF-1细胞株的凋亡细胞占48.5%,亚G1期细胞明显增多,4 μmol/L的As2O3使K862/D细胞株的分裂期细胞占40.6%,G2/M期细胞增多.结论:耐药白血病细胞株UF-1和K562/D分别与敏感株NB4和K562相比,对As2O3的敏感性相同.As2O3诱导UF-1细胞凋亡,使K562/D细胞发生G2/M期阻滞.     

三氧化二砷与化疗药物联合对急性非早幼粒细胞白血病体外细胞毒性的实验研究

目的:为三氧化二砷 (As2O3) 适应证的扩展提供实验依据.方法:应用MTT法,检测了As2O3分别与柔红霉素(DNR)、阿糖胞苷(Ara-C)、三尖杉酯碱(H)和长春新碱(VCR)联合对23例初治急性非早幼粒细胞白血病(ANPL)、16例难治复发ANPL原代细胞的细胞毒性.结果:①As2O3对初治及难治复发ANPL细胞具有明显的细胞毒性,1.0 μmol/L As2O3的细胞毒性分别为12.6%±7.7%和10.1%±6.2%,该毒性作用在两组间无统计学差异(P>0.05).②As2O3与Ara-C、H和VCR的细胞毒性无相关性(r分别为:0.279、0.276、0.204,P均>0.05),与DNR有相关性(r=0.432,P<0.05).③As2O3分别与DNR、Ara-C、H和VCR联用,对多数患者的细胞毒性呈协同及相加作用,当As2O3分别与DNR、VCR联用时,其细胞毒性明显大于单用化疗药物(P<0.05).结论:As2O3与Ara-C、H及VCR无交叉耐药性,与DNR有部分交叉耐药性;可与DNR、VCR等组成新的化疗方案,治疗初治及难治复发ANPL患者.     

三氧化二砷诱导慢性髓细胞性白血病K562细胞株凋亡与c-myc的表达

目的：观察三氧化二砷(As2O3)诱导慢性髓细胞性白血病K562细胞株凋亡和c-myc mRNA表达的作用，并探讨其作用机制。方法：应用MTT法、苔盼蓝拒染法、DNA凝胶电泳和细胞周期凋亡检测，观察0μmol／L、0．5μmol／L、lμmol／L、2μmol／L、4μmol／L、8μmol／LAs2O3分别作用24h、48h、72h后，对K562细胞增殖及活力的影响。应用RT-PCR和免疫组织化学法检测As2O3处理后K562细胞c-myc mRNA和蛋白表达的变化。结果：As2O3诱导后K562细胞核DNA凝缩，核片段化，最后形成凋亡小体。在一定范围内，随着As2O3浓度的增加和As2O3处理时间的延长，细胞存活率明显下降；流式细胞仪检测可见As2O3诱导K562细胞凋亡，影响细胞周期，细胞阻滞于G2／M期；As2O3处理后c-myc mRNA和c-myc蛋白表达均有先上调后回落的趋势。结论：As2O3可以抑制K562细胞增殖并诱导凋亡，其作用机制可能是使细胞受阻于G2／M期而进入凋亡程序，c-myc基因参与了As2O3诱导细胞凋亡的基因调控。     

姜黄素与三氧化二砷联用增强对肝癌细胞的抑制作用

目的探讨在体外姜黄素(curcumin)联合三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞株HepG2的相互作用,判断联合用药的效果.方法采用MTT法测定药物的体外杀伤作用,应用中效原理进行联合用药分析.结果姜黄素(curcumin)与三氧化二砷在体外联合作用能显著抑制 HepG2生长,两药合用的中效浓度分别为1.669μmol/L和16.688μmol/L,较两药单用时的中效浓度低(As2O3单用为3.203μmol/L,curcumin单用为61.469μmol/L).两药合用在≥0.4效应时合用指数(CI) ＜1.结论姜黄素联合As2O3在体外能显著增加单用其中一种药物对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用,两药联合应用效应≥0.4时具有较好的协同作用.     

Effects of arsenic trioxide on drug transporting molecules in multidrug resistance malignant neoplasma MR2 cell line

INTRODUCTIONIn recent ye ars, some studies have introducedAs2O3 into the treatment of acute promyelocyticleukemia (APL) with the complete clinical remission(CR) rate of 52.3￣93.7%[1,2]. Studies in vitro haveconfirmed that As2O3 can induce apoptosis of retinoicacid-resistant APL cell line[3]. As2O3 has been also ap-plied in the treatment for refractory primary hepaticcancer [4] with satisfactory result [5]. The drug resis-tance of tumor is correlated with the drug transport-ing molec…     

硼替佐米或联合三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡实验研究

目的 探讨硼替佐米单独或联合三氧化二砷对HL-60细胞凋亡的影响.方法 不同浓度硼替佐米、三氧化二砷处理细胞12～48 h,采用MTT比色法检测细胞增殖活性;DNA凝胶电泳、细胞形态学观察、流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 10～50 nmol/L硼替佐米可有效抑制HL-60细胞增殖,并诱导其发生凋亡.其中10nmol/L剂量处理12 h,即有细胞凋亡发生,延长作用时间或增加药物剂量,细胞凋亡率明显增加.选择15 μmol/L三氧化二砷与10nmol/L硼替佐米联合应用,可见HL-60细胞凋亡率比两种药物单独使用时显著增加.结论 硼替佐米对HL-60细胞存在时间和剂量依赖性的细胞凋亡效应,与三氧化二砷联合具有明显的协同作用.     

三氧化二砷对耐药白血病细胞血管内皮生长因子和P-糖蛋白表达的影响

目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对K562/A02细胞表达血管内皮生长因子(vascular endo- thelial growth factor,VEGF)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gP)的影响,并对VEGF和P-gp的相关性进行探讨。方法:用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测ATO对K562/A02细胞的增殖抑制率,酶联免疫吸附双抗体夹心法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定上清VEGF含量,流式细胞术测定P-gP表达率。结果:0.05μmol/L ATO对K562/A02细胞的增殖和VEGF的表达无明显影响;0.4、3.2μmol/L ATO则对K562/A02细胞有明显的增殖抑制作用和下调VEGF的作用(P<0.05)。P-gP经0.05、0.4μmol/L ATO处理24、48、72h后无明显变化(P>0.05),3.2μmol/L ATO处理48、72 h后可显著下调P-gP表达(P<0.05)。结论:ATO逆转K562/A02细胞多药耐药(multidrug resistance,MDR)的作用可能与其调控P-gP和VEGF的水平有关;K562/A02细胞VEGF水平与P-gP的表达率可能有一定的相关性。