中成药坤宁安调控围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2mRNA表达的特点

目的：观察中成药坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。 方法：实验于2004年在黑龙江中医药大学完成。选用13—15个月龄雌性Wistaer大鼠50只。经阴道脱落细胞涂片检查，呈现出无动情周期确定为围绝经期鼠。随机分为5组。围绝经期模型组、坤宁安高剂量组，坤宁安低剂量组、替勃龙对照组、更年康对照组，每组10只。另选5月龄雌性Wistar大鼠10只作为青年对照组。围绝经期模型组给予生理盐水2mL，坤宁安高剂量组给予1．96g／kg坤宁安混悬液（组成为柴胡，桂枝、龙骨、牡蛎、白芍、当归等）；坤宁安低剂量组给予0．49g／kg坤宁安混悬液；替勃龙对照组给予0．136mg／kg替勃龙混悬液；更年康对照组给予0．15g／kg更年康混悬液；青年对照组给予生理盐水2mL，灌胃1次／d。灌胃4周后，断头处死，剖取大鼠卵巢，即供原位杂交法检测Bcl-2mRNA的表达。卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2mRNA阳性评定标准：根据切片卵巢组织中卵泡内颗粒细胞免疫组织化学染色的深浅分4级，未被染色的为阴性表达．深棕色为弱阳性表达，棕黄色为中度阳性表达，棕褐色为强阳性表达。为统计方便．予以半定量计分：1，2．3，4分别对应阴性表达，弱阳性表达，中度阳性表达，强阳性表达。每张切片至少观察3个视野。 结果：实验过程中，围绝经期模型组、更年康对照组各有1只大鼠死亡。其余大鼠均存活直至实验结束。青年对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈强阳性表达，围绝经期模型组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈弱阳性表达．青年对照组与之相比差异有极显著性意义（P〈0．01）。坤宁安高、低剂量组、替勃龙对照组大鼠卵巢颗粒细胞均有不同程度的Bcl-2 mRNA阳性表达，与围绝经期模型组大鼠比较差异均有极显著性意义（P〈0．01），更年康对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA蛋白表达里弱阳性，与围绝经期模型组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。 结论：围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡与Bcl-2mRNA的阳性表达呈负相关，坤宁安通过调控大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA的表达．达到延缓卵巢颗粒细胞凋亡的目的。     

氧化修饰高密度脂蛋白对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制

目的研究氧化修饰高密度脂蛋白(Ox-HDL)对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制。方法 30只6周龄SPF级SD雌性大鼠经适应性饲养5 d后,采用孕激素拮抗剂米非司酮进行多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠造模。随机选择25只雌鼠,每天对大鼠进行1次皮下注射,每次剂量0.2 mL米非司酮(20 mg/mL),连续14 d。其余5只雌鼠作为对照组。选择造模成功的15只雌鼠,分为模型组,低剂量组及高剂量组,每组5只。对照组及模型组大鼠尾静脉注射0.05 mL生理盐水,连续14 d。低剂量组和高剂量组每天尾静脉注射0.05 m L Ox-HDL溶液(浓度分别为200、400μmol/L),连续14 d。并收集大鼠卵巢颗粒细胞。采用ELISA试验检测大鼠血清雌激素及孕酮水平;采用HE染色检测Ox-HDL对PCOS卵巢病理形态的影响观察;采用Hoechest33258凋亡染色检测大鼠颗粒细胞凋亡水平的影响;采用RT-PCR法检测Ox-HDL对大鼠颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR及Bax基因表达的作用;采用Western blot法检测Ox-HDL对大鼠颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR及Bax蛋白表达的作用。结果 PCOS大鼠在Ox-HDL作用后,雌激素及孕酮水平均下降差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组的雌激素及孕酮均显著低于其它各组差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色发现PCOS大鼠给予高剂量Ox-HDL后,囊肿卵泡进一步增多,颗粒细胞排列较为疏松,大鼠卵巢病理症状有一定加剧。Hoechest33258凋亡染色检测发现高剂量组细胞凋亡水平显著高于其它各组(P<0.05)。RT-PCR实验发现发现Ox-HDL可抑制颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR基因的mRNA表达水平差异有统计学意义;Ox-HDL可促进颗粒细胞Bax基因的mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting实验发现发现Ox-HDL可抑制颗粒细胞Bcl-2、FSHR、StAR蛋白表达水平;Ox-HDL可促进颗粒细胞Bax蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ox-HDL可促使PCOS大鼠卵巢病理症状加剧,诱导颗粒细胞发生凋亡,并导致颗粒细胞激素分泌能力紊乱。     

紫参颗粒治疗围绝经期综合征实验研究

目的:研究紫参颗粒的作用机理.方法:以去卵巢大鼠模型模拟围绝经期卵巢功能减退,观察紫参颗粒大、中、小剂量组与模型组、阴性组、更年康阳性组及正常组作对照,同时观察小鼠对紫参颗粒高、低剂量组与更年康阳性组及生理盐水阴性组作对照.结果:紫参颗粒中剂量组有使去势大鼠血清FSH水平降低、IL-2水平上升趋势,并使其子宫、胸腺、脾脏的重量系数增加;对小鼠有明显催眠、镇静作用,且明显优于阳性对照组(P＜0.05).提示:紫参颗粒能调整去势大鼠血中性激素水平,提高其免疫力;对小鼠有较强的催眠、镇静作用.     

化癥散积颗粒对小鼠原位肝癌Bcl-2/Bax表达的影响

目的通过建立小鼠原位肝癌模型,给予化癥散积颗粒灌胃,探讨其对小鼠原位肝癌Bcl-2/Bax表达的影响。方法将H22瘤株直接注射到肝脏的方法建立小鼠原位肝癌模型;分组:模型组、阳性对照组、化癥散积颗粒高、中、低剂量组;采用TUNEL染色法检测凋亡细胞;RT-PCR和Western-Blot分别检测肿瘤组织Bcl-2和Bax mRNA和蛋白表达差异。结果 阳性对照组(又称斑蝥组)和中、高剂量组中药可以诱导肝癌细胞发生凋亡;可以显著增加肿瘤组织中Bax(P<0.05),同时Bcl-2表达与对照组相比明显降低(P<0.05),低剂量组Bcl-2和Bax表达与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论斑蝥组和中、高剂量组中药诱导肝癌细胞发生凋亡可能是通过抑制Bcl-2基因表达,同时增加Bax表达,从而引发一系列凋亡级联反应。     

CTGF在多囊卵巢综合征中的表达及对卵巢颗粒细胞增殖凋亡的影响研究

目的探讨多囊卵巢综合征中结缔组织生长因子(CTGF)的表达及对卵巢颗粒细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组和实验组,每组各30只。实验组大鼠肌肉注射脱氢表雄酮(DHEA)(6 mg/100 g体重)和0.2 ml的注射用油,正常组大鼠肌肉注射0.2 ml的注射用油。摘取多囊卵巢综合征大鼠模型的卵巢组织,提取组织中的总RNA和总蛋白,Western blot检测CTGF的mRNA和蛋白表达;原代分离培养卵巢颗粒细胞,将NCsiRNA、CTGF-siRNA转染至细胞内,不经任何处理的细胞作为对照组。48 h后CCK8实验和流式细胞仪分别检测细胞的增殖及凋亡情况;Western blot检测Cleaved caspase3、PI3K、p-AKT蛋白表达。结果卵巢组织中CTGF的mRNA和蛋白表达均显著高于正常组(P0.01);转染siRNA后能显著降低CTGF的蛋白表达;CTGF-siRNA组细胞存活率及PI3K、p-AKT蛋白表达显著低于对照组和NC-siRNA组,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著高于对照组和NC-siRNA组(P0.01)。结论 CTGF在多囊卵巢综合征中的表达升高,抑制其表达可降低颗粒细胞的增殖及诱导凋亡,其机制与PI3K/AKT信号通路的调控有关。     

川芎嗪对脑挫伤皮质Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:探讨川芎嗪对脑挫伤皮质Bcl-2 mRNA表达的影响.方法:采用Feeney法复制大鼠脑挫伤动物模型,Wistar大鼠30只,随机分成正常组、模型组和治疗组.采用原位杂交与医学图像分析技术检测Bcl-2 mRNA阳性细胞数目、平均灰度值.结果:大脑皮质Bcl-2 mRNA在模型组阳性神经元多、着色深,平均数密度值高而平均灰度值低;正常组中着色浅、阳性细胞数少,平均灰度值大,二者差异有显著性(P＜0.01).治疗组与模型组比较,Bcl-2 mRNA阳性神经元增多,平均灰度值降低(P＜0.01).结论:脑挫伤后Bcl-2 mRNA表达增强,川芎嗪可上调Bcl-2 mRNA的表达,从而抑制神经细胞凋亡,在脑挫伤中起到神经保护作用.     

辛伐他汀对脓毒症大鼠血清诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的初步探讨辛伐他汀对脓毒症大鼠血清诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用改良盲肠结扎穿孔术复制脓毒症模型,收集血清备用。体外培养的人脐静脉内皮细胞株(ECV-304)分为三组(对照组、脓毒症组、辛伐他汀干预组),培养24 h,MTT法检测细胞活性,AO染色观察细胞凋亡情况,RT-PCR检测细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达。结果 MTT:与脓毒症组相比,辛伐他汀干预组细胞活性明显提高;AO染色:对照组细胞形态基本正常,脓毒症组可见大量凋亡细胞,辛伐他汀干预组可见少量细胞凋亡;RT-PCR:与对照组相比,脓毒症组、辛伐他汀干预组,Bcl-2 mRNA、Bax mRNA高表达(P<0.01);与脓毒症组相比,辛伐他汀干预组Bcl-2 mRNA高表达(P<0.05),Bax mRNA低表达(P<0.01)。结论辛伐他汀可抑制脓毒症大鼠血清诱导的内皮细胞凋亡,上调Bcl-2和下调Bax表达可能是其机制之一。     

人参皂甙Rg3对糖尿病肾病大鼠肾组织Bax和B淋巴细胞瘤-2蛋白表达及肾细胞凋亡的影响

目的探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠应用人参皂甙Rg3处理后肾组织Bax、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达变化及肾细胞凋亡情况。方法120只雄性SD大鼠,随机分为模型组、治疗组和对照组各40只。模型组、治疗组腹腔注射质量分数2%链尿佐菌素溶液制备DN模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后,治疗组将0.5 mg/kg人参皂甙Rg3与生理盐水混合溶液灌胃,模型组、对照组大鼠给予等量生理盐水灌胃,均1次/d,连续28 d。疗程结束后大鼠麻醉处死,取肾组织行病理检查,采用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡,Western blot法检测肾组织Bax、Bcl-2蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测肾组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA相对表达量。结果对照组大鼠肾组织系膜结构、肾小管均正常,小管膜完整光滑,间质未增生;模型组大鼠肾组织系膜结构异常,间质严重增生,肾小管萎缩严重,小管膜粗糙;与模型组比较,治疗组大鼠肾组织系膜细胞增生减轻,肾小管萎缩减少,纤维组织减少;模型组、治疗组、对照组大鼠肾细胞凋亡率[(0.91±0.23)%、(0.56±0.14)%、(0.21±0.03)%]依次降低(P<0.05);模型组、治疗组、对照组肾组织Bax蛋白相对表达量(1.79±0.31、2.73±0.24、3.26±0.12)、Bcl-2蛋白相对表达量(1.42±0.12、2.59±0.25、4.40±0.31)、Bax mRNA相对表达量(0.35±0.02、1.45±0.91、3.12±1.17)、Bcl-2 mRNA相对表达量(1.34±0.87、1.73±0.67、3.91±0.75)依次增高(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3对DN大鼠有显著治疗作用,可明显改善大鼠肾组织形态,降低肾细胞凋亡率,上调Bax、Bcl-2表达。     

仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用机制

目的:探究仙茅苷在阿尔茨海默病(AD)大鼠中的作用机制以及仙茅苷对大鼠认知功能及海马区神经元凋亡的影响。方法:在大鼠颈背部皮肤注射D-半乳糖与β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))以构建AD模型,选择存活且造模成功的大鼠36只,随机分为模型组和治疗组各18只,治疗组灌胃给予仙茅苷,模型组灌胃给予等量的生理盐水,灌胃给药持续8周。另选择同期进行饲养的同龄大鼠18只为对照组,对照组和模型组采用相同的给药方案。给药结束后,采用Morris水迷宫测试3组大鼠的记忆与学习行为。提取3组大鼠脑组织的蛋白质与RNA,采用RT-PCR及Western blot检测B细胞淋巴瘤/因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)的mRNA及蛋白的表达情况。TUNEL法检测大鼠海马区神经元的凋亡。结果:与对照组相比,模型组的平均逃避潜伏期延长(P<0.05),治疗组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);治疗组的平均逃避潜伏期低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组的Bcl-2 m RNA和蛋白较低,Bax mRNA和蛋白较高(P<0.05),治疗组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,治疗组的Bcl-2 mRNA和蛋白高于模型组,Bax mRNA和蛋白低于模型组(均P<0.05)。模型组和治疗组大鼠的海马区神经元凋亡数目高于对照组(P<0.05),治疗组大鼠海马区神经元凋亡数目低于模型组(P<0.05)。结论:仙茅苷能改善AD大鼠模型的空间学习与认知能力。     

脓毒症大鼠心肌细胞凋亡与p53和Bcl-2基因表达的关系

目的 探讨脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的变化及其与Bcl-2和p53基因mRNA表达的关系.方法 取体重190～220 g的成年雄性SD大鼠42只,随机分为三组,脓毒症组30只,正常对照组6只,假手术组6只;脓毒症组以盲肠结扎穿刺法(CLP)复制脓毒症大鼠模型,于术后3 h、9 h、12h、24 h各处死6只大鼠,假手术组麻醉满意后打开腹腔,正常对照组仅行麻醉术,均取1.0 mm3大小的心肌组织,另外余下的6只脓毒症鼠术后待其自然死亡不取心肌.采用电镜和TUNEL法检测大鼠心肌细胞的凋亡,用RT-PCR方法检测大鼠心肌细胞Bcl-2和p53基因mRNA的表达.结果 电镜下大鼠凋亡的心肌细胞胞膜皱缩,核固缩、边集、碎裂,胞膜突起、凋亡小体形成,TUNEL法检测各时间点的脓毒症大鼠心肌细胞的凋亡率均较正常对照组和假手术对照组明显升高(P＜0.05),术后12h达到峰值;p53 mRNA表达明显升高(P＜0.05),其表达量与心肌细胞凋亡指数呈正相关性(r=0.976,P＜0.05);Bcl-2 mRNA表达明显降低(P＜0.05),其表达量与心肌细胞凋亡指数呈负相关性(r=-0.833,P＜0.05).结论 脓毒症大鼠心肌细胞的凋亡明显增高,p53和Bcl-2 mRNA的表达异常是其可能机制之一.     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。