七叶灵方诱导裸鼠人肺腺癌A549移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的:研究中药复方七叶灵方诱导人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用.方法:皮下接种人肺腺癌A549细胞,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为不用任何治疗的对照组(A组)、化疗组(B组)、化疗加七叶灵治疗组(C组)和七叶灵治疗组(D组),每组12只,分别给予相应处理.治疗开始后每周测量肿瘤体积并换算成瘤重.采用原位细胞凋亡检测试剂盒,检测瘤组织凋亡细胞数.结果:A组瘤重显著高于其他各组(P＜0.05),C组、D组与B组比较亦有显著差异(P＜0.05).凋亡细胞数各组间具有显著差异(P＜0.05),D组瘤组织中的凋亡细胞数显著高于B组和C组(P＜0.05).A组则表现出早期细胞为高分化,到后期肿瘤组织坏死及部分细胞凋亡.结论:在裸鼠体内中药七叶灵方具有诱导A549细胞凋亡的作用.     

谷氨酰胺和精氨酸对荷瘤大鼠5—Fu化疗效果的影响

目的 探讨联合应用谷氨酰胺(G1n)、精氨酸(Arg)对荷瘤大鼠化疗效果的影响。方法 制备荷Walker—256癌肉瘤大鼠模型，第6天随机分为5组：A组腹腔注射生理盐水，B组腹腔注射5—Fu，C组腹腔注射丙氨酰谷氨酰胺二肽(A1a-G1n) 5-Fu，D组腹腔注射Arg 5-Fu，E组腹腔注射A1a-G1n Arg 5-Fu。第14天检测肿瘤重量、瘤重／尸重、T淋巴细胞转化率(LTR)、NK细胞活性(NKCA)、PCNA指数及凋亡指数。结果 C、D组肿瘤生长与B组比较明显降低(P＜0．05)，E与C组比较明显降低(P＜0．05)。C、D、E组免疫功能与B组比较均增高(P＜0．01)，E与C、D组比较增高(P＜0．05)。结论 联合应用G1n和Arg辅助化疗能够改善荷瘤机体化疗效果。     

顺铂腹腔化疗对卵巢癌模型鼠雌激素影响的实验研究

目的观察鼠卵巢癌模型在顺铂化疗前后雌激素水平的变化,评估顺铂腹腔化疗对卵巢功能的影响。方法取8周龄裸鼠36只,随机分为空白对照组(A组,n=8)、肿瘤细胞接种后不化疗组(B组,n=12)、肿瘤细胞接种后静脉化疗组(C组,n=8)、肿瘤细胞接种后腹腔化疗组(D组,n=8)。所有裸鼠均行一侧附件切除术,除A组外,术中向其余3组鼠腹腔内注射卵巢癌细胞悬液。于术后第9天对A组和B组裸鼠腹腔内注入生理盐水,C组裸鼠尾静脉注射顺铂(20μg/g)+腹腔内注射生理盐水,D组裸鼠腹腔内注射顺铂(20μg/g)。第1次化疗后第0、10、20天分别取鼠尾静脉血测量雌激素水平。化疗22d后重复第1次化疗方法1次。于第2次化疗后第10、20及30天分别取鼠尾静脉血测量雌激素水平。结果腹腔内接种肿瘤细胞后B、C及D组裸鼠雌激素水平明显高于A组(P＜0.05),A与B组的雌激素水平相对稳定,C和D组雌激素水平在化疗后显著降低,但C组高于D组(P＜0.05),随着化疗后时间延长,C与D组裸鼠雌激素水平逐渐下降至A组水平(P＞0.05)。结论 顺铂化疗会损伤卵巢功能,腹腔化疗对卵巢皮质的损伤可能大于静脉化疗,随着化疗间隙期的延长卵巢功能可以得到恢复。     

复方中药(苦黄汤)对大鼠原位肝移植急性排斥反应的影响

目的观察复方中药(苦黄汤)对大鼠原位肝移植急性排斥反应(AR)的影响。方法建立Wistar-SD原位肝移植AR模型。将制备的80只大鼠模型按随机数字表法分为:生理盐水组(A组)、苦黄汤组(B组)、环孢素A组(C组)和苦黄汤+环孢素A组(D组),每组20只。各组受体大鼠术前第1天至术后30d分别灌胃给药(1次.d-1):A组仅给予生理盐水2mL.d-1,B组给予苦黄汤2mL.d-1,C组给予环孢素A 10mg.kg-1.d-1,D组给予苦黄汤1mL.d-1+环孢素A 5mg.kg-1.d-1。术后第7天,每组各处死10只大鼠,取腔静脉血检测丙氨酸转氨酶(AST)及天冬氨酸转氨酶(ALT)的值,光镜下观察肝脏组织病理改变。每组余下的大鼠进行生存期观察。结果其他各用药组与A组相比:大鼠术后的生存时间明显延长(P<0.05),以D组大鼠为最长;大鼠的AST及ALT的值明显下降(P<0.05),以D组最为明显;排斥反应指数明显降低(P<0.05),以D组最为显著。结论苦黄汤具有抑制大鼠原位肝移植AR的作用,且与环孢素A具有协同作用。     

细胞注射法及组织块移植法在构建异位妊娠动物模型比较

目的:比较滋养细胞悬液注射法与绒毛组织块移植法在异位妊娠动物模型中的可行性。方法:收集新鲜宫内妊娠绒毛标本30例,其中20例培养成滋养层细胞,并将传代细胞分别植入BALB/c裸鼠腹部皮下(A组)、腹壁下(B组)、宫角(C组);另外10例绒毛组织块分别植入裸鼠盆腔内(D组),每组6只。观察种植后第7天、第15天肿块大小的变化;第7天,各组随机选取2只成瘤裸鼠处死,解剖、切取瘤体,形态学检测并免疫组化检测;第15天处死全部裸鼠,解剖、切取瘤体,形态学检测并免疫组化检测。结果:第7天:(1)瘤体观察:A组有2只裸鼠未见瘤体形成;B组有1只未见瘤体形成;C组全部未见瘤体形成;D组全部见瘤体,组织块瘤体与机体部分融合。(2)形态学检测:A组:皮下囊肿,包膜完整,内部可见移植的细胞;B组:皮下可见移植的细胞;C组:未见种植细胞;D组:边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。(3)免疫组化:A组:CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;B组:CK18在滋养细胞胞浆中呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;C组:未见种植细胞;D组:CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。第15天:(1)瘤体观察:A组:有2只分别在第8天、第10天死亡,剩余2只,未见瘤体形成;B组:有1只在第8天死亡,剩余3只,有1只未见瘤体形成,另2只瘤体较前增大;C组:剩余4只,全部未见瘤体形成;D组:剩余4只,全部见瘤体,组织块瘤体增大明显;(2)形态学检测:A组:未见移植的细胞;B组:皮下可见移植的细胞;C组:未见种植细胞;D组:边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰;(3)免疫组化:A组:未见种植细胞;B组:CK18在滋养细胞胞浆中呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;C组:未见种植细胞;D组:CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。结论:细胞注射法难以建立可靠、稳定的异位妊娠动物模型;组织块移植法可以建立较可靠的动物模型。     

核素131I联合低频超声微泡治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的:探讨核素131I联合低频超声微泡治疗接种于新西兰大白兔肝左叶VX2肝肿瘤的疗效。方法:将成功建立肿瘤模型的32只荷瘤兔随机分为4组(8只.组-1):A组,不作任何处理;B组,使用单纯核素131I治疗;C组,使用单纯低频超声微泡治疗;D组,应用核素131I联合低频超声微泡连续治疗。在2周治疗期间连续进行B超检查,观察各组肿瘤生长及体积变化情况。核素治疗后第1、2、4、8、14天分别对B、D两组行单光子发射型电子计算机断层显像(SPECT),并计算不同时间肿瘤区放射性计数值。治疗2周后取部分肿瘤组织行病理学观察。结果:B、C、D 3组肿瘤体积及增长率均小于A组(P<0.05);B组放射性计数的衰减率明显高于D组(P<0.05);病理学检查发现B、C、D组坏死较A组严重,其中D组最明显。结论:核素131I联合低频超声微泡治疗时能够产生协同效应,明显提高疗效。     

外燥对小鼠血清与呼吸道液抗体的影响

目的 观察外燥对小鼠血清IgG(IgG-S)和呼吸道液IgG(IgG-R)的影响。方法 36只SPF级昆明小鼠 随机分为4组:常温常湿组(A组),常温燥组(B组),温燥组(C组),凉燥组(D组),每组9只。第7天与第14天用 ELISA检测各组IgG-S、IgG-R和胸腺与脾脏平均重量(mg)。结果 C组与D组第14天IgG-S(11．18±1.15,8．29 ±0．28)高于A组(6．80±1．06,P<0．01);C组第7天与第14天IgG-R均低于A组和D组(P<0．01),并且C组与第 14天脾脏平均重量高于其它三组(P<0．01);B组与D组第7天与第14天IgG-R高于A组(P<0．01)。结论 温燥 组IgG-S随时间延长呈代偿性增高,脾脏均重增加而IgG-R却明显降低,表明温燥致气道保护性屏障之一的IgG抗体 严重受损。     

多形拟杆菌对大鼠血糖的影响

目的 探讨多形拟杆菌对大鼠血糖的影响。方法 将46只SD大鼠按体质量的不同分为5组:普通饲料喂养组(A组,n=8)、高脂饲料喂养组(B组,n=8)、高脂饲料喂养+多形拟杆菌菌液灌喂组(C组,n=8)、糖尿病模型组(D组,n=10)和糖尿病模型+多形拟杆菌菌液灌喂组(E组,n=11)。A组采用普通饲料喂养,B、C、D和E 4组采用40%脂肪和胰岛素抵抗诱导模型饲料,每只大鼠25g·d-1饲料喂养。适应性喂养4周后,隔夜空腹12h,D、E2组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液35mg·kg-1;A、B和C 3组大鼠腹腔注射0.1mol·L-1柠檬酸钠缓冲液。A、B和C 3组大鼠均造模成功,D组死亡2只,E组死亡3只。实验第1天开始,C、E 2组大鼠采用多形拟杆菌菌液灌胃,连续7d;A、B和D 3组采用等量0.9%氯化钠注射液灌胃,连续7d。5组大鼠第0—12周采用电子秤称体质量1次。第0、4、8和12周,使用全自动生化仪、采用己糖激酶法检测5组大鼠空腹血糖(FPG)水平,采用ELISA法检测5组大鼠血清胰岛素水平,实时荧光定量PCR法测定5组大鼠肠道多形拟杆菌的数量。结果 与A、B 2组比较,C组大鼠第1—12周体质量均明显增加,D、E 2组大鼠第6—12周体质量均明显降低,C组大鼠第8、12周FPG水平均显著升高,D、E 2组大鼠第4、8和12周FPG水平均显著升高,C、D和E 3组大鼠第4、8和12周血清胰岛素水平均显著升高、肠道多形拟杆菌的数量均显著增多(P<0.05或P<0.01)。与C组比较,D、E 2组大鼠第1—12周体质量均明显降低,第4、8和12周FPG水平均显著升高、血清胰岛素水平均显著降低和肠道多形拟杆菌的数量均显著增多(P<0.05或P<0.01)。与D组比较,E组大鼠第6—12周体质量均明显增加,第4、8和12周FPG水平均显著升高、血清胰岛素水平均显著降低,第8、12周肠道多形拟杆菌的数量均显著增多(P<0.05或P<0.01)。肠道多形拟杆菌的数量与体质量、FPG水平均呈正相关(r=0.163、0.684,P<0.05或P<0.01),与血清胰岛素水平无相关性(r=-0.019,P>0.05)。结论 大鼠肠道多形拟杆菌不但能促进大鼠体质量增加,而且升高FPG。     

阿奇霉素对哮喘小鼠气道炎症和Th2细胞因子的影响

目的观察不同浓度阿奇霉素对哮喘小鼠气道炎症细胞和辅助性T细胞2(Th2)型细胞因子IL-4、IL-5的影响。方法BALB/c小鼠40只随机分为5组:A组(哮喘模型组,8只)、B组(小剂量阿奇霉素治疗组,8只)、C组(中剂量阿奇霉素治疗组,8只)、D组(大剂量阿奇霉素治疗组,8只)、E组(正常对照组,8只)。A、B、C、D组小鼠于第1、13天分别给予卵清蛋白(OVA)20μg和氢氧化铝1mg的混悬液腹腔注射致敏,于第21～30天每天给予雾化吸入2%OVA生理盐水溶液建立哮喘模型,第14～30天,A组每天激发前30min给予生理盐水0.2ml腹腔注射作为阳性对照组,B、C、D组每天激发前30min分别给予阿奇霉素50、100、150mg.kg-1.d-1腹腔注射,均为每天1次。E组以生理盐水代替OVA致敏和激发。所有动物于第31天处死,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),制备肺组织石蜡切片,用计数板检测BALF中炎症细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IL-4、IL-5水平。结果A、B、C、D组的BALF中炎症细胞总数、EOS数及IL-4、IL-5水平较E组明显增高,HE染色显示A、B、C、D组支气管黏膜周围有EOS、淋巴细胞等炎症细胞浸润,EOS分别与IL-4、IL-5呈显著正相关。阿奇霉素可明显降低哮喘小鼠的气道炎症和IL-4、IL-5水平。结论阿奇霉素具有明显抗哮喘气道炎症的作用,可通过抑制Th2反应,减轻慢性气道炎症。     

大鼠肾缺血对结石形成影响的超微结构观察

目的了解大鼠肾缺血情况下结石附着部位的超微结构,并探讨结石形成机制。方法雄性Wistar大鼠100只,随机分成4组,单纯成石剂组(A组)、单纯结扎组(B组)、成石剂并结扎组(C组)、对照组(D组),每组25只。A组口服7.5g/L的乙二醇溶液,B组口服普通饮水、用钛夹夹闭左肾动脉30min,C组口服7.5g/L的乙二醇溶液、用钛夹夹闭左肾动脉30min,D组口服普通饮水,各组大鼠均切除右肾。各组分别于实验第0天、2天、4天、1周、2周时取大鼠左肾(每次5只),电镜观察肾草酸钙结晶体附着部位和细胞形态改变。结果 B、D组各时间点均未出现草酸钙结晶体。A组第4天肾间质出现草酸钙结晶体,1周时肾小管上皮细胞内出现结晶体,2周时肾小管腔内出现结晶体;C组第2天肾间质出现结晶体,第4天时肾小管细胞内出现结晶体,1、2周时肾小管腔内出现结晶体。结晶体中心呈黑色,电子密度高,边缘呈环状透亮带,电子密度低。A、D组未出现细胞凋亡、坏死;B、C组第4天时出现细胞坏死,并随时间推移坏死细胞逐渐增多,坏死细胞胞核溶解,线粒体消失。结论草酸钙与肾缺血在结石形成过程中具有协同作用,草酸钙结石最初附着部位有可能为肾髓质间质。     

“心病”循“因”

患者女, 31岁,来自黑龙江,因心慌、胸闷、憋气半个月,来心内科门诊。进入诊室时,有两位 50多岁的妇女陪同,均面有愠色。当我请患者详说病史时,有一位妇女说:“挂了那么多科的号,看了那么多医生,做了那么多检查,吃了那么多药,什么事也不管。”从她那愤愤不平的态度中,我已感     

"一个目标"和"三个改进"--关于提高德育课教学效果的思考

德育课作为学校对学生进行德育的专设课程，有着不同于一般文化课程教学的特殊规律和方法．在教学内容已作系统规定的情况下，教学效果的好坏，往往取决于对这些规律和方法的运用。笔者以为，提高德育课的教学效果，应着力于树立“一个目标”和在“三个改进”上下功夫。     

从"两个凡是"到"两个突破"

从"两个凡是"到"两个突破",中国共产党把马克思主义基本原理同中国实际相结合,形成了邓小平理论、"三个代表"重要思想和科学发展观三大理论创新成果.三大理论创新成果都是解放思想、实事求是、与时俱进的结果.创新性是它们共同的真谛.应随着时代、形势和实践的发展,坚持思维方式、理论的创新和实践的创新,不断地把社会主义事业和马克思主义理论推向前进.     

“直”与“真”的思考

《小儿药证直诀》一书为我国现存第一部儿科专著,作者对书名中"直"怀有疑问,思考后提出三个假设。通过查阅文献得出结论,书名"真"因避讳制度改为"直"的可能性大。     

从“看病”到“管病”

经典理由 大医院总被冠以“集医、教、研、防为一体的综合性医院”的称谓。但在目前面临生存压力的大环境下,医院如何不丢弃“防”的功能,在慢病管理中有所作为,己成为医院彰显公益性的重要指标之一。