特发性肺纤维化患者肺泡和支气管上皮细胞凋亡及相关信号表达

目的探讨细胞凋亡和促凋亡信号在特发性肺纤维化（IPF）发生中的意义。方法应用末端原位杂交和免疫组化技术，检测12例IPF的肺活检组织和10例正常对照肺组织肺泡和支气管上皮细胞凋亡、P53、Fas抗原和Fas配体（Fas／FasL）蛋白表达的变化。结果IPF肺组织的肺泡和支气管上皮细胞凋亡率（12／12）明显高于对照组（0／10），IPF组肺泡上皮细胞中Fas、FasL、P53蛋白表达的阳性率（分别为12／12、12／12、11／12）均明显高于对照组（分别为5／10、2／10、0／10）。IPF组支气管上皮细胞中Fas、FasL、P53蛋白表达的阳性率（分别为12／12、12／12、11／12）也均明显高于对照组（分别为6／10、3／10、0／10）。相关分析结果表明，肺泡和支气管上皮细胞Fas／FasL、P53蛋白表达与其凋亡百分率之间均呈显著正相关（r值为0．625—0．839，P均〈0．01），肺泡和支气管上皮细胞Fas／FasL与P53蛋白表达之间也均呈显著正相关（r值为0．571～0．760，P均〈0．01）。结论肺纤维化时肺泡和支气管上皮细胞凋亡率增高，P53、Fas／FasL蛋白表达增强，这些因素在肺纤维化的发生和发展中起重要作用。     

姜黄素对大鼠肺纤维化形成病理形态及上皮细胞凋亡的影响

目的 研究姜黄素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成上皮细胞凋亡及Bcl-2家族部分蛋白的影响,探讨姜黄素治疗肺纤维化的可能机制.方法 选取SD大鼠72只,随机分为4组,每组18只:空白组、模型组、姜黄素组、泼尼松龙组.应用博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,空白组注入等量生理盐水,造模后第2天起,姜黄素组和泼尼松龙组分别给予姜黄素(300mg/kg)和泼尼松(5mg/kg)每日灌胃1次,其余两组每日给予1％羧甲基纤维素钠(10ml/kg)灌胃1次.各组动物于7d、14d、28 d随机处死6只,取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,消化法测定肺组织羟脯氨酸(HYP),TUNEL法检测肺组织细胞凋亡.SABC法检测Bid及Bcl-xl蛋白的表达.结果 姜黄素组肺纤维化程度、病理改变及HYP含量及上皮细胞凋亡指数较同时期模型组降低(P值均＜0.01);姜黄素组肺组织肺泡上皮细胞Bid表达较同时期模型组比较差异无统计学意义.姜黄素组肺组织肺泡上皮细胞Bcl-xl表达较同时期模型组升高(P值均＜0.01).结论 在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素干预能有效减轻肺纤维化程度,可能机制为姜黄素上调Bcl-xl的表达而非下调Bid表达来抑制上皮细胞凋亡.     

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺组织中凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达及意义

目的探讨凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax在Graves病(GD)和桥本氏病(HT)中的表达及意义。方法取外科手术切取的GD及HT病人甲状腺组织标本,颈部手术时取正常甲状腺组织作为对照;采用免疫组织化学方法检测甲状腺标本Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达和分布状况。结果(1)Fas/FasL在GD和HT甲状腺滤泡上皮细胞表达均较正常对照组增高(P<0.01)。(2)在GD甲状腺滤泡上皮细胞Bcl-2及Bax表达明显高于HT组及正常对照组,以Bcl-2表达强度显著高于同组Bax(P<0.01),而在HT,Bcl-2表达强度与正常对照组比较差异无统计学意义。(3)GD与HT相比较,GD甲状腺滤泡细胞及浸润淋巴细胞Fas,Bcl-2抗原表达均强于HT,但其浸润淋巴细胞表达强度明显低于同组甲状腺滤泡细胞(均P<0.05)。结论Fas/FasL高表达和Bcl-2的低表达可能引起HT甲状腺滤泡上皮细胞的凋亡。在GD,Fas、Bax诱导细胞凋亡的作用可能被高表达Bcl-2对抗,从而致甲状腺体积增大、功能亢进。此外,Bcl-2与Bax表达强度的比值对于凋亡的调控有重要影响作用。     

慢性肝病肝细胞凋亡Fas、FasL、Bax、Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-2α等蛋白表达

目的 探讨慢性肝病时肝细胞凋亡蛋白Fas、FasL、Bax、Bcl-2、BcL-XL、Bcl-2α等的表达与线粒体的改变。方法 慢性肝炎72例、肝炎后肝硬化29例，以上患者肝组织采用免疫组化SP法检测促凋亡蛋白Fas、FasL、Bax和抑凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-2α等的表达，并对其中15例肝组织着重观察了线粒体的超微结构。结果 促凋亡蛋白与抑凋亡蛋白相比，表达差异有非常显著性(P＜0．001)，前者最高达94．4％，明显高于后者的最高值61．1％，两组Fas、FasL的表达程度以( )、( )为主，未见差别；但慢性肝炎组Bax( )表达多达16例(22．2％)、肝硬化组未见( )表达者。提示慢性肝炎组有明显的细胞凋亡现象而肝硬化组的凋亡相对不活跃。凋亡肝细胞的线粒体普遍存在明显的改变，包括线粒体嵴的扩张，外膜破裂、基质外漏等。结论 慢性肝炎时肝细胞的凋亡激活途径很可能偏重以线粒体途径为主，但尚需进一步研究证实。     

特发性肺纤维化患者上皮细胞促凋亡及抗凋亡信号表达

目的 探讨促凋亡信号和抗凋亡信号在特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)发生中的意义.方法 应用末端原位杂交和免疫组织化学技术,检测12例IPF患者的肺活检组织和10例正常对照肺组织肺泡和支气管上皮细胞凋亡情况及P53、P21、Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.结果 IPF患者肺组织的肺泡和支气管上皮细胞凋亡率明显上调(U=0.0,P＜0.01),肺泡和支气管上皮细胞中P53、P21、Bax蛋白表达上调(U=5.0～35.5,P值均＜0.05),肺泡和支气管上皮细胞中Bcl-2蛋白表达下调(U值分别为12.0、18.0,P＜0.01).相关分析结果表明,肺泡和支气管上皮细胞P53、P21、Bax蛋白表达与其凋亡率之间均呈显著正相关(r值为0.436～0.806,P值均＜0.05),肺泡和支气管上皮细胞Bcl-2蛋白表达与其凋亡率之间均呈显著负相关(r值为-0.715～-0.699,P值均＜0.01).结论 肺纤维化时肺泡和支气管上皮细胞凋亡率增高,P53、P21、Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,这些因素在肺纤维化的发生和发展中起重要作用.     

线粒体凋亡通路在肝细胞癌发生、发展中作用的研究进展

线粒体介导的凋亡通路,主要是由于其上游信号分子作用于线粒体膜,导致线粒体膜的通透性改变,从而使线粒体内的Cyt C、AIF、Smac等凋亡相关因子释放到线粒体外,引起下游caspase家族蛋白活化或者直接作用于相应底物,启动细胞凋亡程序。在正常肝细胞的发育和再生过程中,细胞凋亡可清除异常的肝细胞。若异常的肝细胞凋亡不足,可导致肝癌的发生;而肝癌细胞凋亡不足,会诱导癌细胞的恶性化演进。线粒体凋亡通路可诱导肝癌细胞凋亡,而线粒体膜的通透性改变在线粒体凋亡通路中起枢纽作用,外源性或内源性的应力刺激激活Bcl-2家族或caspase家族,启动线粒体膜的通透性改变并诱导肝癌细胞的凋亡。通过靶向干预该通路中的相关分子,可为肝癌的临床治疗提供新策略。     

芪丹颗粒对博莱霉素致肺损伤大鼠肺组织FasL、caspase-3表达的影响

目的 探讨芪丹颗粒对博莱霉素所致肺损伤大鼠肺泡上皮细胞增殖的影响.方法 将105只SD大鼠随机分成4组.模型组、芪丹颗粒组(芪丹组)、氢化可的松琥珀酸钠组(氢可组)各30只,气管内灌注博莱霉素A5诱导肺纤维化,次日芪丹组每日给予芪丹颗粒3 125 mg/kg灌胃,氢可组腹腔注射氢化可的松25 mg/kg,对照组气管内灌注和灌胃均用生理盐水,分别于造模第7、14、28天处死大鼠(对照组5只,余组各10只)取肺组织,HE染色观察肺泡炎及纤维化程度,免疫组化法检测石蜡切片中FasL及caspase-3的表达.结果 芪丹组较氢可组及模型组肺纤维化及肺泡炎程度轻.FasL、caspase-3表达芪丹组较对照组、模型组、氢可组均有不同程度降低.FasL与caspase-3表达呈正相关(r=0.817,P<0.01).结论 芪丹颗粒可减轻博莱霉素A5诱导的肺纤维化大鼠的肺纤维化及肺泡炎,减少FasL与caspase-3的表达.其机制可能与减少肺泡上皮细胞凋亡有关.     

Fas通路的激活促进结肠癌细胞迁移侵袭

目的探讨Fas通路激活对结肠癌细胞SW480和DLD1产生的非凋亡效应。方法流式细胞学检测结肠癌SW480及DLD1细胞系的Fas、FasL、抗凋亡蛋白c-FLIP、Bcl-2、Bcl-xl、XIAP等在细胞膜上的表达水平;对结肠癌SW480及DLD1细胞系予以梯度浓度（0ng/ml、12.5ng/ml、25ng/ml、50ng/ml）的FasL刺激,计数并比较各组细胞的增殖速率变化;对结肠癌SW480及DLD1细胞系予以低剂量FasL处理,分别对实验组和对照组进行细胞增殖速率及迁移侵袭能力测试,探讨低剂量FasL刺激对结肠癌细胞活力的影响;稳定敲除SW480和DLD1细胞的Fas基因表达,重复上述实验,以明确低剂量FasL刺激对结肠癌细胞活力的影响是否依赖于Fas通路的激活。结果 SW480及DLD1细胞系中均可检测到中等程度的Fas表达及抗凋亡蛋白FLIP、Bcl-2的表达,未检测到FasL表达,在SW480中可测到Bcl-xl表达;低剂量FasL不影响结肠癌SW480和DLD1细胞的增殖速率,但可促进两种细胞的迁移侵袭能力;稳定敲除Fas基因后,低剂量FasL对结肠癌细胞迁移侵袭能力的促进作用受到抑制。结论低剂量FasL可激活Fas通路的非凋亡途径从而增强结肠癌SW480和DLD1细胞的迁移侵袭能力。     

肺纤维化大鼠上皮细胞凋亡及Bcl-xl和Bid动态变化

目的 探讨肺纤维化大鼠中Bcl-2家族部分蛋白介导的线粒体途径引起上皮细胞凋亡的动态变化及相关关系.方法 选取SD大鼠48只,随机分为4组:空白对照组(24只)、模型7d组(8只)、模型14 d组(8只)、模型28 d组(8只).应用博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,空白对照组注入等量生理盐水,各组动物于第7、14、28天随机处死8只,取肺组织采用HE染色观察病理变化,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡,RT-PCR和免疫组化法分别检测肺组织Bid、Bcl-xl mRNA以及蛋白的表达.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、肺泡炎与纤维化并存(14 d)及稳定的肺纤维化(28 d)等表现;同时间段模型组肺组织细胞凋亡指数、Bid mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组(P＜0.01),Bcl- xl mRNA及蛋白表达显著低于空白对照组(P＜0.01);模型组细胞凋亡与Bid蛋白及mRNA从第7天开始逐步升高,第28天达最高峰,Bid mRNA与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.8275,t =7.937 5,P＜0.01);模型组Bcl-xl蛋白与Bcl-xl mRNA表达在第7天开始下降,第28天达最低峰,Bcl-xl mRNA与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.633 8,t=-4.489,P＜0.01); Bcl-xl mRNA与Bid mRNA无明显相关性(r=-0.3869,t=-2.2986,P＞0.05).结论 细胞凋亡在肺纤维形成中起重要作用,肺纤维化细胞凋亡可能与Bcl-2家族蛋白的表达失衡有关.     

小窝蛋白-1与肺纤维化关系的研究进展

小窝蛋白-1(Caveolin-1)是小窝标志性的蛋白,主要通过"脚手架"结构区域,参与负性调控多条信号通路,干预多种疾病进程.目前研究证实:特发性肺纤维化的肺组织中的Caveolin-1表达明显减低,而提高Caveolin-1水平抑制转化生长因子β_1/Smad、JNK、MEK/ERK、wnt/β-Catenin/Lef-1等信号转导通路因子的激活,可减少细胞外基质的合成和上皮细胞的异常修复,阻断肺纤维化进程.深入研究Caveolin-1参与肺纤维化的分子机制,有望为特发性肺纤维化提供新的分子治疗靶点.     

抗独特型抗体NP30诱导虫卵肉芽肿细胞凋亡的分子机制

目的研究抗独特型抗体NP30诱导虫卵肉芽肿细胞凋亡的分子机制.方法 BALB/c 小鼠随机分为两组,实验组腹腔注射NP30 10 μg/次,连续3次,对照组腹腔注射生理盐水,分别在尾蚴攻击感染后第39、49、64、108、112天处死,应用免疫组化S-P法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas、FasL和c-Fos的表达,原位分子杂交检测Bax与Fas mRNA.结果虫卵肉芽肿细胞均表达Bax、Fas、FasL和c-Fos蛋白,其中实验组Bax和FasL蛋白表达均高于对照组(P<0.05);实验组Fas和c-Fos蛋白表达在第64天和第112天低于对照组,其余各时间点均高于对照组(P<0.05);Bcl-2蛋白在实验组和对照组均无表达.实验组Bax和fas mRNA表达均高于对照组.结论死亡受体Fas和FasL途径启动了NP30诱导肉芽肿细胞凋亡的信号,NP30通过凋亡相关基因Bax和c-Fos表达增强来诱导肉芽肿的细胞凋亡.     

TNF-α诱导肝细胞凋亡机制的回顾与展望

在多种肝脏疾病中都涉及到TNF-α诱导的肝细胞凋亡.TNF-α在细胞凋亡过程中发挥多种效应,主要由TNF-R1介导.TNF-R1的激活导致了多种凋亡途径的激活,包括促凋亡的Bcl-2家族蛋白、活性氧、c-Jun NH2-末端激酶、组织蛋白酶B、酸性鞘磷脂酶及中性鞘磷脂酶.这些途径密切相关并主要作用于线粒体,线粒体释放致凋亡因子及其他物质,导致细胞凋亡.     

TNF-α诱导肝细胞凋亡机制的回顾与展望

在多种肝脏疾病中都涉及到TNF-α诱导的肝细胞凋亡.TNF-α在细胞凋亡过程中发挥多种效应,主要由TNF-R1介导.TNF-R1的激活导致了多种凋亡途径的激活,包括促凋亡的Bcl-2家族蛋白、活性氧、c-Jun NH2-末端激酶、组织蛋白酶B、酸性鞘磷脂酶及中性鞘磷脂酶.这些途径密切相关并主要作用于线粒体,线粒体释放致凋亡因子及其他物质,导致细胞凋亡.     

成纤维细胞激活蛋白和基质金属蛋白酶1在小鼠肺纤维化中的表达及相关性

目的 探讨成纤维细胞激活蛋白(FAP)在小鼠肺纤维化组织中的表达,及其与基质金属蛋白酶1(MMP-1)之间的关系.方法 制备小鼠肺纤维化模型,采用免疫组织化学技术、Western-bolt检测肺组织中FAP、MMP-1和α-SMA的表达.结果 ①博莱霉素-A5盐溶液诱导后,FAP、MMP-1和α-SMA的表达与小鼠肺泡炎和肺纤维化程度呈正相关;FAP与MMP-1的表达呈正相关.②Westernbolt结果显示FAP对照组表达弱阳性,随肺纤维化程度的增强,表达增强;MMP-1、α-SMA随肺纤维化程度的增加表达亦增强.结论 FAP的表达与肺泡炎和肺纤维化程度均呈正相关,FAP与MMP-1可能在肺纤维化基质重塑中起协同作用.     

BCL-2家族与细胞凋亡及肺纤维化

目前已经发现的BCL-2蛋白家族按功能可分为2类,一类具有抑制凋亡作用(如BCL-2),而另一类具有促进凋亡作用(如Bax).BCL-2家族调节细胞凋亡机制目前仍不清楚,大多认为与BCL-2调节细胞的氧化应激及调节钙离子的跨膜运动有关.近几年研究证明,BCL-2家族蛋白主要直接控制线粒体外膜通透性的改变而引起细胞凋亡,除此之外,尚存在BCL-2不敏感的凋亡途径;细胞凋亡在肺纤维化中发挥重要的作用,包括上皮细胞的凋亡过度和成纤维细胞的凋亡不足;BCL-2家族蛋白在肺纤维化中发挥着启动和调节线粒体途径引起的细胞凋亡开关作用.     

Caspase介导的Fas凋亡途径

凋亡是导致细胞死亡的调节性生理过程.Fas在各种疾病和细胞凋亡的发生中起到首要作用.Caspase为半胱氨酸蛋白酶家族,是凋亡的中心调节者,一旦Caspase-8,10被激活,引起Caspase的断裂及激活下游的Caspase-3,6,7,作用于Bcl-2家族某些成员如Bad、一些骨架蛋白和RB蛋白等并使其断裂,从而导致细胞凋亡.本文重点讨论了Caspase-3,-8的激活机制及其在Fas诱导细胞凋亡中的作用.     

三氧化二砷对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制

肺泡炎是肺纤维化疾病的发病机制之一，有研究发现诱导肺内炎性细胞凋亡可以减轻博莱霉素A5（BLM-A5）所致大鼠肺泡炎和肺纤维化程度。三氧化二砷（As2O3）可以诱导多系统的多种细胞发生凋亡，但As2O3对肺纤维化疾病是否有作用，目前尚未见报道。本实验目的是探索适当剂量的As2O3能否诱导肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的炎性细胞发生凋亡，从而减轻肺泡炎和肺纤维化。     

肺纤维化中成纤维细胞的激活机制

肺纤维化被公认为多种慢性肺疾病的病理特征,并且它也是特发性肺纤维化发病机制的中心环节.目前的研究现状决定了成纤维细胞的激活在肺纤维化中起关键作用,这种细胞能够产生基质,而且它可能来源于循环血液的纤维细胞或者由上皮细胞和内皮细胞转化而来.许多研究表明肺纤维化中大量基因之间的相互作用及其下游的多种信号途径参与了成纤维细胞表...     

关于特发性肺纤维化的肺泡上皮细胞凋亡的研究进展

目前,特发性肺纤维化的发病机制仍不清楚.但据报道,肺泡上皮细胞凋亡可能在特发性肺纤维化的发病中起关键作用.本文将阐述与肺泡上皮细胞凋亡相关的一些机制,其中主要涉及后天获得性因素和先天遗传性因素.后天获得性因素主要有吸烟、病毒感染、氧化应激、内质网应激等.先天遗传性因素主要有肺表面活性剂相关的异常以及端粒/端粒酶的异常等.     

Egr-1与肺纤维化

异常的细胞外基质的沉积破坏了正常的肺结构是肺纤维化的特征。Egr-1被发现与肺纤维化有关，据研究其作用大多是通过TGF-β1实现的。Egr-1能诱导TGF-β1的表达，而TGF-β1又能诱导Egr-1表达。Egr-1影响成纤维细胞增殖、向肌成纤维细胞分化，并且与肺泡上皮细胞、内皮细胞凋亡，肺泡、气道炎症以及细胞外基质形成有关。血管紧张素转换酶系统对肺纤维化的作用亦与Egr-1有关。但Egr-1对肺纤维化的具体作用还不完全明了，需要作深入研究。