HCMV感染对单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用细胞ＥＬＩＳＡ法，研究发现人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ的影响。结果表明ＨＣＭＶ感染后１ｄ，单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达显著增高（Ｐ＜０．０１），以后逐渐降低，ｄ５降至对照水平；ＩＦＮγ（５００Ｕ／ｍｌ）．ＴＮＦ（２５０Ｕ／ｍｌ）、ＩＬ－６（５００／ｍｌ）、ＩＬ－１（５００／ｍｌ）均能不同程度地刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达；ＨＣＭＶ感染后，细胞因子刺激ＨＬＡ－ＤＲ表达的水平在感染后ｄ５，较对照组均显著降低（Ｐ＜０．０１）；ＩＬ－１＋ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ＋ＩＦＮ－γ在刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达时有协同作用；ＨＣＭＶ感染后，ＩＦＮ－γ＋ＩＬ－１及ＴＮＦ＋ＩＦＮ协同刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达水平较对照组显著降低（Ｐ＜０．０１）。结果提示：在ＨＣＭＶ感染引起免疫抑制过程中，其引起单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达降低是一重要机制。     

HCMV感染对单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用细胞ＥＬＩＳＡ法，研究发现人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ的影响。结果表明ＨＣＭＶ感染后１ｄ，单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达显著增高（Ｐ＜０．０１），以后逐渐降低，ｄ５降至对照水平；ＩＦＮγ（５００Ｕ／ｍｌ）．ＴＮＦ（２５０Ｕ／ｍｌ）、ＩＬ－６（５００／ｍｌ）、ＩＬ－１（５００／ｍｌ）均能不同程度地刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达；ＨＣＭＶ感染后，细胞因子刺激ＨＬＡ－ＤＲ表达的水平在感染后ｄ５，较对照组均显著降低（Ｐ＜０．０１）；ＩＬ－１＋ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ＋ＩＦＮ－γ在刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达时有协同作用；ＨＣＭＶ感染后，ＩＦＮ－γ＋ＩＬ－１及ＴＮＦ＋ＩＦＮ协同刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达水平较对照组显著降低（Ｐ＜０．０１）。结果提示：在ＨＣＭＶ感染引起免疫抑制过程中，其引起单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达降低是一重要机制。     

脑肿瘤细胞HLA—Dr表达及肿瘤中浸润单个核细胞亚…

对４４例原发性脑肿瘤的免疫组化研究发现，２９例（６７．２％）的肿瘤细胞表达ＨＬＡ－Ｄｒ。ＨＬＡ－Ｄｒ阳性细胞含量和阳性率均与肿瘤的组织学类型有关，并随恶性程度增加而升高。肿瘤中浸润的单个核细胞（ＭＮＣ）主要是ＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ细胞和单核巨噬细胞，前者主要包括ＣＤ４和ＣＤ８个亚群。ＨＬＡ－Ｄｒ＋，＋＋，＋＋＋组ＣＤ４５ＲＯ＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞密度均低于ＨＬＡ－Ｄｒ－组。ＣＤ４亚群和单核巨噬细胞密度不受Ｈ     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

脑肿瘤细胞HLA一Dr表达及肿瘤中浸润单个核细胞亚群的研究

对４４例原发性脑肿瘤的免疫组化研究发现，２９例（６７２％）的肿瘤细胞表达ＨＬＡ一Ｄｒ。ＨＬＡ一Ｄｒ阳性细胞含量和阳性率均与肿瘤的组织学类型有关，并随恶性程度增加而升高。肿瘤中浸润的单个核细胞（ＭＮＣ）主要是ＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ细胞和单核巨噬细胞，前者主要包括ＣＤ４和ＣＤ８两个亚群。ＨＬＡ一Ｄｒ＋，组ＣＤ４５ＲＯ＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞密度均低十ＨＬＡ一Ｄｒ一组。ＣＤ４亚群和单核巨噬细胞密度不受ＨＬＡ一Ｄｒ表达状况的影响。这说明脑肿瘤细胞表达的ＨＬＡ一Ｄｒ对参与局部抗肿瘤免疫的ＣＤ８亚群有选择性抑制作用。     

早孕期绒毛细胞短期培养的染色体脆性位点研究

筛选１０２份人工流产的绒毛标本，分组进行短期培养及染色体脆性位点（ＦＳ）的研究，结果表明：Ｍ１９９加ＭＴＸ（２组）（终浓度为４×１０～（－８）ｍｏ１／Ｌ）与单纯Ｍ１９９（１组）比较，染色体畸变率（ＣＡＲ）和脆性位点表达率（ＦＲ）差别均有显著意义（Ｐ＜０．０５）；Ｍ１９９加ＢｒｄＵ（终浓度为２×１０～（－４）ｍｏ１／Ｌ）（３组）与Ｍ１９９加ＭＴＸ比较ＦＲ差别有极显著意义（Ｐ＜０．０ｌ）；ＲＰＭＩ１６４０加ＭＴＸ（终浓度８×１０～（－８）ｍｏ１／Ｌ）（４组）与２组比较中期分裂相数差别有显著意义（Ｐ＜０．０５）。     

IFN_γ对健康和肿瘤患者单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ方法，研究ｒＨｕＩＦＮ－γ（ＩＦＮγ）对体外培养的健康人及恶性肿瘤患者外周血单核细胞表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的影响。结果表明：ＩＦＮγ能促进两者单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达，但ＩＦＮγ对健康人单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达促进程度较恶性肿瘤患者强（Ｐ＜０．０５）。     

乙型肝炎患者红细胞CR1密度相关基因多态性与CR1活性的相关性

为研究乙型肝炎患者红细胞ＣＲ１活性与ＣＲ１密度相关基因多态型别的关系,采用ＰＣＲ加ＨｉｎｄⅢ酶切技术测定红细胞ＣＲ１密度相关基因多态型别（ＨＨ、ＨＬ、ＬＬ型）,采用红细胞ＣＲ１（ＥＣＲ１）免疫粘附活性（ＲＣＩＡ）和粘附ＩＣ量免疫酶联（ＥＬＩＳＡ）法测定红细胞ＣＲ１活性。乙型肝炎患者ＨＨ型比率是７３９％（３４／４６）,正常人ＨＨ型比率是８０％（６４／８０）,ＨＨ型乙型肝炎患者ＥＣＲ１ＲＣＩＡ（３７８±０２９ｎｇＡＨＧ／１０７ＲＢＣ）明显高于ＨＬ型乙型肝炎患者（１８８±０２６ｎｇＡＨＧ／１０７ＲＢＣ）和ＨＨ型正常人（２６０±０３０ｎｇＡＨＧ／１０７ＲＢＣ）。提示乙型肝炎患者红细胞免疫功能低下是获得性的。     

IFNγ对健康和肿瘤患者单核细胞HLA—DR表达的影响

本文采用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ方法，研究ｒＨｕＩＦＮ－γ（ＩＦＮγ）对体外培养的健康人及恶性肿瘤患者外周血单核细胞表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的影响。结果表明：ＩＦＮγ能促进两者单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达，但ＩＦＮγ对健康人单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达促进程度较恶性肿瘤患者强（Ｐ＜０．０５）。     

bcl—2基因在小鼠睾丸及试验隐睾中表达的研究

目的 研究ｂｃｌ－２基因在正常小鼠睾丈中的定位表达及试验隐睾所导致的改变。方法 以Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ印迹法从蛋白水平检测ｂｃｌ－２基因在正常小鼠睾及及试验隐睾中的表达、变化;地高辛标记ｂｃｌ－２基因ｃＤＮＡ探针,石蜡组织切片原位杂交技术,从ｍＲＮＡ水平检测ｂｃｌ－２基因在小鼠精上皮中的定位及试验隐睾所导致的改变。结果 ｂｃｌ－２蛋白在正常小鼠睾丸中有较丰富的表达,试验隐睾导致其表达明显降低;ｂｃｌ－２基因在生精细胞中有较高水平的ｍＲＮＡ转录,表达细胞主要为各级生精细胞,支持细胞和间质细胞未见表达,隐睾术后仍然保持较高水平的ｍＲＮＡ转录。结论 ｂｃｌ－２蛋白可能在生精细胞主动退化的调节中起着重要作用。     

缺氧复氧致神经细胞凋亡中Bcl—2、Bax基因蛋白的表达

目的 探讨缺氧复氧致原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞凋亡中Bcl-2、Bax基因蛋白的表达及其与凋亡的关系。方法 用胎龄17－18d Wistar大鼠的大脑皮层神经细胞进行原代分离培养。采用TUNEL染色方法、流式细胞术确立缺氧复氧神经细胞凋亡病理模型,并用免疫组织化学方法显示缺氧复氧不同时间Bcl-2、Bax基因的动态表达。结果 1.缺氧复氧可以使大鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡,在分别缺氧2、4、6、8h,复氧0h和18h组中,缺氧4h开始出现凋亡细胞,随缺氧时间的延长,凋亡细胞数逐渐升高,两者呈显著负相关,而凋亡的发生也与Bax基因、Bcl-2基因表达呈显著正、负相关性。在缺氧复氧组中,未发现相关性。结论 缺氧复氧可致胎鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡;缺氧复氧所引起Bcl-2基因表达增高,Bax基因表达降低,可能是胎鼠大脑皮层神经细胞发生凋亡的机制之一。     

大鼠急性心肌缺血再灌注的心肌细胞凋亡研究

目的　为证实急性心肌缺血再灌注过程中存在着不同程度的心肌细胞凋亡现象 ,初步研究心肌细胞凋亡与Bcl 2 /Bax蛋白表达的关系。　方法　透射电镜观察心肌细胞的超微结构变化 ,抽提心肌组织DNA琼脂糖凝胶电泳 ,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞 ,免疫组织化学技术和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl 2 /Bax蛋白表达。　结果　缺血及再灌注组电镜观察心肌细胞出现典型凋亡超微结构特征 ,TUNEL染色可见不同程度的心肌细胞凋亡阳性反应 ,DNA电泳显示在缺血再灌注 2h出现明显的DNA条纹图像 ,再灌注组较缺血组心肌细胞中Bcl 2表达明显降低 (P <0 0 5 ) ,而Bax表达显著增高 (P <0 0 1)。　结论　急性心肌缺血及再灌注能诱导不同程度的心肌细胞凋亡 ,Bcl 2 /Bax基因对心肌细胞凋亡的发生有着重要的调控作用     

精索静脉曲张大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达和细胞凋亡的研究

目的：研究精索静脉曲张（VC）大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达与细胞凋亡及其机制。 方法： 选取35只成年健康雄性 Wistar大鼠，随机分为VC组（VG, n=20）和假手术组（SOG, n=15）。术后10周，取双侧睾丸，采用火焰原子吸收法测定线粒体钙、采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax蛋白表达。 结果： VC组大鼠双侧睾丸生殖细胞线粒体钙的含量明显低于SOG组，生殖细胞凋亡显著增多，Bcl-2表达显著降低，Bax表达显著升高,但双侧睾丸生殖细胞凋亡率差异无显著。 结论： VC时，大鼠睾丸生殖细胞凋亡明显增加，提示VC时所致的男性不育可能是在某种凋亡诱发因素（高温、毒素返流、氧自由基等）作用下，线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达的变化直接对生殖细胞产生影响,导致男性不育。     

脑缺血再灌注后神经元和内皮细胞凋亡与Bc1-2和Bax表达的时相关系

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后受损伤的神经细胞和血管内皮细胞凋亡 ,以及Bcl 2和Bax蛋白表达与再灌注时间的关系。　方法　应用原位末端标记 (TUNEL)技术和免疫组织化学方法 ,分别观察脑缺血再灌注 2h、6h、12h、2 4h、2d、3d、7d、14d和 2 1d等不同时间点神经细胞和血管内皮细胞凋亡数及Bcl 2和Bax蛋白的表达。　结果　 1.脑缺血周围区 ,再灌注 2h神经细胞和内皮细胞凋亡开始明显增多 ,12～ 2 4h达高峰 ,之后逐渐减少 ,7～ 14d降至假手术组水平 ;血管内皮细胞凋亡迟于神经元凋亡约 12h。 2 .Bcl 2蛋白表达于缺血再灌注 2h开始逐渐增强 ,12～ 2 4h达高峰 ,之后逐渐下降 ,至 7～ 14d接近假手术组水平 ;3.Bax蛋白表达于缺血再灌注 6h开始逐步增高 ,2 4～ 4 8h达高峰 ,之后逐渐下降 ,至 14d与假手术组已无显著性差异。 4 .Bcl 2表达与细胞凋亡的时相变化基本一致 ,Bax表达时相迟于细胞凋亡。　结论　细胞凋亡是脑缺血再灌注损伤细胞死亡的形式之一 ,血管内皮细胞凋亡迟于神经细胞凋亡 ,Bcl 2和Bax参与细胞凋亡的调节。     

生发中心淋巴细胞凋亡与小结树突细胞关系的研究

研究人淋巴结和扁桃体生发中心内的凋亡细胞与小结树细胞之间的关系。方法用ＴＵＮＥＬ和免疫化学方法分别检测凋亡细胞,ＦＤＣ和Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果在生发中心有散在的凋亡细胞且多被巨噬细胞所吴噬;     

米托蒽醌对HL-60细胞的促凋亡效应

目的 :探索米托蒽醌 (MTN)促HL 6 0细胞凋亡效应及其机理。方法 :取对数生长期HL 6 0细胞 ,不同浓度MTN作用不同时间后 ,利用MTT法、透射电镜、DNA电泳、流式细胞术观察MTN对HL 6 0细胞的抑制效应、促凋亡效应及凋亡相关基因Bcl 2、Bax蛋白表达情况。结果 :(1)毫微克级的MTN对HL 6 0细胞有明显的抑制效应 ,且效应具有时间、剂量依赖关系。(2 )MTN作用后的HL 6 0细胞透射电镜观察胞膜完整、出现核碎裂、凋亡小体等形态学特征。DNA电泳出现 2 0 0bp左右的梯形条带。 (3)Bcl 2、Bax蛋白表达 :MTN作用于HL 6 0细胞相同时间 ,Bcl 2蛋白及Bcl 2蛋白与Bax蛋白比值 (Bcl 2 Bax)随MTN作用时间延长而下降。结论 :MTN具有诱导HL 6 0细胞凋亡作用 ,此过程中伴Bcl 2下调和Bcl 2 Bax的降低。提示MTN可能通过Bcl 2途径诱导HL 6 0细胞凋亡     

自然流产中的早孕期蜕膜细胞Bcl-2 /Bax 比例异常

探讨早孕期蜕膜细胞细胞凋亡异常与妊娠失败的关系。应用TUNEL法测定凋亡的发生及凋亡细胞的定位，免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达和相互关系。结果发现：（1）正常早孕40d蜕膜组织细胞大量凋亡，Bcl-2蛋白表达量较低，Bax蛋白有较强表达。（2）正常早孕50d，凋亡细胞明显减少，Bcl-2的表达显著增强，Bax蛋白表达减弱。（3）早孕50d自然流产组，蜕膜组织大量凋亡，与同时期正常蜕膜组织相比，P＜0．01。Bcl-2蛋白表达明显降低，Bax蛋白表达明显增强，Bcl-2/Bax比例降低。早孕期蜕膜组织凋亡异常可能是自然流产的机制之一，Bcl-2/Bax途径可能是诱导早孕期蜕膜细胞凋亡的重要因素。     

乙醇诱导的肝癌细胞HCC—9204凋亡及其与Bax和Bcl—2蛋白的关系

目的 探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋良心相关基因bax和 bcl-2表达的关系。方法 用噻唑蓝（MTT）法检测浓度分别为20-100mL-L的乙醇对肝癌细胞系HCC-9204的杀伤作用,然后,用60mL/L乙醇作用6h诱导HCC——9204细胞凋亡,以May-Grunwald-Giemsa(MGG)染色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法和流式细胞术分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化,用免疫细胞化学染色图象分析法,检测诱导凋亡前、后Bax和Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果 随着乙醇浓度的增加,其对HCC-9204细胞的杀伤作用逐渐增强,60mL/L乙醇可使HCC-9204细胞发生明显的细胞凋亡的形态学变化,并且大部分细胞为TUNEL阳性着色,流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰,诱导凋亡后的HCC-9204细胞Bax蛋白的表达水平明显增高,而Bcl-2在诱导凋亡前、后的HCC——9204细胞中均未见表达,结论 低浓度乙醇对肝癌细胞HCC——9204具有明显的凋亡诱导作用,其凋亡的发生与Bax蛋白表达水平的增高有关。     

Protective Effect of Quercetin on Cadmium‐Induced Oxidative Toxicity on Germ Cells in Male Mice

Cadmium is a toxic heavy metal that is widely distributed in the environment. As a critical process, oxidative toxicity mediates the morphological and functional damages in germ cells after cadmium exposure. In this study, the protective effect of quercetin on cadmium‐induced oxidative toxicity was investigated in mouse testicular germ cells. After oral administration of cadmium chloride at 4 mg/kg body weight for 2 weeks, damages in spermatozoa occurred in the early stage of spermatogenesis. Cadmium treatment significantly decreased the testicular antioxidant system, including decreases in the glutathione (GSH) level, superoxide dismutase (SOD), and GSH peroxidase (GSH‐Px) activities. Moreover, exposure to cadmium resulted in an increase of hydrogen peroxide production and lipid peroxidation in testes. In addition, cadmium provoked germ cell apoptosis by upregulating expression of the proapoptotic proteins Bax and caspase‐3 and downregulating expression of the antiapoptotic protein Bcl‐XL. However, combined administration of a common flavonoid quercetin at 75 mg/kg body weight significantly attenuated cadmium‐induced germ cell apoptosis by suppressing the hydrogen peroxide production and lipid peroxidation in testicular tissue. Simultaneous supplementation of quercetin markedly restored the decrease in GSH level and SOD and GSH‐Px activities elicited by cadmium treatment. Additionally, quercetin protected germ cells from cadmium‐induced apoptosis by downregulating the expression of Bax and caspase‐3 and upregulating Bcl‐XL expression. These results indicate that quercetin, due to its antioxidative and antiapoptotic characters, may manifest effective protective action against cadmium‐induced oxidative toxicity in mouse testicular germ cells. Anat Rec, 2011. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.