SARS实验室诊断技术

SARS的实验室诊断技术分为常规的临床检验、病原学诊断和血清学诊断。临床检验是SARS诊断的辅助手段，血清学诊断和病原学诊断为临床提供早期或确诊SARS的依据。血清学诊断是检测SARS感染后病人血清中抗SARS冠状病毒抗体反应的情况，病原学诊断是检测SARS病人体内感染病毒的情况。目前应用于检测SARS抗体的血清学方法主要有间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、中和试验、胶体金技术和斑点酶免疫技术等；用于检测SARS的病原学方法主要有组织培养技术分离SARS冠状病毒、分子生物学技术检测SARS冠状病毒核酸、电镜和间接免疫荧光技术检测病人组织或细胞培养物中的病毒等。     

2004年北京SARS的传播及诊断特点分析

目的 分析2004年北京SARS再次发生时的传播和诊断特点，为今后更有效地作好SARS防制工作提供有益的信息。方法 应用现场调查资料对2004年北京SARS发生和发展过程，以及诊断概况进行描述，并结合2003年北京SARS流行情况进行简要的对比分析。结果 2004年北京共发现7例SARS感染病例，其中男性2例，女性5例，年龄为20～49岁。首例SARS确诊病人是从事与SARS病毒有关的实验室研究人员。第1例病例发病到最后1例病例发病的时间间隔为14d，最短和最长潜伏期为3～12d。感染方式主要仍为近距离密切接触。全部病人均以发热为首发症状，肺部均出现片状阴影或病变。在病例诊断中，病原学诊断依据和血清抗体检测已成为最重要的确诊依据之一。结论 2004年北京SARS的传播源于实验室感染，加强实验室管理，消除实验室感染和传播隐患是今后防控SARS等传染病的关键环节。     

广东省不同人群SARS病毒抗体水平调查

目的对不同人群进行SARS-IgG抗体水平检测，分析SARS流行规模和特征，评价暴露的危险性，了解人数中是否存在SARS病毒隐性感染，为寻找SARS病毒传染源提供线索。方法抽取7708份不同人群标本，按临床症状和暴露因素分为临床确诊SARS病人、病人或污染物的接触者、普通健康人群和动物销售人员4类，采用酶联免疫方法(ELISA)进行SARS-IgG抗体检测，用免疫荧光法(IFA)复核，并结合流行病学资料进行分析。结果127例临床确诊SARS病人抗体阳性率为66．9％；密切接触者中女性发病率高于男性；SARS病人或其污染物的密切接触者抗体阳性率为0．88％；动物销售人员为13．4％；野生哺乳动物销售者的抗体阳性率显著高于其他动物销售者，普通健康人群未检出抗体阳性。低年龄健康人群ELISA检测阳性率为2．06％，高于总体水平。结论人群总体抗体水平很低，普通健康人群无SARS冠状病毒抗体，但可能存在某种可与SARS冠状病毒起交叉反应的抗体；有无接触史是影响抗体阳性率的重要因素；密切接触者可能存在隐性感染；野生动物可能是本次SARS的传染源。     

加强实验室生物安全管理势在必行

长期以来，人们在学科建设的理念上，更多重视的是质量管理、信息管理，相对忽视了实验室生物安全管理。在抗击SARS的斗争中，沉痛的教训使我们清醒地认识到．实验室的安全管理是多么重要。2001年12月13日台湾确诊的1例SARS病人。他恰恰是SARS实验室工作人员，这个事实再次提醒人们，加强实验室生物安全管理势在必行。     

对上海首例传染性非典型肺炎患者的流行病学调查

2003年，传染性非典型肺炎(WHO称SARS)肆虐全国乃至全球，由于该病无特殊治疗和预防方法，传播途径简单，危及患生命，对社会造成严重威胁。如何早期发现、早期诊断、早期报告、早期隔离、早期治疗，对防止二代SARS的发生和控制爆发流行有着极其重要作用。本对上海第一例SARS确诊病例的临床资料进行回顾性分析，旨在通过流行病学调查，从中更多地吸取经验教训。     

从四起SARS爆发案例分析SARS的流行病学特征

目的探索SARS的可能来源、流行特征、传播途径与预防对策。方法对广西的2起早期SARS案例进行流行病学调查,对北京某家庭SARS案例和报刊介绍的北京一宗SARS案例收集有关流行病学资料,用流行病学方法和因素分布理论结合免疫学原理对其传播链进行解剖分析和演绎推理。结果广西的两宗早期病例分别存在动物或野生动物接触史。4起爆发案例均呈家庭和特殊职业聚集性,其二代病例以近距离飞沫和密切接触传播为主,但也可能存在血传播和性传播。结论SARS很可能为自然疫源性疾病,除传播途径为近距离飞沫和密切接触传播外,显性感染者的潜伏期或隐性感染可通过性传播而形成隐匿传播。SARS的预防策略为禁止捕杀野生动物,加强疫情报告与监测,做到早发现、早报告、早隔离、早治疗、早调查处理,同时做好医护人员防护和避免院内交叉感染以及切断隐匿传播途径的综合性预防措施。     

荧光定量PCR检测传染性非典型肺炎冠状病毒的分析

目的 探讨荧光定量PCR在检测传染性非典型肺炎(SARS)冠状病毒(SARS—CoV)中的应用。方法 对2003年1～4月广州市各大医院送检的临床确诊或疑似的SARS病例以及密切接触的咽漱液和咽拭子进行荧光定量PCR检测。结果 从57份确诊患标本中检出SARS-CoV阳性38份，检出率为66．7％。14份密切接触标本中检出阳性7份。59份疑似患标本中检出阳性12份。SARS发病10～12d时SARS—CoV检出率最高，达87．5％。结论 荧光定量PCR能早期、快速检出SARS—CoV，临床符合率达66．7％，采样时间在发病1～12d最佳。     

湖南省SARS早期预警症状监测数据分析

目的 通过对湖南省“发热病例”监测数据的分析，了解全省发热病人尤其是发热呼吸道病人的流行病学特征，为SARS早期症状监测预警系统的建立提供数据参考。方法 设计统一的调查表格，收集湖南省二级以上医院1～6月就诊发热病人的基本信息，用Excel录入和进行流行病学分析。结果 本次监测共报告发热病人113823例，其中发热呼吸道病人76937例，占发热病人总数的67．59％；发热肺炎病人9990例，占发热病人总数的8．78％，报告SARS预警病例4例，无SARS疑似和确诊病例报告。结论 选择在医院对发热病人进行监测对于及时发现和治疗SARS病人（疑似病人）、切断传播途径、保护易感人群等方面起到了有效的作用。     

严重急性呼吸综合征实验室的生物安全管理

2003年3月1日,北京市出现首例严重急性呼吸综合征(SARS)患者,我中心便正式开始了该病的实验室检测工作。2003年3～6月,共检测SARS标本数千份,有的标本病毒含量高达10^5拷贝;检测方法有细胞培养、电镜、PCR、实时荧光PCR、免疫荧光实验、酶联免疫吸附实验等。由于条件所限,这些实验均在二级生物安全实验室中完成,甚至是早期的病毒分离、阳性毒株的培养及鉴定。由于我们实验室科学、严格的生物安全管理制度,未出现人员感染、样品污染及环境污染等事故。我们积累了一些经验或心得,对今后出现的其他病原未明、传播机制不清、生物安全等级不明疾病的研究,尤其对那些尚无P3实验室的单位有着很好的借鉴意义：     

院外SARS病人判定标准(WHO)的评估:前瞻性调查研究

有关SARS的早期报告描述了确诊病例的临床特征。近期的报告则更详尽地描述了其流行病学特点和疾病进程。基于医院的早期发现 ,世界卫生组织和香港医院权威机构制定了SARS疑似病例和可能病例的定义 ,该定义可用于入院前病人的筛检 ,或非临床医疗机构如机场等地对人群的筛检。SARS病毒的发现及其血清学快速检测的发展有助于SARS病例的诊断 ,但这些快速检测法至今仍未能得到推广应用。2 0 0 3年 3月的前两周 ,接触威尔士亲王医院 8A病房的 1 5名医生、1 5名护士、1 7个医学生和 5名其他职员 (辅助人员 ,文员及清洁人员 )感染了SARS。…     

天津市传染性非典型肺炎康复者健康状况的随访研究

目的 了解天津市传染性非典型肺炎（SARS）康复者健康状况及其主要并发症的转归，并通过特异性抗体检测完成血清学诊断，观察抗体时间变化规律。方法对2003年天津市SARS流行期间经住院治疗康复的220人，进行了发病后14个月内分3个阶段的随访研究。对全部随访者进行了血清SARS-CoV特异性抗体IgG、IgM以及淋巴细胞亚群、血生化等指标检测，同时进行了肺部高分辨CT检测和双侧髋关节MRI检测。结果随访患者中，原SARS临床确诊、临床疑似和临床观察病例的SARS-CoV特异性抗体IgG的阳性率分别为99．34％，87．5％和45．59％，提示临床疑似和临床观察病例中有较多病人漏诊。随访早期发现87人存在肺功能或（和）肺间质性变化，经过8个月观察，影像学显示46人肺部病变自愈，其余41人肺部病变也明显好转。49人发生股骨头坏死，仅在SARS-CoV特异性抗体阳性患者中发生，且多为Ⅰ期病变，经多因素分析显示，股骨头坏死与SARS病毒感染以及住院期间激素的平均使用量的联合作用有关。结论血清学诊断在SARS患者感染确证中不可缺少，应在恢复期早期进行血清抗体检测。康复者肺间质性改变有自愈倾向，股骨头坏死的发生是病毒感染与激素联合作用的结果。     

改良分子信标-双重实时荧光PCR快速检测SARS病毒

目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒的方法,用于SARS的早期诊断和动物溯源。方法利用改良分子信标技术、装甲RNA和双片段双色荧光技术,根据GenBank公布的SARS病毒聚合酶基因1b的阅读开放框架结构的保守序列,自行设计一对引物和探针,以部分临床标本的酶联吸附实验结果和传统细胞培养方法作为对照,建立分子信标检测SARS病毒的方法。对368份临床标本(咽漱液、血液、粪便、尿液)、52份细胞培养液和50份动物标本进行荧光PCR扩增。结果分子信标检测SARS病毒的方法灵敏度为10～100个拷贝ml,与流感病毒等呼吸道病毒无交叉反应。分子信标检测368份临床标本,20份阳性。其中确诊病例阳性率为21.27%(1047),确诊病例的咽漱液阳性率为43.48%,还分别从粪便和血清中检测到SARS病毒。52份细胞培养液,29份阳性,阳性率为55.77%。50份动物标本,23份阳性,阳性率为46%。结论改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒方法灵敏度高、特异性强,可用于SARS的临床早期诊断和动物溯源。     

广东省SARS病例血清学调查与分析

目的　分析广东省严重急性呼吸综合征 (SARS)病例SARS CoV抗体检出情况。方法　分别对 2 92份广东省SARS临床确诊病例、39份疑似病例和 30 3份健康体检人员 (一般人群 )血清标本 ,采用酶联免疫方法进行SARS冠状病毒IgG抗体检测。结果　SARS临床确诊病例的SARS CoVIgG抗体阳性率为 5 8 90 % (1 72 / 2 92 ) ,高于疑似病例及一般人群抗体阳性率 (分别为 1 8 0 0 %、2 31 % )(P <0 0 1 )。分析 2 92份临床确诊病例血清标本 ,结果显示有明确接触史者抗体阳性率 (72 6 7% )高于无明确接触史者 (4 1 98% ) (P <0 0 1 )。不同性别抗体阳性率差异无显著性 ,不同年龄组抗体阳性率差异有显著性 ,4 0～ 5 9岁年龄组最高 (P <0 0 1 )。流行早期病例抗体阳性率 (6 7 4 3% )高于后期(31 94 % )。SARS冠状病毒IgG抗体在发病 1 0d后能较可靠检出且能维持较长时间。结论　SARS冠状病毒IgG抗体检测结果与临床诊断存在一定差异 ,IgG抗体检测是有效的辅助诊断手段 ,但不能用于早期诊断。实验室血清学检测结果进一步证明接触史是SARS病例诊断的重要依据之一。     

血站血液检测实验室全面质量安全管理

1998年10月1日《中华人民共和国献血法》颁布实施以来，我国的输血事业实现了跨越式发展，全国实行无偿献血制度，临床经输血传播性疾病逐渐减少。但是由于血液中HBV、HCV、HIV、TP、CMV、HTLV-Ⅰ／Ⅱ等相关病原体“窗口期”及检测条件的限制，输血与其他治疗一样，存在一定的风险。同时，由于出现了疯牛病、SARS等一些新型传染病以及人类活动的日益多元化，客观上要求对血液检测必须进行全面质量管理和生物安全管理，这样才能最大限度地减少经输血传播性疾病的发生和保障实验室工作人员及环境卫生的安全。     

2004年北京严重急性呼吸综合征疫情的流行特征

2004年4月北京出现了新发严重急性呼吸综合征(SARS)病例，共报告确诊病例7例，累计隔离密切接触者747人。我们通过对疫情发现经过、指示病例及传播链关系、潜伏期和密切接触者管理情况等进行描述，分析了2004年北京SARS疫情流行特征。     

沈阳市某大学非典型麻疹暴发调查报告

目的通过调查处理一起大学发生的非典型麻疹暴发疫情,发现现阶段麻疹流行特点．为制定麻疹控制措施提供依据。方法以不明原因的发热、咳嗽及出疹等症状的学生为调查对象,按照《全国麻疹监测方案》开展现场流行病学调查与处理,采集病人鼻咽拭子、尿和全血标本,进行流行病学调查、麻疹病原学和血清学检测。结果42名学生流行病学调查结果、临床症状和实验室检测结果显示,确诊麻疹病例8例,其麻疹IgM血清学检测阳性率为19．00％,学校麻疹罹患率为0．02％。结论本起疫情是由麻疹典型病例引起的不典型麻疹的暴发,通过对早期不典型麻疹病例的鼻咽拭子病原学检测,提高了麻疹病例早期的确诊率,为及时隔离治疗麻疹病例,采取麻疹类疫苗的应急接种等有效控制措施提供了科学依据。     

北京市怀柔区首例输入SARS病人传播链分析

任何传染病的流行和暴发都离不开传染源、传播途径和易感人群,SARS正是借助了这个传播链条在人群中传播,并在人口聚集地造成暴发流行.北京市怀柔区的大部分SARS确诊病人主要通过以王某为传染源的传播链感染,造成在医院及患者家庭中流行.现将传播流行情况报告如下.     

中国24省、市、自治区SARS首发临床确诊病例分析

2003年1月2日广东省首次报告严重急性呼吸综合征(SARS)病例,从该省对聚集性SARS病例的回顾调查中发现,首例发病时间为2002年11月16日。此后,我国内地许多省份和全球部分国家或地区陆续报告病例,并且发生了医院和家庭聚集性爆发。流行病学调查资料表明,在这次SARS流行的早期,一个地区的医院内和家庭内发生爆发,往往与输入性病例有关。因此,对我国各省SARS首例临床确诊病例进行分析,找出其共同特点,为今后控制工作特别是预防该病的跨地区传播提供参考。     

广东省临床确诊SARS病人统计分析

目的通过对临床确诊SARS病人流行病学特点、治疗与转归、住院费用,以及公共应急体系建设等进行分析,了解SARS的流行和发病规律,为相关部门制定相关的防治对策和完善突发公共卫生应急体系提供依据。方法利用描述性和单因素、多因素统计分析方法对临床确诊的1381例SARS病人流行规律、流行特点、以及SARS预后情况进行了分析。结果SARS流行除与天气、环境、接触方式等有一定关系外,与职业、年龄、公共卫生应急体系等也有一定关系。结论只要掌握了SARS的流行规律和流行特点,建立了科学合理的应急防治体系,SARS不但可防、可控,而且治愈率高。     

广东省临床确诊SARS病人住院费用分析

利用广东省所有临床确诊SARS病人住院病历资料，通过详细分析各类SARS病人住院费用情况，初步了解了影响SARS病人住院费用的主要原因；探讨了公共卫生应急体系及社会保障体系建立对SARS治疗成本影响；提出了如何降低传染病治疗成本的建议。