实时荧光定量聚合酶链反应在丙型肝炎诊断中的临床应用价值

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)荧光定量检测在丙型肝炎诊断中的临床应用价值。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测358例血清中HCV RNA载量及抗-HCV。结果 358例慢性丙型肝炎患者抗-HCV和HCV RNA检出率分别为78.8%和54.2%,经χ2检验差异有统计学意义(P<0.05),HCV RNA的平均载量为4.85×105 copies/mL。结论FQ-PCR检测血清中HCV RNA的载量,是判定HCV感染的直接证据,它反映HCV的活动性和复制程度,有利于抗病毒治疗的疗效观察。抗-HCV和HCV RNA联合检测对丙型肝炎病毒的早期诊断有重要临床应用价值。     

临汾地区丙型肝炎病毒感染检测结果分析

目的了解本地区普通人群中丙型肝炎病毒(HCV)感染实验室检测情况。方法收集2015年1月1日至12月31日来山西省临汾市人民医院就诊的申请检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的门诊及住院患者标本共21 120例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗-HCV的筛查,对ELISA筛查阳性的标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法进行丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)检测。结果 21 120例标本中抗-HCV筛查阳性率为0.69%(146/21 120);在146例抗-HCV标本中其中47例检测出HCV RNA,检出率为32.2%(47/146);检测出HCV RNA标本的抗-HCV的浓度试剂测量值/阳性判定值之比值(S/CO值)介于8.32~25.80(8.0)。结论在山西临汾地区就诊的普通人群中抗-HCV阳性分布比例以及HCV RNA检出率均较低,可检出HCV RNA的患者抗-HCV浓度相对较高。     

血清转换样本丙型肝炎病毒核酸、核心抗原及抗体检测对比研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原酶联免疫诊断试剂检测早期HCV感染“窗口期”样本的可行性。方法用新研制的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)酶联免疫诊断试剂检测11份系列血浆转换样本的抗-HCV、HCV-cAg、HCV RNA,并与病毒核酸及抗体检测方法做对比研究。结果HCV-cAg较抗-HCV检出提前14~51d,平均32.7d;HCV RNA较抗-HCV检出提前19~51d,平均36.0d。结论HCV-cAg酶联免疫诊断试剂可用于HCV早期感染“窗口期”样本的检测,降低输血风险度。     

丙型肝炎核心抗原酶联免疫检测试剂的临床应用

目的评价1种国产丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)酶联免疫检测试剂的敏感性以及在临床应用效果。方法采用1种酶联免疫试剂盒(ELISA)检测HCV游离核心抗原,分别对2808名献血者、随机抽取的1099名门诊病人及244名抗-HCV阳性者血清作HCV-cAg检测,再进一步对献血者、门诊病人HCV-cAg阳性血清作HCV-RNA和抗-HCV检测,对244名抗-HCV阳性血清作HCV-RNA检测。结果献血者2808份血清,经HCV-cAg试剂检测出HCV-cAg阳性1例,此例血清HCV-RNA亦为阳性;随机抽取的1099份门诊病人血清标本,检测出HCV-cAg阳性8份,其中抗-HCV阳性5份(5/8),HCV-RNA阳性5份(5/6,有2份HCV-cAg阳性标本因血清不足未作RT-PCR和FQ-PCR);244名抗-HCV阳性的血清中检测出HCV-cAg阳性52份,HCV-RNA阳性49份(49/52),2种方法符合率为94.23%;另外,检测为HCV-cAg阴性的192份标本中,HCV-RNA阳性68份(68/192)。结论该HCV-cAg检测试剂在不同的临床样本中具有很好的应用价值。     

ELISA法检测HCVcAg、抗-HCV及RT-PCR法检测HCV-RNA的价值

目的分析探讨采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCVcAg)、HCV病毒抗体(抗-HCV)及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)用于丙型肝炎诊断的价值。方法随机选择2014年8月至2015年10月进行HCVcAg、抗-HCV及HCV-RNA检测的疑似丙型肝炎病毒感染患者180例为研究对象,纳入同期体检人员200例为健康对照。对比观察3种检测方法的检测结果。结果 180例受检人员经HCV-RNA定量检测,阳性检出率为61.11%(110/180),抗-HCV阳性检出率为52.22%(94/180),HCVcA阳性检出率42.22%(76/180)。200例健康对照人员HCV-RNA阳性检出率为0.50%(1/200),HCVcAg阳性检出率为7.00%(14/200),抗-HCV阳性检出率为9.00%(18/200)。结论 RT-PCR检测HCV-RNA是丙型肝炎感染最为准确的方法,HCVcAg、抗-HCV联用或者抗-HCV、RNA(HCV-RNA)联用,可提高检测的准确率。     

肝组织病毒学检测对血清HCVRNA阴性慢性HCV感染者诊治价值探讨

目的探讨肝组织病毒学检测对血清丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)阴性慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染患者的诊治价值。方法我院收治的血清HCV RNA阴性(连续3次监测)慢性HCV感染患者46例,均行经皮穿刺肝组织活检,测定肝组织HCV RNA定量结果,明确是否存在慢性HCV感染,对肝组织HCV RNA阳性者给予抗病毒治疗,评定肝组织病理炎症坏死及纤维化改善情况,并测定血清及肝组织HCV RNA定量。结果 46例患者肝组织HCV RNA阳性率为71.74%,抗-HCV阳性率为89.13%;抗-HCV阳性患者肝组织HCV RNA阳性率为75.61%,抗-HCV阴性患者肝组织HCV RNA阳性率为40.00%;33例肝组织HCV RNA阳性患者中HCV基因型为1型者18例(54.55%),非1型15例(45.45%),非1型慢性HCV感染患者末次随访肝组织HCV RNA阴转率高于1型慢性HCV感染患者(P0.05)。末次随访时,患者肝组织Knodell HAI评分、Ishak评分均低于治疗前(P0.05)。结论血清HCV RNA阴性慢性HCV感染者肝组织病毒学检查阳性率较高,对血清HCV RNA阴性、抗-HCV阴性且原因不明反复肝功能异常患者,建议行经皮穿刺肝组织活检,可提高HCV感染检出率,并为患者临床抗病毒治疗提供有效指导。     

丙型肝炎病毒RNA含量与抗-HCV及ALT的关系

目的 了解丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系.方法 144例在本院住院和门诊同时检测HCV RNA、抗-HCV及ALT的患者,用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)法检测标本中的HCV RNA,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定ALT水平.结果 144例标本中HCV RNA高于上限值34例(23.6%),抗-HCV阳性44例(30.6%),二者有很好的相关性.有46例(31.8%)存在ALT异常,而ALT异常率与HCV RNA含量有一定的比例关系.结论 HCV RNA含量与抗-HCV同时检测可提高临床对丙型肝炎的诊断.HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的炎性反应状态.FQ-RT-PCR法检测HCV RNA具有非常好的临床应用价值.     

149例抗-HCV和HCV核酸检测结果比较分析

目的对该地区149例抗-HCV和HCV核酸定量检测的结果进行分析。方法血清标本同时以酶联免疫吸附法检测抗-HCV和荧光定量PCR法检测HCV RNA。结果在149例标本中,抗-HCV阳性率为70.47%(105/149),HCV RNA的阳性率为59.73%(89/149)。结论荧光PCR检测HCV RNA可以直接反映体内丙型肝炎病毒(HCV)的活动性和复制情况,优于抗-HCV对HCV感染检测的准确性,有利于抗病毒治疗的疗效观察。     

丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸与丙型肝炎抗体及肝功能的检测

目的对丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)定量检测结果与丙型肝炎抗体(抗-HCV)的检测结果以及丙氨酸转氨酶(ALT)水平进行比较分析,探讨其相关性及临床意义。方法对251例丙型肝炎患者血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测HCV RNA含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测抗-HCV,用生化自动分析仪检测ALT值。结果251例丙型肝炎患者血标本均为抗-HCV或HCV RNA阳性,其中:①抗-HCV阳性235例(93.6%);HCV RNA阳性197例(78.5%)。②抗-HCV和HCV RNA同时阳性181例(72.1)%;抗-HCV阳性,HCV RNA阴性54例(21.5%);HCV RNA阳性,抗-HCV阴性16例(6.4%);③ALT异常者164例(65.3%),其中HCV RNA阳性143例,HCV RNA阴性21例;ALT正常87例,其中HCV RNA阳性54例,HCV RNA阴性33例;HCV RNA水平与ALT异常率呈正相关(rs=0.468,P=0.000),而与ALT水平高低无相关性(r=-0.048,P=0.447)。结论抗-HCV和HCV RNA含量的检测在丙型肝炎的诊断中具有重要意义;二者同时检测可以提高临床对丙型肝炎的诊断;丙型肝炎患者HCV RNA水平与ALT异常率呈正相关,而与ALT水平高低无相关性。     

一种国产HCV RIBA试剂性能评价

目的评价国产丙型肝炎病毒抗体重组免疫印迹(HCV RIBA)试剂在检测anti-HCV阳性献血者中应用价值。方法采用国产RIBA试剂对107例进口酶联免疫吸附试验(ELISA)检出的抗-HCV阳性样本进行补充实验。平行HBV/HCV/HIV三联单样本核酸定性检测HCV RNA,对RIBA试剂性能进行评价。结果 RIBA阳性检出率50.47%(54/107),RIBA阳性样本中HCV RNA检出率为59.26%(32/54)。随着RIBA结果中条带数增加,HCV RNA检出率增加。RIBA试剂NS3抗原条带检出率最高(90.91%),33例HCV RNA阳性样本NS3均为阳性,阳性符合率100%,两者中等相关性(Spearman相关系数rs=0.486,P0.01),52.85%NS3阳性样本未检测出HCV RNA(37/70),结果一致性较差(Kappa=0.382,P0.001)。22例RIBA阳性/HCV RNA无反应性样本中2例HCV RNA定量检测阳性,另一进口抗-HCV酶免检测试验结果阳性。结论国产RIBA试剂作为检测献血者HCV感染补充实验具有一定应用价值。RIBA可疑结果可以检出部分极低载量HCV RNA样本。     

抗-HCV、HCV-RNA及ALT检测138例结果分析

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA与丙型肝炎抗体（抗-HCV）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）之间的关系。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定138例疑似HCV感染者血清HCV RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪测定ALT。结果：138例标本中HCV RNA和抗-HCV均阳性者108例,HCV RNA阳性而抗-HCV阴性者3例,HCV RNA阴性而抗-HCV阳性者27例。ALT水平与HCV RNA含量无显著相关性。结论：同时检测HCVRNA和抗-HCV可提高丙型肝炎患者的检出率;HCV RNA含量不能反映肝脏损伤的程度。     

Murex丙型肝炎病毒血清分型试剂应用及其评价

目的探讨检测丙型肝炎病毒的血清学分型实用检测方法。方法采用Abbott公司的Murex HCV酶联免疫抗原竞争法,对67例抗-HCV阳性的慢性丙型肝炎患者血清进行检测。结果67份抗-HCV阳性标本中,61份可分型,分型率为91.0%(61/67)。其中1型44例(72.1%),2型15例(24.6%),3型1例(1.6%),(1+2)型1例(1.6%);同时,对44例HCV RNA阳性标本进行基因分型,两者符合率为97.6%。结论Murex HCV血清分型方法特异、敏感、简便、快速,其结果对临床抗病毒治疗具有指导作用。     

在安全输血中应用丙型肝炎病毒核心抗原检测技术的初步探索

本研究探讨用丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原酶联免疫吸附技术（HCV-cAg ELISA）筛查献血员感染HCV的可行性.对我医院2003年1月-2005年12月间的8 677份献血者血清标本进行抗-HCV初检和复检.将仅初检阳性的15份血清标本和仅复检阳性的14份血清标本,分别再做HCV-cAg ELISA和HCV RT-PCR检测.结果表明：经HCV-cAg ELISA检测,29份仅初检（15份）和仅复检（14份）抗-HCV阳性血清标本中只有5份结果为阳性,阳性率为17.24%.经HCV RT-PCR检测,29份仅初检和仅复检抗-HCV阳性血清标本中同样也只有5份阳性结果,阳性率也为17.24%.结论：HCV-cAgELISA检测技术的敏感性与HCVRT-PCR技术类似,但成本明显降低,有可能作为HCV感染的辅助确证试验,或作为抗-HCV检测技术的更新换代技术用于安全输血中献血者血液的筛查.     

2012～2014年无偿献血者抗-HCV筛查结果分析

目的了解盐城地区献血者丙型肝炎病毒(HCV)感染情况。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测献血者抗-HCV,用荧光定量聚合酶链反应检测HCV RNA。结果盐城地区献血者抗-HCV阳性率为0.07%(109/163 782);109例抗-HCV阳性者中,80例为单试剂阳性,29例为双试剂阳性;初次献血者抗-HCV阳性80例,重复献血者抗-HCV阳性29例;符合核酸检测要求的72例单试剂抗-HCV阳性者均为HCV RNA阴性。结论盐城地区献血者抗-HCV阳性率低于普通人群,近三年献血者抗-HCV阳性率没有变化,抗-HCV单试剂阳性者核酸检测均为阴性。     

丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测在丙型肝炎诊疗中的作用

目的了解丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)检测在丙型肝炎(简称丙肝)诊疗中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对400例健康体检者和600例邢台市人民医院住院患者进行HCV-cAg和丙肝抗体(抗-HCV)联合检测,HCV-cAg阳性标本用PCR荧光定量法检测HCV-RNA确认。结果 400例健康体检者6例(1.5%)抗-HCV阳性,0例HCV-cAg阳性;600例住院患者12例(2%)抗-HCV阳性,4例(0.67%)HCV-cAg阳性(含1例抗-HCV阳性),HCV-RNA确认3例,二者符合率为75%。结论 HCV-cAg较抗-HCV的检测将丙肝病毒感染的"窗口期"提前了,是HCV的早期诊断指标,HCV-cAg与抗-HCV联合检测有助于提高HCV的诊断率,对于HCV筛查有重要意义,是有效防范丙肝传播的重要手段,值得推广。     

HCV患者年龄、抗体和HCV RNA与血清分型的关系

目的 采用建立的丙型肝炎病毒(HCV)血清分型技术,探讨HCV患者年龄、抗体(S/CO)和HCV RNA与血清分型的关系.方法 收集HCV慢性感染患者血清200例,定量检测HCV RNA、抗-HCV,同时进行血清分型,并进行统计分析.结果 200例慢性丙肝患者的血清抗-HCV抗体均为阳性,S/CO＞ 3.5,HCV RNA滴度在1.12×103～9.29×107 copies/ml.其中血清1型102例,2型58例,混合型2例,分型率为81.00％.采用Student t检验分析年龄、抗体S/CO、HCV RNA与分型之间的关系,t值分别为1.842 9,0.446 7,1.778 2,P均＞0.05,无统计学意义.结论 HCV患者年龄、抗体(S/CO)和HCV RNA滴度对血清分型结果没有影响.     

HCV早期感染者病毒载量与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T淋巴细胞相关性研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)早期感染者(抗原阳性、抗体阴性)的HCV病毒载量与CD4+CD25+叉头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3+)调节性T淋巴细胞水平的相关性,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞在HCV感染中的作用。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ RT-PCR)技术检测22例HCV核心抗原阳性、抗体阴性(即HCV Ag阳性、抗-HCV阴性)的早期感染病例、26例核心抗原阳性、抗体阳性(即HCV Ag阳性、抗-HCV阳性)的慢性HCV感染病例,24例核心抗原阴性、抗体阳性(即HCV Ag阴性、抗-HCV阳性)的既往HCV感染病例及22例健康对照组HCV RNA病毒载量;并用流式细胞技术检测各组外周血有核细胞中的CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平。结果 HCV Ag阳性、抗-HCV阴性组,HCV Ag阳性、抗-HCV阳性组,HCV Ag阴性、抗-HCV阳性组及健康对照组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞逐级下降,其中抗原阳性、抗体阴性组[(4.86±2.14)%]高于其他组[分别为(3.74±1.67)%、(2.74±1.27)%、(2.56±1.18)%],差异有统计学意义(t值分别为2.023、4.125、4.402,P0.05);HCV Ag阳性、抗-HCV阴性组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞与HCV RNA病毒载量的对数(copy/mL,Ig)呈正相关(r=0.535,P0.05)。结论 HCV早期感染者CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平与高病毒调定点相关,CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平可能是加速HCV早期感染的影响因素之一。     

HCV RNA载量与肝脏组织损伤的关系

目的探讨丙型肝炎病毒（HCV）RNA复制水平与肝功能丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）之间的相互关系。方法收集1182例疑似丙肝病人血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HCV RNA,利用酶动力法测定ALT、AST,采用ELISA测定抗HCV抗体。数据采用SPSS16.0统计软件处理。结果病人血清样本中,HCV RNA阳性801例（64.8%）,其中抗HCV阳性766例（95.6%）;HCV RNA阴性381例（32.2%）,其中抗HCV阳性100例（26.2%）。HCV RNA阳性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为59.0%和60.8%;抗-HCV阴性者为31.4%和34.2%。HCV RNA阴性样本中同时抗-HCV阳性者ALT,AST异常率分别为24.0%和15.0%,抗-HCV阴性者为13.9%和12.1%。HCV RNA含量与ALT、AST水平明显成正相关,r=0.62,P〈0.05。结论 HCV RNA含量与肝组织损伤程度成正相关。     

2009～2010年某地区戒毒人员丙型肝炎感染率调查

目的了解惠州市惠阳区吸毒人群丙型肝炎的感染率及流行病学特征。方法对2009～2010年500例戒毒人员抽取静脉血,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测,对阳性患者进行流行病学调查。结果在500例戒毒人员中,抗-HCV阳性368例,阳性率73.6%(368/500)。男性抗-HCV阳性率为72.9%(344/472),女性抗-HCV阳性率为86.7%(24/28)。抗-HCV阳性者以无业人员及初中或以下文化程度为主,均有静脉注射吸毒行为。吸毒年限在2～4年为感染丙型肝炎高峰区。结论丙型肝炎在吸毒人群中流行严重,丙型肝炎流行与静脉吸毒方式及吸毒年限密切相关,与文化程度高低有关。     

静脉吸毒人群中血浆抗-HCVEIA法、WB法与HCVRNA荧光定量PCR法比较

目的了解吸毒人群中抗-HCV EIA法、WB法与HCV RNA检测分析的符合性,选取适合高危人群的HCV实验室诊断策略。方法使用2种EIA试剂进行筛查试验,初检阳性者用另一种抗体试剂复检和用FQ-PCR(荧光定量PCR)法检测HCV RNA,抗体复检阳性的样品用HCV WB检测试剂进行确认。结果血清学试验115份样本初检结果阳性108份,阴性7份;对初检阳性者进行复检,结果阳性90份,阴性18份。复检阳性者使用WB确认,89份阳性,1份不确定;EIA抗-HCV结果S/CO≥3.8有71份,与WB阳性符合率为98.6%。EIA复检阳性样本中HCV-RNA检出率为82.22%,复检阴性样本中有HCV RNA的检出率为77.78%(14/18)。结论抗-HCV并不与HCV RNA同时出现。吸毒人员HCV感染的检测,在EIA筛查基础上,对阴性样本检测HCV-RNA,阳性样本用WB试验进行确认,确保检测的准确性。