酶联免疫吸附试验检测人类巨细胞病毒抗体在肝移植患者术后诊断及监测中的应用

目的 客观评价传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人巨细胞病毒(HCMV)抗体对肝移植患者术后诊断和监测HCMV感染的意义.方法 对108例肝移植术后患者分别用ELISA检测HCMV特异性抗体IgM、用免疫组化法检测HCMV低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原血症、用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HCMV DNA,将这3种方法的检测结果进行比较.结果 108例患者中,IgM阳性者8例,pp65抗原阳性者10例,DNA阳性者12例.ELISA的敏感性较其他2种方法略低,但3种方法的特异性和阴性预测值之间差异无显著性.此外,ELISA检测HCMVIgM阳性者,其结果均在临床症状出现后6～14 d检出,而pp65阳性者和HCMV DNA阳性者均在临床症状出现前被检出.结论应用ELISA检测HCMV抗体可以用于诊断监测HCMV感染情况,但有一定的局限性.     

2项对诊断儿童人巨细胞病毒活动性感染的比较

目的比较血清人巨细胞病毒(HCMV)-IgM抗体(以下简称IgM抗体)与HCMV pp65抗原(以下简称pp65)两种方法对HCMV活动性感染诊断检测的实用意义。方法采集临床疑似HMCV活动性感染儿童血标本91份,分离血浆和多形白细胞,分别用于IgM抗体检测和pp65抗原检测,同时用聚合酶链反应(PCR)检测HCMV DNA,与pp65抗原作平行比较。结果 pp65抗原检测的结果与IgM抗体检测的符合率为70.3%,与HC-MV DNA检测相比,pp65抗原检测的符合率、特异性和敏感度分别为85.5%、70.6%和75.6%,而且高pp65抗原血症与患者临床症状密切相关。结论 pp65抗原血症反映该病毒活动状况,可监测HCMV活动性感染。     

儿童巨细胞病毒IgG抗体亲和力指数测定的意义

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)特异性IgG抗体亲和力指数(AI)在儿童HCMV感染诊断中的意义。方法:对150例临床疑似HCMV感染的儿童,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和微粒子酶免化学发光法检测尿液HCMV DNA载量和血清HCMV IgM/IgG抗体;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HCMV IgG抗体亲和力指数(AI)。结果:150例疑似HCMV感染的儿童尿液HCMV DNA阳性检出率为83%(124/150),病毒载量范围为2.67×103～1.31×106copies/mL;血清HCMV IgM阳性检出率为74%(111/150),HCMV IgG阳性检出率为91%(136/150),其中HCMV IgM单阳性检出率为6%(9/150),HCMV IgG/IgM双阳性检出率为68%(102/150);102例HCMV IgG/IgM双阳性标本,AI>60%占71%(72/102),40%≤AI≤60%占6%(6/102)例,AI<40%占24%(24/102)。结论:IgG抗体亲和力指数测定能准确地反映HCMV感染的活动状况,有助于HCMV感染的诊断与治疗。     

母乳巨细胞病毒DNA阳性婴儿HCMV感染情况分析

目的回顾性分析母乳巨细胞病毒(HCMV)DNA阳性的母亲及其婴儿HCMV感染状况。方法 268例母乳HCMV阳性的母亲入选,患儿以肝炎或黄疸为临床诊断者最多见,占39.2%,肺炎次之,占34.0%。应用荧光定量PCR(qPCR)法检测患儿不同标本类型HCMV DNA的表达量,化学发光法检测患儿血清中HCMV特异抗体免疫球蛋白G(IgG)和(或)免疫球蛋白M(IgM)的水平。结果核酸检测中患儿全血阳性者49.8%,尿液阳性者68.1%,两者差异有统计学意义(P=0.000)。同时进行了尿液和全血核酸检测的137例患儿中全血总阳性率46.0%,尿液总阳性率74.5%,两者差异有统计学意义(P=0.000)。有IgG检测结果的病例182例,175例阳性(96.2%);有IgM检测结果的病例194例,88例阳性(45.4%),IgG阳性率和IgM阳性率差异有统计学意义(P=0.000)。结论患儿尿液HCMV DNA的检出率高于全血,提示病原学检测方面尿液标本优于全血。母乳HCMV DNA阳性母亲通过母乳喂养导致婴儿患病的概率为68.1%;根据IgM结果,处于活动性HCMV感染的患儿比例为45.4%。血液IgG阳性率明显高于IgM,提示1岁以内婴儿患HCMV感染的比例很高,但要考虑到胎传抗体的可能。     

巨细胞病毒两种实验室检测方法比较

目的 比较荧光定量PCR (FQ-PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV) DNA 水平和酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HCMV-IgM 抗体对HCMV感染的诊断价值.方法 采用FQ-PCR检测188例临床疑似HCMV感染患者血液中HCMV-DNA 水平.同时采用ELISA法检测血清HCMV-IgM 抗体.结果 FQ-PCR检测血清HCMV-DNA 的阳性率为31.9%(60/188),ELISA检测血清HCMV-IgM 抗体的阳性率为14.9%(28/188).前者阳性率显著高于后者(P<0.05 ).在HCMV-DNA检测阳性患者中,IgM 抗体阳性组HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.05).结论 FQ-PCR 检测HCMV-DNA是早期诊断HCMV感染的敏感有效的方法.     

人类巨细胞病毒先天性感染的产前诊断

目的探讨人类巨细胞病毒 (humancy tomegalovirus ,HCMV)先天性感染的敏感指标。方法应用病毒分离培养、ELISA及PCR技术检测原发感染或继发活动性感染孕妇羊水中的HCMV、HCMV IgM、HCMV DNA以及羊水沉渣中的HCMV DNA。结果93例羊水上清液标本分离培养出HCMV 5 2例 ,HCMV IgM 11例 ,HCMV DNA阳性 78例 ,阳性率分别为 5 5 .8%、11.6 %和 83.9%。羊水沉渣HCMV DNA阳性 5 4例 ,阳性率 5 8.1% ,与羊水上清液HCMV分离培养检出率比较差异无显著性 (χ2 =1.78,P >0 .0 5 ) ,但显著高于羊水HCMV IgM抗体的检测 (χ2 =9.2 7,P <0 .0 5 )。而羊水上清液的HCMV DNA检测率均显著高于其他指标的检测 (P <0 .0 5 )。结论羊水上清液HCMV DNA的检测可为先天性HCMV感染的产前诊断提供重要的信息     

胶体金免疫层析法检测SARS-CoV-2血清抗体的临床价值探讨

目的通过对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)免疫球蛋白(Ig)M和总抗体(即IgM/IgG)的检测,探讨应用胶体金免疫层析法(GICA法)在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的应用价值。方法收集76例患者共计83份血清,其中32例为SARS-CoV-2核酸阳性患者(确诊组),44例为SARS-CoV-2核酸阴性患者(对照组)。确诊组中7例患者为两次时间点采集标本。采用GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体。结果GICA法检测SARS-CoV-2 IgM的灵敏度50.00%(16/32),特异度90.91%(40/44),符合率73.68%(56/76),阳性预测值80.00%(16/20)、阴性预测值71.43%(40/56);SARS-CoV-2总抗体检测的灵敏度68.75%(22/32)、特异度97.73%(43/44)、符合率85.53%(65/76)、阳性预测值95.65%(22/23)、阴性预测值81.13%(43/53)。GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体的特异度均大于90%,符合率均大于70%,满足临床需求。结论GICA法检测SARS-CoV-2 IgM和总抗体,标本采集易标准化,报告时间快,灵敏度不高,但特异度较高,有辅助诊断的价值。     

小儿急性扁桃体炎非细菌病原体IgM抗体检测结果分析

目的了解小儿急性扁桃体炎非细菌性感染病原体情况,为临床合理选用抗微生物治疗药物提供依据。方法采用间接免疫荧光法检测220例急性扁桃体炎患儿血清标本中的非细菌病原体IgM抗体。结果 220例标本中,检出非细菌病原体抗体阳性标本98例,阳性检出率44.54%;共检出非细菌病原体抗体146例次,其中肺炎支原体47例次、腺病毒9例次、乙型流感病毒72例次、副流感病毒18例次。有40例标本同时检出2种及2种以上非细菌病原体抗体,检出率40.82%(40/98)。联合检出率最高的非细菌病原体抗体组合是乙型流感病毒抗体+肺炎支原体抗体。结论呼吸道非细菌病原体抗体检测对小儿急性扁桃体炎非细菌病原体感染的诊断和治疗具有指导意义。     

FQ-PCR检测造血干细胞移植受者HCMV感染及与淋巴细胞免疫表型变化的关系

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)DNA含量在异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)受者HCMV激活感染中的诊断价值和淋巴细胞免疫表型变化与HCMV激活感染的关系。方法应用FQ-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测allo-PBSCT后受者HCMV DNA和抗HC-MV lgM抗体;用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群。结果39例allo-PBSCT受者中19例检出HCMV DNA(<30 d的有5例,2~3个月的13例,>100 d的1例)。HCMV感染后血清HCMV、IgM阳性检出率非常低(4/19),且出现时间较晚。移植后早期HCMV DNA阳性组与阴性组及健康组比较CD4 细胞、CD19 细胞及CD4/CD8比值显著下降,CD8 细胞和CD16 56 细胞升高。HCMV阳性患者CD4/CD8比值在感染前后比较差异也有统计学意义。结论allo-PBSCT后HCMV活动性感染易发生于allo-PBSCT后早、中期,高峰期在移植后30~60 d;HC-MV活动性感染与细胞免疫功能紊乱互为因果,加重病情。     

佛山地区无偿献血人群人细小病毒B19感染情况分析

目的了解佛山地区无偿献血人群人细小病毒(HPV)B19感染现状。方法采用ELISA检测血液中的HPV B19IgG和IgM抗体,并用PCR检测抗体阳性标本HPV B19DNA。结果 368例无偿献血者标本中检出HPV B19IgG阳性92例,阳性率为25.00%;检出HPV B19IgM阳性2例,阳性率为0.54%,两者比较差异有统计学意义(P0.01)。94例抗体阳性标本中,检测HPV B19DNA阳性4例,阳性率为4.26%。结论佛山地区无偿献血人群存在较高的HPV B19既往感染率,急、慢性感染率较低,慢性感染者HPV B19病毒载量较低。     

HCMVpp65抗原和IgM抗体检测诊断儿童HCMV活动性感染的比较

目的：比较人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原(以下简称pp65)检测和血清HCMV-IgM抗体(以下简称IgM抗体)检测两种方法对儿童HCMV活动性感染的诊断实用意义。方法：采集临床疑似HCMV活动性感染儿童血标本(共251份)，分离血浆和多形核白细胞，分别用于IgM抗体检测和pp65检测。同时进行荧光定量PCR检测HCMVDNA，与pp65抗原作平行比较。结果：pp65抗原检测的结果与IgM抗体检测的符合率为73.3％。与HCMV DNA检测相比pp65抗原检测法的符合率、特异度和敏感度分别为85．5％，85．2％和86．2％。而且高pp65抗原血症与患者的临床症状密切相关。结论：pp65抗原血症反映该病毒活动状况，可监测HCMV活动性感染。由于儿童患者还存在原发感染的可能性，所以．联合HCMV-IgM的监测来提高临床的诊断率。     

登革热病毒快速检测NS1抗原和IgG/IgM抗体的临床应用评价

目的采用胶体金免疫层析法(GICA)检测登革热病毒(DENV)NS1抗原和/或IgG/IgM抗体,初步评价其临床应用效果。方法将2633例经聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法检测DENV核酸的血清样本分为3组:Ⅰ组为948例样本,用GICA检测NS1抗原;Ⅱ组为1156例样本,用GICA检测IgG/IgM抗体;Ⅲ组为529例样本,用GICA同时检测NS1抗原和IgG/IgM抗体。另5例流行性出血热抗体阳性样本、4例风疹/麻疹抗体阳性样本和50名健康人群样本为Ⅳ组,用GICA检测NS1抗原和IgG/IgM抗体。结果Ⅰ组结果与PCR结果相比,阳性、阴性、总体符合率分别为89.09%、92.41%、89.87%(P0.01);Ⅱ组结果与PCR结果相比,阳性、阴性、总体符合率分别为64.68%、66.41%、64.88%(P0.01);Ⅲ组结果与PCR结果相比,阳性、阴性、总体符合率分别为93.56%、61.82%、86.96%(P0.05),Ⅲ组中有419例样本经PCR检测结果为阳性,NS1抗原阳性率为85.20%,IgG/IgM抗体阳性率为63.25%,NS1抗原和/或IgG/IgM抗体阳性符合率为93.57%;Ⅳ组结果均为阴性,特异性为100%。结论GICA对NS1抗原和IgG/IgM抗体的联合检测结果与PCR检测结果较接近,且特异性良好,可用于DENV感染的早期辅助诊断和筛查。     

荧光定量PCR检测婴幼儿巨细胞病毒感染情况分析

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测婴幼儿尿液人巨细胞病毒(HCMV)在HCMV感染诊断中的意义。方法采用FQ-PCR检测148例临床疑似HCMV感染婴幼儿尿液中HCMV-DNA水平。同时采用ELISA法检测婴幼儿血清HCMV-IgM抗体。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中比较血清HCMV-IgM抗体阳性与阴性患儿尿液中HCMV-DNA拷贝数差异。结果 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA的阳性率为35.14%,ELISA检测婴儿血清HCMV-IgM的阳性率为15.54%。两种方法对HCMV感染诊断的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中,IgM抗体阳性组尿液HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.01)。结论 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA是早期诊断婴幼儿HCMV感染的敏感有效的方法。     

HCMV抗原、抗体和DNA的同I时检测在慢性肾盂肾炎中的意义

目的进一步探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与慢性肾盂肾炎的关系及同时检测HCMV抗原、抗体和DNA三项指标的意义.方法对95例慢性肾盂肾炎患者和83例正常对照,分别用免疫斑点法测尿中HCMV抗原,酶联免疫吸附测定(ELISA)测血清中HCMV抗体(IgG型),聚合酶链反应(PCR)测尿中HCMV-DNA.结果患者组HCMV抗原、抗体(IgG型)及DNA阳性率分别为55.8%,82.1%,24.2%,抗体(IgG型)S/N值(标本450 nm吸光度/阴性对照450 nm平均吸光度)为3.40±0.86,均明显高于正常对照组.三项指标的出现并非完全一致.结论HCMV感染可能与慢性肾盂肾炎有关,三项指标同时检测可能更有意义.     

液态蛋白芯片技术在抗-HCV、抗-TP检测中的应用

目的建立液态蛋白芯片联合检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体和梅毒螺旋体(TP)抗体的方法,并采用已知标准品进行评估。方法 HCV和TP重组抗原分别包被在不同的羧基化珠子上,应用免疫间接法原理建立液态蛋白芯片检测抗-HCV和抗-TP的方法。利用建立的方法检测标准血清盘标本和已知结果的标本,并评估方法的敏感性和特异性。结果液态蛋白芯片法检测抗-HCV灵敏度达到1 NCU/ml,抗-TP灵敏度达到2 NCU/ml。在标准血清盘中,抗-HCV阳性符合率24/24,阴性符合率16/16;抗-TP阳性符合率19/23,有4份IgM阳性标本未检出,阴性符合率17/17。在收集的60份阳性标本、2 000份阴性标本中,抗-HCV阳性符合率100%,阴性符合率分别为99.5%。抗-TP阳性和阴性符合率均为100%。结论建立的液态蛋白芯片方法操作简便、快速,可同时检测抗-HCV和抗-TP。     

高水平血清HCMV IgM在低龄儿童原发性HCMV感染诊断中的作用

目的：探讨血清人巨细胞病毒（HCMV）IgM水平在低龄儿童中诊断原发性HCMV感染的意义。方法收集临床诊断为HCMV感染的患儿血标本56例,年龄为0.5-1岁,采用全自动化学发光法分别定量检测血清HCMV IgG、IgM抗体水平,以及IgG亲和力指数。结果 HCMV IgG＋患儿亲和力检测结果发现,其中IgM-/IgG＋的5例患者都为高亲和力IgG,而IgM＋/IgG＋的42例患者中25例是低亲和力IgG,占59.5%。根据IgM定量检测结果进一步将此47例HCMV IgG＋患儿由低至高分成5组,分别为IgM阴性组（〈30 AU/mL）,30-100 AU/mL组,100-170 AU/mL组,170-240 AU/mL组以及大于240 AU/mL组。随着IgM抗体水平的增加,低亲和力样本所占比例呈增高趋势,经卡方检验,差异有统计学意义（χ2=12.72,P〈0.05）。结论在0.5-1岁婴儿中,HCMV IgM水平与HCMV原发感染呈正相关,临床同时参考IgM定量检测和HCMV IgG亲合力检测结果,将对0.5-1岁以内婴幼儿近期HCMV感染发生时间的判定起到有益的互补作用。先进行HCMV IgM定量检测,再进行阳性病例的IgG亲和力检测是低龄儿童原发HCMV感染实验室诊断的可行方案。     

HCMV抗原、抗体和DNA的同时检测在慢性肾盂肾炎中的意义

目的　进一步探讨人巨细胞病毒 (HCMV)感染与慢性肾盂肾炎的关系及同时检测 HCMV抗原、抗体和 DNA三项指标的意义。方法　对 95例慢性肾盂肾炎患者和 83例正常对照 ,分别用免疫斑点法测尿中 HCMV抗原 ,酶联免疫吸附测定 (ELISA)测血清中 HCMV抗体 (Ig G型 ) ,聚合酶链反应 (PCR)测尿中 HCMV- DNA。结果　患者组 HCMV抗原、抗体 (Ig G型 )及 DNA阳性率分别为 5 5 .8% ,82 .1 % ,2 4 .2 % ,抗体 (Ig G型 ) S/N值 (标本 45 0 nm吸光度 /阴性对照 45 0 nm平均吸光度 )为 3 .40± 0 .86 ,均明显高于正常对照组。三项指标的出现并非完全一致。结论　 HCMV感染可能与慢性肾盂肾炎有关 ,三项指标同时检测可能更有意义     

儿童血清肺炎支原体抗体IgM两种检测方法比较

目的:比较血清肺炎支原体抗体IgM检测的ELISA和间接免疫荧光法,为合理选择实验室检测方法提供依据.方法:北京同仁医院疑似肺炎支原体感染的儿童患者90例,采用ELISA和间接免疫荧光法进行血清肺炎支原体抗体IgM检测,数据进行统计学分析.结果:两种方法检测肺炎支原体抗体IgM差异具有显著性,而且一致性差(χ2=6.667,P=0.015,Kappa值=O.242,P=0.01).ELISA方法的灵敏度=98.5%,特异度=70.8%,阳性预测值=90.3%,阴性预测值=94.4%,假阳性率=29.2%,假阴性率=1.5%,诊断符合率=91.1%;间接免疫荧光法的灵敏度=84.8%,特异度=100%,阳性预测值=100%,阴性预测值=70.6%,假阳性率=0,假阴性率:15.2%,诊断符合率=88.9%.结论:ELISA和间接免疫荧光法各有优势,实验室应根据临床的诊断要求选择合适的肺炎支原体抗体IgM检测方法.     

1197例患者呼吸道感染病原体IgM检测结果分析

目的探讨9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测在成人急性呼吸道感染中的作用,为临床提供早期诊断依据。方法选取成都军区昆明总医院呼吸道感染患者1 197例,通过9项呼吸道感染病原体IgM抗体试剂检测住院成人患者血清病原体抗体,分析9项呼吸道感染病原体在不同年龄段及性别患者血清中的检出情况。结果1 197例患者血清IgM抗体阳性共371例,总阳性率为30.99%(371/1 197);肺炎支原体(MP)阳性率最高,为16.96%(203/1 197);其次为乙型流感病毒(IFB),阳性率为16.21%(194/1 197);副流感病毒(PIV)、甲型流感病毒(IFA)阳性率分别为10.03%、7.44%。病原体合并感染170例,阳性率为14.20%(170/1 197),占阳性病例的45.82%(170/371)。结论昆明地区呼吸道感染的病原体主要为MP、IFB、PIV及IFA等,且病原体的检出率和年龄具有相关性。     

两种不同方法检测血清肺炎支原体抗体结果比较

目的 探讨被动凝集法和酶联免疫吸附法(ELISA)在支原体肺炎诊断中的价值及临床意义.方法 采用被动凝集法和ELISA对1 633例疑似肺炎支原体(MP)感染患儿进行血清MP IgM检测.结果 1 633例血清标本中,被动凝集法检测阳性率为17.4%(285/1 633),ELISA检测阳性率为21.0%(343/1 633),2种方法阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05).285例被动凝集法检测阳性标本ELISA检测均为阳性;1 348例被动凝集法检测阴性标本中,有58例ELISA检测为阳性,被动凝集法漏检率为3.55%(58/1 633).结论 被动凝集法用于支原体肺炎疑似患者的初筛,当抗体效价小于1∶160,但临床症状支持阳性诊断时,需进行ELISA检测以提高检出率,从而避免漏诊.