肝病患者肝组织及血清HBV—DNA比较

肝组织HBV-DNA检测能直接反映HBV病毒的存在。我们采用PCR-溴化乙锭法对乙型肝炎68例及肝癌5例肝组织和血清HBV-DNA进行检测,并对其中51例在不同的e系统模式时HBV-DNA存在情况进行分析,以期探讨肝病患者肝细胞内HBV-DNA复制、感染情况。1　对象和方法1.1　对象　共收集乙肝68例及肝癌5例的肝穿组织及血清标本。其中男41例,女32例;年龄18～51岁,均为本院1995年12月至1998年9月的住院患者。急性肝炎22例,慢性肝炎35例,重症肝炎11例。临床诊断以1995年5月修订的病毒性肝炎防治方案(试行)为参考[1],并辅以病理诊断。1.2　试剂来源…     

用Blot杂交技术检测11例乙肝及肝癌患者尸解多种组织的HBV—DNA

尽管嗜肝性作为乙型肝炎病毒(HBV)的生物学活性之一已得到公认,并且HBV归属于肝DNA病毒科(HAPADNAVIRIDAE),但近年来的一些动物实验和临床研究表明:除了肝细胞之外,还可在其它组织中检测到HBV抗原和DNA,包括它的复制形式。这对于研究HBV感染的慢性持续状态、受染者的免疫异常、及感染的传播途径等具有一定价值。为此,我们采用Southern blot杂交技术,对11例乙肝及肝癌患者的尸解多种组织进行了     

聚合酶链反应在检测HBV—DNA中的价值

为探讨乙型肝炎的检出率,1997年1～6月,我们采用聚合酶链反应(PCR法)对乙型肝炎78例的血清HBV-DNA进行检测,并与乙肝病毒血清标志物(HB-VM)的检出情况(ELISA法)进行比较,以评价PCR法在监测乙肝病毒感染者中的临床意义。1　对象和方法1.1　对象　乙肝78例,男42例,女36例;年龄14～56岁,平均38.2岁。均无HAV、HCV、HDV、HEV重叠感染。1.2　方法1.2.1　HBV-DNA检测　乙型肝炎病毒基因扩增试剂盒由中山医科大学科技开发公司提供。取患者DNA血清40μl,加40μlDNA提取液后打匀,沸水浴5min,以10000r/min离心5min,取上清液2μl行P…     

用原位聚合酶链反应检测肝癌石蜡包埋组织中的HBV—DNA

为研究乙型肝炎病毒(HBV)感染和肝细胞癌(HCC)之间的关系,我们建立了原位聚合酶链反应(ISPCR)并检测26例HCC石蜡包埋组织中的HBV—DNA。结果显示,HBV DNA在肝癌组织和癌旁肝组织的阳性率分别为84.6％(22/26)、91.3％(21/23)。ISPCR技术既显示了PCR技术的高敏性和特异性,又能在细胞内定位,是研究HBV与HCC关系的一项有价值的技术。     

应用PCR检测4种消毒剂对HBV—DNA的灭活效果

我们应用聚合酶键反应（PCR）技术，检测碘伏、高锰酸钾、来苏尔和84消毒液对HBV－DNA的灭活效果。报告如下。材料与方法一、材料碘伏，南京大学消毒剂厂生产（批号19931204）。高锰酸钾，广东梅县锰化厂生产（批号19920201）。来苏尔，南昌医药比工厂生产（批号19921024）。84消毒液，南昌健宝防疫用品厂生产（批号19930720）。HBV－DNAPCR试剂盒，由南通宏达生物技术有限公司提供（批号19930509HBV－DNA强阳性血清，采集于住我院的慢性乙型肝炎患者。中和剂：碘伏用2．5％硫代硫酸钠，高锰酸钾用0．2％硫酸亚铁该，来苏尔用2％…     

抗—HBe和HBV—DNA阳性慢性乙型肝炎26例临床分析

近年来，随着乙型肝炎病毒（HBV）分子生物学研究的进展，尤其是HBV前C基因突变株的发现，对慢性HBV感染中e系统的临床意义有了进一步的认识。目前趋向于将慢性乙型肝炎分为两大型[1]：乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性慢性肝炎和乙型肝炎e抗体（抗-HBe）阳性慢性肝炎（异型慢性乙型肝炎acypicalchronichepatitisB）。本文就抗-HBe和DNA阳性慢性乙型肝炎26例临床分析如下。1临床资料1．1性别与年龄男性25例，女性1例，年龄23～48岁，平均29．8岁。1．2临床症状与体征乏力和食欲不振26例，关节痛5例，低热2例，蜘蛛痣24例，肝掌18例，肝…     

PreSlAg、HBeAg和HBV—DNA的对比检测与分析

目的：通过对比检测和分析739份血清中preS1蛋白、HmAg和HBV—DNA的检测阳性率，为临床正确选用实验室指标防治乙型肝炎提供依据。方法：应用ELISA法对739份血清进行PreSlAg和HBV血清标志物检测，并与实时荧光定量PCR检测HBV—DNA结果进行比较。结果：所有739份血清中，PmSlAg阳性率为34．6％（256／739），HmAg阳性率为觚7％（227／739），HBV—DNA阳性率为58.9％（435／739）。227份HBeAg阳性血清中，PreSlAg阳性率55．9％（127／227），HBV-DNA阳性率96．0％（218／227）；512份HBeAg阴性血清中，PreSlAg阳性率25．2％（129／512），HBV—DNA阳性率为42．4％（217／512）。HBeAg、HBV—DNA和PreSl的阳性率有显著差异（P〈0．05），阳性率高低依次为HBV—DNA〉PreSl〉HBeAg；HBeAg阳性血清中PreSlAg（55．9％）阳性率显著高于HmAg阴性血清PreSlAg（25．2％）阳性率（x^2=36．5，P〈0．01）；HBV—DNA阳性血清的PreSlAg检出率58．9％（256／435）显著高于HBV—DNA阴性血清的PreSlAg检出率1＆4％（56／304）（P〈0.01）；PreSl抗原与HBV—DNA阳性符合率为（200／256）7＆1％，阴性符合率为（248／483）51．3％。598份HBeAg阳性血清（阳性率为80．9%，598／739）中HBeAg、PreSl和HBV—DNA阳性数（率）分别是224（37．5%）、253（42．3oA）、417（69．7％）。结论：PreSlAg、HBV—DNA、HBeAg的阳性率有显著性差异（P〈0．05）。作为HBV感染和复制的指标，以检测HBV—DNA最为可靠，而PmSlAg可能较HBeAg更敏感。在HBV感染的不同时期，如何理解和使用上述指标对防治乙型肝炎有重要意义。     

聚合酶链反应对单—抗HBc阳性的飞行员血清HBV—DNA的检测

用聚合酶链反应对单－抗ＨＢｃ阳性的飞行员血清ＨＢＶ携带情况进行了调查，首先用ＥＬＩＳＡ法对１８９份血清检测了ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ和抗ＨＢｃ。ＨＢｓＡｇ阳性率为４．７６％（９／１８９），抗ＨＢｓ１７．９９％（３４／１８９），抗ＨＢｃ２４．８７％（４７／１８９），聚合酶链反应检测单－抗ＨＢｃ阳性血１９份，抗ＨＢｓ阳性／抗ＨＢｃ阳性血２０份。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３１．５８％（６／１９）和５％（１／     

应用PCR技术检测HBsAg携带者血清中HBV DNA

应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增38例HBsAg携带者和58例正常人血清中的HBV DNA特异性片段,通过与HBsAg滴度及HBV血清标志物进行对比分析,发现HBVDNA阳性率与HBsAg滴度呈正相关(r=0.981,P<0.005)与HBeAg减低、抗-HBe产生以及其后的e系统消失过程呈相应递减趋势.并且在单项抗-HBs阳性的血清中,HBV DNA检出率可达10%.     

乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒血清标志物和HBV—DNA联合检测的临床应用

目的探讨乙肝病毒前S1抗原（PreS1）、乙肝病毒标志物（HBVM）与乙肝病毒DNA（HBV—DNA）检测三者之间的关系，判断乙肝病毒在体内的复制情况。方法对550例乙型肝炎患者血清，用ELISA方法检测PreS1、两对半标志物，用荧光定量PCR方法定量检测HBV—DNA并分析3者之间的关系。结果HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）的模式中，PreS1与HBV-DNA检出率分别为5213％与88．4％，HBsAg（＋）、HbeAb（＋）、HBcAb（＋）的模式中PreS1和HBV—DNA检出率分别为31．1％和47．5％，HBsAg（＋）、HBcAb（＋）的模式中PreS1和HBV-DNA检出率分别为47.3％和63．4％。结论PreS1能较好的反映HBV病毒感染及复制情况，可作为一种新的HBV血清标志物和监测指标，三者联合检测互相补充，更有助于临床疾病的诊治。     

肝组织HBcAg检测应用价值的探讨

为探讨肝组织HBcAg检测的应用价值，笔者应用免疫组化技术检测了慢性乙型肝炎（慢乙肝）90例的肝组织HBcAg（简称HBcAg）；其中24例在相隔3～6个月作了第二次检测，以观察动态变化。对象和方法90例慢乙肝全为男性，年龄18～39岁。均经临床、病理和病原学诊断确诊，包括慢性活动性肝炎（慢活肝）69例，慢活肝伴肝硬变7例，慢性迁延性肝炎（慢迁肝）14例。HBCAg检测用ABC法，同份肝组织作HE染色观察病变。同步用ELISA法检测血清乙型肝炎病毒标志物（HBVM）。血清HBV－DNA检测用斑点杂交。结果一、病原学诊断价值90例慢乙肝中HB…     

丙型肝炎病毒感染的慢性肝病患者肝组织原位分子杂交和免疫组化研究

为探讨丙型肝炎病毒(HCV)在肝组织的分布及可能的致病机理,用地高辛标记的HCV5′-NC区cDNA探针和抗HCVC33c单克隆抗体对经血清抗HCV和HCVRNA检测证实的24例HCV感染的慢性肝病患者肝组织进行原位核酸杂交和免疫组化研究。结果显示:肝组织HCVRNA和C33c阳性率分别为58.3％,79.2％,两项阳性率无显著性差异(X~2=0.178,P>0.5)。17例血清HCVRNA和抗HCV均阳性者中,肝组织HCVRNA阳性14例,C33c阳性为15例。7例血清单项抗HCV阳性者没有检出HCVRNA,但4例C33c阳性。HCV RNA和C33c阳性信号主要定位于肝细胞浆或肝癌细胞浆内。HCV感染的阳性肝细胞呈散在、局灶和弥漫三种形式分布,与ALT水平,肝组织学类型没有明显联系。HCV感染的细胞周围有较多的淋巴细胞和单核细胞浸润。提示HCV在肝细胞浆增殖复制,引起宿主的免疫反应,在HCV感染的慢性肝病发病机理中起重要作用,同时检测血清抗HVC和HCVRNA可提高HCV感染的确诊率,免疫组化检测C33c与原位杂交检测HCVRNA有同样的敏感性,但方法简便、更适应用于临床。     

前—S2蛋白与HBeAg,HBV—DNA及肝组织内HBcAg,HBsAg的初步研究

本文对各型HBV感染者50例的同份血清作了Pre-S_2蛋白与HBeAg、HBV-DAN检测,并与同期肝组织内HBcAg,HBsAg的关系进行了初步研究。50例HBV感染者均系1984～1988年收治的患者,其中重型肝炎9例,慢性活动性肝炎(CAH)18例,无症状HBsAg携带者(AsC)18例,甲乙型肝炎重叠感染者5例。 检测方法:(1)血清Pre-S_2蛋白ELISA检测药盒及血清HBV-DVA(斑点杂交试验)药盒均(?)北京医科大学肝病研究所提供。(2)HBeAg(?)-HBe药盒由302医院免疫室提供(ELISA)     

HBV感染指标检测及在诊断治疗中的应用

传统的检测乙肝的方法为“乙肝两对半”和肝功能检测,但这两种方法均不能测定乙肝病毒在体内的含量及复制情况、传染程度,是否有必要继续服药,如果盲目给患者用药,恐因个体差异而引起治疗失败。致使病情延误,随着医疗技术水平的发展,乙肝两对半定性及定量、乙肝DNA定量、前S1抗原、HBV基因分型的检测,为临床诊断及治疗提供了可靠的依据,成为临床治疗疗效测定的依据。     

DWI技术在肝外胆管细胞癌诊断、分期和 疗效评估中的研究进展

肝外胆管细胞癌（EHCC）是第二大原发性肝胆系统肿瘤,其恶性程度高,预后不良。扩散加权成像（DWI）是反映组织水分子扩散运动的常用无创性成像方法。近年来,DWI及体素内不相干运动（IVIM）、扩散张量成像（DTI）及扩散峰度成像（DKI）等衍生技术已广泛应用于EHCC的诊断、病理分期预测和监测以及疗效评估。就DWI及其衍生序列对EHCC应用的研究进展以及局限性和应用前景予以综述。     

实时组织弹性成像技术在无创评价慢性乙型肝炎肝纤维化中的应用

目的:探讨实时组织弹性成像方法在无创评价慢性乙型肝炎肝纤维化中的应用。方法:应用组织弥散定量分析软件分析98例慢性乙型肝炎后肝硬化组、100例健康者(健康对照组)的肝脏硬度,得到11个弹性图像的特征量,包括应变均值、标准差、蓝色区域%、复杂度、峰值、偏度、对比度、均等性、杂乱性、一致性、相关性。结果:健康对照组与肝硬化组弹性图像特征量的应变均值、标准差、蓝色区域%、复杂度、峰度、偏度、对比度、均等性、杂乱性、一致性、相关性分别为114.96±37.54/100.07±17.73、51.85±29.69/59.76±11.00、15.00±7.94/28.83±15.85、23.57±5.72/32.83±14.55、2.80±0.45/2.73±0.59、0.25±0.18/0.48±0.35、163.07±54.31/225.40±94.82、3.83±0.09/3.77±0.24、0.12±0.17/0.14±0.04、0.01±0.00/0.01±0.00、0.96±0.03/0.96±0.00;肝脏硬度指数1.97±0.56/2.47±1.00。肝纤维化组与健康对照组间,除相关性、一致性、均等性无统计学意义(P>0.05)外,其余各值均有统计学差异(P<0.01)。结论:实时组织弹性成像技术的组织弥散定量分析软件有助于肝脏硬度的评估,可成为无创评价慢性乙型肝炎肝硬化的有效方法。     

应用荧光定量聚合酶链反应检测血清、肝组织中HBV-DNA含量观察HGV感染对慢性乙型肝炎HBV复制的影响

目的　探讨庚型肝炎病毒 (HGV)感染对慢性乙型肝炎 (CH B)患者乙型肝炎病毒 (HBV)复制的影响。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物 (PAP)法免疫组织化学、荧光定量PCR(FQ PCR)技术对 5 6例CH B患者血清HGV RNA、肝组织HGV Ag、血清及肝组织中HBV DNA含量分别进行了检测 ,并将血清HGV RNA与肝组织HGV Ag的表达、HGV RNA ,HGV Ag阳性与阴性患者HBV DNA含量进行了对比研究。 结果　血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性分别为 8例 (1 4 3 % )、1 0例 (1 7 9% )。血清HGV RNA阳性与肝组织HGV Ag表达显著相关 (P <0 .0 1 ) ,但部分肝组织HGV Ag阴性患者亦有血清HGV RNA表达。血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性与阴性患者血清及肝组织中HBV DNA含量均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　HGV感染对CH B患者HBV复制无影响。肝脏是HGV的复制场所 ,但可能亦有肝外组织器官中复制。HGV至多具有微弱的致病性 ,但仍然需要进一步研究。     

PCR结合寡核苷酸分子杂交技术在基因诊断中的应用——附一例β地贫(IVS—Ⅰ—5G→C)杂合子的报告

本文报告采用~(32)P标记的寡核苷酸探针与聚合酶链式反应(PCR)扩增的β珠蛋白基因的特异DNA片段进行分子杂交,鉴定β地中海贫血(地贫)的基因突变,检出1例病人为地贫基因突变(IVS-1-5G→C)的杂合子,为临床开展其它遗传病及病毒、肿瘤等疾病的基因诊断提供了实用、有效的途径.