磷脂类对大白鼠甲状腺的作用——组织学和组织化学观察

磷脂是细胞的主要组成成分之一。在细胞膜、细胞核、线粒体、高尔基体及微粒体中,磷脂的含量都相当多。我国马文昭早就注意到磷脂类在细胞基本结构中的重要性,并发现动物持续服磷脂,可以防止吗啡中毒所引起的各器官细胞基本结构的过度消耗。此后,该氏及其它作者的一系列研究表明;施磷脂于正常机体,     

锌、汞对大鼠肝微粒体、线粒体脂质过氧化作用的影响

脂质过氧化物(LPO)是自由基引发不饱和脂肪酸的过氧化链式反应产物,微粒体及线粒体的膜磷脂中含有大量不饱和脂肪酸,易受脂质过氧化作用的损伤。本文从亚细胞水平探讨给锌、汞后大鼠肝微粒体、线粒体LPO含量的变化。1 材料和方法1.1 动物:体重 250～300g Wistar雄性大鼠20只,随机分为4组:对照组(皮下注射0.9％氯化钠溶液1ml/d×5);锌组(皮下注射醋酸锌0.75mmol/kg·d×5);汞组(皮下     

质膜制备技术近况(综述)

细胞是生物体的基本结构和功能单位。所有细胞都有细胞膜(常称质膜)。真核细胞除质膜外还存在着细胞内膜系统构成的各种亚细胞结构、如线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体、过氧化酶体和核膜等,这些膜结构(包括质膜)统称为生物膜。原核细胞没有线粒体、内质网、核膜,唯一的膜结构是质     

参附注射液对病毒性心肌炎小鼠心肌能量代谢的保护作用

目的 探讨参附注射液对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌能量代谢的保护作用.方法 将雄性Balb/c小鼠随机分为柯萨奇B3病毒(CVB3)感染组、CVB3感染加参附注射液治疗组和对照组.分别采用电镜和形态计量学方法观察心肌线粒体形态、数量和膜磷脂定位;酶细胞化学法分析线粒体细胞色素C氧化酶(CCO)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性.结果 感染组小鼠心肌线粒体大量破坏,膜磷脂严重缺失、定位改变;CCO和SDH活性降低.各时间点治疗组上述各项指标均较感染组显著改善.结论 VMC心肌线粒体结构严重破坏、功能明显下降,参附注射液能有效保护VMC心肌线粒体结构和功能,改善心肌能量代谢.     

线粒体和微粒体谷胱甘肽S-转移酶在大鼠肝脏癌前病变组织中的变化

本文报道在大鼠肝脏化学致癌过程中癌前病变组织的细胞浆、微粒体、线粒体及核膜等亚细胞组分内谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的变化。在大鼠肝脏癌前病变组织中,胞浆、线粒体及微粒体内,以1,2-二氯-4-硝基苯(1,2-dichloro4-nitrobenzene,DCNB)为底物的A-C组GST活性以及以1-氯-2,4-二硝基苯(1-chlo-ro-24-dinitroben-zene,CDNB)为底物的B组GST活性均显著增高然而在核膜中上述的两种分子形式的GST活性,均无明显变化。实验结果表明,GST不仅存在于胞浆中,而且在线粒体、微粒体及核膜中也固有。把二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)腹腔注射后给予2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluoren,FAA)并进行肝脏部分切除,以此制造大鼠肝脏癌前病变,这时组织中不仅是胞浆中的GST活性明显升高,而且微粒体和线粒体GST也有显著升高。因此,作者认为微粒体及线粒体GST也可做为肝脏肿瘤标志酶。     

心磷脂与氧化应激及胰岛B细胞凋亡

糖尿病的一个重要特征是B细胞量进行性减少,这种改变与B细胞凋亡密切相关[1]。心磷脂(CL)是构成线粒体内膜的主要磷脂之一。目前研究认为其在线粒体氧化应激、启动细胞凋亡信号通路中发挥作用,本文就其与氧化应激及B细胞凋亡的研究进展综述如下。1 CL概述CL即双磷脂酰甘油,是由     

没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体功能的影响

目的观察没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体功能的影响作用。方法结扎大鼠冠状动脉30 min再灌注20 min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+.Mg2+—ATP酶、Ca2+—ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶((GSH—PX)活性及细胞色素、磷脂和丙二醛含量。结果没食子酸丙酯(20和40 mg/kg,结扎冠状动脉前60 min ip)能显著减轻缺血再灌注所致琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+.Mg2+-ATP酶、Ca2+—ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶活性的抑制(P<0.05)及细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量的减少,并能抑制丙二醛含量的升高。结论没食子酸丙酯对缺血再灌注时心肌线粒体功能具有保护作用,其机制可能是通过提高对氧自由基的清除功能和抑制脂质过氧化。     

应用定量分析法与图像观察法对光敏剂细胞内分布的对比研究

目的 探讨定量分析法在光敏剂亚细胞定位研究中的应用特点,并与图像观察法进行比较. 方法 传代培养A549肺癌细胞,分别与光敏剂血卟啉单甲醚孵共同孵育2,12,24 h.选择四种特异性细胞器荧光探针Rhodamine-123、Lucifer yellow、DiOC6(3)和BODIPY分别标记细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体,倒置荧光显微镜和致冷CCD探测HMME和探针荧光图像.观察细胞中光敏剂和荧光探针各自的荧光图像并分析光敏剂在细胞中的分布特点.定量计算探针荧光高强度区域与细胞区域内的HMME荧光均量比IB/IA. 结果 图像观察法显示,孵育2,12,24 h,细胞内HMME几乎不进入细胞核,而主要弥散分布于细胞质及各细胞器.定量结果显示: A549肺癌细胞内,2 h时IB/IA由高到低为:高尔基体、溶酶体、线粒体、内质网;12 h时IB/IA由高到低为:高尔基体、溶酶体、内质网、线粒体;24 h时IB/IA由高到低为:高尔基体、内质网、溶酶体、线粒体;高尔基体组IB/IA随时间上升. 结论 应用定量分析法较图像观察法更可以准确反映出HMME在细胞内分布随着孵育时间变化的特点.     

Ⅱ.五氧化二钒对膜脂流动性的影响

本文采用DPH荧光偏振技术研究了五氧化二钒(V_2O_5)对大鼠肾皮质线粒体和微粒体膜脂流动性的影响。结果表明,V_2O_5在体外能降低线粒体和微粒体膜脂流动性,但在体内主要作用于微粒体。醋酸锌和EDTA在体外对 V_2O_5的这种作用有拮抗作用。作者讨论了膜脂流动性降低与脂质过氧化的关系及其意义。     

活性氧与线粒体损伤

活性氧(reactive oxygen species,ROS)是细胞代谢不可避免的产物。细胞内高水平的ROS直接或间接地参与细胞信号传导,诱导细胞凋亡,是肿瘤及许多其它疾病的共同发病机制。线粒体是细胞能量生成的重要细胞器,也是广受关注的细胞调节氧化应激的中枢。但ROS与线粒体损伤之间的关系,至今尚未完全清楚。近年来的研究表明,线粒体是ROS产生的主要场所,又是ROS作用最敏感的部位。ROS通过氧化线粒体心磷脂、线粒体DNA和线粒体重要的蛋白质对线粒体造成氧化损伤,进而诱导细胞凋亡。     

没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护

目的观察没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护。方法结扎大鼠冠状动30min再灌注20min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+·Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及细胞色素、磷脂和丙二醛含量。结果没食子酸丙酯(20和40mg/kg,结扎冠状动脉前60minip)能显著减轻缺血再灌注所致琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+·Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷光甘肽过氧化物酶活性的抑制(P<0.05),及细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量的减少,并能抑制丙二醛含量的升高。结论没食子酸丙酯对缺血再灌注时心肌线粒体功能具有保护作用,其机制可能是通过提高对氧自由基的清除功能和抑制脂质过氧化。     

生物膜过氧化氢的生成及其在克山病病因研究中的意义

过氧化氢(H_2O_2)能在各种生物体内内质网微粒体、线粒体、过氧化体、质膜等细胞器生物膜系统生成。组织中H_2O_2的产量一般只占细胞耗氧量的1～2％,以肝中产量为最高,如大鼠肝全部耗氧的近10％可用于H_2O_2生成,其中主要产于微粒体(45％)、过氧化体(35％)、线粒体(15％)和胞浆(5％)。同时组织中有高活力的H_2O_2清除系统(如过氧化氢酶和过氧化物酶类等),通常可边产生边迅速消除。细胞H_2O_2的生成是好多膜性和溶性     

五氧化二钒对大鼠肾脏毒性的机理探讨 Ⅰ.五氧化二钒诱导的脂质过氧化

本文用硫代巴比妥酸(TBA)法和荧光法研究了五氧化二钒(V_2O_5)对大鼠肾脏的脂质过氧化作用。结果表明,V_2O_5经体内和在体外给予均能诱导大鼠肾皮质细胞生物膜的脂质过氧化,体外接触后的过氧化部位主要在线粒体膜和微粒体膜,体内染毒后则主要限于微粒体膜。醋酸锌和 EDTA 在体外实验中均能抑制 V_2O_5所诱导的脂质过氧化。     

肺表面活性蛋白A在肺部疾病中的研究进展

肺表面活性物质是覆盖于肺泡上皮内侧的脂质一蛋白混合物,由Ⅱ型肺泡细胞合成和分泌,起减少肺泡张力、稳定肺泡形态的作用。二棕榈酰磷脂酰胆碱(dipalmitoylphosphatidylcholine,DPPC)被认为是组成肺表面活性物质最主要的脂质成分,其磷脂含量高达90%,在肺泡表面形成一个气-液面。而发挥连接这些脂质以降低肺气-液面张力、维持肺表面活性物质更新和内稳态等作用的便是肺表面活性蛋白(surfactant protein,SP)。目前     

过氧化氢诱导人唾液腺导管细胞凋亡的体外研究

目的探讨氧化剂对SV-40转染的人类唾液腺导管细胞(NS-SV-DC)的诱导凋亡作用及其可能机制。方法应用流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸的外露,蛋白印迹检测半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达及细胞色素C从线粒体内的释放。结果NS-SV-DC经0.4 mmol/L过氧化氢(H2O2)孵育后,磷脂酰丝氨酸由细胞膜内释放到膜外,细胞色素C在细胞浆中显著增加;caspase-3和PARP被剪切。结论H2O2可在0.20~.8 mmol/L浓度范围内诱导唾液腺导管细胞的凋亡,其凋亡的发生机制与线粒体介导的信号转导路径相关。     

胎儿脏器亚细胞组分中谷胱甘肽S-转移酶活性分布

用差速离心法对胎龄4～7个月水囊引产胎儿的肝、肺、肾、心脏、脾、脑和胃组织的胞浆、线粒体和微粒体进行了分离,并以1.2-二氯-4-硝基苯(CDNB)为底物,测定了上述脏器亚细胞组分中谷胱甘肤S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)的活性。结果显示,在上述脏器亚细胞组分中,GST活性主要分布在胞浆,在微粒体和线粒体中亦有分布。以每克湿组织所含GST活性大小顺序排列上述各脏器,依次为脾、心、脑、胃和肝、肾、肺。     

过氧化氢诱导人唾液腺导管细胞凋亡的体外研究

目的 探讨氧化剂对SV-40转染的人类唾液腺导管细胞(NS-SV-DC) 的诱导凋亡作用及其可能机制.方法 应用流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸的外露,蛋白印迹检测半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达及细胞色素C从线粒体内的释放.结果 NS-SV-DC经0.4 mmol/L 过氧化氢(H 2O2)孵育后, 磷脂酰丝氨酸由细胞膜内释放到膜外,细胞色素C在细胞浆中显著增加;caspase-3和PARP被剪切.结论 H2O2可在0.2 ～ 0.8 mmol/L浓度范围内诱导唾液腺导管细胞的凋亡,其凋亡的发生机制与线粒体介导的信号转导路径相关.     

大鼠牙髓组织中甲硫氨酸脑啡肽合成位点及其调控的实验研究

目的:探讨大鼠牙髓组织甲硫氨酸脑啡肽(MEK)的细胞内生物合成位点及其调控机制.方法:①将健康雄性大鼠随机分成四组:对照组,牙髓炎组,FOY-305注射组和牙髓炎加FOY-305注射组,分别测定各组牙髓组织中MEK值.②采用分次离心法分离各亚细胞成分:胞核,线粒体,溶酶体,微粒体和上清液,对比经胰蛋白酶处理前后大鼠牙髓细胞各亚细胞成分中MEK含量的变化情况.结果:①炎性牙髓组织中MEK含量较正常牙髓组织有显著性升高,FOY-305可显著抑制炎症反应引起的MEK含量的升高,而对正常牙髓无明显抑制作用.②经胰蛋白酶处理后,牙髓组织的上清液、胞核、微粒体的MEK样肽含量显著增加,表明这些部分富含前体.结论:在炎性刺激下,胰蛋白酶参与牙髓中MEK的生成.而微粒体部分可能是IdEK前体蛋白分布的合理位点.     

大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量分布

对大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量进行了测定．结果，在大鼠血浆、腓肠肌和肝脏三者中，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛含量由高至低的顺序依次为肝脏、肌肉、血浆，均有显著性差异；在肌肉和肝脏亚细胞组分中超氧化物歧化酶则以胞浆中活性为最，线粒体次之，微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶活性最低．肝脏胞浆中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于线粒体中的活性．谷胱甘肽过氧化物酶在微粒体中的活性极低或无法测出．丙二醛含量在肝脏中的含量最高，肌肉中含量次之，最后为血浆．丙二醛含量在肝脏中的顺序依次为线粒体、微粒体和胞浆．在肌肉中丙二醛含量顺序为胞浆、微粒体和线粒体．     

参附注射液对腹腔感染脓毒症小鼠心肌能量代谢的保护作用研究

目的:观察腹腔感染脓毒症小鼠心肌能最代谢情况,用参附注射液进行干预治疗,探讨参附注射液对其能量代谢的保护作用.方法:采用肓肠结扎穿孔法(Cecal ligation and puncture,CLP)复制腹腔感染脓毒症动物模型.83只小鼠随机分为CLP组(感染组)、CLP加参附注射液治疗组(治疗组)和假CLP组(对照组).于造模后6h、12 h及24h分别采用电镜和形态计量学方法观察心肌线粒体形态、数量和膜磷脂定位;酶细胞化学法分析线粒体细胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase,CCO)和琥珀酸脱氢酶(Succinate dehydrogenase,SDH)活性,反相高效液相色谱法测定心肌组织ATP、ADP和AMP含量.结果:感染组小鼠心肌线粒体大最破坏,膜磷脂严重缺失、定位改变;CCO和SDH活性降低,ATP、ADP和AMP含量下降.各时间点治疗组上述各项指标均较感染组显著改善.结论:脓毒症小鼠心肌线粒体结构严重破坏、功能明显下降,参附注射液能有效保护脓毒症小鼠心肌线粒体结构和功能,改善心肌能量代谢.