探讨原子力显微镜在变形链球菌研究中的应用

目的：探讨原子力显微镜在口腔变形链球菌研究中的应用。方法：应用原子力显微镜在自然干燥状态和在态条件下观察变形链球菌血清c型MT6R菌株和MT8148葡糖基转移酶基因缺陷型菌株B29的超微结构。结果：原子力显微镜在自然干燥观察变形链球菌MT6R可见，表面形态呈不规则状，有大量的不定性物质，有呈囊状突起，菌细胞之间靠大量的不定性物质相互连在一起；水不溶性葡糖基转移酶(GTFI)缺陷型菌株B29菌细胞表面相对光滑，无囊状突起，有颗粒状物，菌细胞间不定性物质较少。在液态条件下观察细菌的超微结构与自然干燥下的相似，但吏加清晰。结论：应用原子力显微镜可以在液态条件下观察变形链球菌表面超微结构，还可以对菌细胞进行三维成像。     

变异链球菌黏附机制的研究进展

变异链球菌对牙面的黏附,是形成牙菌斑的前提和致龋的重要条件.分子生物学技术的不断进步使针对变异链球菌黏附机制的研究进入了分子水平,旨在更好地诠释变异链球菌在致龋过程中的作用,为龋病的防治奠定基础.本文就黏附、变异链球菌表面成分与黏附的关系、影响变异链球菌黏附的环境因素、变异链球菌黏附研究的前景展望等作一综述.     

三种改性方法对钛合金表面变形链球菌黏附的影响

目的 比较表面脉冲等离子渗氮、超声滚压表面纳米化、纳米化后渗氮对钛合金表面变形链球菌黏附的影响,为提高临床口腔钛合金修复体表面改性方法提供依据.方法 制作相同规格的钛合金试件24片,通过查随机数字表将试件随机分为4组,分别为抛光组(对照组,A组)、表面纳米化组(B组)、表面等离子渗氮组(C组)、纳米化后渗氮组(D组),每组6片.试件表面黏附变形链球菌1h后对细菌进行吖啶橙染色.用荧光显微镜对每片试件选5个点作为观测区并拍照.利用Image-ProPlus6.0软件进行细菌计数.采用SPSS13.0对计数结果进行方差分析.结果 对照组表面变形链球菌为(214 ±29)个/视野,B组为(220±30)个/视野,C组为(162±27)个/视野,D组为(45 ±24)个/视野.A、B组差异无统计学意义(P＞0.05);A组和C、D组差异均有统计学意义(P＜0.01);B组和C、D组差异均有统计学意义(P＜0.01);C、D组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 表面等离子渗氮及纳米化后渗氮两种表面处理方法均能在一定程度上改善钛合金表面性能,并能减少变形链球菌黏附.纳米化后渗氮在减少变形链球菌黏附方面效果明显.     

赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌黏附的影响

目的对比赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌黏附的影响。方法变异链球菌分别在阴性对照组以及含质量分数2％、4％、6％、8％赤藓糖醇和木糖醇的TPY液体培养基试管内厌氧培养24h,用磷酸缓冲盐溶液（PBS）冲洗含变异链球菌生物膜的试管3次,加入PBS超声震荡。分别收集各组原液并将其稀释至10％,各取50μL分别接种于TPY固体培养基中,厌氧培养48h,行平皿菌落计数并绘制变异链球菌集落生成单位（CFU）计数曲线图。结果赤藓糖醇组和木糖醇组的变异链球菌CFU计数低于阴性对照组,且差异有统计学意义;随着赤藓糖醇和木糖醇质量分数的增加,变异链球菌的CFU计数逐渐降低,且差异有统计学意义。在同一质量分数下,木糖醇组变异链球菌的CFU计数少于赤藓糖醇组。在质量分数为2％和4％时,组间差异无统计学意义;在质量分数为6％和8％时,组间差异有统计学意义。结论赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌的黏附有抑制作用,随其质量分数的增加,抑制效果增强。在质量分数为2％和4％时,赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌黏附的抑制作用没有明显的差异,在质量分数为6％和8％时,木糖醇对变异链球菌黏附抑制效果优于赤藓糖醇。     

原子力显微镜在细菌学研究中的应用

原子力显微镜具有样品制作简单，无需对样品包埋、固定、染色、干燥等处理，使之更接近自然状态；可在气相和液相对样品观察成像等特点。目前已被广泛应用于对细菌表面的超微结构、细菌生物膜的形态和空间构像、细菌膜表面蛋白变化以及生物大分子之间相互作用的研究中，得到了许多超过电镜分辨率的可重复结果。     

原子力显微镜在细菌学研究中的应用

原子力显微镜具有样品制作简单,无需对样品包埋、固定、染色、干燥等处理,使之更接近自然状态;可在气相和液相对样品观察成像等特点。目前已被广泛应用于对细菌表面的超微结构、细菌生物膜的形态和空间构像、细菌膜表面蛋白变化以及生物大分子之间相互作用的研究中,得到了许多超过电镜分辨率的可重复结果。     

蜂胶涂膜对变形链球菌生长和黏附的抑制作用

目的观察蜂胶涂膜对变形链球菌生长和黏附的抑制作用。方法采用纸片琼脂扩散法观察10、25、50g/L和100g/L蜂胶防龋涂膜对变形链球菌c型和d型的抑菌作用。以蜂胶涂膜涂布黏附板,置变形链球菌培养液中培养,观察其抗黏附效果。结果各浓度蜂胶涂膜及基质都能够抑制细菌生长和黏附,且抑菌作用呈现明显的浓度依赖性,100g/L涂膜组的抑菌效果与1.6g/L洗必泰溶液无显著性差异(P>0.05)。结论25~100g/L蜂胶涂膜均可以有效抑制变形链球菌c型和d型的生长黏附。     

稻芽粗提物抑制变异链球菌的体外实验研究

目的:观察稻芽粗提物对变异链球菌的抑制作用。方法:采用醇提法制取稻芽的药物粗提物,并测量其在不同药物浓度下对变异链球菌生长、黏附、产酸等作用的抑制效果。结果:稻芽粗提物抑制变异链球菌(变链菌)体外生长的最低抑菌浓度(MIC)值为6.25 mg/mL,当稻芽粗提物浓度≥0.78 mg/mL时有较明显的抑制变链菌黏附的作用,当稻芽粗提物浓度≥0.39 mg/mL即有较明显的抑制变链菌产酸的作用。结论:稻芽粗提物对变异链球菌有一定的抑制作用。     

金银花对变异链球菌UA159体外作用的实验研究

目的 探讨金银花对变异链球菌UA159的体外抑制作用。方法 通过液体二倍稀释法测定金银花对变异链球菌UA159的最低抑菌浓度（minimium inhibitory concentration,MIC）;以溶剂DMSO溶解金银花粉末,配制不同浓度药液,加入菌液,同时设置溶剂对照组与菌液对照组。通过抑菌实验测定金银花对变异链球菌UA159生长及产酸作用,绘制生长曲线和产酸曲线;计算黏附率及黏附抑制率;采用结晶紫定量法测定金银花对变异链球菌UA159生物膜形成量的影响;利用正置显微镜、扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）观察生物膜形成情况及细菌数量变化。结果 金银花对变异链球菌UA159的MIC值为12.5 mg/mL;抑菌实验显示金银花对变异链球菌UA159生长、产酸、黏附的抑制作用较对照组强,差异均具有统计学意义（P<0.05）,且随着药液浓度增强,抑制作用增加。结晶紫定量法结果显示药液组生物膜形成量与对照组相比下降,差异有统计学意义（P<0.05）,同时正置显微镜下显示生物膜形成量明显下降。扫描电镜下,药液组0、6、12 h加...     

赤藓糖醇对变异链球菌作用机制的实验研究

目的研究赤藓糖醇对变异链球菌细胞壁结构的影响,探讨其抑制变异链球菌生长的机制。方法测定在蔗糖和赤藓糖醇条件下变异链球菌所在的液体培养基中乳酸脱氢酶（LDH）的活性;在扫描电镜下观察变异链球菌表面的形态变化,了解赤藓糖醇对变异链球菌细胞壁的影响。结果在赤藓糖醇组中,变异链球菌所在的液体培养基内LDH的含量和蔗糖组有差别,但差别甚微。扫描电镜显示：在赤藓糖醇组中,变异链球菌的表面形态清晰,没有内容物溢出的迹象。结论赤藓糖醇可能不是通过影响细胞壁结构和功能的完整性而抑制变异链球菌的。     

抗龋IgY和IgY牙膏对体外培养变形链球菌影响的电镜观察

目的：观察抗龋IgY和IgY牙膏对变形链球菌超微结构的影响，为探讨IgY的防龋机制提供形态学资料。方法：体外厌氧培养变形链球菌，用不同浓度抗龋IgY和IgY牙膏处理菌细胞，并对培养出的菌细胞做透射电镜和扫描电镜观察。结果：①透射电镜。经抗龋IgY处理的变形链球菌，细胞壁不完整，细胞壁最外层荚膜溶解消失；经IgY牙膏处理的变形链球菌除上述变化外，部分菌细胞结构破坏、菌体溶解。②扫描电镜。经抗龋IgY处理的变形链球菌，其长链菌减少，菌体表面光滑。结论：抗龋IgY可导致变形链球菌细胞壁损伤。由于细胞壁具有黏附作用丧失，导致菌体黏附牙面的能力下降和菌斑形成减少，从而达到抗龋作用；IgY牙膏膏体中的成分可能对菌细胞有破坏作用     

不同浓度硒对变形链球菌粘附功能的影响

目的：通过体外模拟口腔环境,观察不同浓度硒作用下,变形链球菌粘附作用的改变情况,以确定硒是否对变形链球菌粘附功能产生影响。方法：4个实验组培养基中分别含硒0.4、0.8、1.0、2.0（×10-6）,对照组培养基含硒浓度为0。各组分别加入0.1mL吸光度调至0.33的菌液,及稀释后的3H-TdR（调整各组浓度至0.37×107Bq/L）,厌氧连续培养24h。将羟磷灰石研磨过筛、灭菌,用全唾液处理以形成人工获得性膜,用人白蛋白包被,分别在每组中加入5mg,继续培养1h,离心后收集沉淀,加入闪烁液,液闪仪测定。结果：与对照相比,加入不同浓度硒培养的变链菌每分钟闪烁强度值（CPM）均有所降低,单因素方差分析各组间有显著性差异（P〈0.05）,说明变形链球菌粘附在羟磷灰石颗粒上的数量较少。结论：一定浓度的硒可使变形链球菌在体外形成的羟磷灰石获得性膜上的粘附量减少,这可能是硒抑制了变形链球菌的粘附功能。     

变形链球菌Ⅰ型和Ⅲ型合成葡聚糖的研究

目的 通过对Ⅰ型ＪＢＰ（ｃ型）和Ⅲ型６７１５（ｇ型）变链菌在不同状态葡糖基转移酶（ＧＴＦ）所合成的水不溶性和葡聚糖（ＩＧ）和水溶性葡聚糖（ＳＧ）的测定来研究两种变链菌的ＧＴＦ－Ⅰ和ＧＴＦ－Ｓ是否存在差异。方法 制备ＪＢＰ和６７１５的含酶上清液（ｃｅｌｌ－ｆｒｅｅ ｅｎｚｙｍｅ）及含酶提取液（ｃｅｌｌ－ｂｏｕｎｄ ｅｎｚｙｍｅ）,以蔗糖为底物,恒温培养后分别收集ＩＧ和ＳＧ。     

氟钼酸铵影响变形链球菌粘附性的研究

目的 :观察氟钼酸铵对变形链球菌粘附性的影响。方法 :以苯酚 -硫酸法研究氟钼酸铵对变形链球菌合成胞外葡聚糖的作用。以Somogy -Nelson法来研究不同浓度的氟钼酸铵和氟化钠对葡糖基转移酶活性的作用。结果 :( 1) 0 .1mg/ml氟钼酸铵可使变形链球菌合成胞外葡聚糖的量明显减少 ,0 .5mg/ml氟钼酸铵此作用更显著 ,而 0 .1mg/ml氟化钠则无此作用。 ( 2 ) 1.2 5mg/ml至 10mg/ml氟钼酸铵可抑制葡糖基转移酶的活性 ,并且随着浓度增加 ,此抑制作用逐渐增强 ;6.8mg/ml氟化钠可以抑制葡糖基转移酶的活性 ;当氟总量相等的情况下 ,氟钼酸铵抑制葡糖基转移酶活性的作用显著地强于氟化钠。结论 :低浓度氟钼酸铵可以抑制变形链球菌胞外葡糖基转移酶的活性 ,因此减少变形链球菌胞外葡聚糖的形成 ,降低变形链球菌的粘附性 ,具有显著抗龋作用     

Inhibition of Streptococcus mutans adhesion to buccal epithelial cells by an aqueous extract of Thymus vulgaris

OBJECTIVES: The aim of this study was to investigate the effect of an extract of Thymus vulgaris (thyme) on the growth of Streptococcus mutans (S. mutans) and the adhesion of this bacterium to human buccal epithelial cells. METHODS: Different concentrations of an aqueous extract of thyme were prepared and the effects investigated on growth of S. mutans. Furthermore, the effect of these extracts on adhesion of S. mutans to buccal epithelial cells was also investigated and compared with the effects of chlorhexidine digluconate. RESULTS: The data revealed that exposure of S. mutans to thyme extract showed a time and concentration-dependent decrease in bacterial viability. The greatest effect was observed when S. mutans had been exposed to 20% thyme extract for a period of 48 h which resulted in 96% inhibition of bacterial growth. Furthermore, the adhesion of S. mutans to buccal epithelial cells was also reduced when either buccal epithelial cells or S. mutans had been pre-incubated with different concentrations of aqueous thyme extracts (83-98% and 75-89% inhibition respectively). There was also greater reduction in the adherence of bacterial cells to buccal epithelial cells after mouth rinsing with 20% aqueous thyme extract compared to rinsing with chlorhexidine digluconate (45% and 89% inhibition of bacterial adhesion respectively). CONCLUSION: The diminished adherence of S. mutans to buccal epithelial cells after exposure to various concentrations of aqueous thyme extract as well as the antimicrobial properties of this plant may have clinical relevance.     

变形链球菌葡糖基转移酶缺陷突变株粘附特征的观察

为了揭示变形链球菌葡糖基转移酶（ｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＴａｓｅ）在变链菌粘附中的作用，通过扫描电镜观察了其缺陷突变株对玻片的粘附。结果显示，在蔗糖存在的条件下，变链菌ＭＴ８１４８及其ＧＴａｓｅ缺陷株表现出不同的粘附模式。提出了细胞吸附型ＧＴａｓｅ（ＣＡＧＴａｓｅ）与细菌间的聚集有密切关系的观点，认为这种聚集的紧密程度高于由细胞外ＧＴａｓｅ（ＣＦＧＴａｓｅ）所介导的聚集。而ＣＦＧＴａｓｅ所合成的葡聚糖可能与细菌间某种有序的粘接有关。本研究结果对深入认识变链菌的致龋机理有参考价值。     

In vitro Streptococcus mutans adhesion and biofilm formation on different esthetic orthodontic archwires

ObjectivesTo evaluate the ability of different esthetic archwires to retain oral biofilms in vitro.Materials and MethodsSeven different brands of coated orthodontic archwires were tested: two epoxy coated, two polytetrafluoroethylene coated, two rhodium coated, and one silver plus polymer coated. Conventional uncoated metallic archwires were used as controls. Streptococus mutans adherence to archwires was quantified by colony count following 24 hours of biolfilm growth, and total wire-associated biofilm was measured using a crystal violet staining assay. For both tests, two conditions were used: 0% sucrose and 3% sucrose. For statistical analysis, P < .05 was considered as statistically significant.ResultsFor S. mutans colony forming units per biofilm, there were no statistically significant differences among the various archwires (P = .795 for 0% sucrose; P = .905 for 3% sucrose). Regarding total biofilm formed on archwires in the 3% sucrose condition, there were statistically significant differences in crystal violet staining only for the comparison between Niti Micro Dental White and Copper Ni-Ti wires (P < .05).ConclusionsThe clinical use of esthetic-coated orthodontic wires may be considered to have similar risks as uncoated archwires for biofilm retention.