Forskolin体外诱导Balb/c小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化

目的：探讨forskolin诱导小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞的分化过程。方法：取妊娠12.5d胎鼠第3代下颌外胚间充质细胞，分别在含5、25、50μmol/L forskolinr DMEM/F12培养基中培养。相差镜下观察细胞的形态变化，免疫组化鉴定细胞性质。结果：培养2d，细胞形态及排列发生明显变化，呈两突的长梭形；胸体中有空泡样改变，随时间的增加而明显。变化以25μmol/L组较明显，免疫组化鉴定：抗神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及S－100染色阳性；NSE及NF染色阴性。结论：forskolin可诱导外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化。     

rhBMP-2诱导颅神经嵴细胞向神经元分化的体外研究

目的；观察重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）对颅神经嵴细胞的诱导发化作用。方法：分别用不含rhBMP-2的无血清培养液和含有不同浓度rhBMP-2的培养液对颅神经嵴细胞进行培养。10d后，观察两组细胞的形态学差别，用胶质纤维酸性蛋白（GFAP），神经纤维细丝蛋白（NF），颅神经嵴细胞的特异性抗体P75等抗体进行免疫组化染色，鉴定细胞的分化状态，并计算NF阳性细胞数的百分比及进行统计分析。结果：在含有rhBMP-2的培养液中，颅神经嵴细胞的形态由成纤维细胞样向神经元样的表型进行转变，可见较长的细胞突起出现。NF染色结果阳性，而GFAP，P75染色结果阴性。50ng/mL组中，NF的阳性细胞数比其它浓度组明显增多，并有显著性差异（P＜0．05）。结论：rhBMP-2可以诱导颅神经嵴细胞向神经元进行分化，50ng/mL是其中最有效的诱导浓度。     

小鼠颅神经嵴细胞的培养和特征

目的：在体外原代培养Balb/c小鼠胚胎的颅神经嵴细胞。为颅面部各种组织细胞的发育研究提供细胞来源。方法：采用胰酶消化法分离小鼠胚胎第8.5天的颅神经管，从小鼠颅神经管中游离出来的细胞即为颅神经嵴细胞，用免疫组织化学方法鉴定细胞的来源，并测定细胞的生长曲线。结果：成功地培养出小鼠的颅神经嵴细胞，其形态类似成纤维样细胞，免疫组化检测结果表明，神经特异性烯醇化酶（NSE）抗体染色结果阳性。细胞的群体倍增时间为43.65h。结论：原代培养的小鼠颅神经嵴细胞生长稳定，来源明确，是颅面部各种细胞的发育和分化研究中一种有用的工具。     

诱导颅神经嵴细胞向第一鳃弓外胚间充质细胞分化的实验研究

目的 研究体外成纤维细胞生长因子8(FGF-8)对颅神经嵴细胞向第一鳃弓表型分化的影响，并确立其时相效应，为进一步探讨颅神经嵴细胞的牙颌向分化诱导提供实验依据。方法 组织块法无血清条件培养颅神经嵴细胞，通过同源盒基因Hoxa2原位杂交及波形蛋白免疫细胞化学染色，观察不同剂量FGF-8对颅神经嵴细胞迁出前、后及其向第一鳃弓外胚间充质细胞表型分化的影响。结果 迁出前颅神经嵴细胞在100μg／LFGF-8作用下，呈现Hoxa2阴性表达、波形蛋白阳性表达，迁出后颅神经嵴细胞诱导组及对照组Hoxa2、波形蛋白表达均为阳性。结论 FGF-8可诱导颅神经嵴细胞向第一鳃弓外胚间充质细胞表型分化，具有早期诱导时相性特征。     

神经嵴细胞的特性和培养

在胚胎的发育中，神经嵴细胞是一组特殊的细胞群，可以分化为神经元、神经胶质细胞及多种非神经细胞，是机体内最具多能性的结构之一。在口腔颌面部的发育中，大部分组织如牙乳头、牙囊、牙周膜、骨组织、肌肉中所包含的细胞几乎无一例外地均来源于神经嵴细胞。因此，神经嵴细胞，尤其是     

外周神经胶质细胞：牙髓干细胞的新来源

来源于早期外胚间充质组织头部的神经嵴细胞迁移衍生出牙髓间充质干细胞,随后这些细胞产生牙髓细胞和成牙本质细胞。神经胶质细胞是另外一个神经嵴细胞衍生迁移而形成的细胞系。神经胶质细胞有广泛的分化发育潜能,研究发现神经胶质细胞可以分化为神经细胞和牙髓间充质干细胞,并且神经胶质细胞的不同分化发育阶段间可以互相转变。通常认为,大多数组织中的间充质干细胞来源于血管周细胞,但有研究发现相当一部分牙髓间充质干细胞来源于外周神经相关的神经胶质。本文通过对神经嵴细胞、牙髓间充质干细胞和神经胶质细胞的分化发育以及神经胶质细胞的衍生细胞的概述,介绍牙髓再生领域一种新的更有前景的牙髓间充质干细胞来源。     

颅神经嵴细胞向成骨细胞表型分化的诱导实验

目的：观察颅神经嵴细胞（CNCC）在体外是否可以向成骨细胞表型进行诱导分化。方法：用标准的无血清培养液和含10^-8mol/L地塞米松、50mg/L左旋抗坏血酸和10mmol/L β－磷酸甘油钠的矿化诱导培养液对CNCC进行培养。15d后取两组细胞用于实验，观察两组间细胞形态，群体倍增时间、活力细胞数、碱性磷酸酶的活性和OC的含量等方面的变化。结果：诱导后的CNCC形态由成纤维样转变为多角形，细胞群体倍增时间延长，细胞活力数减少，碱性磷酸酶的活性和OC的含量升高。结论：CNCC在特定的矿化诱导培养液中，可以向成骨细胞表型分化。     

颅神经嵴细胞迁移的调控

<正>颅神经嵴细胞(cranial neural crest cells,CNCC)起源于背侧神经管,是一个对颅颌面部各种软硬组织的衍生都具有十分重要作用的细胞群。其产生后便向腹侧迁移,并向多种方向进行分化,如骨细胞、神经元细胞、神经胶质细胞、色素细胞、肌细胞等等[1],而这些细胞则进一步组织构建成颅颌面大部分的软硬结缔组织,因此,颅神经嵴细胞对于颅颌面发育具有十分重要的意义。颅神经嵴细胞迁移的启动、迁移     

miR-1通过调控神经嵴细胞增殖和凋亡影响颌骨发育

目的：研究微小RNA?1（ miR?1）在斑马鱼胚胎发育过程中对神经嵴的影响。方法：通过显微注射miR?1反义核苷酸（ MO）抑制miR?1的功能，在胚胎发育96 h时，观察下颌骨的发育，软骨染色观察颅面部软骨的发育状况。 TUNEL和磷酸化组蛋白H3（ pH3）免疫荧光观察神经嵴细胞的凋亡和增殖。结果：在miR?1被敲低后，下颌发育不足，软骨染色显示下颌骨和舌骨形态结构异常。神经嵴细胞的凋亡异常增多，增殖能力降低。结论：miR?1参与调节了颅面部神经嵴细胞的发育，miR?1对于神经嵴细胞的活性具有调控作用，导致颅面部发育过程中神经嵴来源的下颌骨发育缺陷。     

体外培养的神经嵴细胞的定向诱导分化

神经嵴细胞是发育中具有多向分化潜能的干细胞,可向神经元、神经胶质细胞、软骨细胞、平滑肌细胞和黑色素细胞等多方向分化。其分化受到多种因子和化学物质的影响,包括转录因子、生长因子、钙离子浓度和细胞外基质等。     

毛囊bulge区神经嵴细胞体外分离培养及生物学特点

目的探讨毛囊bulge区神经嵴细胞的体外生物学特点。方法采用体视显微解剖分离毛囊bulge区组织块,贴壁培养获取神经嵴细胞,通过形态学,结合Sox10,p75,nestin免疫细胞化学,观察神经嵴细胞的生物学特点。结果分离培养的小鼠毛囊神经嵴细胞,其形态类似成纤维细胞,免疫细胞化学检测细胞表型nestin,p75,Sox10均呈阳性表达。结论本研究成功从小鼠触须毛囊分离培养出神经嵴细胞,为进一步利用神经嵴细胞开展组织再生研究奠定了基础。     

Experimental analyses of the migration and cell lineage of avian neural crest cells

Neural crest cells migrate extensively during embryonic development and give rise to numerous and varied derivatives. Two important and unresolved questions are: what controls the migration and differentiation of these cells? This review summarizes recent experiments that address these issues. Specifically, this overview describes the pathways of neural crest cell migration, the functional importance of interactions between neural crest cells and the extracellular matrix for their movement, and studies on neural crest cell lineage in vivo by labelling individual precursor cells.     

哺乳动物外胚间充质细胞的表型和形态学研究

目的：探讨胚胎中外胚间充质细胞表型和形态鉴定。方法：取E12 SD大鼠胚胎颌突组织进行免疫组化鉴定和电镜观察。结果：免疫组化抗LNGFR、NF、NSE、S100、Vimentin呈阳性着色，抗GFAP呈阴性着色；细胞主要为间充质样细胞，形状不规则，呈多突起的星形或梭形，突起不规则；核、浆比例大；核仁明显，大、靠边；常染色质多，异染色质少；含有大量的线粒体及少量粗面内质网及核糖体。电镜结果显示细胞代谢旺盛，增殖活性高，处于未分化状态。结论：外胚间充质中存在表达神经嵴前体细胞标志LNGFR的细胞，而且这些细胞在形态上也明显处于未分化状态，说明在迁移后的神经嵴细胞中仍然含有未分化的多能前体细胞。     

鸟苷酸交换因子Trio通过调控神经嵴细胞迁徙影响颅颌面发育

目的:研究鸟苷酸交换因子Trio在胚胎发育过程中对神经嵴细胞的影响.方法:将trio反义寡核苷酸通过显微注射入斑马鱼胚胎内,抑制其trio功能;在斑马鱼胚胎发育96 h时使用体式显微镜观察神经嵴细胞衍生物下颌骨的发育情况,120 h时通过阿尔辛蓝染色观察颅颌面部软骨的发育状况.利用转基因斑马鱼(sox10:EGFP)特...     

牙髓干细胞向神经细胞方向的诱导分化实验

目的探讨克隆化培养分离的人牙髓干细胞是否具有向神经细胞方向分化的潜能,并确定其诱导条件。方法克隆化培养的人牙髓干细胞预诱导24 h,然后换含一定浓度二甲基亚砜（DMSO）、丁羟基茴香醚（BHA）、forskolin、β- 巯基乙醇（β-ME）和氢化可的松（hydrocortisone）的联合诱导液连续诱导4 d,对诱导细胞进行形态学观察,神经胶质酸性蛋白（GFAP）、非特异性酯酶（NSE）免疫组化染色和GFAP mRNA RT- PCR检测。同时,以未诱导细胞为对照。结果诱导12 h时细胞形态开始改变,24 h时分化为较为典型的神经细胞样细胞,继续诱导分化细胞数量增多;诱导细胞表达神经元细胞特异性标志NSE和GFAP蛋白;RT- PCR检测诱导细胞表达GFAP mRNA,而未诱导细胞均无上述改变和表达。结论人牙髓干细胞在一定的诱导条件下可横向分化为神经元样细胞。     

Melanotic neuroectodermal tumour of infancy (MNTI). Immunohistochemical and ultrastructural study of a case

A case of melanotic neuroectodermal tumour of infancy (MNTI) which occurred in the left lower jaw of a 15-months old child was studied by electron microscopy and immunohistochemical methods to verify the neural crest origin of this tumour. Two cell population were observed: pigment melanocyte-like cells and non-pigmented nerve-like cells. Immunohistochemical analysis with neuron-specific enolase (NSE) and S-100 protein visualized two cell subtypes in the non-pigmented cell population. The combined ultrastructural findings and immunohistochemical data confirm the neural crest origin of MNTI.