CIK细胞的体外增殖及对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用的实验研究

目的：观察CIK(cytokine induced killer)细胞及LAK(Lymphokine activated killer)细胞对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用。方法：建立Lewis肺癌小鼠动物模型，静脉输入CIK细胞做抗肿瘤治疗，同时设LAK对照，用同位素法检测各组小鼠T细胞增殖反应，同时用MTT法检测各组小鼠NK细胞毒活性。结果：CIK细胞对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用显著强于LAK细胞。结论：CIK细胞对Lewis肺癌小鼠有明显的抗肿瘤作用，并且优于LAK细胞。     

使用Lewis肺癌细胞建立昆明种小鼠肺癌模型初探

目的:探讨建立昆明种小鼠Lewis肺癌模型的可行性。方法:将32只雌雄各半的昆明组小鼠随机分为空白组和模型组,将Lewis肺癌细胞悬液按0.2 m L(细胞含量1×107/m L)于模型组16只昆明种小鼠右腋皮下注射,观察其一般状况及成瘤率、肺癌形成率。结果:与空白组相比,模型组小鼠饮食量减少,体重增加缓慢,成瘤率及肺癌形成率均为68.75%。结论:使用Lewis肺癌细胞可以建立昆明种小鼠肺癌模型。     

半枝莲多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

目的：探讨半枝莲多糖（SBPS）对Lewis 肺癌荷瘤鼠的抑瘤作用。方法建立Lewis 肺癌荷瘤鼠实验模型,随机的分为5组：分别为模型组（生理盐水）、环磷酰胺（CTX）组（30 mg· kg－1· d－1）、SBPS高剂量组（200 mg· kg－1· d－1）、中剂量组（100 mg· kg－1· d－1）和低剂量组（50 mg· kg－1· d－1）。测定抑瘤率、脾指数、胸腺指数、肺／体比。结果 SBPS 抑制Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤与模型组相比有显著差异（ P ＜0.01）。100 mg· kg－1 SBPS对Lewis 肺癌荷瘤鼠肿瘤的抑制作用最好,抑瘤率为49.68％。 SBPS中剂量组和低剂量组可有效提高脾指数和胸腺指数、降低肺／体比。结论 SBPS对Lewis 肺癌荷瘤鼠具有明显的抑瘤作用。     

益气养精小复方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:探讨益气养精小复方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响及其作用机制。方法:建立Lewis肺癌细胞C57小鼠皮下移植瘤模型,将造模后的荷瘤小鼠随机分为模型组、中药组、顺铂组和中药+顺铂组。模型组不予药物干预,中药组予益气养精小复方中药灌胃,顺铂组予顺铂腹腔注射,中药+顺铂组予顺铂腹腔注射配合益气养精小复方中药灌胃,连续灌胃给药14 d。比较各组荷瘤小鼠体内抑瘤作用;采用流式细胞术检测荷瘤小鼠外周血T细胞亚群和NK细胞水平;双抗体夹心ELISA法检测荷瘤小鼠血清IFN-γ及IL-10浓度。结果:中药组、顺铂组、中药+顺铂组平均瘤重均显著低于模型组(P0.05),而该3组之间差异无统计学意义(P0.05),该3组抑瘤率依次为37.75%、44.59%和45.47%。药物干预后,顺铂组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著低于模型组(P0.05),其CD8+T细胞百分比显著高于模型组(P0.05);中药组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著高于顺铂组(P0.05),而其CD8+T细胞百分比显著低于顺铂组(P0.05);中药+顺铂组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著高于顺铂组(P0.05)且低于中药组(P0.05),其CD8+T细胞百分比显著高于中药组(P0.05)。中药组与中药+顺铂组血清IFN-γ浓度均显著高于模型组和顺铂组(P0.05),而IL-10浓度则显著低于模型组与顺铂组(P0.05)。结论:由生黄芪、黄精、灵芝组成的益气养精小复方能够有效升高小鼠CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值与NK细胞水平,正向调节IFN-γ浓度,降低CD8+T细胞百分比与IL-10浓度,进而协同发挥抑制肿瘤生长的作用。     

芪加合剂对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的　研究芪加合剂对小鼠 Ｌｅｗｉｓ 肺癌的影响。方法　观察 Ｌｅｗｉｓ 肺癌小鼠的生存时间和瘤重。结果　芪加合剂（１３７５ ～２７５０ ｇ·ｋｇ － １） 治疗或预防给药均能延长 Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠平均生存时间；对小鼠 Ｌｅｗｉｓ 肺癌瘤重增长有明显抑制作用，并可抑制其自发性肺转移。结论　芪加合剂对肺癌可能具有明显抑制作用。     

调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能调节的实验研究

目的：研究调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用并探讨其作用机制．方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型;灌胃给药12d后观察瘤组织中淋巴细胞与瘤细胞形态学的变化;常规石蜡切片HE染色．观察瘤组织癌细胞形态的变化;免疫组化法检测瘤组织中CD4＋,CD8＋的表达水平及其血清IL-2的活性．结果：调衡中、大剂量组可见瘤组织Lewis肺癌细胞大量坏死和凋亡,荷瘤对照组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡中剂量组和调衡大剂量组瘤组织中CD4＋与CD8＋表达均增多,而阳性组、调衡小剂组、热休克组则主要是CD8＋表达升高．调衡方在25g／kg剂量下,对Lewis肺癌荷瘤小鼠外周血IL-2活性水平有显著地增强作用．结论：调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与增强小鼠外周血IL-2的活性有关及增强CD4＋,CD8＋的表达水平,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移．     

威麦宁对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响

目的复制小鼠Lewis肺癌模型,检测威麦宁的抑瘤率.方法采用流式细胞术分析、免疫组化法检测药物对模型鼠肿瘤细胞周期及对Cyclin D1表达的影响.结果威麦宁浓度在100、150、200、250 mg/(kg*d)时,对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%、33.59%、40.63%、51.56%, 药物对肿瘤的抑制作用具有剂量依赖性;药物可将肿瘤细胞阻滞在G0～G1期,并降低肿瘤细胞Cyclin D1的表达(P＜0.01).结论威麦宁可能是通过降低肿瘤细胞Cyclin D1的表达,将肿瘤细胞阻止于G0～G1期,使细胞不能进入S期进行DNA复制,从而抑制肿瘤的生长.     

小鼠Lewis肺癌原位模型的建立

目的 利用Matrigel与Lewis制备细胞混悬液注射于小鼠左肺内,建立小鼠Lewis肺癌原位模型,评价其肿瘤生长情况、转移情况,以期建立更稳定、更接近于人肺癌生长情况的小鼠肺癌原位模型。方法 将处于对数生长期的Lewis肺癌细胞混悬于Matrigel中,接种于C57BL/6近交系小鼠左肺内。分别于第4,7,10,13,16天各处死5只小鼠,观察其局部成瘤率、肿瘤生长情况、中位生存期及肿瘤转移情况,并对各阶段小鼠行肺部,肝脏,肾脏,脾脏病理切片检查。结果 术后第7天解剖的5只小鼠中,3只小鼠肺上可见小的瘤结节形成,其余2只肺上未见肉眼成瘤,行病理HE染色检查在显微镜下可见2只小鼠肺脏有小的瘤结节形成。术后第10天以后处死的所有小鼠肺上均有肉眼成瘤,术后第13天,所有小鼠肺原位成瘤并伴有血性胸腔积液、胸腔内转移。术后第25天,有1只小鼠出现上述转移的同时还出现了心包膜转移及肾脏远处转移。5只小鼠生存期分别为17d、20d、22d、22d、25d,小鼠中位生存期为21.2d（17-25d）。成瘤率100%。结论 利用Matrigel法成功建立小鼠Lewis肺癌原位模型,稳定性好,成瘤率高,并具有远处转移的特性,更接近于人肺癌的发生、发展过程,故此方法有进一步推广的价值。     

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对小鼠Lewis肺癌生长及PCNA表达的影响

目的：观察丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对小鼠Lewis肺癌的生长抑制及PCNA表达的影响,进而对丹参酮ⅡA的抗癌机制进行探讨。方法：建立Lewis肺癌小鼠模型,将动物随机分为生理盐水对照组、丹参酮ⅡA组、丹参酮ⅡA＋环磷酰胺（CTX）组和环磷酰胺治疗有效组共四组。腹腔连续注射给药。10d后计算各组Lewis肺癌小鼠的瘤重、抑瘤率。用免疫组化方法测定PCNA表达水平。结果：与盐水组相比丹参酮ⅡA组及丹参酮ⅡA联合环磷酰胺组的瘤重明显减低、抑瘤率升高,对小鼠Lewis肺癌的生长有抑制作用,PCNA指数明显降低。结论：丹参酮ⅡA可抑制小鼠Lewis肺癌PCNA的异常表达并抑制小鼠Lewis肺癌生长。     

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对小鼠Lewis肺癌生长及PCNA表达的影响

目的：观察丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对小鼠Lewis肺癌的生长抑制及PCNA表达的影响,进而对丹参酮ⅡA的抗癌机制进行探讨。方法：建立Lewis肺癌小鼠模型,将动物随机分为生理盐水对照组、丹参酮ⅡA组、丹参酮ⅡA＋环磷酰胺（CTX）组和环磷酰胺治疗有效组共四组。腹腔连续注射给药。10d后计算各组Lewis肺癌小鼠的瘤重、抑瘤率。用免疫组化方法测定PCNA表达水平。结果：与盐水组相比丹参酮ⅡA组及丹参酮ⅡA联合环磷酰胺组的瘤重明显减低、抑瘤率升高,对小鼠Lewis肺癌的生长有抑制作用,PCNA指数明显降低。结论：丹参酮ⅡA可抑制小鼠Lewis肺癌PCNA的异常表达并抑制小鼠Lewis肺癌生长。     

参芪固本方对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

【目的】探讨参芪固本方对Lewis肺癌模型小鼠的治疗作用及机制。【方法】C57/BL系小鼠48只,随机分为参芪固本方组(剂量为0.5 g.只-1.d-1)、环磷酰胺组(剂量为80 mg.kg-1.d-1)、参芪固本方与环磷酰胺合用组(简称中西药合用组)及模型对照组;每只小鼠右腋窝皮下接种小鼠Lewis肺癌细胞混悬液(2×106/mL)0.2 mL,第2天开始参芪固本方组与中西药合用组以参芪固本方药液灌胃,连续10 d,第4天环磷酰胺组与中西药合用组腹腔注射环磷酰胺,连续3 d。末次给药24 h后称瘤体质量,计算抑瘤率;称胸腺和脾脏质量,检测外周血白细胞(WBC)数量、T淋巴细胞亚群及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。【结果】参芪固本方可减轻荷瘤小鼠瘤体质量,抑瘤率达30.05%,与环磷酰胺合用后可使其抑瘤率由84.96%提升至90.02%;参芪固本方及中西药合用均可升高荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群、TNF-α及外周血WBC水平(P<0.05或P<0.01),而参芪固本方单用可升高免疫器官脾脏和胸腺的质量。【结论】参芪固本方具有一定的抑瘤作用,可能与其增强荷瘤小鼠的免疫功能有关;与化疗药合用具有增效作用,并可拮抗其副作用。     

反应停抗Lewis肺癌小鼠肿瘤血管生成的作用

目的 :研究具有抗血管生成作用的药物反应停对 Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤和肺转移瘤的作用 ,并探讨其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法 :2 4只皮下接种 Lewis肺癌肿瘤细胞 ( 1×1 0 6cell/mouse)的 C57BL/6小鼠随机分为两组 ,治疗组每日反应停 77.5 mg· kg-1灌胃 ,对照组每日生理盐水灌胃。第 2 1天处死动物 ,秤取瘤重、肺重 ,计数肺转移结节数 ,免疫组化染色后计数肿瘤组织微血管密度 ,流氏细胞仪测定分析肿瘤细胞凋亡率及细胞周期。结果 :反应停治疗组皮下移植瘤重量与对照组间差异无显著性 ( P>0 .0 5 ) ,但是肿瘤平均体积有下降趋势 ;反应停治疗组肺重、肺转移结节数目、肿瘤微血管密度低于对照组 ( P<0 .0 5 )。反应停治疗组肿瘤细胞凋亡率及 G1、S、G2 期肿瘤细胞百分数与对照组比较差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 :反应停有明显地抑制肿瘤细胞转移的作用 ,移植瘤体积有缩小的趋势 ,但不影响细胞的增殖周期     

仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌的作用研究

[目的]探讨具有健脾清肺、化痰祛瘀作用的中药复方仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用及其相关的分子机制.[方法]将50只Lewis肺癌荷瘤小鼠分为仙鱼汤高、中、低剂量组(剂量分别为1.747、0.874、0.437 g·kg-1·d-1),环磷酰胺(CTX)组(剂量为20 mg·kg-1·d-1),荷瘤模型组;计算各组小鼠平均瘤体质量及抑瘤率;制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测各组小鼠Lewis肺癌细胞周期、细胞凋亡率;采用免疫组化法检测各组Lewis肺癌小鼠的bcl-2基因的表达.[结果]仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组瘤体质量均低于模型组,肿瘤细胞凋亡率均高于模型组(P＜0.05或P＜0.01),仙鱼汤各组随着药物剂量的增大,抑瘤率和肿瘤细胞凋亡率逐渐增加.仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组处于S期的细胞比例均低于模型组(P＜0.05或P＜0.01),呈现明显的G0/G1期阻滞现象.仙鱼汤各剂量组bcl-2染色强度指数显著低于模型组(P＜0.01).[结论]仙鱼汤具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,其机理可能与通过降低bcl-2表达从而促进肿瘤细胞凋亡有关.     

参芪固本方治疗脾虚荷Lewis肺癌小鼠的实验研究

[目的]探讨参芪固本方对脾虚荷Lewis肺癌模型小鼠的治疗作用及机制.[方法]将72只小鼠随机分为4组,每组18只,分别为荷瘤模型组(A组)、脾虚荷瘤模型组(B组)、脾虚荷瘤化疗组(C组)、脾虚荷瘤中药组(D组),其中B、C、D组均以大黄煎液(30 g/kg)灌胃7 d复制脾虚模型,然后各组小鼠右侧腋窝皮下接种传代小鼠Lewis肺癌细胞混悬液(5×106/mL)0.2 mL.接种后第2天A、B组每日以生理盐水灌胃,C组以顺铂(DDP)每日腹腔注射1次(剂量为1 mg/kg),同时每日以生理盐水灌胃,D组每日以参芪固本方药液灌胃,剂量为43.83 g/kg,均连续10 d.检测模型小鼠瘤体质量,去瘤体质量,免疫器官脾、胸腺质量,并采用放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平.[结果]B组瘤体质量最重,与其他组比较差异均有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).去瘤体质量比较,D组略高于其他组,但差异无显著性意义(P＞0.05).B、C组较A组胸腺质量减轻(P＜0.01).C、D组均可升高血清TNF-α水平(与A、B组比较,P＜0.05或P＜0.01),D组可显著性降低IL-6水平(与A、B组比较,P＜0.01).[结论]参芪固本方的抑瘤作用可能与其能升高血清TNF-α水平,降低IL-6水平,提高免疫功能有关.     

中药芪灵合剂对拉米夫定片治疗CHB患者Th17细胞及Treg细胞的影响

[目的]观察中药芪灵合剂对拉米夫定片治疗慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B, CHB）患者辅助性T细胞17（T helper cel s 17, Th17）、调节性T细胞（regulatory T cel s, Treg）及Treg/Th17平衡的影响。[方法]选取56例HBeAg阳性的CHB患者,随机分成治疗组和对照组,治疗组予以中药芪灵合剂联合拉米夫定片,对照组予以拉米夫定片,疗程均为48周。在基线期、24周、48周检测所有入组患者外周血的IL-17、FOXP3的频数,HBV-DNA的变化。[结果]两组HBV-DNA阴转率比较,治疗24周、48周后治疗组均高于对照组（P〈0.05）;治疗组和对照组治疗48周后外周血HBV-DNA阴转率相对于治疗24周后均有所提高（P〈0.05）。两组外周血IL-17、FOXP3频数及Treg/Th17比率比较,治疗24周、48周后治疗组均低于对照组（P〈0.05）;治疗组和对照组治疗48周后均有所下降,与基线期比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。[结论]中药芪灵合剂可明显减轻肝脏炎症,增强抗病毒效力,改善免疫功能,其机理可能与其对Th17细胞及Tregs细胞的分布频率和功能调节有关。     

CIK细胞对Lewis肺癌荷瘤鼠细胞因子水平影响的实验研究

目的观察CIK(cytokine induced killer)细胞的体外增殖和杀瘤活性及对Lewis肺癌小鼠脾细胞分泌的细胞因子浓度变化的影响。方法常规方法培养CIK细胞和LAK细胞,建立Lewis肺癌小鼠模型,给予CIK和LAK细胞治疗3周后,杀鼠取脾,用ELISA方法检测Lewis肺癌荷瘤小鼠脾细胞上清液中IL-2、IL-4、IFN-γ浓度,用MTT法测定TNF-α浓度。结果CIK细胞治疗的Lewis肺癌小鼠脾细胞培养上清液中细胞因子水平明显高于LAK组。结论CIK细胞对Lewis肺癌小鼠治疗有效,杀瘤活性强于LAK,CIK治疗组荷瘤鼠的细胞因子水平也高于LAK组。     

从一气周流论治慢性阻塞性肺疾病

一气周流从最本质的"气"的层面,构建了以土为轴,清气左旋,浊气右转,兼顾四象,带动左右之气升降有序的一气周流模式。治疗慢性阻塞性肺疾病可根据一气周流理论下脾胃及四象的生理特性补虚泻实,标本共治,使气机轮转,四维圆则中气旺。主要治则包括:治肺脾以升降得序,温肾阳以运助周流,补心火以阴阳调和,使得中气健旺,肝木升发,肺金沉降,肾水滋养肝木并抑制心火过亢,心火温暖肺金并防止肾水过寒。周流顺畅,阴阳调和而正气充足、邪不可干。     

吲哚美辛对鼠Lew is肺癌治疗及对放化疗增敏作用的实验研究

目的探讨非甾体类抗炎药物吲哚美辛(IN)对荷瘤小鼠Lewis肺癌生长的抑制效果。方法荷Lewis肺癌小鼠肿瘤接种后肿瘤长至1.0cm左右,分为生理盐水对照组、单用IN组、单用放疗组、化疗组及化疗加IN组、放疗加IN组,治疗结束后以抑瘤率、放免法测定TNF-α含量及肿瘤病理等指标进行疗效评价。结果放疗、化疗加IN联合治疗组较单纯放、化疗组及单用IN组的抑瘤率高;放疗、化疗加IN治疗组的TNF-α含量明显高于其他单一治疗组血清中TNF-α的含量;病理观察到各组肿瘤细胞均有坏死,IN与放、化疗联合治疗组尤为明显。结论IN对肺癌有治疗作用,与放疗、化疗同时应用治疗效果更明显,具有抗肿瘤增敏剂的作用。     

肺岩宁方干预Lewis肺癌小鼠移植瘤VEGF及其受体Flt-1、KDR蛋白表达的实验研究

目的：观察肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠移植瘤VEGF及其受体Flt-1、KDR蛋白表达的影响。方法：采用C57BL／6小鼠,接种Lewis肺癌细胞株,随机分为对照组、化疗组、肺岩宁组和综合组,在接种后5天肿瘤直径约为5min时,开始给予0．9％NaCl溶液、DDP、肺岩宁、DDP＋肺岩宁治疗。用药21d,第22天处死小鼠。观察各组肺转移灶抑制率,免疫组化测定肿瘤VEGF及其受体Flt-1、KDR蛋白表达。结果：与对照组相比,肺岩宁组及综合组能显著降低肺转移灶发生率（P〈0．05）。免疫组化结果显示：肺岩宁方能够显著降低肿瘤VEGF及其受体KDR水平。肺岩宁方能够减少肿瘤Flt-1表达,但无统计学意义。结论：益气养精、解毒散结的肺岩宁方具有明显的抗肺癌侵袭转移作用。肺岩宁方可以干扰VEGF与其受体（主要是KDR）的相互作用,从而抑制VEGF的生物活性,这可能是肺岩宁方抗肺癌侵袭转移的机制之一。