结缔组织生长因子在糖尿病视网膜病变中的调控机制及研究进展

糖尿病视网膜病变是一种微血管循环异常的致盲性眼病。在疾病进展后期,血管内皮生长因子抗体类药物因可显著抑制新生血管形成和改善黄斑水肿而被广泛应用于临床。然而,药物应用后纤维化趋势的加重也引起了广泛的关注。结缔组织生长因子作为眼内纤维化的重要细胞因子,在药物应用后过量表达,被认为是引起上述副反应的重要因素之一,也是一种潜在的辅助治疗靶点。整理目前研究进展后发现,结缔组织生长因子的调控机制包括调控下游细胞因子基因表达和直接结合于其他细胞因子或受体两种方式。因其特殊的四模块结构上具有多种细胞因子特异结合位点,其调控方式多依赖于后者,进而促进或抑制了多种重要细胞因子通路的表达。在糖尿病视网膜病变中,其表达贯穿整个疾病进程。在临床前期和新生血管形成末期,结缔组织生长因子的累积分别起到促进基底膜增厚和新生血管纤维化形成的重要作用。本文将对结缔组织生长因子多样化的调控机制及该因子在DR中的研究进展进行系统阐述。     

结缔组织生长因子在糖尿病视网膜病变中的研究进展

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是即刻早期基因CCN家族的成员之一.CTGF与多种细胞因子相互作用,可调节细胞间的黏附迁移、促进有丝分裂的发生、细胞活化和参与血管的生成.CTGF有望成为基因诊断和治疗糖尿病视网膜病变的有效靶标.     

结缔组织生长因子在糖尿病视网膜病变中的研究进展

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是即刻早期基因CCN家族的成员之一.CTGF与多种细胞因子相互作用,可调节细胞间的黏附迁移、促进有丝分裂的发生、细胞活化和参与血管的生成.CTGF有望成为基因诊断和治疗糖尿病视网膜病变的有效靶标.     

实验性糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和微血管改变及结缔组织生长因子的表达

目的 研究糖尿病大鼠视网膜凋亡细胞和结缔组织生长因子(CTGF)表达情况及其在微循环改变中的作用.方法 实验研究.55只成年雄性Wistar大鼠,以随机数字表法,随机分为正常对照(CON)组(10只鼠)和糖尿病(DM)组(45只鼠).根据病程不同,将存活的30只DM组大鼠再分为2个月组(DM2)、4个月组(DM4)及6个月组(DM6),每组各10只鼠.用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测视网膜凋亡细胞,用免疫组织化学法测定CTGF表达水平,以视网膜消化铺片过碘酸雪夫(PAS)染色法观察视网膜血管改变情况.观察并比较不同病程的DM大鼠视网膜凋亡细胞及CTGF表达情况、视网膜微血管形态变化及周细胞数量变化.对各组大鼠视网膜的细胞凋亡指数、CTGF表达阳性率及血管周细胞数量进行比较采用LSD-t检验法,两变量间的相关性分析采用线性相关法.结果 CON组大鼠视网膜细胞凋亡和CTGF表达均阴性.DM2组、DM4组、DM6组大鼠视网膜细胞凋亡指数分别为0.05±0.01、0.25±0.03及0.52±0.02;组间两两比较,差异均有统计学意义(DM2与DM4组比较t=21.432,DM2与DM6组比较t=50.843,DM4与DM6组比较t=29.410;P<0.05),表明随DM病程延长,视网膜凋亡指数逐渐增加.DM2组、DM4组、DM6组大鼠视网膜CTGF表达阳性率分别为(22.79±2.99)%、(41.73±2.59)%、(55.27±2.68)%,组间两两比较,差异均有统计学意义(DM2与DM4组比较t=15.345,DM2与DM6组比较t=26.316,DM4与DM6组比较t=10.971;P<0.05),表明随DM病程延长,视网膜CTGF表达水平逐渐增高.CON及DM2组大鼠视网膜血管走形良好,DM4组大鼠视网膜部分血管渐变僵硬、狭窄;DM6组大鼠视网膜血管主干僵硬,部分微血管狭窄明显.与CON组视网膜血管周细胞数量对比,DM2组未见明显变化;随病程延长,DM4组和DM6组大鼠视网膜血管周细胞数量较CON组逐渐减少,差异均有统计学意义(t=3.367,6.667;P<0.05).DM大鼠视网膜细胞凋亡指数与CTGF阳性表达水平呈显著正相关(r=0.958,P<0.05),凋亡指数和CTGF阳性表达水平与视网膜血管周细胞数量均呈显著负相关(r=-0.540,-0.595;P<0.05).结论 在DM大鼠视网膜组织中,凋亡细胞和致纤维化因子CTGF的产生均早于微循环血管走形及周细胞的改变.(中华眼科杂志,2011,47:521-526)

Abstract：

Objective To study the cell apoptosis and the expression of connective tissue growth factor (CTGF) in the retina of diabetic rats and to explore their contributions to the changes of microcirculation. Methods It was a experiment study. Fifty-five adult male Wistar rats were divided into two groups, normal control group (CON,10 rats) and diabetes mellitus group (DM, 45 rats). The 30 surviving rats in the DM group were further divided into 3 groups based on the time of observation, 2 month (DM2), 4 month (DM4) and 6 month (DM6) groups, with 10 rats in each group. Cell apoptosis was detected by TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL). Expression of CTGF was determined by immunohistochemical study. Retinal vessels were observed by retinal digest stretched periodic acid Schiff (PAS) staining. Results Immunohistochemical staining and TUNEL staining revealed negative results in normal control group. Retinal cell apoptosis index increased gradually from DM2 to DM6, the differences between any two groups were statistically significant (t2-4,2-6,4-6=21.432, 50.843, 29.410;P<0.05). Expression of CTGF in the retina increased from DM2-DM6, the differences between any two groups were statistically significant (t2-4,2-6,4-6=15.345, 26.316, 10.971;P<0.05). PAS staining of retinal blood vessels obtained negative results in the CON and DM2 groups. Part of retinal capillaries were slightly stiff and narrow in DM4 group. Retinal capillaries in DM6 group were trunk stiff and were narrowed obviously. The number of pericytes was reduced in DM4, and progressed following the course of diabetes. The number of pericytes in the DM2 group did not different from that in the CON group (t=0.875,P=0.387). The number of pericytes in the DM4 and DM6 group were significantly decreased as compared to the CON group (t=3.367,6.667;P<0.05). Retinal cellular apoptosis index had a significant positive correlation to the expression of CTGF (r=0.958,P<0.05). Number of pericytes was significantly correlated (negative correlation) with retinal cellular apoptosis index and the expression of CTGF (r=-0.540, -0.595; P<0.05). Conclusions The appearances of cellular apoptosis and fibrosing factor CTGF in the retina of diabetic rats occurred earlier than the changes of microcirculation and the number of capillary pericytes.     

糖尿病大鼠视网膜中血管内皮生长因子的表达

目的 利用糖尿病大鼠动物模型，通过大鼠视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothellal growth fac—tor，VEGF)的表达情况，探讨VEGF在糖尿病视网膜病变(Diabetlc Retinopathy，DR)发展过程中作用机理。方法 复制链脲佐菌素(Streptozocin，STZ)糖尿病大鼠动物模型，取不同组、不同时期大鼠视网膜，利用免疫组织化学及原位杂交方法，检测VEGF蛋白质及mRNA的表达情况。结果 正常对照组(H)、血糖恢复组及糖尿病1月组(H1)大鼠视网膜均无VEGF蛋白质及mRNA的阳性表达。糖尿病3月组(M3)未见VEGF mRNA表达，而在内核层及节细胞层VEGF蛋白表达阳性(34％)，此表达与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性细胞相同。糖尿病5月组(M5)VEGFmRNA表达阳性率为67％，表达位于视网膜各层，内界膜中的表达与GFAP免疫组化阳性分布相同，VEGF蛋白质表达强阳性(89％)，主要位于内核层、节细胞层的细胞及血管上。结论 VEGF在STZ大鼠视网膜中的表达与病程相关，而且VEGF的产生存在着自分泌和旁分泌多种途径。     

增生性糖尿病视网膜病变玻璃体中结缔组织生长因子的定量分析

目的 定量测定结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在增生性糖尿病视网膜病变(proliferative di-abetic retinopathy,PDR)患者玻璃体中的浓度,探讨其在PDR发病机制中的作用.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法定量检测27眼PDR、5眼非增生性糖尿病视网膜病变及5眼正常对照组玻璃体中CTGF的浓度.结果 PDR组玻璃体中CTGF浓度(567.09±181.15)ng·L-1明显大于对照组(128.06±57.28)ng·L-1及非增生性糖尿病视网膜病变组(150.70±52.39)ng·L-1(P均<0.01).PDR组中Ⅵ期患者玻璃体中CTGF浓度(706.17±88.78)ng·L-1大于Ⅳ期(349.20±110.60)ng·L-1及Ⅴ期(526.70±122.50)ng·L-1(P均<0.01).结论 PDR患者玻璃体中CTGF浓度升高可能与视网膜新生血管纤维膜的形成有关,CTGF在PDR发展过程中起着一定作用.     

转化生长因子β2 mRNA在糖尿病大鼠视网膜中的表达

糖尿病视网膜病变 (ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ ,ＤＲ)的基本病理过程是微循环障碍导致的视网膜微血管的变化 ,其发生、发展与细胞增殖调控失常有关[1] 。转化生长因子 β(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ ,ＴＧＦ β)就是一种重要的多功能调节因子 ,它可抑制内皮细胞增殖 ,也可促进新生血管管腔形成 ,并趋化成纤维细胞和单核细胞浸润[2 ] 。迄今未见对ＤＲ不同时期的ＴＧＦ β2 表达进行研究的报道。本研究应用链脲佐菌素 (ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ ,ＳＴＺ)诱导大鼠糖尿病模型 ,动态观察视网膜中Ｔ…     

结缔组织生长因子与眼病

结缔组织生长因子是近年新发现的细胞因子。它在促纤维化、细胞外基质产生、促新生血管形成等方面发挥重要的生物学作用。本文主要就结缔组织生长因子与增生性视网膜病变及其它相关眼病的关系作一综述。     

结缔组织生长因子mRNA在增生性糖尿病视网膜病变视网膜前纤维血管膜中的表达

目的：观察结缔组织生长因子（connective tissue growth factor ,CTGF)mRNA在增生性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR)纤维血管性视网膜前膜中的表达。方法：采用原位杂交方法，对玻璃体切割术获得的6例PDR的纤维血管性膜进行CTGF mRNA的检测。结果：2例纤维血管性膜标记为阳性染色（＋＋），4例为强阳性染色（＋＋＋），每例标本随机计数100个细胞中的阳性细胞数，取6例标本的平均值，计算平均阳性率为77％，阳性细胞多见于成纤维细胞样细胞和新生血管的血管内皮细胞。结论：PDR纤维血管性膜形成过程中成纤维样细胞及血管内皮细胞在TGF－β等生长因子的刺激下，CTGF mRNA显著上调，CTGF参与了PDR纤维血管性膜的形成和发展。     

生长因子与糖尿病性视网膜病变

生长因子与视网膜增殖性疾患的关系日益引起人们的关注，本综述与增殖性糖尿病性视网膜病变有关的生长因子的研究进展，生长因子是一类多功能的分子信号，其化学性质是一类多肽或蛋白质，正常眼视网膜和玻璃体中存在数种生长因子，刺激增殖性因子与抑制性因子的平衡失调可能导致或加重增殖性糖尿病变。本述及生长因子的特点，新生血管发生过程，糖尿病性视网膜病变的病理生理改变，生长因子与糖尿病性视网膜病变的关系，抑制新生     

Research progress on the role of connective tissue growth factor in fibrosis of diabetic retinopathy

Diabetic retinopathy (DR) is one of the most important types of diabetic microangiopathy, which is a specific change of fundus lesions and is one of the most serious complications of diabetes. When DR develops to proliferative DR, the main factors of decreasing vision, and even blindness, include retinal detachment and vitreous hemorrhage caused by contraction of blood vessels by fiber membrane. Recent studies reported that the formation of fiber vascular membrane is closely related to retinal fibrosis. The connective tissue growth factor (CTGF) is a cytokine that is closely related to DR fibrosis. However, its mechanism is poorly understood. This paper summarizes the recent studies about CTGF on DR fibrosis for a comprehensive understanding of the role and mechanism of CTGF in PDR.     

糖尿病视网膜病变玻璃体中CTGF,SDF-1的质量浓度测定

目的:定量测定结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者玻璃体中的质量浓度,探讨其在糖尿病(diabetic retinopathy,DR)发病机制中的作用。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)定量检测33例增生型糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)、5例单纯型糖尿病性视网膜病变组(background diabetic retinopathy,BDR组)及5例正常对照组玻璃体中CTGF的质量浓度。结果:PDR组玻璃体中CTGF质量浓度大于对照组(P<0.01)、BDR组(P<0.01)。PDR组玻璃体中SDF-1质量浓度大于BDR组(P<0.05)。结论:SDF-1,CTGF在DR发展过程中起着一定的作用。     

结缔组织生长因子在2型糖尿病大鼠虹膜中的表达

目的探索2型糖尿病大鼠虹膜新生血管(new vascularization of iris,NVI)的形成与虹膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的关系。方法将Wistar大鼠40只随机分为实验组和对照组,每组各20只大鼠。实验组大鼠通过腹腔注射STZ制备2型糖尿病大鼠模型,对照组为正常大鼠。造模成功后取出大鼠眼球,将实验组及对照组各取15只眼球用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,Elisa)定量分析大鼠虹膜中CTGF的表达情况,实验组及对照组另25只眼球取虹膜进行光镜和电镜观察(其中光镜观察各15只眼球,电镜观察各10只眼球)。结果光镜和电镜下将实验组与对照组相比较,实验组大鼠虹膜有明显的NVI的特征性改变,而对照组无显著改变。在实验组大鼠虹膜中CTGF的含量为(1010.49±8.18)ng·L-1,而在对照组大鼠虹膜中CTGF的含量为(644.82±8.08)ng·L-1,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 2型糖尿病大鼠虹膜中CTGF的含量与其NVI的生成有一定关系。     

糖尿病性视网膜病变相关生长因子的研究进展

糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最严重的微血管并发症之一,也是一种世界性的主要致盲眼病,近年来随着分子生物学方面的研究进展,对DR发病机制的认识进一步深入和完善,认为高血糖、多元醇-肌醇代谢异常、血液流变学改变、氧化应激、炎症/免疫系统活化、细胞因子/生长因子表达或活性改变等导致DR的发生发展。下面就生长因子及其相关因素与DR的关系作系统阐述。     

结缔组织生长因子在眼科的研究进展

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)是相对分子量为38kDa的分泌性生长因子，属于即刻早期基因家族——CCN家族成员之一。多种组织的成纤维细胞、部分血管内皮细胞和平滑肌细胞、某些上皮细胞和肿瘤细胞以及软骨细胞等都可表达CTGF。CTGF的主要生物学作用包括促进细胞有丝分裂和增生、细胞移行、诱导细胞粘附和胞外基质合成等。CTGF作为组织过度纤维化、瘢痕愈合和创伤修复可能的关键因子，以及在血管形成、肿瘤生长、发育分化等方面的作用，近来受到较多的关注。我们着重概述了CTGF的蛋白结构、生物学作用，回顾了近几年CTGF在眼科的研究进展。     

血管内皮细胞生长因子在糖尿病性视网膜病变进展中的作用

糖尿病性视网膜病变是糖尿病微血管病变常见而严重的并发症,在很大程度上导致不可逆的视功能损害或完全失明.VEGF在DR发生、发展,尤其在视网膜新生血管形成过程中发挥重要作用,本文就血管内皮生长因子与糖尿病性视网膜病变的关系进行综述。