牛血浆高密度脂蛋白及其载脂蛋白A-1的研究

用密度梯度区带超速离心法分离了牛血浆高密度脂蛋白(HDL),经脱脂和凝胶层析(Sephadex G-200),得到载脂蛋白A-1(apo A-1)。SDS-PAGE电泳鉴定apoA-1的分子量为25.8kD。在apo A-1中不含有半胱氨酸,极性氨基酸多达33.6％。DABITC微量分析法实验结果证明apo A-1氨基酸末端是天门冬氨酸,与北京鸭apo A-1氨基末端相同。     

人载脂蛋白A—1基因在中国仓鼠卵巢细胞的表达

本文报道了用人载脂蛋白A-1(apo A-1)的cDNA探针从人基因库中筛选到apo A-1全基因:将2.2kb的apo A-1全基因连接到1.9kb鼠MT-1基因启动子下游,组装成人apo A-1基因表达质粒pLY1。质粒pLY1与质粒pSV2-neo共转化中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,经G418筛选,单细胞克隆培养,经酶联免疫测定,结果表明,人apo A-1可在CHO细胞中得到表达。     

乙型肝炎病毒对载脂蛋白A1表达的影响及其机制探讨

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)对载脂蛋白A1( ApoA1)表达的影响及其调节机制.方法 RT-PCR和Western blot检测HepG2和HepG2.2.15中ApoA1 mRNA和蛋白的表达,全自动生化分析仪检测HBV患者和健康对照者ApoA1和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)血清学水平,SPSS13.0分析其统计学差异;将HBV感染性克隆pHBV1.3与ApoA1基因启动子共转染HepG2细胞,并测定荧光素酶的活性;RT-PCR和Western blot检测HepG2细胞转染pHBV1.3后ApoA1 mRNA和蛋白表达的变化.结果 HepG2.2.15细胞中ApoA1 mRNA和蛋白的表达水平较HepG2低;ApoA1和HDL-C在乙型肝炎感染者血清学水平明显低于健康对照组(P＜0.05);pHBV1.3在HepG2细胞中抑制ApoA1启动子活性、mRNA和蛋白表达.结论 HBV能够在体内外抑制ApoA1的表达.     

载脂蛋白AⅠ基因启动子和内含子1中的单核苷酸多态性对其表达的影响

目的构建含ApoAⅠ基因调控区和荧光素酶报告基因的真核表达载体，探讨ApoAⅠ基因启动子区域-75bp G→A置换及第1内含子＋83bp C→T置换对ApoAⅠ表达的影响。方法采用PCR方法扩增人染色体中含ApoAⅠ基因-145～＋289bp的DNA片段，筛选出含ApoAⅠAA／CC基因型（-75bp变异，＋83bp无变异）、GG／TT基因型（-75bp无变异，＋83bp变异）及GG／CC（-75bp和＋83bp均无变异）的DNA片段，构建含以上3个基因片段的pUC重组载体，经SacⅠ和BglⅡ酶切后，再将不同的DNA片段连接到含荧光素酶报告基因的pGL2载体中，获得多个重组克隆。采用阳离子脂质体转染法将携带萤火虫荧光素酶报告基因的重组质粒和携带海肾荧光素酶报告基因的对照质粒共转染HepG2细胞，经48h培养，用化学发光法测定细胞裂解液中荧光素酶的活性，以反映ApoAⅠ的表达水平。结果质粒重组获得3个pGL2-ApoAⅠ-L（-2500～＋289bp）长片段质粒和3个pGL2-ApoAⅠ-S（-145～＋289bp）短片段质粒，分别含AA／CC、GG／TT及GG／CC3种基因型。荧光素酶报告基因活性显示：ApoAⅠAA／CC或GG／TT基因型携带者引起荧光素酶相对活性明显低于GG／CC基因型者。结论基因启动子ApoAⅠ-75bp G→A置换和＋83bp C→T置换对ApoAⅠ转录活性起抑制作用，这可能是-75A和＋83T等位基因携带者高密度脂蛋白血浆水平降低的原因。     

血清淀粉样蛋白A—一种新的载脂蛋白ApoSAA

血清淀粉样蛋白Ａ── 一种新的载脂蛋白ＡｐｏＳＡＡ余立清，余铭鹏血清淀粉样蛋白Ａ（ｓｅｒｕｍａｍｙｌｏｉｄＡ，ＳＡＡ）是由同一簇基因编码的一组多形性蛋白。它们存在于各种哺乳动物和禽类中。急性和许多慢性炎症时，血浆８ＡＡ水平明显升高。过去偏重研究ＳＡＡ?..     

载脂蛋白A—I在形成实验性高脂血症最初阶段时的作用

探讨高胆固醇血症兔模型在血脂升的最初阶段,血清中血脂水平的变化与合成新生ａｐｏＡ－Ⅰ主要部位的关系。结论在家兔脂血症最初阶段,新生ａｐｏＡ－Ⅰ主要在小肠内合成。     

冠心病患者载脂蛋白A5和载脂蛋白C3基因多态性的研究

载脂蛋白A5基因是21世纪初在人与老鼠试验中发现的一种新型的基因,它和血脂尤其与甘油三酯的代谢有着紧密联系,现阶段已成为医学界研究的焦点,载脂蛋白C3的多态性变化和血浆脂质水平也具有密切的关联。然而,我国目前仍没有报导关于载脂蛋白A5与载脂蛋白C3基因多态性两者和冠心病之间的关系。本文选择78例通过临床症状表现、心电图的检查而确诊为冠心病患者及78例非冠心病患者作为对象,旨在探讨分析载脂蛋白A5(APOA5)基因多态性和载脂蛋白C3(APOC3)基因多态性与冠心病之间存在的关联,     

人血浆载脂蛋白B——100抗原决定簇的研究

应用本室建立的8株抗人血浆载脂蛋白B单克隆抗体及竞争性液相放免测定法,发现在天然脂蛋白—VLDL、IDL及LDL的亲水性表面,至少存在3种不同的抗原决定簇,这对载脂蛋白B抗原结构的研究及其含量测定可能其育一定意义。     

ATP结合盒转运子A1与胆固醇外流

高密度脂蛋白(HDL)及其载脂蛋白具有抗动脉粥样硬化作用;这种血管保护作用主要是通过胆固醇逆转运来实现的.胆固醇外流是胆固醇逆转运的第一步,目前已明确ATP结合盒转运子A1(ABCA1)在胆固醇外流方面起关键作用.有关ABCA1的作用机制、表达调控和相互作用等方面的研究,近年来取得了很大的进展.对ABCA1的深入研究有利于进一步阐明脂质代谢过程,为防治脂质异常血症和动脉粥样硬化提供新思路和新手段.     

血浆载脂蛋白A5水平与HDL亚类分布的关系

目的：探讨载脂蛋白A5（apolipoprotein A5,apoA5）水平对HDL亚类分布的影响。方法：采用酶联免疫吸附法（enzyme-1inked immunosorbent assay,ELISA）和双向电泳免疫印迹检测法分别检测310例受试者的血浆apoA5浓度和HDL亚类相对含量。受试者按apoA5浓度均值加或减去一个标准差作为分割点,分为高apoA5组（apoA5≥286．83mg／L）,中apoA5组（139．99mg／L≤apoA5〈286．83mg／L）和低apoA5组（apoA5〈139．99mg／L）。结果：与高apoA5组相比,apoA5低浓度组preβl-HDL和HDL3a含量显著升高（P〈0．01）,HDL2a和HDL2b显著降低（p〈0．01）。结论：随着血浆apoA5浓度降低,HDL亚类有变小的趋势,apoA5浓度降低可能阻碍了HDL亚类的成熟。     

载脂蛋白A—I分子生物学研究进展

ａｐｏＡ－Ｉ转基因和基因灭活小鼠的产生、ａｐｏＡ－Ｉ体细胞基因转移以及给实验性动脉粥样硬化兔注射同种ａｐｏＡ－Ｉ的研究，证明ａｐｏＡ－Ｉ具有直接抗动脉粥样硬化作用及防治应用价值。ａｐｏＡ－Ｉ分子结构及前β高密度脂蛋白（ｐｒｅ－βＨＤＬ）的研究进一步阐明了ａｐｏＡ－Ｉ在胆固醇逆转运及抗动脉粥样硬化中的作用机理。     

载脂蛋白A5基因多态性与脑梗塞的相关性研究

目的 分析中国江苏地区汉族人群载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,apoA5)-1131T＞C和c.553G＞T两位点基因多态性及单倍型与脑梗塞的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分别检测272例脑梗塞患者和316名对照者apoA5-1131T＞C和c.553G＞T两位点变异,用SNPA-lyze V6.0软件构建并分析两多态性位点的个体单倍型;通过生化检测和病历调查方式分别获得研究对象的血脂水平和相关临床资料.结果 -1131CC基因型人群患脑梗塞的风险较-1131T等位基因携带者高出2.10倍(95%CI:1.01～4.37).在对照人群和脑梗塞患者中T-G和C-G单倍型分布频率的差异均具有统计学意义(P＜0.05);C-G和T-G单倍型携带者患脑梗塞的风险分别要比其他单倍型携带者高出1.34倍和0.71倍(95%CI:1.02～1.76和0.55～0.92).T-G*T-G、T-G*C-G、T-G*C-T、C-G*C-G 4种常见的单倍型配对间血清TG水平差异存在统计学意义(P＜0.05).结论 江苏地区汉族人群载脂蛋白A5基因-1131T＞C与脑梗塞可能存在一定的关联性,但血脂对其的影响不容忽视.     

丙型肝炎病毒核心蛋白与载脂蛋白AⅠ相互作用的研究

erase Reporter Assay System检测荧光素酶强度.结果 CoIP试验显示有共沉带的出现,且大小正确.转染pACT-apoA Ⅰ和pBIND-core组,相对荧光素酶活性值较pACT和pBIND空载体组明显升高.结论 HCV-core可与apoA Ⅰ在体内相互作用,为慢性丙型肝炎致肝脂肪变的机制研究提供理论依据.     

载脂蛋白A5 553G/T单核苷酸多态性对血浆脂质代谢的影响

目的探讨载脂蛋白A5基因（apoa5）553G／T变异在中国镇江地区的频率分布及其对血浆脂质代谢的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）结合琼脂糖凝胶电泳技术检测152例健康人ApoA5 553G／T基因型及等位基因频率分布，同时采用生化方法测定所有研究对象的血浆脂质水平。结果ApoA5 553T等位基因频率为0．049。GG、GT、TT3种基因型中，GT杂合子个体和刀纯合子个体甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平明显高于GG纯合子个体。T等位基因携带者（GT＋TT）的TG水平较非T等位基因携带者（GG）增高了54．6％（2．47±2．01mmol／L：1．20±1．13mmol／L，P〈0．05），LDL-c水平增高28．3％（3．33±1．03mmol／L：2．78±0．82mmol／L，P〈0．05）。非T等位基因携带者年龄与TG、胆固醇（TC）水平呈正相关，T等位基因携带者年龄与血脂各项指标不相关。男性T等位基因携带者较非T等位基因携带者TG水平增高77．1％（P〈0．01），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平和载脂蛋白Al（ApoAl）水平分别降低6．7％（P〈0．05）和5．2％（P〈0．05），而女性T等位基因携带者较非T等位基因携带者TG水平增高23．1%（P〈0．05），HDL-c水平和ApoAl水平略降低，但无统计学意义（P〉0．05）。结论ApoA5 553G／T单核苷酸多态性对健康人群血浆TG有影响，553T等位基因与血浆TG和LDL-c水平增高有关，与HDL-c和ApoAl水平降低有关，这种作用在男性人群较女性人群更为明显。     

载脂蛋白A5 553G>T单核苷酸多态性对血浆脂质代谢的影响

目的 探讨载脂蛋白A5（APOA5）553G>T基因变异在中国镇江地区的频率分布及其对血浆脂质代谢的影响。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR- RFLP)结合琼脂糖凝胶电泳技术检测152例健康人APOA5 553G>T基因型及等位基因频率分布，同时采用生化方法测定所有研究对象的血浆脂质水平。结果 APOA5 553T等位基因频率为0.049。GG、GT、TT三种基因型中，GT杂合子个体和TT纯合子个体甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平明显高于GG纯合子个体。T等位基因携带者（GT+TT）的TG水平较非T等位基因携带者（GG）增高了54.6%（2.47±2.01mmol/L vs 1.20±1.13mmol/L ，P<0.05），LDL-c水平增高28.3%（3.33±1.03 mmol/L vs 2.78±0.82 mmol/L，P<0.05）。非T等位基因携带者年龄与TG、胆固醇（TC）水平呈正相关，T等位基因携带者年龄与血脂各项指标不相关。男性T等位基因携带者较非T等位基因携带者TG水平增高77.1%（P<0.01），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平和载脂蛋白A1（apoA1）水平分别降低6.7%（P<0.05）和5.2%（P<0.05），而女性T等位基因携带者较非T等位基因携带者TG水平增高23.1%（P<0.05），HDL-c水平和apoA1水平略降低，但无统计学意义（P>0.05）。结论 APOA5 553G>T单核苷酸多态性对健康人群血浆TG有影响，553T等位基因与血浆TG和LDL-c水平增高有关，与HDL-c和apoA1水平降低有关，这种作用在男性人群较女性人群更为明显。