LC-MS法同时测定雷公藤浸膏中雷公藤新碱和雷公藤碱戊含量

目的建立一种灵敏、准确的雷公藤浸膏中雷公藤新碱和雷公藤碱戊含量的LC-MS法。方法雷公藤浸膏样品经氯仿溶解后用稀盐酸（2．0mol·L“）溶液提取,上清液移人Oasis。MCX固相萃取小柱进行净化,然后样品在ZorbaxPlusRRHDC18柱（50innl×2．1mm,1．8μm）上,以醋酸铵缓冲液[0．05％醋酸一酸酸铵溶液（5mmol·L-1）]-乙腈（30：70）为流动相进行分离,应用LC—MS法,在大气压化学电离正离子选择离子监测模式（SIM）下测定,雷公藤新碱和雷公藤碱戊的定量离子分别为m／z806和m／z779。结果雷公藤新碱和雷公藤碱戊的绝对回收率为87．0％-97．5％,在含量1．0—200．0μg·kg-1内均具有良好线性,日内RSD均〈9．8％,日间RSD均〈14．7％,定量检出限均为1．0μg·kg-1。结论本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于雷公藤浸膏中雷公藤新碱和雷公藤碱戊含量的监测。     

HPLC-Q-TOF-MS法测定不同厂家小金丸中9种乌头类生物碱的含量

目的：建立高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱（ HPLC-Q-TOF-MS）法测定不同厂家小金丸中乌头类生物碱（乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱）的含量。方法色谱柱：ZORBAX Extend-C18 RRHT柱（1.8μm,2.1×50mm）;流速为0.21mL· min -1;柱温：30℃;流动相：甲醇-水（水相含0.1%甲酸和2.5mmol· L -1醋酸铵溶液）系统梯度洗脱;采用电喷雾离子（ESI）源,正离子方式检测。结果上述9种生物碱在一定范围内具有较好的线性关系,r值均大于0.9997,精密度、重复性和稳定性的RSD都低于5%,加样回收率均在98.73%~103.54%之间。结论该方法简便、快速、灵敏、精密度高、重复性好,可应用于小金丸的质量控制。     

HPLC测定三黄汤中4种成分含量

目的 建立高效液相色谱法测定三黄汤中4种重要活性成分（绿原酸、盐酸药根碱、盐酸小檗碱和盐酸巴马汀）的含量。方法 采用Agilent C18色谱柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）,流动相为1%醋酸甲醇溶液-1%醋酸溶液梯度洗脱;检测波长：329 nm;流速：1.0 mL·min^-1。结果 绿原酸、盐酸药根碱、盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的线性范围分别为0.5-4.0 μg·mL^-1（r=0.999 1）,0.5-4.0 μg·mL^-1（r=0.999 7）,0.5-12.0 μg·mL^-1（r=0.999 3）,0.3-4.0 μg·mL^-1（r=0.999 9）。平均回收率分别为99.0%（RSD=1.13%）,99.3%（RSD=1.20%）,99.0%（RSD=0.27%）,99.8%（RSD=0.88%）。日内、日间RSD均〈2%。结论 本方法准确、灵敏、重复性好,可同时测定三黄汤中4种重要化学成分的含量。     

铁棒锤中3种双酯生物碱的含量测定

目的为铁棒锤的合理使用及质量控制提供依据。方法色谱柱:Diamonsil C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:以乙腈-四氢呋喃(25∶15)为流动相A,以0.1mol·L~(-1)醋酸铵溶液(每1 000mL加冰乙酸0.5mL)为流动相B,梯度洗脱;流速:1.0mL·min~(-1);检测波长:235nm。结果在此色谱条件下,3种双酯型生物碱可以完全分离,乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的线性范围分别为:0.13~1.33μg(r=0.999 0),0.34~3.41μg(r=0.998 2)和0.34~3.41μg(r=0.998 1),回收率分别为97.0%(RSD=1.290%),97.0%(RSD=1.174%)和96.3%(RSD=1.521%)。结论该方法操作简便,结果准确可靠,重复性好,能用于铁棒锤中3种双酯型生物碱的含量测定。甘肃产铁棒锤中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的平均含量分别为0.183%,0.012%和0.055%,酯碱含量高,临床使用时应减少用量或炮制后使用。     

RP—HPLC法同时测定不同产地雷公藤根皮中3种生物碱的含量

目的:建立快速的反相高效液相色谱法同时测定和比较不同产地雷公藤根皮中3种生物碱含量。方法:采用 Microsorb-100 C_(18)反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈和0.02 mol·L~(-1)磷酸二氢钾水溶液作为流动相,分2个梯度进行洗脱:1→8 min 时梯度变化为50:50→70:30,而8→12 min 时70:30→100:0,最后保持乙腈洗脱3 min。进样量10 μL,流速为1mL·min~(-1),检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果:在该色谱条件下,雷公藤定碱(wilfordine)、雷公藤吉碱(wilforgine)及雷公藤次碱(wilforine)被成功分离;线性相关性在0.9996～0.9998之间;3种生物碱的加样回收率分别为99.1%,99.9%,98.8%,RSD 分别为0.99%,0.76%,0.64%。结论:用所建立的方法直接测定和比较了浙江、湖北、广西和福建雷公藤根中的3种生物碱含量,分离度高,分析快速、准确。     

HPLC法测定玛木然止泻胶囊中盐酸小檗碱与没食子酸的含量

目的采用高效液相色谱法测定玛木然止泻胶囊中盐酸小檗碱和没食子酸的含量。方法色谱柱为Ecosil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)。盐酸小檗碱流动相为乙腈-0.05mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(30∶70),检测波长为345nm,流速为1.0mL·min~(-1);没食子酸流动相为甲醇-2mL·L~(-1)磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为270nm,流速为1.0mL·min~(-1)。结果盐酸小檗碱和没食子酸分别在0.211~2.109(r=0.999 1)及0.207~2.071μg·mL~(-1)(r=0.999 6)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为98.20%(RSD=2.20%)和102.52%(RSD=1.28%)。结论该方法准确、简便、重复性好,可用于玛木然止泻胶囊的质量控制。     

HPLC测定利舒康胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的:建立利舒康胶囊中盐酸小檗碱的高效液相色谱测定方法。方法:采用HYPERSILBDS C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,10μm);流动相:乙腈-0.1 mol·L~(-1)磷酸二氢钾-0.025 mol·L~(-1)十二烷基磺酸钠(50:25:25)。流速1.0 ml·min~(-1);检测波长为345 nm。结果:平均回收率为98.9%,RSD为0.96%,方法重现性的RSD为1.33%(n=5)。盐酸小檗碱线性范围为0.194～0.972μg(r=0.9996)。结论:本法操作简便,结果准确,可用于利舒康胶囊的质量控制。     

藏药榜嘎中的双酯型和内酯型生物碱分析方法研究

目的建立藏药榜嘎中双酯型和内酯型生物碱的测定方法,为榜嘎的质量标准提高提供参考。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为:Phenomenes luna C18(250mm×4.6mm,5μm);流速:1.0mL·min-1。双酯型生物碱的流动相为:A为乙腈-四氢呋喃(25∶15),B为0.1mol·L-1醋酸铵溶液(每1 000mL加冰乙酸0.5mL),梯度洗脱;检测波长为235nm;柱温为室温。内酯型生物碱的流动相为甲醇-水-氯仿-三乙胺(70∶30∶2∶0.1);检测波长230nm;柱温30℃。结果榜嘎中均不含新乌头碱、乌头碱、次乌头碱等双酯型生物碱;内酯型生物碱:阿替新在2.024²0.24μg范围内线性关系良好,线性方程:Y=1.918×104 X-678(r=0.999 9),平均回收率97.3%,RSD=0.9%;异叶乌头碱在2.00820.24μg范围内线性关系良好,线性方程:Y=1.918×104 X-678(r=0.999 9),平均回收率97.3%,RSD=0.9%;异叶乌头碱在2.008²0.08μg范围内线性关系良好,线性方程:Y=1.602×104 X-215(r=0.999 9),平均回收率98.6%,RSD=1.4%。结论该方法准确,可靠,专属性强,可用于榜嘎的质量控制。     

高效液相法测定盐酸氮卓斯汀鼻喷剂的含量

目的：建立测定盐酸氮卓斯汀鼻喷剂中盐酸氮卓斯汀含量的高效液相色谱方法。方法：色谱柱：Diamonsil C_（18）柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：4%三乙胺（用醋酸调节pH至6.0）-乙腈-甲醇（45：21：34）;检测波长：289 nm;流速：1.0ml·min~（-1）;柱温：30℃。结果：盐酸氮卓斯汀在80~800μg·ml~（-1）范围内呈良好的线性关系（r=1.000 0）,平均加样回收率为99.93%,RSD=0.82%（n=9）。结论：本方法操作简便,灵敏,结果准确可靠,可用于盐酸氮卓斯汀鼻喷剂的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中富马酸喹硫平与度洛西汀浓度

目的 建立同时测定人血浆中喹硫平与度洛西汀浓度的高效液相色谱法.方法以DiamonsilTM C18反相柱（150mm＆#215;4.6mm,5μm）为色谱柱,流动相为30mmol·L-1醋酸铵-乙腈（18：82 V/V）;流速：1.0mL·min-1;柱温：40℃;检测波长：220nm.以乙酸乙酯和二氯甲烷（80：20 V/V）作为提取剂.结果 喹硫平在25.0～800.0μg·L-1、度洛西汀在10.0～320.0μg·L-1浓度范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系;喹硫平、度洛西汀的低、中、高3种浓度相对平均回收率大于95%;提取回收率大于70%.日内、日间RSD均低于15%（n=5）.分析方法的检测限5.0μg·L-1（S/N=3）;喹硫平曲线方程：Y=32.68X＋1.06,r=0.9989（n=7）;度洛西汀曲线方程：Y=21.39X＋1.72,r=0.9985（n=7）.结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床喹硫平与度洛西汀血药浓度监测和药动学研究.     

HPLC-MS-MS法定量测定人血浆中多潘立酮的浓度

目的：建立HPLC-MS-MS方法定量测定人血浆中多潘立酮浓度。方法：以地西泮为内标,采用甲醇：0.5%乙酸=80：20为流动相,以Inerstil C18（2.1mm×100mm,3.0μm）色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源（ESI）,以正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。多潘立酮和地西泮用于定量分析的离子对分别为[M＋H]^＋m/z426.2→m/z175.2和[M＋H]^＋m/z285.0→m/z193.0。结果：多潘立酮线性范围为1～80μg·L-1,定量下限为1μg·^L-1（n=6）。日内、日间的RSD均〈15%,平均回收率〉75%。结论：本方法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于多潘立酮临床药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中曲美他嗪的浓度及其药动学研究

目的:建立以高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定人血浆中曲美他嗪浓度的方法,并研究其在健康人体内的药动学。方法:色谱柱为Shimadzu Shim-pack VP-ODS,流动相为甲醇-0.2%甲酸(12∶88),流速为0.8 mL·min-1,柱温为室温;采用电喷雾离子源(ESI源),选择正离子监测(SIM)质荷比(m/z)为267.25(曲美他嗪,[M+H]+)和338.05(法莫替丁,[M+H]+)的正电荷的准分子离子峰。结果:曲美他嗪血药浓度在2～250 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.997 8),方法的定量下限为2 ng·mL-1;日内、日间RSD均≤9.3%,提取回收率在71.1%～75.8%之间(RSD≤5.4%)。22名受试者单剂量口服盐酸曲美他嗪片40 mg后曲美他嗪的平均药动学参数分别为:cmax(156.2±24.4)μg·L-1、tmax(2.16±0.36)h、t1/2(5.44±0.75)h、AUC0～24(1 191±205)μg·h·L-1、AUC0～∞(1 260±212)μg·h·L-1。结论:本方法简便、准确、灵敏、专属性强,适用于人血浆中曲美他嗪浓度的测定及其药动学研究,对于评价盐酸曲美他嗪疗效和安全性有重要意义。     

硝苯地平缓释片人体药代动力学研究

目的建立HPLC-MS法硝苯地平血浓度测定方法,评价硝苯地平缓释片的药动学特点。方法固定相XB-C18（5μm,150mm×4.6mm,Agilent1100SeriesLC/MSD高效液相色谱/质谱仪;流动相甲醇：0.01mol·L^–1醋酸铵溶液（60：40,V/V）,0.40μm微孔滤膜过滤,在线脱气;流速1.0mL·min^–1;柱温25℃;进样量10L。离子源：AP-ESI,正离子模式,雾化电压50psi,保护气13.0L·min^–1 N2,毛细管电压4000V,碎片电压为110V。SIM离子采集方式,采集离子（m/z）硝苯地平314.9[M＋H]^＋,内标劳拉西泮320.8[M＋H]^＋。结果硝苯地平线性范围0.3～80ng·mL^–1,最低检出浓度为0.3ng·mL^–1。硝苯地平试验制剂和参比制剂t1/2分别为6.73±2.00h和7.04±2.18h,Tmax分别为4.28±0.70h和4.48±0.70h,Cmax分别为39.66±10.58ng·mL^–1和40.19±10.97ng·mL^–1,AUC0～36分别为391.63±108.55ng·mL^–1·h和387.57±121.51ng·mL^–1·h,AUC0–∞分别为408.28±121.16ng·mL^–1·h和406.15±133.13ng·mL^–1·h,试验制剂硝苯地平缓释片相对生物利用度F为103.02±13.93%。结论HPLC-MS法测定硝苯地平血浓度实用、可行,适用于常规硝苯地平药代动力学研究。     

超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中阿托伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中阿托伐他汀浓度的超高效液相色谱串联质谱（UPLC—MS／MS）法。方法色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱（50mm×2．1mm。1．7μm）,柱温40℃,流动相为乙腈-含0．01％甲酸的水溶液（70：30）,流速为0．3mL／min,进样量10μL,电喷雾离子化（ESI^＋）正离子MRM扫描。检测离子为m／z 559．2[M＋H]^＋→440．5[M＋H]^＋（阿托伐他汀）,m／z315．5[M＋H]^＋→109．3[M＋H]^＋（黄体酮）,血浆样品采用乙酸乙酯提取,50℃水浴氮气挥干,用黄体酮作为内标定量分析。结果阿托伐他汀血药浓度在0．01。50ng／mL线性关系良好（r=0．9989）。回收率在95％-106％之间,萃取回收率在72％-79％之间（RSD〈4％,n=5）,日内、日间精密度的RSD均小于5％（n=5）,最低检测质量浓度为0．002ng／mL。结论该方法准确、灵敏、简便,适用于阿托伐他汀的血药浓度测定。     

小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS同时测定方法的建立及在药动学研究中的应用

目的：建立同时测定小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS法,并研究小型猪皮肤外用二丙酸倍他米松乳膏后,二丙酸倍他米松及倍他米松的药动学特征。方法：血浆样品经酸化后以乙醚-环己烷（4∶1）提取,LC-MS/MS分析,以Hedera ODS-2（150 mm×2.1 mm,5μm）为分析柱,流动相为5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.1%乙酸）–甲醇,梯度洗脱。二丙酸倍他米松、倍他米松及内标布地奈德的监测离子对分别为m/z 563.2（[M＋CH3COO]-）→483.1、m/z 451.2（[M＋CH3COO]-）→361.0和m/z 489.3（[M＋CH3COO]-）→357.1。对小型猪外用二丙酸倍他米松乳膏后其血浆中二丙酸倍他米松及代谢物倍他米松的浓度进行测定,并计算主要药动学参数。结果：二丙酸倍他米松血药浓度在26.85~644.4 ng·L-1范围内线性关系良好,倍他米松血药浓度在10.62~637.2 ng·L-1范围内线性关系良好。结论：本方法专属性强、简便、灵敏,可用于血浆样本中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的测定及药动学研究。     

LC-MS法测定人血浆中尼美舒利的浓度

目的:建立以液-质联用法测定人血浆中尼美舒利浓度的方法。方法:色谱柱为Agilent Zorbox SB-Cl8,流动相为乙腈-0.1%甲酸(65∶35),流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,内标为缬沙坦;正离子检测模式,选择m/z309(尼美舒利,[M+H]+)和m/z436(缬沙坦,[M+H]+)进行监测。结果:尼美舒利血药浓度在5～50ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9989);方法回收率为87.1%～92.9%;日内、日间RSD分别为3.1%～5.8%、6.4%～9.2%。结论:本方法灵敏、简便,结果准确可靠,重复性好,可用于尼美舒利的临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC-MS法同时测定人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的浓度

目的建立一种可同时检测人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的浓度HPLC-MS方法。方法采用HPLC-MS法，色谱柱为Thermo Hypersil-HyPURITY C18 （150mm×2．1mm，5μm），流动相为20mmol·L^-1醋酸铵（pH3．0，0．15％TFA）-甲醇＝47：53（v／v），流速为0．25mL·min^-1；正离子检测，电喷雾电离，喷雾电压4．5kV，选择性离子监测，分别监测m／z377（依那普利）、m／z349（依那普利拉）和m/z425（贝那普利）。结果依那普利和依那普利拉的定量下限均为1．56ng·mL^-1；线性范围均为1．6～400ng·mL^-1（n＝9，r1＝0．9997，r2＝O．9998）；提取回收率均〉80％，日内、日间变异均〈8．5％。结论该方法灵敏、快速、重现性好，可用于依那普利人体生物利用度和药物动力学研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中的帕珠沙星

目的：建立一种快速灵敏检测帕珠沙星血药物浓度的液相色谱－串联质谱方法。方法色谱柱为 Agilent Eclipse XDB－C18（4．6mm ×150mm,5μm）;流动相为乙腈：水（0．005mol· L－1甲酸铵,0．1％甲酸）＝（30∶70）;流速：0．5mL· min －1;质谱条件为电喷雾电离源（ESI）;采用选择反应监测（SRM）对帕珠沙星（m／z 319．0→301．1）和环丙沙星（m／z 332．2→314．2）进行测定。样本处理采用乙腈沉淀蛋白法,吸取上清液1μL进样。结果帕珠沙星的线性范围为0．02～20μg· mL －1,提取回收率为82％～92％,日内和日间精密度均小于15％。结论本方法简便、灵敏,该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床药物浓度的测定和药代动力学的研究。     

雷公藤片和雷公藤多苷片抗炎作用量效研究

目的明确雷公藤片和雷公藤多苷片发挥抗炎作用的剂量范围,比较其作用效果异同,为临床用药提供依据。方法给小鼠灌胃不同量的雷公藤片和雷公藤多苷片,连续3天,通过巴豆油混合致炎液致小鼠耳肿胀模型计算雷公藤片和雷公藤多苷片对抗急性炎症的半数有效量（ED50）,探讨雷公藤片和雷公藤多苷片对小鼠急性炎症的抑制作用差异。结果雷公藤片和雷公藤多苷片发挥抗炎作用的ED50分别为17.753μg·kg-1和9.236mg·kg-1,折合成雷公藤甲素分别为17.753和8.922μg·kg-1,分别相当于临床70kg人临床日用量的20.30倍和10.21倍。结论雷公藤片、雷公藤多苷片均可拮抗巴豆油混合致炎液导致的急性炎症,且呈现良好的量效关系。抗炎作用强度为雷公藤多苷片〉雷公藤片。提示雷公藤甲素、雷公藤多苷均是雷公藤抗炎作用的物质基础。雷公藤抗炎作用机制有待于进一步研究。