3种不同途径移植骨髓间充质干细胞治疗肝硬化模型大鼠的效果比较

目的探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不同途径移植对肝硬化模型大鼠的效果差别。方法用四氯化碳液体橄榄油混合液皮下注射和酒精喂养的方法建立肝硬化大鼠模型,将肝硬化模型随机分为肝硬化未移植组(n=8)、门静脉移植组(n=8)、肝动脉移植组(n=8)、尾静脉移植组(n=8)。取健康SD大鼠骨髓,利用全骨髓贴壁的方法原代培养骨髓MSCs,利用CM-DiI标记间充质干细胞,然后通过3种途径分别进行移植。术后4周检测血清白蛋白、转氨酶、胆红素、Ⅳ型胶原;激光共聚焦显微镜观察干细胞在肝脏的分布及数量;HE和Masson染色观察肝硬化程度。结果通过3种途径移植MSCs到肝硬化模型大鼠体内,4周后发现移植组模型大鼠的肝功能均得到明显改善,血清白蛋白较肝硬化未移植组显著升高(P<0.05),转氨酶、胆红素较肝硬化未移植组显著降低(P<0.05),肝纤维化程度较肝硬化未移植组显著减轻(P<0.05)。3种途径移植MSCs对大鼠肝硬化的治疗效果无统计学差异(P>0.05)。结论骨髓MSCs移植肝硬化模型大鼠,移植后4周肝功能改善,肝纤维化程度降低,3种移植方法治疗效果相似。     

人羊水干细胞移植改善肝硬化大鼠的肝纤维化

目的研究人羊水干细胞（hAFSC）移植对CCl4诱导性肝硬化大鼠的改善。方法使用贴壁法分离培养羊水干细胞,Western blot法鉴定。Wistar大鼠24只随机分为对照组（n=8）和肝硬化组（n=16）,肝硬化组采用60%的CCl4植物油皮下注射7周,制造肝硬化模型,再随机分成肝硬化模型对照组（注射等体积PBS,n=8）、hAFSC移植组（n=8）。直接经肝内注射hAFSC,3周后处死所有大鼠,肝组织石蜡切片进行病理学分析。结果分离的羊水干细胞均表达特异性标记物Oct-4、SSEA-4。与大鼠肝硬化模型组比较。肝硬化程度明显减轻,假小叶附近脂肪化细胞和肝组织中胶原纤维的量明显减少。结论 hAFSC肝内移植可减轻大鼠肝硬化病变程度。     

不同途径移植大鼠骨髓间充质干细胞对大鼠肝硬化的作用研究

目的探索不同途径移植绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记的大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs）在慢性肝纤维化中的作用,以及移植后细胞在肝脏组织内的存活、分布情况。方法全骨髓差速贴壁法分离、培养BMSCs,利用携带GFP基因的慢病毒载体感染P3代BMSCs,建立四氯化碳慢性肝纤维化大鼠模型,通过不同途径移植GFP标记的BMSCs,移植后维持四氯化碳肝损伤,1月后处死大鼠,行肝脏功能相关指标白蛋白（albumin,ALB）、谷丙转氨酶（alaninotransferase,ALT）和谷草转氨酶（aspartate aminotrans-ferase,AST）检测,观察肝脏局部组织标本苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）、胶原纤维染色和荧光分布情况。结果不同途径BMSCs移植对大鼠四氯化碳所致慢性肝纤维化肝脏功能无明显改善,移植后GFP标记的BM-SCs均可向损伤肝脏迁移或停留,不同途径移植的BMSCs在肝脏内分布不同。结论大鼠骨髓间充质干细胞移植对大鼠慢性肝纤维化无明显治疗作用,可能参与了肝纤维化的形成。     

大鼠骨髓间充质干细胞移植后肝内定居的实验研究

目的探索大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)同种异体移植后在受体大鼠模型肝内定居分布情况。方法利用密度梯度离心法分离、纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞。取第三代MSCs经CFSE标记后从门静脉植入同种异体正常组和肝损伤组大鼠体内,于移植后的第14d取出的肝脏,通过冰冻切片行荧光检测,研究MSCs在大鼠肝脏内定居分布情况。结果经门静脉移植的MSCs在正常组和肝损伤组的肝脏内均能定居,且定居的细胞数量上肝损伤组明显多于正常组。结论经门静脉移植的MSCs可以定居于肝脏内,且定于肝脏的干细胞数量与肝脏是否损伤密切相关。     

不同时期骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用,并探索最佳移植时期。方法应用贴壁培养法分离SD大鼠MSCs,分别于肝硬化造模第6周,10周经尾静脉注射1×106MSCs。在移植4周后,评价移植组与对照组的生存状态,行肝功能检测(ALB,ALT,TBIL),肝脏HE染色。结果MSCs经尾静脉移植入肝硬化大鼠后,大鼠肝功能均明显改善,与对照组相比有统计学意义(P0.05),其中6周移植组较10周移植组效果更佳。结论MSCs移植可以改善大鼠外周血液的血生化特性和肝的组织学结构,且在肝纤维化早期进行移植效果更优。     

脂肪间质干细胞移植对肝硬化大鼠的实验研究

目的:研究脂肪间质干细胞经门静脉及尾静脉移植入肝硬化大鼠后的治疗效果. 方法:选取45只Wister大鼠,采用随机对照方法将Wister大鼠分为对照组、门静脉移植组及尾静脉移植组.3组先用相同方法制造肝硬化模型,随后,门脉移植组及尾静脉移植组分别从门静脉和尾静脉注射2mL细胞数量为2×106 个脂肪间质干细胞悬液,对照组注入2mL细胞培养液,6周后观察三组大鼠治疗效果. 结果:门静脉组大鼠肝脏边缘变钝,表明纹理变粗,大鼠肝脏形态改变程度较轻;对照组及尾静脉组大鼠肝脏质地则比较生硬,肝脏萎缩,颜色暗淡,出现不同成度的肝硬化;三组治疗前 AST、ALT、ALB及总胆红素( TBIL)指标差异不显著( P>0.05);门静脉组大鼠AST、ALT、总胆红素( TBIL)指标显著低于对照组和尾静脉组( P<0.05);ALB显著高于对照组和尾静脉组( P<0.05);对照组肝脏在显微镜下显示:肝脏出现不同程度的变性、坏死,肝细胞脂肪变性占小叶比例2/3以上;尾静脉组肝脏出现纤维化,且细胞数少于对照组;门脉组大鼠肝脏纤维化程度最轻,光镜下甚至能够看见正常肝脏细胞. 结论:脂肪间质干细胞便于获取,易于分离、培养,且容易与外源基因导入和表达,属于进行干细胞移植治疗肝硬化的新型种子细胞. 其经门静脉及尾静脉移植,能够有效的改善肝硬化大鼠的肝功能并改善肝纤维化及肝硬化程度,具有重要的研究价值.     

同种异体骨髓间质干细胞移植在大鼠肝内定居能力初步研究

目的探索绿色荧光蛋白标记的大鼠骨髓间质干细胞（MSCs）经不同途径移植到同种异体大鼠后其定居于肝脏的能力。方法从大鼠骨髓中分离培养获取MSCs，以绿色荧光蛋白进行标记，体外扩增后，分别从大鼠尾静脉和门静脉注入同种异体正常和肝脏损伤大鼠体内，于移植后的第3、7天通过荧光定量PCR检测移植的MSCs在大鼠肝内的表达情况。结果所有大鼠移植同源异体MSCs后全部存活，无意外死亡。从门静脉、尾静脉注入MSCs，在大鼠肝脏受损时其定居量大于非肝脏受损大鼠（P〈0．05）。在肝细胞受损大鼠，从门静脉注入MSCs与从尾静脉注入比较肝脏定居量差异不显著（P〉0．05）。非肝脏受损大鼠，从门静脉注入MSCs与从尾静脉注入比较细胞定居于肝脏量差异显著（P〈0．05）．并与移植后时间有关。结论干细胞定居于肝脏的时间与细胞数量可能与肝脏是否受损伤关系密切．与移植途径关系不密切；在正常动物干细胞可定居于肝脏，定植的细胞量与移植途径和移植后时间有关。     

不同途径肝细胞移植对肝硬化大鼠模型肝脏血流灌注的影响

【目的】 采用CT灌注成像的方法评价不同途径移植肝细胞对肝硬化大鼠模型肝脏血流灌注的影响,进而筛选出针对肝硬化大鼠模型安全,有效的细胞移植途径。【方法】 50只经证实成模的肝硬化大鼠模型随机分为5组,前4组分别自肝动脉、门静脉、脾动脉及尾静脉移植肝细胞悬液2 mL(细胞数量2 × 106),对照组不干预,各组大鼠在细胞移植前1周及移植后第4、8周行CT灌注扫描,计算肝动脉灌注量(HAP)、门静脉灌注量(PVP)、总肝灌注量(THBP)等参数,死亡大鼠或第8周后处死大鼠取肝脏、肺行病理切片检查。【结果】 移植后4周,G1组、G2组与G3、G4、G5组间HAP水平有显著性差异(P < 0.05);移植后第8周5组间HAP没有显著性差异(P > 0.05),移植后4、8周,G1组、G2组与G3、G4、G5组间PVP水平差异没有统计学意义(P > 0.05)。5组大鼠肝纤维化均未见明显改善,肝假小叶未见明显改建。【结论】 不同途径肝细胞移植虽不能有效地改善肝脏的血流灌注,但肝动脉、门静脉及尾静脉途径移植大鼠有较高的病死率,而经脾动脉途径移植相对较为安全。     

不同途径移植大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠肝硬化的治疗作用

目的探讨BMSCs移植治疗肝硬化的最佳移植途径。方法1.取6周龄健康SD雌性大鼠股骨骨髓,以密度梯度离心和贴壁法分离纯化BMSCs。2.体重250~300g雌性SD大鼠60只,CCl4联合酒精制做肝硬化模型。3.取模型大鼠50只随机分为对照组,尾静脉移植组,肝脏移植组,脾脏移植组,门静脉移植组,每组10只。各实验组均移植DAPI标记的BMSCs。4.3周后比较各组大鼠肝功能。结果实验各组大鼠肝功能均明显改善,其中肝脏局部移植组效果优于其他各组,其他各组之间差异无统计学意义。结论通过肝脏局部移植BMSCs治疗肝硬化比经外周静脉、门静脉、脾脏更有优势。     

骨髓间充质干细胞移植抗大鼠肝纤维化的作用及机制

目的：探讨骨髓间充质干细胞（ MSCs ）移植对大鼠肝纤维化模型的作用与机制。方法分离大鼠MSCs培养传代至第4代。采用大鼠腹腔注射四氯化碳制造肝纤维模型。将造模成功SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只：（1）对照组：鼠尾静脉注射等量的生理盐水;（2） MSCs 组：鼠尾静脉注射MSCs 悬液;（3）诱导组：鼠尾静脉注射经肝细胞生长因子（HGF）诱导14 d后的MSCs悬液。于移植后第1周、2周、3周、4周分别处死大鼠5只,检测大鼠血清透明质酸（ HA）、层黏蛋白（ LN）、Ⅳ型胶原水平;光镜下观察肝组织纤维化程度;分别用PCR法及Western检测大鼠肝脏Col-Ⅰ、RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA基因及其蛋白质表达水平。结果（1）诱导组与MSCs组的纤维化程度评分随着时间延长逐渐下降,且在第4周诱导组评分明显低于MSCs组（ P＜0．05）。（2）移植3周后各组血清HA、LN、Ⅳ型胶原含量均显著下降,4周时诱导组和MSCs组各指标含量明显低于对照组,并且诱导组低于MSCs组（ P＜0．05）。（3） MSCs移植后诱导组、MSCs组大鼠肝脏组织Col-Ⅰ、RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA和蛋白表达均随时间延长而下降,移植4周时诱导组各项指标明显低于MSCs组和对照组（ P＜0．05）。结论 MSCs移植可抑制肝纤维化大鼠肝组织中HA、LN、Ⅳ型胶原的分泌,并可下调肝纤维化大鼠肝组织Rho信号通路相关因子RhoA,Cdc42,Rac1 mRNA及蛋白表达。 HGF诱导MSCs后抗大鼠肝纤维化作用显著增强。     

共聚酯PEIT-PEG结晶性能的研究

PET与PEG共聚可改善PET的抗静电性，但PEG含量的增加，会使共聚物的结晶温度大幅度地降低，不利于纤维加工，且伴随着结晶的发生，纤维的抗静电性也受到影响。在共聚体系中添加间苯二甲酸(IPA)，不仅能破坏大分子链结构的规整性、降低共聚酯的结晶性，而且能提高共聚酯纤雏的抗静电性能。用DSC与TG对共聚酯(PEIT-PEG)的聚集态结构、热性能、结晶性能等进行了表征。     

白黎芦醇和维生素E的快原子轰击质谱的比较研究

目的：考察浓度、轰击时间两个外部因素对FAB-MS谱的产生及其相对强度的影响。方法：以常用药物白黎芦醇（BLLC）和维生素E（VE）为研究对象,考察不同浓度的BLLC与VE在以m-NBA为基质的FAB-MS谱。结果：BLLC在基质中的浓度越小,其相关离子峰相对强度就越弱;VE表面浓度增大,VE被快原子直接轰击的几率增加,VE被检测的灵敏度提高。轰击时间对离子的影响由样品分子的性质决定。结论：在FAB的离子化过程中样品与基质的混合物表面起着至关重要的作用。     

共聚酯PEIT-PEG结构与性能的研究

PET与PEG共聚可改善PET的抗静电性，但PEG含量的增加，会使共聚物的结晶温度大幅度地降低，不利于纤维加工，且伴随着结晶的发生，纤维的抗静电性也受到影响。在共聚体系中添加间苯二甲酸(IPA)，不仅能破坏大分子链结构的规整性、降低共聚酯的结晶性，而且能提高共聚酯纤雏的抗静电性能。用DSC与TG对共聚酯(PEIT-PEG)的聚集态结构、热性能、结晶性能等进行了表征。     

白花前胡化学成分的研究(V)

从中药白花前胡Ｐｅｕｃｅｄａｎｕｍ ｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍ根中分得４个化合物,经理化常数和波谱数据测定,分别鉴定为ｐｅｕｃｅｄａｎｏｃｏｕｍａｒｉｎⅠ（Ｉ）,ａｎｇｅｌｉｃｉｎ（Ⅱ）,３′（Ｒ）,４′（Ｒ）－３′－千里光酰基－４′－当归酰基－３′,４′－二氢邪蒿素（Ⅲ）,ａｒｎｏｃｏｕｍａｒｉｎ（Ⅳ）。Ⅱ为首次从该植物中分得,Ⅲ和Ⅳ为首次从首胡属植物中分得。     

M(E)CANISMES MOL(E)CULAIRES IMPLIQU(E)S DANS L''''ALT(E)RATION DU PH(E)NOTYPE DES CELLULES (E)PITHELIAL(E)S TUBULAIRES PAR LES CALPA(I)NES EXTRACELLULAIRES

Objectif Rechercher les mécanismes moléculaires par lesquels des calpaines extracellulaires af-fectent l'adhérence et la mobilité des cellules épithéliales HK-2 dérivées du tubule proximal humain. Méthodes Western blot pour détecter le clivage des chaines α des intégrines; dosage radioimmunologique pour mesurer l' AMP cyclique intracellulaire; fluorescence-activated cell sorting (FACS) pour tester l' apoptose cellulaire. La morpholo-gie des cellules HK-2 a été observée et photographiée. Résultats (1) L ' exposition des cellules HK-2 à la calpaine μ n'a pas entrainé de clivage des chaines o3 et αV des intégrines; (2)l' exposition des cellules HK-2 à la calpaine μ entrainait une augmentation progressive de l' accumulation intracellulaire d' AMP cyclique (P<0.05) qui était associée une résistance cellulaire à l'apoptose(P <0. 05 ) ; (3)l'addition d'un inhibiteur pharmacologique de la protéine kinase A(PKA) prévenait totalement les modifications d'adhérence et de mobilité cellulaires induites par calpaine μ Conclusion Les calpaines externalisées peuvent modifier l' adherence et la mobilité cellulaires via un mécanisme qui implique l'accumulation d' AMP cyclique et l' activation de la PKA. Par ces mécanismes, les calpaines externalisées pourraient jouer un role dans l'induction de la réparation au cours de l'insuffucance rénale aiguё.     

外伤性蛛网膜下腔出血与脑血管痉挛

目的:探讨外伤性蛛网膜下腔出血与脑血管痉挛的关系。方法:36例患者经CT扫描或腰穿检查确诊为外伤性蛛网膜下腔出血,应用改良Fisher分级评估CT,对比经颅多普勒检查及颅内压变化。结果:出现脑血管痉挛13例,其中3例为重度血管痉挛,2例形成缺血性梗死,血管痉挛程度与出血量及部位有关。结论:外伤性蛛网膜下腔出血可引起血管痉挛,从而加重病情,应予以重视。     

血液透析（HD）患者血管钙化（VC）程度与动静脉内瘘（AVF）失功的关系

目的研究血液透析患者血管钙化程度与其动静脉内瘘失功的临床关系。方法选取我院2014年1月～2018年1月接受血液透析干预的患者72例,根据其血管钙化程度分为重度组(n=26)、轻中度组(n=22)和无血管钙化组(n=24)。分析三组各临床指标变化,同时对血管钙化程度与动静脉内瘘失功关系进行研究。结果重度组血肌酐水平、透析时间要明显高于轻中度组、无血管钙化组各指标水平,组间数据比较差异有统计学意义(P0.05);但重度组血磷水平、血红蛋白水平以及钙磷乘积与轻中度组、无血管钙化组比较,差异无统计学意义(P0.05)。23例患者发生动静脉内瘘失功情况,发生率为31.94%(23/72),其中重度组发生13例(56.52%),轻中度组发生7例(30.43%),无血管钙化组发生3例(13.04%);49例患者未发生动静脉内瘘失功。动静脉内瘘失功患者的桡动脉钙化、血红蛋白以及血磷、透析时间、血肌酐、钙磷乘积与非动静脉内瘘失功患者各指标比较,差异有统计学意义(P0.05)。经过Logistic回归分析,血红蛋白水平是血液透析患者行动静脉内瘘失功的危险因素(P0.05)。结论血液透析患者血管钙化程度与动静脉内瘘失功发生有着十分密切的关系,接受血液透析时间越长,患者的血肌酐水平越高,引起患者发生血管钙化的风险也会明显增加,同时会进一步提升患者发生动静脉内瘘失功的机率。     

光敏疗法对恶性肿瘤的治疗

本文介绍HpD—PdT治疗14例恶性肿瘤的临床经验以及治疗后肿瘤的病理改变。14例中鳞癌7,基底细胞癌2,黑色素瘤2,腺瘤1,成骨肉瘤1,移行细胞瘤1。治疗效果:治愈5(35.7％),显效2(7.14％),有效4(28.6％),无效3(21.4％)。波长630nm的红光可穿透肿瘤组织深达3cm。对影响内腔肿瘤照射剂量的各种因素予以讨论。注药后与照射的间隔时间以48、72小时较为理想。与此疗法的同时应强调综合治疗的必要性。     

黑莓(萨尼)和红树莓(哈瑞特斯)对凝血作用的影响

目的研究黑莓(萨尼)和红树莓(哈瑞特斯)提取物对血液凝固的影响。方法采用体外血浆复钙时间法,对黑莓(萨尼)、红树莓(哈瑞特斯)乙酸乙酯和正丁醇提取物体外血浆复钙时间的影响进行测定。结果与空白组相比较,黑莓(萨尼)、红树莓(哈瑞特斯)正丁醇部位和红树莓(哈瑞特斯)乙酸乙酯部位可较显著延长体外血浆复钙时间(0.001相似文献