胎儿心脏连接蛋白43的表达

目的:研究胎儿心脏不同部位连接蛋白43(Cx43)的表达。方法：应用SP免疫组化方法和图像处理系统，分析和比较胎儿心脏不同腔室心肌细胞Cx43的表达。结果：(1)胎儿心脏Cx43的蛋白表达在心脏4个腔均有，呈斑点状遍布于整个心房肌和心室肌的细胞质内和细胞膜表面，少数位于闰盘处。(2)Cx43主要在心室肌表达，心房较少。左、右心房肌和房间隔之间及左、右心室肌和室间隔之间的分布相似。结论：胎儿心脏Cx43蛋白表达主要分布于心肌细胞质内和细胞表面。心室表达多于心房，这种差异可能与胎儿期心房和心室之间功能差异有关。     

实验性病毒性心肌炎时穿孔素和连接蛋白43表达的相关性

目的：探讨病毒性心肌炎时穿孔素和心肌细胞缝隙连接蛋白43表达的关系。方法：应用免疫组织化学EnVision法对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌组织中穿孔素、连接蛋白43的表达进行观察。结果：正常小鼠心肌中未见穿孔素阳性表达，连接蛋白43在心肌闰盘中呈阳性表达。心肌炎组织中部分浸润的炎细胞穿孔素呈阳性表达。在穿孔素阳性表达外，连接蛋白43表达明显减弱甚至阴性。结论：在病毒性心肌炎时穿孔素直接影响到连接蛋白43的正常表达，是引起连接蛋白43阴性表达及异常表达的主要因素之一。     

连接蛋白43在病理性瘢痕成纤维细胞中的表达

目的:探讨连接蛋白43(Cx43)及其构成的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)在病理性瘢痕中的调控作用.方法:选择临床上不同病理分类的瘢痕组织(包括瘢痕疙瘩、增生性瘢痕)和正常修复组织,以正常皮肤为对照,应用免疫组织化学检测Cx43在成纤维细胞中的表达.结果:Cx43在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达明显少于正常修复组织及正常皮肤.结论:成纤维细胞Cx43的表达下调可能是造成病理性瘢痕组织中成纤维细胞间GJIC异常,从而导致病理性瘢痕发生的因素之一.     

人神经胶质瘤组织中连接蛋白43的表达

目的　为了研究人神经胶质瘤发生中连接蛋白 43的作用。方法　本实验用免疫组化的方法 ,检测了 2 6例不同级别的脑瘤组织中连接蛋白 43的蛋白表达。结果　在正常脑组织星形胶质细胞和良性的脑质细胞瘤连接蛋白 43表达阳性反应 ,在恶性的脑胶质细胞瘤 ,连接蛋白 43明显减弱 ,呈弱性或阴性。结论　人脑胶质细胞肿瘤的发展及恶化程度与其连接蛋白 43蛋白表达有关 ;在癌的多阶段学说 (起始阶段、促癌变阶段、进展阶段 )中 ,连接蛋白 43表达的减少被认为是促瘤变阶段的重要机制。     

新生儿心肌连接蛋白43、45的表达

目的　研究新生儿心肌不同部位连接蛋白 4 3、4 5 (Cx4 3、Cx4 5 )表达的差异。方法　应用SP免疫组化方法 ,分析和比较 6例新生儿心不同腔室心肌细胞Cx4 3、Cx4 5的表达。结果　 1 新生儿心肌Cx4 3的蛋白表达在心四个腔均有表达 ,呈斑点状遍布于整个心房肌和心室肌的细胞质内和细胞膜表面 ,少数位于闰盘处 ;Cx4 3、主要在心室肌表达 ,心房较少 ;2 Cx4 3与Cx4 5的分布类似 ,但远少于Cx4 3。结论　Cx4 3主要分布于新生儿心肌细胞质内和细胞表面。心室表达多于心房 ,Cx4 5和Cx4 3分布相似 ,但不如Cx4 3丰富。     

连接蛋白43基础研究及其分子成像的研究进展

连接蛋白(Cx)是哺乳动物体内广泛存在的一种膜蛋白,在哺乳动物体内其分子质量介于26～56 ku。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)是哺乳动物体内表达最为广泛的连接蛋白,其在心血管疾病以及肿瘤的发生、发展中扮演着重要的角色。近年来,随着分子影像的快速发展,将Cx43作为分子成像靶点,可能成为心血管疾病以及肿瘤诊疗的一种全新手段。     

成人与新生儿心脏连接蛋白43表达差异

目的　探讨成人与新生儿心脏连接蛋白 4 3(Cx4 3)表达差异。　方法　应用SP免疫组织化学和图像分析方法 ,观测成人与新生儿心脏Cx4 3的蛋白表达。　结果　 1 新生儿心脏Cx4 3在心房和心室均呈斑点状遍布于心肌细胞侧面连接处和细胞质内 ,闰盘处极少。 2 成人Cx4 3表达在心房肌非均质分布于细胞侧面连接处和端闰盘处 ;心室肌典型地排列在闰盘处。 3 图像分析表明 ,心肌细胞Cx4 3分布密度 ,新生儿心房 <心室 ,成人心房 >心室。成人心房、心室均低于新生儿。　结论　新生儿Cx4 3主要分布于心肌细胞侧连接处 ,成人心房和心室存在差异。Cx4 3分布密度新生儿心房 <心室 ,成人心房 >心室 ;成人心脏低于新生儿。提示 ,Cx4 3有增龄变化。     

实验性病毒性心肌炎组织中连接蛋白43和结蛋白的表达

目的 了解病毒性心肌炎时心肌细胞连接蛋白４３和结蛋白表达情况,以探讨病毒性心肌炎时心律失常的机制。方法 应用免疫组织化学ＳＡＢＣ法,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞连接蛋白４３和结蛋白的表达进行了观察。结果 连接蛋白４３和结蛋白在正常小鼠心肌闰盘中定位分布,均匀存在,后者还在肌节横纹中显示阳性;病毒性心肌炎时两者的表达明显减弱甚至阴性。结论 病毒性心肌炎时受累的心肌细胞连接蛋白４３和结蛋白的表达受     

连接蛋白43在肺癌组织中表达及对E-cadherin的影响

目的探讨连接蛋白（Cx）43和E-cadherin蛋白在肺癌中表达及两者关联性,研究Cx43对E-cadherin表达的影响.方法采用免疫组织化学SP法检测85例原发性肺腺癌、鳞癌组织中Cx43和E-cadherin蛋白表达,分析两者的相关性;采用Cx43基因转染人肺巨细胞癌LH7细胞,分析转染Cx43后对E-cadherin蛋白表达以及对细胞生长速度和细胞周期的影响.结果Cx43和E-cadherin蛋白在癌旁肺组织中均呈膜阳性表达,而在肺癌组织中表达下降,其阳性率分别为50.6%和67.1%,且两者表达下降存在关联性.Cx43和E-cadherin蛋白的表达下降程度与肺癌的分化程度、P-TNM分期和淋巴结转移正相关.LH7细胞转染Cx43基因后,Cx43蛋白表达增加的同时,E-cadherin蛋白也表达升高,且两者均为胞质表达,未见明确的细胞膜表达;转染Cx43基因后细胞增殖速度减慢,与对照组相比,G1期细胞增多,而S、G2期细胞数目减少.结论Cx43和E-cadherin蛋白在肺癌组织中表达下降,且两者之间存在关联性,表达下降程度与临床病理参数相关;LH7细胞转染Cx43基因后,在出现胞质Cx43表达增加的同时,可诱导E-cadherin的胞质表达;Cx43可通过参与细胞周期调节抑制细胞生长速度.     

成人心脏传导系统中连接蛋白43的表达

目的 探讨成人心脏及传导系统窦房结,房室结,浦肯野纤维中连接蛋白43(CX43)的表达情况。方法 免疫组织化学SABC法。结果 CX43在窦房结及房室结周围细胞膜呈散在、少量表达,在浦肯野细胞膜可见线性、细长阳性颗粒,在心房及心室肌阳性颗粒主要位于端端相连部位的闰盘处。结论 CX43在传导系统的表达与心脏传导系统的电生理传导特性相符。     

Altered expression of connexin43 and phosphorylation connexin43 in glioma tumors

In this study, we aim to evaluate the connexin (Cx43) and phosphorylation Cx43 (p-Cx43) expression of human glioma tumors and correlate their expression with degrees of malignancy and proliferation, apoptosis, and migration activity of tumors. Cx43 and p-Cx43 expression were examined by Western blot analysis and immunohistochemical staining. The U251 cell viability was measured by MTT analysis. The apoptosis and migration were also evaluated by flow cytometric analysis and fluoroblok transwell chambers, respectively. We found that the Cx43 expression were significantly downregulated in in malignant glioma (WHO grade III and IV), compared to the malignant glioma (WHO grade I and II) and the p-Cx43 expression levels of malignant glioma (WHO grade III and IV) were significantly increased (P<0.05), compared to the malignant glioma (WHO grade I and II) at immunohistochemical analysis. After treatment of cells with a specific inhibitor of PKC, MAPK, and PTK inhibitors, the cell viability and migration were significantly decreased, while the apoptosis was slightly induced. In conclusion, the Cx43 expression level is inversely correlated with the tumor grade and proliferation and migration activity of tumor. Higher p-Cx43 expression level in high tumor grade suggests that a complex mechanism is involved in the suppression of tumor growth by connexins.     

通心络对心肌梗死大鼠心室缝隙连接蛋白43重构及室性心律失常的影响

目的:探讨通心络(TXL)对心肌梗死大鼠心室缝隙连接蛋白43(Cx43)重构及室性心律失常(VA)的影响。方法:雄性SD大鼠100只,随机分为假手术(sham)组(n=25)和手术组(n=75)。手术组动物结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型,假手术组只开胸不结扎。将手术后存活3 d的大鼠随机分为TXL治疗组(TXL组)和心肌梗死组(MI组)。TXL组给予TXL(2 g·kg-1·d-1)连续4周灌胃治疗,MI组和sham组则给予等体积生理盐水灌胃。药物干预结束后,采用酶联免疫吸附法检测梗死周边区心肌组织白细胞介素-1β(IL-1β)及内皮素-1(ET-1)的水平;免疫组化法检测Cx43的分布;Western blotting法检测Cx43表达;RT-PCR法检测Cx43 mRNA的表达;采用Burst刺激诱发VA。结果:与sham组相比,MI组梗死周边心肌的IL-1β和ET-1水平均显著升高,而Cx43的mRNA及蛋白表达均显著降低,Cx43分布无规律性且侧面化分布增多,VA诱发率也明显升高(P0.05);与MI组相比,TXL组梗死周边心肌IL-1β和ET-1水平明显降低,Cx43的mRNA及蛋白表达均显著增加,Cx43部分呈线性分布于心肌细胞闰盘处,VA诱发率也明显降低(P0.05)。结论:TXL可降低心肌梗死大鼠VA的发生率,其机制可能与TXL抑制心肌梗死后Cx43重构有关。     

急性心肌缺血时连接蛋白43降解对传导速度影响的研究

目的：探讨急性短时间缺血时心肌细胞连接蛋白43(Cx43)的降解对缺血心肌电传导速度的影响。方法：16只犬随机分为正常对照组(n=4)和缺血组(n=12), 缺血组结扎冠状动脉1h造成急性心肌缺血, 测定缺血区心肌电传导速度, 应用激光共聚焦显微镜技术和荧光免疫组织化学方法对缺血心肌Cx43含量进行定量检测。结果：(1)急性心肌缺血时Cx43迅速降解, 心肌电传导速度明显下降；(2)缺血区各局部传导速度与该部位Cx43像素密度呈明显正相关；(3)出现持久传导阻滞的区域其Cx43降解程度均大于50%。结论： 急性短时间(1 h)缺血时Cx43的降解已经开始对心肌传导速度产生明显的影响, 而局部心肌Cx43的严重降解将导致该区域出现持久传导阻滞。     

miR-301a-3p对大鼠星形胶质细胞Cx43转录后的靶向调控作用

目的:研究大鼠星形胶质细胞中微小RNA-301a-3p(miR-301a-3p)对缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的靶向调控作用及其作用位点。方法:合成miR-301a-3p agomir和miR-301a-3p antagomir,转染至星形胶质细胞,Western blot检测各组细胞中Cx43蛋白的表达情况;构建重组载体wt-pEZX-MT05-Cx43和mut-pEZX-MT05-Cx43,采用双萤光素酶报告基因实验验证miR-301a-3p的靶基因;构建表达载体pcDNA3.1-Cx43,通过回复实验分析miR-301a-3p对细胞凋亡的影响。结果:将miR-301a-3p agomir转染到星形胶质细胞后,Western blot检测显示,与对照组相比,Cx43蛋白表达显著降低(P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验结果表明,miR-301a-3p能够与Cx43的3′-UTR结合,对其表达产生负调控;将不含Cx43 3′-UTR的重组载体pcDNA3.1-Cx43转染星形胶质细胞后,能够回复miR-301a-3p对Cx43蛋白表达的负调控作用,引起细胞凋亡。结论:Cx...     

脂联素对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43表达的影响

目的: 观察脂联素(APN)对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,进一步探讨其抗心律失常的可能机制。方法: 将48只雄性Wistar大鼠随机分成:(1)假手术 (SM)组;(2)缺血再灌注(I/R)组:结扎冠状动脉左前降支,30 min后松开结扎线,再灌注120 min;(3)脂联素+缺血再灌注组1(I/R+APN1):先阻断血流30 min,于再灌注120 min开始时给予3.5 μg/kg APN;(4)脂联素+缺血再灌注组2(I/R+APN2):缺血前10 min给予3.5 μg/kg APN,余同I/R组。观察各组心律失常的发生情况;应用RT-PCR观察各组心室肌细胞 Cx43 基因表达;用免疫组织化学方法观察Cx43分布的变化;应用硫代巴比妥酸(TBA)法和黄嘌呤氧化酶法测各组动物血清中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;用RT-PCR及Western blotting法分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及蛋白的表达,用电镜观察各组心室肌超微结构的改变。结果: (1)I/R组与SM组比较,心律失常评分和血清MDA含量显著增高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01);心室肌Cx43表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),Cx43分布紊乱,失去正常的规律性;心肌细胞超微结构有明显损伤;心室肌eNOS mRNA及蛋白的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)无论缺血前还是缺血后使用脂联素处理,与I/R组相比,心律失常评分显著降低(P<0.01);Cx43及eNOS表达增高(P<0.01),Cx43分布紊乱的程度减轻;心肌细胞超微结构损伤明显改善。结论: APN可能通过氧化应激调节Cx43的功能,从而发挥抗缺血/再灌注心律失常的作用。     

Cx43基因干扰对鼠胎肝干细胞培养的优化效应

背景：胎肝干细胞具有分化成肝细胞、胆管细胞的潜能,参与肝脏的修复与重建,是肝细胞的重要来源,但是人体的胎肝干细胞含量极少,如何获取一定数量和较高纯度的胎肝干细胞是目前研究的热点。目的：构建能有效抑制大鼠胎肝干细胞Cx43基因表达的siRNA载体,探讨抑制 Cx43表达对体外培养的鼠胎肝干细胞增殖及细胞周期的影响。方法：体外培养鼠胎肝干细胞,设计及合成靶向Cx43的siRNA序列(Cx43-siRNA)以及阴性对照序列(NC-siRNA),采用电转法转染大鼠胎肝干细胞,即为实验组和对照组,未转染的胎肝干细胞为空白组。应用real-time PCR和Western blot法检测转染前后鼠胎肝干细胞Cx43基因和蛋白的表达;细胞生长曲线、CCK-8法观察细胞生长增殖情况;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果与结论：转染Cx43-siRNA后,实验组与对照组、空白组相比Cx43基因和蛋白水平表达均明显降低,细胞的生长速度明显增快,G₀/G₁期细胞减少,S期细胞数增多,差异有显著性意义(P < 0.05),结果表明通过电转法转染靶向Cx43的siRNA能促进体外培养的鼠胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：