多药耐药蛋白对大鼠皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠影响的研究

目的观察多药耐药蛋白(multidrugresistance-associatedprotein,MRP)拮抗剂丙磺舒对大鼠大脑皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠含量的影响,证明MRP能够减少皮层内抗癫痫药物的浓度,探讨脑内表达MRP和难治性癫痫多药耐药的关系。方法在健康大鼠大脑皮层内安置微透析探针,腹腔注射卡马西平(20mg/kg)和苯妥英钠(50mg/kg),在给药后不同时间点收集透析液,并用高效液相检测其中的药物浓度,通过微透析探针局部给于丙磺舒,观察后者能否提高大鼠大脑皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠的浓度。结果丙磺舒升高了皮层细胞外液中卡马西平和苯妥英钠的药物浓度,前者在给药后45min～120min显著增高(P<0.05),后者在给药后30min～150min显著增高(P<0.05)。结论MRP具有限制卡马西平和苯妥英钠通过血脑屏障的作用,引起抗癫痫药物在大鼠大脑皮层细胞外液中分布减低,MRP表达增加可能参与了难治性癫痫多药耐药机制的形成。     

难治性癫痫大鼠脑内多药耐药相关蛋白1表达的研究

目的 研究杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠脑内多药耐药相关蛋白1（multidrug resistant-associated protein 1 MRP1）表达的情况.方法 建立杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠模型,用免疫组织化学及免疫蛋白印记（western blot）的方法,分析比较MRP1蛋白在癫痫模型组与正常对照组的表达.结果 药物难治性癫痫大鼠组脑内多药耐药相关蛋白的表达显著高于正常对照组（P〈0.01）.在癫痫大鼠脑内广泛分布的MRP1免疫阳性细胞主要为毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞.结论 癫痫大鼠脑内高表达的MRP1参与了难治性癫痫的耐药机制.     

药物难治性癫痫患者脑内多药耐药相关蛋白1表达的研究

目的 研究药物难治性癫痫患者脑内皮层多药耐药相关蛋白1（multidrug resistant-associated protein 1，MRP1）表达的情况。方法 选择12例药物难治性癫痫患者癫痫切除灶与12例正常对照脑组织标本．用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组化及免疫蛋白印记（Western blot）方法，分析比较MRP1基因在各组的表达。结果 药物难治性癫痫患者组脑内MRP1的表达显著高于正常对照组（P〈0．01）。在癫痫病灶内广泛分布的MRP1免疫阳性细胞主要为毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞。结论 脑内高表达的MRP1参与了难治性癫痫的耐药机制。     

多药耐药相关蛋白-1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中的表达及丙磺舒的干预作用

目的 观察难治性颞叶癫痫患者脑组织中多药耐药相关蛋白1( MRPl)及应用MRP1拮抗剂丙磺舒干预后的表达,探讨MRP1与难治性颞叶癫痫多药耐药的关系.方法 应用免疫组化检测难治性颞叶癫痫患者脑组织实验组和对照组MRP1的表达情况,同时应用免疫蛋白印记(Western blot)方法检测实验组、丙磺舒干预组和对照组MRP1的表达.结果 免疫组化结果显示MRP1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中表达增强,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).Western blot结果显示丙磺舒干预组MRP1蛋白水平较实验组明显较少,差异有显著性(P＜0.05).结论 脑内高表达的MRP1参与难治性颞叶癫痫的耐药机制,丙磺舒可以降低脑组织内MRP1的表达.     

难治性癫痫患者脑内MDR1的表达

研究发现大约有三分之一的癫痫患者对抗癫痫药物产生耐药反应。其中又有近60%的患者为难治性癫痫。这类药物难治性癫痫患者的耐药可能机制为脑内多药转运体的过高表达从而导致脑实质内药物浓度的下降。多药耐药基因1(multidrug resistance gene1MDR1)其编码蛋白PGP(P-glycoprotein)是脑内重要的多药转运体。本实验通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),免疫组织化学和免疫蛋白印记的方法,对12例药物难治性癫痫患者脑内癫痫灶与12例对照组标本的MDR1表达进行研究。1资料与方法1.1研究对象12例药物难治性癫痫患者,均经过适当的抗癫痫药物正规…     

癫痫耐药的分子机制

约1/3的癫痫患者对抗癫痫药物(AEDs)耐药。癫痫耐药是一个复杂的过程,可能涉及多药转运体P-糖蛋白(Pgp)和多药耐药相关蛋白(MRP),这些蛋白质及其mRNA在脑内皮的表达增加,主动从中枢神经系统清除AEDs,降低AEDs在致痫组织的有效浓度;此外,某些药物作用的分子靶点(如电压依赖性Na~+通道)也可能发生改变。     

丙磺舒逆转多药耐药相关蛋白的表达在难治性癫痫治疗中的作用

耐药基因表达成为难治性癫痫重要原因的发现为难治性癫痫的治疗开辟了一条新途径,寻找耐药基因的逆转剂就成为实现这个目标的主要手段。近年来,数10种耐药基因的逆转剂在临床上作过探索,其中最为成熟的药物就是丙磺舒。本文就目前有关丙磺舒在癫痫中的研究进展作一文献复习。 1难治性癫痫中多药耐药相关蛋白的表达及对抗癫痫药物的影响上世纪70年代有学者提出多药耐药的概念。随后在动物和难治性癫痫患者中的研究发现多药耐药基因及其产物P-     

多药物耐药蛋白与难治性癫痫关系的研究进展

难治性癫痫患者的多药物耐药已经成为癫痫治疗的焦点问题。本文介绍了目前被认为是主要责任蛋白的P-糖蛋白和多药物耐药相关蛋白的结构与功能,并阐述了其过度表达与癫痫耐药机制的关系及影响其表达的有关因素。对该领域的深入认识将有助于实现难治性癫痫治疗上的突破。     

多药耐药相关蛋白1基因多态性及蛋白表达与癫痫患者耐药机制关系的研究

目的探讨多药耐药相关蛋白1 (MRP1)基因G128C (rs41395947)、C218T (rs41494447)、G2168A(rs4148356)、G3173A(rs41410450)多态性及MRP1蛋白水平与癫痫耐药的关系,进一步探究MRP1基因多态性更易导致癫痫患者对哪种抗癫痫药物(AED)耐药。方法对2017年11月至2018年6月就诊于包头医学院第一附属医院门诊、病房和包头中心医院癫痫门诊,且诊断符合2014年国际抗癫痫联盟关于癫痫的诊断标准,均经视频脑电图及头颅MRI证实的31例耐药性癫痫患者和67例药物敏感性癫痫患者进行调查问卷。采用DNA测序的方法分别检测MRP1基因,从而分析其多态性分布情况,采用酶联免疫吸附(ELISA)测定的方法分别检测两组人群中MRP1蛋白的浓度,采用化学发光法检测癫痫患者卡马西平、丙戊酸钠的血药浓度。结果经DNA测序发现,AED耐药组和AED敏感组癫痫患者MRP1基因中第128位和第3173位未出现基因突变,第218位、2168位中存在单核苷酸多态性。MRP1的C218 T(rs41494447)突变5例,其中AED耐药组4例,ADE敏感组1例,C218T(rs41494447)多态性在AED耐药组与AED敏感组中的分布差异无统计学意义(P 0. 05)。MRP1的G2168A(rs4148356)突变9例,其中AED耐药组6例,ADE敏感组3例,G2168 A (rs4148356)多态性在AED耐药组与AED敏感组中的分布差异有统计学意义(P 0. 05); MRP1的2168位GA基因型在AED耐药组67%高于AED敏感组33%。MRP1蛋白水平测定结果:AED耐药组高于AED敏感组,差异有统计学意义(P 0. 05)。MRP1的2168位GA基因型患者的卡马西平、丙戊酸钠血药浓度低于GG基因型患者,差异有统计学意义(P 0. 05)。比较MRP1的C218T(rs41494447)、G2168A(rs4148356)不同基因型的MRP1浓度,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论MRP1的G2168A (rs4148356)多态性可能是癫痫患者发生AEDs耐药的风险位点。MRP1基因的G128 C (rs41395947)、C218 T (rs41494447)、G3173 A (rs41410450)三个位点可能不是癫痫患者发生AEDs耐药的风险位点。MRP1蛋白高表达可能是引起癫痫患者耐药的一个因素。癫痫患者中存在MRP1的G2168A单核苷酸多态性者更易对卡马西平、丙戊酸钠耐药。耐药性癫痫患者MRP1基因218位点及2168位点突变可能不是引起MRP1蛋白高表达的原因。     

脑发育异常性癫痫脑组织的MDR-1、MRP和GFAP表达一例并文献复习

目的：观察灰质异位性难治性癫痫中多药耐药基因蛋白（MDR-1）、耐药基因相关蛋白（MRP）及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）在发育异常性脑组织中的表达情况。方法：对确诊为脑灰质异位性症状性癫痫患者手术切除下病灶组织行免疫组化染色，观察脑组织中MDR-1、MRP及GFAP的表达情况。结果：在手术切除的病灶组织中，除一些增生性的星形胶质细胞同时具上述三种蛋白的阳性标记外，在一些异形的神经元内同时还存在有MDR-1和MRP的阳性表达。结论：灰质异位性难治性癫痫中MDR-1、MRP及GFAP不仅可在一些反应性的星形胶质细胞中表达，而且还可在一些发育异常的异形神经元中表达。     

P糖蛋白与难治性癫痫多药耐药

目前,大约有20%～30%的癫痫患者通过一线的抗癫痫药物(antiepileptic drugs,AEDs)无法达到有效的治疗效果,成为难治性癫痫(refractory epilepsy,RE)。本病的形成是个多因素过程。近年来,对难治性癫痫研究重点集中在其多药耐药(multidrug resistant,MDR)机制上,与肿瘤患者对     

难治性癫痫的耐药性与多药耐药基因的研究进展

目前难治性癫痫的多药耐药1（MDR1）基因引起了国内外学者的关注,其编码的P-糖蛋白（P-gp）可将抗癫痫药物（AEDs）泵出脑组织,降低其在脑组织中的药物浓度,不能抑制脑细胞的异常放电。本文从动物模型、人脑组织、外周静脉血液角度阐述近年来难治性癫痫的耐药性与MDR1基因之间的研究进展。     

凋亡抑制蛋白XIAP在难治性癫痫大鼠脑内的表达

目的研究杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠脑内凋亡抑制蛋白XIAP表达的情况。方法建立杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠模型,通过药物筛选用出耐药大鼠和药物敏感大鼠,采用免疫组织化学及western blot的方法,分析比较凋亡抑制蛋白XIAP在耐药组与药物敏感组的表达。结果难治性癫痫大鼠脑内XIAP的表达明显高于药物敏感组。结论癫痫大鼠脑内凋亡抑制蛋白XIAP可能参与了难治性癫痫的耐药机制。     

多药耐药蛋白及其在难治性癫痈中作用的研究进展

难治性癫痫的耐药性研究已取得了许多突破性进展。近年发现,难治性癫痫与多药物耐药蛋白存在着密切联系。文中介绍3种主要多药耐药蛋白（P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、主穹窿蛋白）的结构和功能,并对其近年在难治性癫痫耐药中作用的研究进展作一综述。     

海人酸致难治性癫痫大鼠脑组织及外周血P糖蛋白表达趋势相关性研究

目的 研究难治性癫痫大鼠脑组织及外周血中P糖蛋白表达的相关性,探讨难治性癫痫可能的耐药机制,并比较海人酸在不同核团致痫后P糖蛋白表达的差异.方法 用海人酸分别于大鼠杏仁核及海马进行化学点燃,制作难治性癫痫模型.采用免疫组化方法,分析比较难治性癫痫大鼠脑组织及外周血中P糖蛋白的表达.结果 杏仁核点燃组与海马点燃组大鼠脑组织及外周血P糖蛋白表达高于与其相对应的生理盐水卡马西平组及生理盐水对照组,有统计学意义(P＜0.05);杏仁核生理盐水卡马两平组及海马生理盐水卡马西平组大鼠脑组织及外周血P糖蛋白的表达高于杏仁核生理盐水对照组及海马生理盐水对照组,有统计学意义(P＜0.05);杏仁核点燃组和海马点燃组大鼠脑组织及外周血P糖蛋白的表达相近,无统计学意义(P＞0.05).结论 难治性癫痫大鼠外周血及脑组织中P糖蛋白的表达具有一定的相关性,难治性癫痫的耐药机制可能是癫痫本身、服用抗癫痫药物等多因素作用的结果.杏仁核点燃模型及海马点燃模型均可诱导相近似的P糖蛋白的表达.     

药物难治性癫痫大鼠脑内Bax和Bcl-2表达的研究

目的研究杏仁核电刺激点燃的药物难治性癫痫大鼠脑内凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的情况。方法建立杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠模型,通过药物筛选用出耐药大鼠和药物敏感大鼠,采用免疫组织化学及免疫蛋白印记（western blot）的方法,分析比较Bax和Bcl-2在耐药组与药物敏感组的表达。结果药物难治性癫痫大鼠组脑内Bax蛋白的表达显著高于药物敏感组（P〈0.01）,而Bcl-2蛋白的表达显著低于药物敏感组（P〈0.01）。结论癫痫大鼠脑内凋亡相关蛋白可能参与了难治性癫痫的耐药机制。     

芬氟拉明治疗难治性癫痫的研究进展

癫痫是神经科常见病,60%在儿童期起病,最终有20%～30%发展为药物难治性癫痫。难治性癫痫是指在使用正确选择且能耐受的两种抗癫痫发作药物的情况下仍不能终止其发作的癫痫,儿童以LennoxGastaut综合征（Lennox-Gastaut syndrome,LGS）、Dravet综合征（Dravet syndrome,DS）等为代表,成人以颞叶癫痫为代表。难治性癫痫具有“低治愈率、高致残率、高致死率”的特点,给患者及家属造成巨大的生理和心理上的痛苦。目前,离子类抗癫痫发作药物已难在机制上实现重大突破,而非离子类抗癫痫发作药物的研究则具有广阔的前景,其机制可能涉及癫痫发生的根本机制,而近年来获批上市的芬氟拉明（Fenfluramine,FFA）就属于此类抗癫痫发作药物。多个Ⅲ期随机对照试验研究提示FFA对DS、LGS具有卓越的有效性,为难治性癫痫患者及家属带来了新希望。本文从FFA治疗难治性癫痫的作用机制、药动学、临床疗效、安全性及耐受性等方面进行综述。     

MDR1基因SNPs与难治性癫痫的相关性研究进展

研究癫痫耐药机制及克服的办法已成为重要的课题,近年来研究发现多耐药基因(multidrug resistance,MDR1,ABCB1)及其表达产物P-gp蛋白在动物模型及人类难治性癫痫脑组织中表达明显增多,P-gp蛋白与耐药机制的形成有关,应用P-gp蛋白抑制剂能够增加细胞内抗癫痫药物(antiepileptic drugs,AEDs)浓度,减少其应用。国外大多数研究发现MDR1基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)影响MDR1功能和P-gp蛋白表达,与难治性癫痫的耐药性相关,但是有的学者持相反观点,可能与研究的单倍体局限性有关。标签单核苷酸多态性SNP(tag SNPs)能够特异识别某一单倍型,将来通过对MDR1基因tag SNPs研究,对难治性癫痫的的遗传学研究、发现其遗传标志、早期诊断、个体化治疗有重要的意义。     

苯妥英钠、苯巴比妥钠诱导建立难治性癫(癎)动物模型

目的探索性应用苯妥英钠（PHT）、苯巴比妥钠（PB）诱导建立难治性癫痫动物模型，并研究其多药耐药机制。方法将60只大鼠随机分为实验组50只和对照组10只；实验组给予亚抽搐剂量戊四氮腹腔注射，其中45只大鼠确定点燃．将其随机分为给药组35只和未给药组10只。给药组应用较大剂量PHT、PB腹腔注射，其间注射小剂量戊四氮．根据Racine行为分级以及脑电图改变，从中筛选出耐PHT和PB的难治性癫痫动物模型。应用免疫组化法观察比较P糖蛋白（Pgp）在各组脑组织中的表达。结果12只大鼠制成难治性癫痫动物模型（耐药组），11只为药物有效组，12只死亡。耐药组大鼠脑组织Pgp表达较对照组、未给药组和药物有效组增强，差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论应用较大剂量PHT和PB诱导点燃大鼠制作难治性癫痫的动物模型．方法可行。该模型可以用于研究难治性癫痫脑内PgP的表达。PgP的高表达与难治性癫痫发生密切相关。     

药物难治性癫痫患者脑内多种耐药基因表达的初步研究

目的研究药物难治性癫痫患者与正常对照组脑内多种药物耐药基因（ＭＤＲ１）表达的情况。方法　选择１５例药物难治性癫痫患者和５例对照组患者的脑组织标本,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,以Ｂ－ａｃｔｉｎ为内参照对ＭＤＲ１基因进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳分别得到２２６ｂｐ和５４８ｂｐ的条带,通过照相、扫描、计算ＭＤＲ１／ｂ－ａｃｔｉｎ比值进行半定量分析。结果统计学处理提示,药物难治性癫痫患者脑内ＭＤＲ１的表达明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论　Ｐ－糖蛋白为ＭＤＲ１的产物,能将药物从脑内排入血循环而降低脑内药物浓度。药物难治性癫痫患者因脑内ＭＤＲ１的高表达,导致脑内抗癫痫药物（ＡＥＤ）浓度较低而耐药。故应用ＭＤＲ１抑制剂也许可以提高ＡＥＤ在脑内的药物浓度,使癫痫的药物治疗效果更令人满意。