中华按蚊和嗜人按蚊卵蛋白质二维电泳图谱的比较分析

用二维电泳法比较分析两种按蚊卵的蛋白质多肽图谱。结果:中华按蚊和嗜人按蚊卵分别显示多肽斑点172和160个,其中121个为两者共有斑点,中华按蚊显示49个特有斑点(占28.5%),嗜人按蚊显示38个特有斑点(占23.8%),嗜人按蚊的点A,在中华按蚊变异为点A和点B,两蚊卵平均差异为28.2%。文中还报告了两者特有斑点的等电点和分子量。     

嗜人按蚊和中华按蚊相关细菌差异的初步探讨

目的通过对河南省桐柏地区嗜人按蚊和中华按蚊的DNA提取物中细菌DNA的拷贝数和种类是否存在差异进行初步探讨，为进一步深入开展蚊媒中肠细菌与蚊媒传播疟疾能力之间的关系提供理论基础。方法以保存于75％乙醇中的成蚊为研究对象，首先应用聚合酶链反应（PCR）和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—PFLP）方法确定蚊种，在此基础上，用PCR比较蚊虫细菌拷贝数的异同，同时克隆并酶切4只按蚊中细菌的16SrDNA序列，对酶切结果进行统计分析。结果共明确23只按蚊的种类。不同蚊种DNA中所含细菌拷贝数存在差异，但与按蚊的种类没有关系。4只按蚊DNA中共发现19种细菌16SrDNA的酶切类型。不同中华按蚊个体间存在共同的细菌DNA酶切类型；嗜人按蚊仅呈现2种细菌DNA酶切类型，均与中华按蚊不同。结论嗜人按蚊和中华按蚊中含有的细菌种类存在差异，该项研究为我们进一步研究按蚊中肠细菌是否会影响按蚊对疟原虫的感染性奠定了基础。     

PCR技术在赫坎按蚊复合体近缘种鉴别中的应用

目的应用聚合酶链反应（PCR）技术分析湖北省不同地区媒介按蚊的种型.方法采用传统的形态学方法和新建立的基因鉴别技术对现场捕获的按蚊分别进行形态特征鉴别和基因鉴别及比较.结果现场捕获181只按蚊,形态学确认176只为中华按蚊,而PCR鉴定172只为中华按蚊,另4只为八代按蚊;经形态学特征鉴别的5只嗜人按蚊中,PCR鉴别有4只为嗜人按蚊,另1只为八代按蚊.结论采用PCR基因鉴别技术能准确鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、八代按蚊等近缘种按蚊,较传统的按蚊形态学鉴别方法准确,适用于复合媒介地区的疟疾媒介调查和监测.     

嗜人按蚊产卵次数的实验研究

观察嗜人按蚊生态学特征,了解其种群在一个生活周期的动态变化,探讨其发育繁殖规律,对媒介生物防制和控制疟疾流行都具有十分重要的意义.曾有文献报道中华按蚊产卵次数,但对于嗜人按蚊在实验室条件下自然交配和人工交配产卵次数尚未见系统观察.为此,我们在实验室进行了实验研究.     

中华按蚊吸血过程及生殖营养关系的实验观察

<正> 对中华按蚊生态习性已做了多年的调查研究工作,对此,我们于1979～1980年又做了该蚊吸血过程及生殖营养关系的实验观察,即包括吸血量、吸血速度、吸血过程中的排血时间和排血量、以及吸血次数、产卵次数与卵小管形成结节数关系等,现将结果报告如下。     

中华按蚊CYP6P5基因的生物信息学鉴定及特征分析

目的鉴定中华按蚊CYP6P5基因并分析其序列特征,为研究中华按蚊CYP6P5基因杀虫剂抗性机制提供理论依据。方法以催命按蚊基因CYP6P5为询问基因,基于中华按蚊转录组测序数据,采用双向Blast方法搜寻中华按蚊CYP6P5cDNA序列。利用生物信息学相关软件对该基因编码蛋白序列的一级结构、疏水区、跨膜区、结构域、3D结构等进行预测分析,并采用最大似然法（maximumlikelihood,ML）建立代表性蚊种的系统发育关系。结果搜索获得1条中华按蚊CYP6P5全长cDNA序列。该cDNA序列具备P450超家族和CYP6家族特征性的保守序列,命名为CYP6P5（GenBank登录号：KF358704）。该cDNA全长为1583bp,开放阅读框为1527bp,编码508个氨基酸,推测其相对分子质量为58．32×10-3,等电点为7．17。分析表明该基因编码的蛋白序列第5～21位氨基酸是疏水区,第5～22位氨基酸是跨膜区,第36～505位氨基酸是P450保守结构域,并具有多个酶活性位点。系统发育关系和相似性分析表明,中华按蚊CYP6P5与催命按蚊CYP6P5和冈比亚按蚊CYP6P5亲缘关系最近,形成一个单系,相似率分别为89．4％和89．0％。结论为进一步研究中华按蚊CYP6P5基因溴氰菊酯抗性的分子机制奠定了基础。     

重庆市按蚊种群调查与主要传疟媒介的研究

[目的]掌握辖区内传播疟疾媒介按蚊种群数量,为制订疟疾防治策略提供科学依据.[方法]以县为单位,以东西南北设点.在媒介繁殖高峰季节每点捕人房按蚊50只或50顶蚊帐内全部按蚊;牛房按蚊50～100只,分别单个饲养.产卵后结合成蚊鉴定蚊种,对主要传疟媒介的分布、密度、季节消长、媒介能量以及对杀虫剂敏感性的研究.[结果]共发现按蚊属13种,中华按蚊为优势蚊种,其次为嗜人按蚊、微小按蚊,帕氏按蚊等其余按蚊数量相当少.40个区县.共调查37个,有嗜人按蚊分布的20个,占54.05%,主要分布于渝西南面的远郊县和近郊区.以壁山、江津、永川、铜梁密度最高.人房嗜人按蚊构成比依次为83.33%、49.49%、30.69%、30.21%;均为较平坦的浅丘地形,海拔高度在200～290 m之间,有溪流、池塘、稻田.嗜人按蚊媒介能量江津、铜粱分别为3.54和4.09.嗜人按蚊对常用杀虫剂敏感,中华按蚊已产生抗性.[结论]嗜人按蚊和中华按蚊是该市的传疟媒介,前者为主要媒介,媒介能量在3.54～4.09之间,嗜人按蚊对常用杀虫剂敏感,虽然中华按蚊已产生抗性,但是轮换使用杀虫剂仍然有效.     

云南省部分疟疾疫情不稳定地区重要媒介按蚊生态习性研究

目的了解云南省疟疾疫情不稳定地区重要传疟媒介按蚊生态习性的变化。方法在景洪市、元江、绥江和龙陵县4个疟疾不稳定区,采用诱蚊灯人(畜)房通宵捕获蚊虫,通宵人工诱捕观察蚊虫夜间活动节律,应用多重PCR方法检测蚊虫胃血血源。结果 4个调查点共捕获18种44 635只按蚊,其中中华按蚊26 468只,微小按蚊2428只,雷氏按蚊100只,昆明按蚊1620只,其他按蚊14 019只,分别占所获按蚊总数的59.30%、5.44%、0.22%、3.63%和31.41%。景洪市微小按蚊夜间活动高峰在23:00-00:00;景洪市和元江县的中华按蚊夜间活动高峰为20:00-21:00;绥江县的中华按蚊夜间活动高峰为02:00-03:00;昆明按蚊夜间活动高峰主要在22:00之前;中华按蚊、微小按蚊和昆明按蚊日预期寿命较高,均在0.90~1.00之间;中华按蚊人血指数为0.30,微小按蚊为0.50,昆明按蚊为0.30。结论微小按蚊、中华按蚊和昆明按蚊生态习性发生了变化,是否引起当地疟疾流行特征发生改变,有待于进一步调查。     

四种方法提高嗜人按蚊卵孵化率的效果比较

目的　探讨提高嗜人按蚊卵孵化率的有效方法。方法　群体产卵、单管产卵所得嗜人按蚊卵 ,分别分组下水孵化 ,每天观察各组孵化幼虫数 ,计算孵化率。结果　群体产卵分组孵化率 :搅水组 (74.5 % ) >击盆组 (73 .4% ) >喷水组 (71.9% ) >毛笔刷组 (60 .9% ) >对照组 (3 5 .6% ) ;单管产卵分组孵化率 :击盆组 (92 .5 % ) >搅水组 (88.0 % ) >喷水组 (83 .2 % ) >毛笔刷组 (81.4% ) >对照组 (5 0 .7% )。结论　击盆法、搅水法、喷水法、毛笔刷法均能提高嗜人按蚊卵的孵化率 ,以击盆法效果最好。     

广东省蚊虫感染沃尔巴克氏体初步调查研究

目的 了解广东省蚊虫种群中沃尔巴克氏体（Wolbachia）的分布及其基因型别.方法 利用Wolbachia的wsp基因序列建立PCR检测方法,对蚊科中库蚊属、伊蚊属、阿蚊属和按蚊属部分蚊虫种类进行检测,同时利用Mega 5.2软件对所获基因序列进行系统分析.结果 分别从致倦库蚊、骚扰阿蚊、白纹伊蚊及未分型蚊种中检测到12条目的基因序列,其中11条成功进行测序,这些序列分别属于A和B2个超级基因组,分布在5个不同的基因族中.结论 广东省白纹伊蚊、骚扰阿蚊和致倦库蚊中均存在A大组（含2个小组）和B大组（含3个小组）基因型的Wolbachia感染,埃及伊蚊和中华按蚊未检测出Wolbachia.     

蛋白质和氨基酸对2种蚊虫产卵选择的影响

目的评价不同蛋白质和氨基酸对我国2种重要媒介蚊虫淡色库蚊和白纹伊蚊雌蚊产卵选择的影响,为新型蚊虫诱卵器的研制提供理论支持。方法在室内测定淡色库蚊和白纹伊蚊对不同种类蛋白质和氨基酸溶液的产卵趋性。结果淡色库蚊怀卵雌蚊偏好在较高浓度的鱼蛋白胨溶液(1000和100mg/L)和酵母浸膏溶液(1000mg/L)中产卵,而10mg/L浓度的鱼蛋白胨溶液能显著引诱白纹伊蚊产卵;苯丙氨酸溶液在1000、100和10mg/L3个实验浓度下均能显著引诱淡色库蚊和白纹伊蚊产卵。结论鱼蛋白胨和苯丙氨酸对淡色库蚊和白纹伊蚊在室内有较好的产卵引诱效果。     

糖和维生素对淡色库蚊及白纹伊蚊产卵选择的影响

目的评价不同营养物质对淡色库蚊和白纹伊蚊雌蚊产卵选择的影响,为新型诱卵器的研制提供理论支持。方法在室内测定淡色库蚊和白纹伊蚊对不同种类糖和维生素溶液的产卵趋性。结果淡色库蚊怀卵雌蚊偏好在1000mg/L和100mg/L浓度的葡萄糖溶液及1000mg/L浓度的蔗糖溶液中产卵,而白纹伊蚊则对供试的各种糖液没有明显的产卵选择偏好;浓度为100mg/L的盐酸硫胺（VB1）溶液和抗坏血酸（VC）溶液、10mg/L的VB1溶液能显著引诱淡色库蚊产卵,10mg/L的VB1溶液还能显著引诱白纹伊蚊产卵。结论葡萄糖对淡色库蚊、VB1对淡色库蚊和白纹伊蚊在室内有较好的产卵引诱效果。     

三带喙库蚊自然种群产卵周期和存活率估测

在上海江湾地区对三带喙库蚊进行连续取样,应用时间序列方法分析雌蚊总数和一定时滞的经产蚊数两序列的互相关性,对自然种群产卵周期和存活率进行估测,并观察气象因素(主要是风速)对分析结果的影响。三带喙库蚊自然种群的产卵周期为2天,产卵周期存活率为0.422～0.457,日存活率为0.650～3.676。风速等气象因素对取样结果分析影响不大。     

Oviposition signals and their neuroethological correlates in the Culex pipiens complex

Mosquitoes in the Culex pipiens complex (Diptera: Culicidae), especially Cx. pipiens and Culex quinquefasciatus, have successfully exploited the rapid growth of the human population and globalization to their advantage by successfully utilizing man-made habitats, particularly for oviposition. Culex spp. lay over 100 eggs together in a raft. Each egg in the raft produces an apical droplet containing an oviposition attractant, erythro-6-acetoxy-5-hexadecanolide, commonly referred to as Mosquito Oviposition Pheromone (MOP). Here we present a detailed gas chromatography–mass spectrometry (GC–MS) analysis of the apical droplets from six populations that revealed MOP as the most abundant constituent. Subjecting MOP and the remaining 17 most abundant chemical constituents of the droplets from these populations to a Principal Component Analysis (PCA) resolved the populations into two distinct clusters that contained two populations each of Cx. quinquefasciatus and Culex pipiens molestus. The two Culex pipiens pipiens, however, did not resolve into a single cluster, with the Shasta population sorting closer to Cx. quinquefasciatus. Comparing the PCA scores with the genetic evidence from adult females using available molecular markers that have earlier shown to sort various Culex forms, we found that the molecular data support the PCA clustering pattern. Behavioral investigation of the droplet-induced attraction tested in gravid Cx. quinquefasciatus elicited various degrees of oviposition to the droplets from each population. Overall, droplets from all six populations induced higher attraction compared to controls. A detailed time-course analysis of droplet composition in Cx. quinquefasciatus from 6 to 54 h post egg-laying identified MOP again as the main constituent. Finally, our electrophysiological investigation identified MOP as the only biologically active constituent from of the droplets eliciting responses from female antennae. These studies will aid in global efforts to understand the vector biology and evolution that can be exploited to develop novel vector management strategies.     

山东省部分地区中华按蚊的抗药眭监测

目的检测淄博、青岛、济宁3个地区中华按蚊对DDT、溴氰菊酯、氟氯氰菊酯、马拉硫磷的敏感性,了解山东省部分地区中华按蚊的抗药性。方法采用WHO区分剂量标准和方法,观察首只蚊虫击倒时间、蚊虫击倒率和死亡数量,根据校正死亡率判断群体抗性级别。结果淄博、青岛、济宁3个地区的中华按蚊,接触4％DDT60min后击倒率分别为31．78％、22．32％和25．66％,24h恢复后的死亡率分别为34．58％、30．40％和24．67％,均为抗性级别（R）;接触0．05％溴氰菊酯60min后的击倒率分别为40．20％、42．16％和22．73％,24h恢复后的死亡率分别为86．58％、61．85％和31．94％,淄博地区的中华按蚊对溴氰菊酯形成初步抗性（M）,青岛和济宁市的中华按蚊为抗性级别（R）;接触0．15％氟氯氰菊酯60min后的击倒率分别为14．29％、30．10％和13．00％,24h恢复后的死亡率分别为66．39％、42．77％和22．05％,均为抗性级别（R）;接触5％马拉硫磷60min后的击倒率分别为31．19％、49．53％和29．52％,24h恢复后的死亡率分别为75．09％、87．18％和81．47％,淄博地区的中华按蚊对马拉硫磷为抗性级别（R）,青岛和济宁市的中华按蚊形成初步抗性（M）。结论山东省部分地区的中华按蚊对DDT和氟氯氰菊酯仍有较高的抗药性,对溴氰菊酯和马拉硫磷也有一定的抗药性和抗击倒力。在蚊媒监测与卫生灭蚊工作中,应根据不同地区蚊虫的抗药性特点采取合理的防治措施,加强蚊媒与蚊传疾病的监测预警。     

江苏省部分地区中华按蚊对溴氰菊酯和氟氯氰菊酯的敏感性调查

目的了解江苏省部分疟区中华按蚊对溴氰菊酯和氟氯氰菊酯的敏感性。方法采用WHO推荐的接触筒强迫接触法,观察接触10、15、20、30、40、50、60min的蚊虫击倒数和24h后的死亡率。结果盱眙、泗洪、睢宁、宜兴4个县（市）中华按蚊接触0．05％溴氰菊酯60min时的击倒率分别为67．37％、64．00％、71．43％和78．40％,24h后的死亡率分别为68．42％、68．00％、72．53％和76．80％,4个县（市）的中华按蚊对溴氰菊酯的抗性评价均为R级。盱眙、泗洪、睢宁、宜兴4个县（市）中华按蚊接触0．15％氟氯氰菊酯60min时的击倒率分别为84．13％、91．76％、89．80％和100％,24h后的死亡率分别为85．71％、91．76％、93．88％和100％,宜兴地区的中华按蚊对氟氯氰菊酯抗性评价为S级,其他3个县（市）的中华按蚊对氟氯氰菊酯抗性评价为M级。结论江苏省部分疟区中华按蚊已对溴氰菊酯产生高度抗性,对氟氯氰菊酯已产生初步抗性。今后,在媒介防制上应采取综合治理措施,以防止抗性产生。     

Laboratory evaluation of 21 insect repellents as larvicides and as oviposition deterrents of Aedes albopictus (Diptera: Culicidae)

Twenty-one commercial insect repellent products, including 12 botanical, 6 DEET-based, and 3 synthetic organics, were evaluated as larvicides and as oviposition deterrents of Aedes albopictus. Ten of the 12 botanical products at 0.1% concentration provided 57-100% mortality of laboratory-reared 4th-stage Ae. albopictus larvae at 24 h after treatment. Five of the 6 DEET-based products and 3 synthetic organic repellents at 0.1% concentration induced 88-100% larval mortality at 24 h after treatment. All 12 botanical products proved highly effective oviposition deterrents of Ae. albopictus, resulting in 76-100% effective repellency at 24 h after exposure. The 6 DEET-based repellents and the 3 synthetic organic repellents caused 84-100% effective oviposition repellency of Ae. albopictus at 24 h after exposure. Several botanical repellents previously shown to have minimal protection from mosquito bites proved effective oviposition deterrents. Some commercial topical repellents have good potential for development and use in management of container-inhabiting mosquitoes because they deter oviposition and kill larvae.     

Factors affecting oviposition site preference by Toxorhynchites splendens in the laboratory

In a series of laboratory oviposition assays, gravid Toxorhynchites splendens exhibited a preference for cups containing Aedes aegypti larval rearing water, but not for cups containing liquid cultures of bacteria, live Ae. aegypti in distilled water, Ae. aegypti larval holding water with reduced bacterial contamination, or methyl propionate at 0.1, 0.2 and 0.3% in distilled water. Preoviposition flight behavior was elicited by dark-colored containers, but few eggs were deposited if they contained no water. An invisible source of humidity placed in cups enhanced oviposition, but a reflective surface placed in dry cups did not. It is concluded that this species is strongly influenced by humidity and visual stimuli in the acceptance of a site for oviposition.     

下流式固定床反应器中反硝化细菌类群及其脱氮效率分析

目的研究下流式固定床反应器的脱氮效果及反硝化细菌群落结构。方法采用多孔陶粒作反硝化细菌固定化载体,研究下流式固定床生物反应器的适宜脱氮条件;扫描电子显微镜观察反硝化菌群的固定化形态并通过16SrDNA测序分析其组成。结果反应最适条件为T=35℃、pH8.0,合成废水处理10hNO3--N去除99%,其中前4h为91%,呈零级反应动力学过程。反硝化细菌主要为杆菌,16SrDNA同源性分析表明反硝化细菌有恶臭假单胞菌、硝基还原假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、睾丸酮丛毛单胞菌、苍白杆菌属等。结论下流式固定床生物反应器的脱氮效果良好,反硝化菌群丰富。