一种新的高纯度的百日咳疫苗在婴幼儿中的评价

在美国用于儿童免疫的常规全细胞百日咳疫苗预防百日咳是有效的。然而,由于对百日咳杆菌的抗原和生物学活性因子的研究有了新进展,使得生产新一代更高纯度的非细胞疫苗。从百日咳杆菌中纯化出两种血凝素蛋白——淋巴细胞增多症刺激因子血凝素(LPF)和     

百日咳无细胞菌苗、百日咳毒素和丝状血凝素体外诱导人体抗原特异性抗体合成和T淋巴细胞增殖

本文报道了人体B和T淋巴细胞对百日咳无细胞菌苗JNIH-6(含百日咳类毒素和丝状血凝素)、JNIH-7(含百日咳类毒素)、纯化组分JNIH-4(丝状血凝素)和JNIH-5(百日咳毒素)的体外免疫应答的研究结果.百日咳类毒素和丝状血凝素在体内能诱导恢复期患者的淋巴细胞合成特异性Ig.抗原依赖性Ig在淋巴细胞培养悬液中的存在可通过ELISA和中国仓鼠卵巢细胞毒性中和试验来证明.JNIH-4、JNIH-6和JNIH-7能诱生高滴度抗体,在百日咳恢复期患者细胞     

百日咳69kDa蛋白预防小鼠喷雾感染的研究

沉降精制百日咳菌苗抗感染的抗原成份已知有百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、缴。最近有报告提出,菌体外膜蛋白69kDa(69k)具有预防小鼠脑内感染及喷雾感染的活性,作者对69k和其他抗原合并应用的抗感染效果进行了研究,获得了若干新的认识。实验选用雌性4周龄小鼠。FHA及PF用东浜1相菌的液体培养上清。缴和69k从培养菌体精制。各种抗原用甲醛灭活及脱毒后用于试验。抗原单独或按适当比例调整为     

百日咳杆菌的重要保护性抗原——百日咳毒素和丝状血凝素

Keogh(1947年)最早报道百日咳杆菌具有凝集各种动物红细胞的血凝素。Arai等(1976年)进一步指出I相百日咳杆菌能产生两种截然不同的血凝素,即淋巴细胞增多促进因子血凝素和丝状血凝素。两者都是具有保护性的蛋白质抗原。近年来,日本和美国学者证明,I期百日咳杆菌有许多抗原,毒素和毒素样成份,包括凝集原、丝状血凝素(FHA)、淋巴细胞增多促进因子(LPF)、腺苷环化酶、不耐热毒素、脂多糖和气管细胞毒素等。其中LPF和FHA两种蛋白可能有重     

抗百日咳杆菌免疫力的血清学相关物

本文介绍了两项百日咳无细胞菌苗试验的血清学数据的分析结果,认为粘附素、菌毛和百日咳毒素抗体水平高与百日咳感染的可能性较低有关。与仅含有百日咳毒素或百日咳毒素和丝状血凝素组分的菌苗相比,含有百日咳抗原成分越多,百日咳无细胞菌苗就越有效。     

化学交联抗原组成的无细胞百日咳疫苗的效力

在联合疫苗与多价疫苗研制过程中 ,抗原总量的增加可能是个问题 ,制备高效抗原可使疫苗的抗原含量减至最小。研究发现弱抗原性抗原经化学交联后能诱生抗体。为此作者在小鼠呼吸道感染模型中研究了化学交联抗原组成的无细胞百日咳疫苗的效力。　　作者将百日咳杆菌 Tohama株在改良的S- S液体培养基中静止培养 5天后 ,取上清液提纯百日咳杆菌丝状血凝素 ( FHA)、百日咳毒素 ( PT)、百日咳 6 9k Da外膜蛋白( PRN)。然后将上述三种抗原以 9∶ 2∶ 1的蛋白比混合 ,加入 2或 50 m M 1 -乙基 - 3- ( 3-二甲胺基丙基 )碳化二亚胺 ( EDC)和 0 …     

不同凝集原型的百日咳菌株中百日咳原的生物学活性

百日咳原是百日咳菌体中的一种蛋白质毒素,具备百日咳菌苗所具有的大部分生物学活性,如组织胺致敏(Hs)、促进白细胞增多(LP)、激活胰岛(IA玛以及保护小鼠伊A)等活性。Arai等得到一种高度纯化的结晶百日咳原,该物质可保护小鼠抵抗百日咳活菌的脑腔感染。至于百日咳原是不是主要的保护性抗原尚未定论,因为丝状血凝素(FH助与某些凝集原亦具有保护动物抵抗呼吸道感染的作用。本文作者对由不同凝集原型的光滑型菌株及不产生FllA的突变株制备的百日咳原的生物学及血清学活性进行了比较研究。 试验采用5株不同凝集原型的光滑菌株[18三323(1、2…     

百日咳杆菌丝状血凝素的制备及百日咳毒素和丝状血凝素血清抗体的分析

近十年来,提纯和检测百日咳杆菌丝状血凝素(FHA)、百日咳毒素(PT)和其它一些抗原技术的不断发展,为应用百日咳抗原检测血清学应答成为可能.可是这些技术通常十分复杂并且相当费钱.提供纯化抗原仅局限于少数专门研究实验室.作者建立了一种为临床和公共卫生实验室制备FHA血清的简单而经济的方法,利用这个方法开展了百日咳血清诊断的研究.     

白细胞介素12能增强百日咳无细胞菌苗的效力

作者曾用小鼠呼吸道感染模型证实,百日咳杆菌感染或百日咳全细胞菌苗免疫能诱导抗原特异性Th1细胞,且能完全抵御百日咳杆菌的气雾攻击,而用含脱毒百日咳毒素(PTd)、丝状血凝素(FHA)和69kDa外膜蛋白(pertactin)的无细胞菌苗免疫则诱导Th2细胞。     

百日咳杆菌外膜蛋白的提纯和保护力

最近的研究证明,百日咳全细胞菌苗（WCV）中的百日咳毒素（PT）、丝状血凝素和外膜蛋白复合物（OMC）在脑内（ic）试验（小鼠脑内保护力试验）中都显示有保护作用,并发现这些保护作用与某些毒力相关外膜蛋白（OMP）的存在有关。     

制备百日咳无细胞菌苗的简易方法

作者应用染色配体层析法从百日咳杆菌的培养上清中提取百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA),并研究了用水溶性1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)-碳化二亚胺(EDAC)进行类毒化的条件。应用SS培养基加环糊精和环糊精液体(CL)培养基制备PT和FHA。用Blue Sepharose层析从培养上清中提取抗原。SS培养基加环糊精产生的PT是FHA的2.5倍,     

百日咳杆菌感染和百日咳菌苗接种后的人体血清抗体应答

作者采用免疫印迹技术比较了百日咳感染和百日咳全菌体菌苗免疫后抗百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69千道尔顿(kDa)的腺苷酸环化酶相关蛋白(69kDa蛋白)和百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)的血清抗体应答.试验血清样品取自1985年7月～1987年2月百日咳流行期的8例百日咳患者、4名百日咳家庭接触者和4名经吸附DTP全程免疫的儿童.百日咳杆菌抗原的SDS-PAGE表明,     

用干燥抗原ELISA检测人体百日咳杆菌丝状血凝素抗体

ELISA可定量测定人血清中抗丝状血凝素抗体(抗-FHA)和抗百日咳毒素抗体(抗-PT)。但纯化用于致敏的FHA和PT不仅困难,而且不经济,因此,作者改良了试验方法以减少测定抗体所需要的抗原量。作者参照Voller法进行了间接ELISA。用碳酸氢钠缓冲液(pH9.6)吸附抗原致敏聚苯乙烯微量板,置4℃过夜,用室温下在孔内干燥的抗原致敏另一块聚苯乙烯微量板。每孔中加100μl试剂(除封闭过程以外)。抗原致敏的孔用磷酸盐缓冲液(PBS)洗两次,加百日咳恢复期病人抗-FHA和抗-PT阳性血清[参考血清含650 ELISA单位(EU)/ml抗-FHA和200EU/ml抗-PT活性]于37℃孵育2     

对百日咳杆菌外膜蛋白的血清抗体应答

本文报道并比较了小鼠和婴儿对百日咳杆菌各种抗原成分的免疫应答情况.抗原制备:用理化方法从W28X和C株百日咳杆菌中提纯百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)、丝状血凝素(FHA)和白细胞增多促进因子(LPF).抗血清:置W28X株于56℃加热30分钟,用DTP免疫6～8周龄的C_3H/He小鼠,收集小鼠血清,并用磷酸盐缓冲液(PBS)免疫小鼠作为对照.用DTP免疫12～15月龄健康婴     

学龄儿童血清中的百日咳丝状血凝素抗体及其保护作用

百日咳毒素（PT）、丝状血凝素（FHA）和69kDa外膜蛋白（OMP）是诱导机体产生抗百日咳保护性免疫力的最重要的抗原。作者对1992年9～12月芬兰西南部农村一所小学的两个班（7～12岁）中爆发百日咳的情况进行了调查。这两个班共有学生39人,他们在婴儿期都接种了3针DTP,其中31人在2岁时又加强接种了1针。在出现首例百日咳     

百日咳杆菌血凝素的分离和提纯

过去对百日咳杆菌的丝状血凝素(FHA)和淋巴细胞增多促进因子血凝素(LPF)的分离和提纯,不易获得完全不含LPF的FHA。本文提出了直接从静止培养物上清液中分离FHA和LPF的方法,采用以每小时500～1,000ml的速度将培养物上清液注入羟基磷灰石柱进行层析,可使两种血凝素很好     

百日咳全菌体菌苗中百日咳毒素、丝状血凝素、69KDa外膜蛋白、凝集原2和3及脂多糖含量的测定

百日咳全菌体菌苗可诱导对多种抗原[如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69KDa外膜蛋白(69KDa OMP)、凝集原2和3(AGG 2和3)以及其他外膜蛋白]的抗体应答。在百日咳菌苗中,这些抗原成分的含量影响其免疫应答。 作者测定了丹麦当地4种百日咳菌株等量混合的百日咳全菌体菌苗中相应抗原成分的含量。菌苗经甲醛和硫柳汞灭活制成。每剂菌苗含16浊度单位(菌体数约为16×10~9)。从菌苗中提取各种抗原,用ELISA测定菌苗中各种抗原和脂多糖(LPS)含量。 应用2M尿素,在60℃加热30分钟,随后超声处理45秒是提取FHA、69KDa OMP、AGG2和3的最有效方法。提取PT的最佳方法是1M NaCl 4℃过夜,随后超声处理。     

百日咳菌苗中的抗原及儿童接种后的抗体水平

作者测定了英国现行百日咳菌体菌苗中的丝状血凝素(FHA)、血清型特异性凝集原2(AGG2)和3(AGG3)及淋巴细胞增多促进因子(LPF),同时还测定了接种和未接种菌苗的儿童血清中抗上述三种抗原及百日咳菌的脂多糖(LPS)和外膜蛋白(OMP)的抗体水平。     

国际百日咳学术讨论会

1988年4月20～22日,来自24个国家的164位学者(其中包括两名中国代表)出席了由民主德国微生物学和流行病学协会在柏林组织召开的国际百日咳学术讨论会。会议讨论了百日咳杆菌的活性成份,百日咳杆菌的分子克隆技术和百日咳无细胞菌苗进展及评价。现将会议主要内容整理报告如下。百日咳毒素的抗原结构及其亚单位各国实验室对百日咳杆菌所含的许多抗原和毒素成份进行了大量研究和分析。这些活性物质可能在致病机理或在宿主对疾病反应方面起重要作用,其中包括:百日咳毒素     

用于ELISA的百日咳杆菌丝状血凝素的提取及检定

百日咳杆菌的B-G培养基24小时培养物,先以1M醋酸钠提取,再以‘Sephacryl S-300凝胶层析,在280nm吸收光谱观察到5个峰,Ⅱ和Ⅲ峰主要是蛋白质,Ⅰ和Ⅴ峰主要是糖。丝状血凝素(FHA)活性在Ⅰ和Ⅱ峰中间,并不与任何蛋白和糖的主峰相重迭。