蛋白尿为主要表现的肾损伤患者肾小球TRPC6和ILK的表达及作用机制

目的探讨以蛋白尿为主要表现的肾损伤患者肾小球瞬时受体电位阳离子通道(TRPC6)和整合素连接激酶(ILK)的表达及作用机制。方法行肾脏穿刺活检且24 h尿蛋白1 g的患者肾组织标本共25例。免疫组化染色观察TRPC6、ILK在肾小球中的表达和分布情况。体外培养人原代肾足细胞,10~(-7)mol/L的阿霉素诱导足细胞12、24、36 h至其损伤,Western印迹检测TRPC6、ILK蛋白情况。使用脂质体2000将pc DNA3.1-TRPC6质粒、pc DNA3.1分别转入足细胞建立TRPC6过表达组、阴性对照组,仅加脂质体2000的为空白对照组,检测转染48 h各组TRPC6、ILK蛋白情况。结果 TRPC6多表达于足细胞,除高血压肾损伤组织外,其余类型肾损伤TRPC6表达强度均明显高于正常肾组织(P0.05);ILK多表达于足细胞和系膜区,局灶节段性肾小球硬化症、狼疮性肾炎、糖尿病肾病的肾小球中ILK表达强度均明显高于正常肾组织(P0.05)。体外阿霉素诱导24、36 h时TRPC6、ILK蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P0.05)。TRPC6过表达组足细胞ILK蛋白相对表达量明显高于阴性对照组和空白对照组(P0.05)。结论蛋白尿为主要表现的肾损伤患者肾小球中TRPC6、ILK的表达水平升高,尤其是局灶节段性肾小球硬化症和糖尿病肾病。上调足细胞TRPC6表达可提升ILK表达,二者共同参与足细胞损伤。     

缬沙坦对糖尿病肾病大鼠肾脏TRPC6表达的影响

目的探讨缬沙坦对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏TRPC6表达的影响。方法高脂高糖喂养联合小剂量链脲佐霉素建立DN模型,将模型大鼠随机分为两组:模型对照组(DN组)与缬沙坦治疗组(DV组),另设正常对照组(NC组)。干预8周末测生化指标及24 h尿蛋白,光镜观察大鼠肾脏病理改变,免疫组化法测肾脏Nephrin、TRPC6表达并作半定量分析。结果与NC组相比DN组大鼠表现为高血糖、高血脂、胰岛素抵抗和蛋白尿,病理出现系膜基质增多,Nephrin表达减低而TRPC6表达增高。经缬沙坦治疗后Nephrin表达增加,TRPC6表达显著降低。TRPC6与尿蛋白呈正相关,Nephrin的与尿蛋白呈负相关。结论 DN大鼠肾脏出现足细胞损伤和TRPC6表达增加,缬沙坦可通过下调TRPC6的表达而发挥足细胞保护作用。     

PDGF与糖尿病肾病

血小板源性生长因子(PDGF)主要通过自分泌、旁分泌及内分泌作用参与糖尿病肾病(DN)的发生、发展.PDGF-BB在糖尿病肾脏局部高表达,与转化生长因子协同促进肾小球系膜细胞增生及细胞外基质的合成,导致糖尿病肾小球硬化的发生,而应用阻止PDGF-BB表达的方法则可有效防止DN的发生.     

Podocin与糖尿病肾病

Podocin是新近发现的肾小球裂隙隔膜上的一个蛋白，参与肾小球滤过屏障的形成并维持其正常功能。在糖尿病肾病(DN)患者中存在其编码基因nphs2的异常和podocin蛋白的表达下降。Podocin蛋白表达下降可使nephrin诱导的肾小球足细胞内信号转导功能障碍，肾小球足细胞减少，肾脏裂隙隔膜结构与屏障功能的完整性破坏，肾小球蛋白滤过增加。Podocin在DN的发生、发展中可能起关键作用。对podocin的进一步研究可能对DN的诊治有重要的指导意义。     

足细胞损伤与糖尿病

糖尿病。肾病(DN)是糖尿病的严重并发症和患者主要死亡原因之一，出现持续性蛋白尿则提示病情不可逆转，直至终末期。肾病。DN有3种主要组织病理学改变：肾小球基底膜(GBM)增厚，。肾小球内细胞外基质聚积，结节性。肾小球硬化(K-W性损害)。其中细胞外基质聚积被视为DN的关键性改变。近年研究发现，足细胞损伤在DN的发展中起着重要的作用。我们就足细胞损伤与的DN关系作综述。     

PDGF与糖尿病肾病

血小板源性生长因子(PDGF)主要通过自分泌、旁分泌及内分泌作用参与糖尿病肾病(DN)的发生、发展。PDGF-BB在糖尿病肾脏局部高表达，与转化生长因子协同促进肾小球系膜细胞增生及细胞外基质的合成，导致糖尿病肾小球硬化的发生，而应用阻止PDGF-BB表达的方法则可有效防止DN的发生。     

Podocin与糖尿病肾病

Podocin是新近发现的肾小球裂隙隔膜上的一个蛋白,参与肾小球滤过屏障的形成并维持其正常功能。在糖尿病肾病(DN)患者中存在其编码基因nphs2的异常和podocin蛋白的表达下降。Podocin蛋白表达下降可使nephrin诱导的肾小球足细胞内信号转导功能障碍,肾小球足细胞减少,肾脏裂隙隔膜结构与屏障功能的完整性破坏,肾小球蛋白滤过增加。Podocin在DN的发生、发展中可能起关键作用。对podocin的进一步研究可能对DN的诊治有重要的指导意义。     

糖尿病肾病与足细胞损伤

糖尿病肾病(DN)发病机制复杂,足细胞损伤是DN发病的早期事件如微量白蛋白尿(MA)、肾小球肥大等的重要病因,与肾小球硬化、肾功能下降有关系.     

糖尿病肾病患者尿足细胞脱落及其与尿蛋白的关系

目的 通过观察糖尿病肾病(DN)患者尿中足细胞及肾活检标本足细胞脱落情况,探讨尿中足细胞脱落与尿蛋白、空腹血糖、肌酐的关系.方法 选取2005年1月至2006年12月间天津医科大学总医院收治的DN患者50例,微小病变(MCD)患者25例及正常人对照组10例,按照慢性肾脏病(CKD)分期将DN患者分为5组,其中CKD I期15例,CKD Ⅱ期10例,CKD Ⅲ期8例,CKD IV期9例,CKD V期8例;另按尿蛋白量将DN患者分为3组,其中少量蛋白尿组(<1.0 g/d)13例,中量蛋白尿组(1-3.5 g/d)20例,大量蛋白尿组(>3.5 g/d)17例,采用间接免疫荧光法检测尿足细胞数目及肾小球足细胞特异性蛋白(podocalyxin,PCX)表达;分别统计各组中尿足细胞数目;同时检测各组患者24h尿蛋白、肌酐、空腹血糖,多组计量指标比较采用单因素方差分析,双变量分析采用Pearson相关分析.结果 DN组尿中足细胞的阳性率为88%(44/50);微小病变(MCD)组及正常对照组中阳性率为0;DN组患者的肾活检标本中,肾小球足细胞PCX表达缺失,MCD组肾活检标本足细胞PCX呈完整连续性表达.少量蛋白尿组尿足细胞数目(1.5±1.0)个/ml,中等量蛋白尿组(2.2±0.7)个/ml及大量蛋白尿组(3.5±1.3)个/ml,除少量蛋白尿与中量蛋白尿组差别不具有统计学意义外,其他组间差别均具有统计学意义(P<0.05).DN患者尿足细胞数目与蛋白尿(r=0.785,P<0.05)、I-Ⅲ期患者同期SCr呈正相关(r=0.466,P<0.05);而与FBG无相关性(P>0.05).结论 DN进展过程中存在足细胞损伤.DN足细胞脱落与尿蛋白、CKD I至Ⅲ期同期SCr呈正相关,与Ⅳ至V期SCr、FBG无关.     

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6过表达致足细胞足突形态改变的形态计量学分析

目的:定量研究足细胞过表达瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)引起足细胞足突形态变化的特征. 方法:建立足细胞过表达TRPC6的细胞模型,设立正常对照组(Con)、转染空载体组(GFP)和过表达TRPC6组(OverTRP),并分别给予TRPC6离子通道特异性激动剂OAG和阻断剂U73122处理足细胞;免疫荧光染色后采用激光扫描共聚焦显微镜摄片,图像分析仪进行分析,并应用形态计量学的方法,分别检测足细胞足突的表面积密度、突触长径和足突平均宽度,以研究TRPC6通道蛋白高表达所引起的小鼠足细胞足突的形态变化. 结果:共聚焦成像分析结果可见,足细胞过表达TRPC6后,足突表现出回缩的形态特点.形态计量学的结果进一步表明,过表达TRPC6的足细胞足突表面积密度减小(OverTRP:500.97±98.25 vs Con:915.5±130.83,P＜0.05)、突触长径缩短(OverTRP:58.32±5.41vs Con:91.41±9.13,P＜0.05)、平均宽度缩短(OverTRP:7.97±2.64vs Con:12.43±1.47,P＜0.05),与对照组比较统计学差异均有显著性(P＜0.05);其中过表达组突触长径与对照组比较差异最为显著(P＜0.05). 结论:足细胞离子通道蛋白TRPC6的过表达,可诱导足细胞足突形态发生改变,表现为足突回缩,可能是参与蛋白尿发生的形态学基础,为今后对该通道蛋白功能与相关分子间作用的研究提供了实验形态依据.     

血管内皮生长因子与糖尿病肾病足细胞损伤的研究进展

肾病是糖尿病（DM）主要并发症之一。传统上糖尿病肾病（DN）研究主要集中在肾小球系膜细胞损伤机制上，足细胞损伤被认为是由日益增加的蛋白尿所引起的后期病变，而不是导致DN的原因。然而，最近人体活组织检查研究表明，DN发病过程中足细胞功能及结构上的损伤早期已出现。足细胞损伤发生发展过程中一些细胞因子的变化起着重要作用，其中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）与足细胞损伤之间的关系最近成为研究热点,本文拟就DN时VEGF与足细胞损伤的相互关系做一综述。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾组织结构及足细胞nephrin蛋白表达的影响

目的 探讨雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、足细胞损伤及肾皮质nephrin 蛋白表达的影响.方法 建立高脂饮食联合链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病模型组、小剂量TWP(6 mg·kg-1·d-1)治疗组及大剂量TWP(12 mg·kg-1·d-1)治疗组,并以正常大鼠为对照,每组12只.干预12周后检测大鼠24 h尿蛋白量、血肌酐及尿素氮水平,并以苏木素-伊红染色(HE)、过碘酸希夫染色(PAS)、Masson染色检测肾组织病理变化;透射电镜测量足细胞超微结构变化;免疫组化检测肾皮质nephrin蛋白表达.结果 与正常大鼠相比,2型糖尿病大鼠尿蛋白明显增加[( 3.28±0.26) mg/24 h vs.(27.60±0.24) mg/24 h],而小剂量及大剂量TWP治疗后大鼠尿蛋白均明显改善[分别为(12.63 ±0.21)及(10.50±0.15) mg/24 h,P＜0.05)],大剂量TWP治疗组尿蛋白低于小剂量TWP治疗组,但差异末达统计学意义.病理分析显示糖尿病肾病模型组表现为肾小球硬化、基底膜增厚,肾小管变形、上皮细胞空泡变性,间质纤维化,足细胞足突增宽、融合、细胞减少,TWP治疗组大鼠肾小球、小管间质及足细胞病变明显减轻.同时免疫组化结果显示TWP治疗使肾脏皮质nephrin蛋白表达增加,且大剂量TWP治疗组高于小剂量TWP治疗组.结论 TWP可能通过增加nephrin的表达,发挥其对糖尿病肾病足细胞功能的保护作用.     

足细胞损伤与糖尿病肾病

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的主要并发症。1936年Kimmelstiel等[1]第一次描述DN时,系膜基质增多和肾小球基底膜(glomerular basement mem-brane,GBM)增厚就被描述为DN的主要病理表现。研究也证实,系膜增生与蛋白尿、肾功能恶化密切相关。但是,系膜增生并不能解释蛋白尿的发生,因为由肾小球内皮细胞、GBM、足细胞构成的肾小球滤过屏障的损伤才是蛋白尿的根源。事实上,肾小球内皮细胞和GBM参与了DN蛋白尿的发生,但两者均是有孔的,均允许某些蛋白通过[2]。因此,足细胞构成了蛋白滤过的最后一道屏障,但其在DN中的生物…     

足细胞和糖尿病及其肾病

肾小球足细胞损伤和丢失是肾小球硬化形成和发展的关键因素。糖尿病时足细胞可出现密度和数量减少、足突增宽、足细胞脱落等改变,且可从尿中丢失,继而导致糖尿病肾病的发生。高血糖、高血压、氧化应激及一氧化氮等可直接损伤足细胞,并抑制α3β1整合素、nephrin的表达,促进血管内皮生长因子、Ⅳ型胶原、糖基化终末产物受体、转化生长因子β等的表达而加重足细胞损伤。因而,探索足细胞损伤在糖尿病肾病发生、发展中的病理发展过程对糖尿病肾病的防治具有重要意义。     

瞬时受体电位通道蛋白6参与血管紧张素Ⅱ诱导足细胞损伤的信号传导机制

足细胞表达瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6),TRPC家族是一类能通透钙离子的非选择性阳离子通道,近年来,研究发现TRPC6参与了血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导足细胞损伤的病理生理过程.本文就TRPC6一般特性及参与AngⅡ诱导足细胞损伤的信号传导机制作一简述.     

糖尿病肾病与足细胞损伤

糖尿病肾病（DN）发病机制复杂，足细胞损伤是DN发病的早期事件如微量白蛋白尿（MA）、肾小球肥大等的重要病因，与肾小球硬化、肾功能下降有关系。     

足细胞能量代谢调节因子与糖尿病肾病

足细胞结构和功能异常是糖尿病肾病(DN)发生蛋白尿并不断进展的重要原因.足细胞主要通过糖酵解供能,而线粒体稳态对于足细胞正常发挥生物学功能极为重要.研究发现,糖尿病时足细胞胰岛素敏感性下降,线粒体功能障碍进而导致足细胞能量利用障碍和足细胞损伤.AMP激活的蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物...     

糖尿病糖脂代谢紊乱与足细胞损害的实验研究

目的　观察糖脂代谢紊乱对糖尿病大鼠肾小球滤过屏障外层足细胞的影响 ,以探讨糖尿病肾病的发病机制。方法　采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型 ,喂养 5周后 ,测定血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐、尿素氮和尿白蛋白排泄率 ,应用免疫组化检测肾小球足细胞损伤标志蛋白 -desmin的表达 ,同时利用透射电子显微镜观察肾小球足细胞超微结构。结果　糖尿病大鼠血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率水平明显升高 (P <0 .0 5 ) ,肾小球内desmin蛋白表达上调 ,足细胞部分足突融合 ;同时 ,两组间血甘油三酯水平无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　糖脂代谢紊乱可导致糖尿病大鼠肾小球滤过屏障外层足细胞明显损害 ,尿白蛋白排泄率增加 ,这可能是糖尿病肾脏损害、蛋白尿出现的机制之一     

足细胞和糖尿病及其肾病

肾小球足细胞损伤和丢失是肾小球硬化形成和发展的关键因素。糖尿病时足细胞可出现密度和数量减少、足突增宽、足细胞脱落等改变，且可从尿中丢失，继而导致糖尿病肾病的发生。高血糖、高血压、氧化应激及一氧化氮等可直接损伤足细胞，并抑制α3β1整合素、nephrin的表达，促进血管内皮生长因子、Ⅳ型胶原、糖基化终末产物受体、转化生长因子β等的表达而加重足细胞损伤。因而，探索足细胞损伤在糖尿病肾病发生、发展中的病理发展过程对糖尿病肾病的防治具有重要意义。     

糖尿病肾病患者足细胞病变的临床病理特征

目的：研究2型糖尿病肾病患者肾小球足细胞病变，分析其与血糖控制、蛋白尿、肾功能及肾组织病理形态学改变之间的关系。方法：27例经肾穿刺活检明确诊断的2型糖尿病肾病。肾组织病理定量计数肾小球足细胞数。借助足细胞特定标志物WTl与肾小球基膜Ⅳ型胶原α3链(C—Ⅳα3)双套色荧光染色，用激光共聚焦荧光显微镜对肾小球足细胞进行准确的密度定量分析。结果：糖尿病肾病患者无论临床表现为微量白蛋白尿、蛋白尿(尿蛋白＜3．5g/24h)，还是大量蛋白尿(尿蛋白＞3．5g/24h)，均伴肾小球足细胞数目及密度的减少，其中以大量蛋白尿组最为显著，蛋白尿组次之，微量白蛋白尿组最轻。足细胞数目及其密度与尿蛋白量呈显著负相关(P＜0．01)。足细胞数目的减少还与肾小球病理改变相关，表现为肾小球K—W结节病变者其足细胞数明显少于肾小球弥漫系膜增生性病变者(P＜0．01)。此外，足细胞数减少严重者肾小球硬化以及血清肌酐水平升高的发生率均明显增高。结论：糖尿病肾病患者早期就表现出肾小球足细胞数目及其密度的减少，随着病变加重，这种变化愈发明显。足细胞病变不仅导致大量蛋白尿的发生，而且还与肾小球硬化和肾功能损伤的发生有关。