鸡胚圆锥动脉干缺损相关基因差异表达的研究

目的 通过检测剔除心脏神经嵴的异常鸡胚心脏组织与正常心脏组织之间在发育过程中存在差异表达的基因,探索心脏圆锥动脉干缺损（CTD）发生的相关基因。方法 用电极刺激方法在鸡胚发育早期破坏心脏神经嵴,建立圆锥动脉干缺损模型。应用抑制消减杂交法（SSH）筛选出在正常心脏组织表达,但在异常心脏组织中表达减少或不表达的原因,构建减数杂交文库,用cDNA芯片技术验证,并进行测序。结果 建立了含261个克隆的cDNA减数文库,经验证有83个克隆在实验组与对照组之间存在明显的表达差异（31．8％)。随机选15个克隆测序,最后确定7种基因。经Genebank查询发现有一cDNA片段与鸡（Gallus)DEAD-box解旋酶mRNA基因序列100％同源。结论 在剔除心脏神经嵴造成圆锥动脉干缺损畸形的过程中,有多个基因参与和调节。DEAD－box解旋酶基因的缺失可能是造成心脏CTD畸形的原因之一。     

神经嵴细胞迁移障碍在先天性巨结肠发病中的作用研究进展

神经嵴细胞起源于神经和非神经外胚层的交界处(神经板交界处), 具有显著的多能性和迁移能力, 在胚胎中广泛迁移至最终目的地, 分化成相应组织或器官。先天性巨结肠(Hirschsprung disease, HSCR)是由于胚胎早期神经嵴细胞迁移障碍, 导致胚胎期肠管缺乏足够数量的肠神经嵴细胞定植, 因而导致肠神经系统形成障碍, 而引起患儿腹胀便秘等症状的先天性消化道畸形。因此, HSCR的发病与神经嵴细胞迁移异常密切相关。现就细胞外基质的降解和重构、神经嵴细胞上皮-间质转化以及细胞间突起形成影响神经嵴细胞迁移的研究现状进行综述。     

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先天性脊髓发育异常均与脊柱裂同时并存,MRI的问世以及脊髓病理影像学诊断水平的不断提高,为早期诊断脊髓发育异常,特别是伴有隐形脊柱裂的脊髓畸形提供了可能,进而使我们对先天性脊髓发育异常的类型、临床病理特点有了更深入的认识,也为早期治疗提供了科学依据。1先天性脊髓发育异常的分类根据椎管膨出内容,将脊髓发育异常分为显性脊柱裂和隐形脊柱裂两大类[1]。显性脊柱裂根据椎管内容膨出的病理特点,分为脊膜膨出、脊髓脊膜膨出和脂肪瘤型脊膜膨出3种类型。顾名思义,脊髓脊膜膨出的病理改变包括脊髓、马尾神经以及脊膜等组织通过脊柱裂…     

脑源性神经营养因子对缺氧缺血胚鼠脑细胞凋亡的作用

目的探讨外源性脑源性神经营养因(BDNF)在宫内缺氧缺血环境下对胚鼠脑神经细胞凋亡的作用及其可能信号传导途径。方法 钳夹孕鼠子宫动脉30 min后,实验组经孕鼠尾静脉注射2 μg BDNF,对照组注入生理盐水、Tunel法测定各组脑组织神经细胞凋亡,免疫组织化学分析不同时间点胞外信号调节酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达情况。结果随缺血再灌注时间延长,胚脑凋亡细胞逐渐增多。实验组胚脑组织同时间点神经细胞凋亡数较对照组少,ERK表达较对照组增强,JNK表达成弱。结论BDNF在宫内缺氧缺血环境下有减少胚脑神经细胞凋亡作用,该作用可能与激活ERK信号途径有关。     

新生儿期使用糖皮质激素对神经系统的不良反应

近年研究显示,新生儿期,尤其是新生儿早期糖皮质激素治疗对中枢神经系统可能存在诸多不良反应,如对脑发育的长期影响可导致精神运动发育异常、脑瘫发生率增加和认知行为异常。其作用机制尚不明确,可能与糖皮质激素治疗促进神经细胞凋亡及影响神经细胞分化增殖等有关,故提出除非有严格的适应证,应尽量避免新生儿期应用糖皮质激素。     

心脏α肌动蛋白基因在胚胎心脏发育中的时空表达

目的 了解心脏α肌动蛋白（cardiac alpha—actin,CAA）基因在胚胎心脏发育过程中的时空表达规律,探讨其与心脏畸形发生的关系。方法用电刺激方法制备鸡胚心脏畸形模型。用实时荧光定量PCR方法检测胚胎发育不同阶段CAA基因表达量的动态变化;用免疫组化方法检测CAA蛋白在胚胎不同发育时期表达部位的变化。结果（1）CAA基因在胚胎发育早期即开始表达。以后表达量逐渐增加至稳定。CAA主要局限在心脏部位表达,并随着心肌结构的发育成熟表达逐步增强;在肝脏、脑、胃等器官中不表达或微量表达。（2）心脏神经嵴被破坏的实验组胚胎在胚龄第2～7天,CAA基因相对表达量明显低于正常对照组胚胎相对应时期（P=0．013）。实验组心脏组织在第7、9、15天时CAA基因表达量也明显低于正常对照组（P=0．029）。结论CAA基因与心脏发育密切相关。CAA基因表达受到心脏神经嵴细胞调控,剔除心脏神经嵴后其表达减少,影响了心肌细胞的成熟和分化,可能是导致心脏畸形发生的一个重要因素。     

产前激素治疗对中枢神经系统发育的影响

糖皮质激素参与神经细胞的发生、分化、成熟与死亡。产前激素 (地塞米松 )治疗作为预防早产儿呼吸窘迫综合征的常规手段 ,目前已广泛应用于临床。近年来 ,产前激素治疗有重复用药的趋势。研究表明 ,产前激素治疗尤其是重复激素治疗对中枢神经系统发育可能存在诸多不良影响 ,如对下丘脑 垂体 肾上腺轴、对胚胎脑结构的发育及神经内分泌系统的发育及对子代神经发育有长期影响。其机制尚未明确 ,可能与产前激素治疗可促进脑神经细胞凋亡及影响胶质细胞发育等有关。故提出对高危早产孕妇产前重复激素治疗应权衡利弊     

Chop及Grp78基因在先天性脊柱裂大鼠胚胎12天神经管中的异常表达

目的 探讨Chop及Grp78基因在先天性脊柱裂大鼠胚胎12 d神经管及神经上皮干细胞中的表达情况.方法 取畸形大鼠12d胚胎神经管组织,荧光实时定量PCR考察Chop及Grp78基因表达.另取12 d正常大鼠胚胎,分离消化神经管行神经上皮干细胞培养.荧光实时定量PCR考察Chop及Grp78基因表达.结果 先天性脊柱裂大鼠胚胎12 d神经管内Chop基因及Grp78基因表达异常增高.神经上皮干细胞分化为神经元后Chop及Grp78基因的表达上调.结论 Chop及Grp78基因在先天性脊柱裂大鼠胚胎12d神经管中表达异常增高,二者在神经上皮干细胞分化为神经元后表达上调,可能与内质网应激相关的凋亡有关.神经上皮干细胞培养培养体系稳定、高效,可以为胚胎早期发育提供实验模型.     

神经与营养

中枢神经系统(CNS)的发生、发育、结构和功能完善,与5大营养素关系非常密切。神经与蛋白质人胚18天起神经组织开始发生,至胚胎5～7个月大脑的沟、裂、回逐渐发育完成。胚胎的最后3个月至生后6个月,神经元和神经胶质细胞不断分化发育,因此需要极其丰富的各种营养物质,尤其蛋白质的供应。如蛋白质供应下足,则神经元、神经胶质细胞数量减少,体积变小,重者发生智力低下,因此必须重视孕妇和婴儿的营养保健。蛋白质是构成脑组织的基本物质。脑组织中蛋白质的形式有清蛋白、球蛋白、核蛋白、糖蛋白及神经角     

反式维甲酸诱导显性脊柱裂胎鼠骶尾部神经前体细胞凋亡和增殖的变化规律研究

目的观察大鼠胚胎脊柱裂发生早期,细胞凋亡与细胞增殖的变化规律。方法孕鼠随机分为对照组和实验组。胚胎10天时,实验组1次性经胃管注入致畸量反式维甲酸诱导产生脊柱裂动物模型,对照组胃饲等量溶剂,分别在妊娠11、12、13天(E11,E12,E13)时剖宫取胚胎,一部分胚胎固定后进行全胚胎TUNEL染色观察其整体凋亡情况;另一部分胚胎常规制作石蜡切片,采用TUNEL切片染色和免疫荧光染色技术,检测胚胎脊部神经管组织中细胞凋亡和细胞增殖的变化。结果与对照组相比,细胞凋亡于多个发育部位明显增多,集中表现在颅面原基、颅部神经管的背外侧、骶尾部神经管的背部中线。免疫荧光染色显示,与对照组相比,脊柱裂组胚胎畸形发生部位的神经前体细胞的凋亡率升高[E11(2.02±0.52)%与(0.57±0.23)%,E12(3.56±0.33)%与(0.93±0.14)%,E13(3.76±0.37)%与(1.24±0.21)%,P0.001]。而细胞增殖降低[E11(65.17±2.30)%与(81.76±2.17)%,E12(63.97±3.03)%与(76.98±5.14)%,E13(56.86±2.80)%与(73.43±1.99)%,P0.001]。结论反式维甲酸诱导的大鼠脊柱裂胚胎骶尾部神经管中神经前体细胞凋亡增多,而细胞增殖减少,这可能是脊柱裂胚胎神经元发育异常的主要原因之一。     

产前激素治疗对中枢神经系统发育的影响

糖皮质激素参与神经细胞的发生、分化、成熟与死亡。产前激素(地塞米松)治疗作为预防早产儿呼吸窘迫综合征的常规手段，目前已广泛应用于临床。近年来，产前激素治疗有重复用药的趋势。研究表明，产前激素治疗尤其是重复激素治疗对中枢神经系统发育可能存在诸多不良影响，如对下丘脑．垂体．肾上腺轴、对胚胎脑结构的发育及神经内分泌系统的发育及对子代神经发育有长期影响。其机制尚未明确，可能与产前激素治疗可促进脑神经细胞凋亡及影响胶质细胞发育等有关。故提出对高危早产孕妇产前重复激素治疗应权衡利弊。     

神经嵴细胞与先天性心脏病发病机制

先天性心脏病的发病机制十分复杂,近年来的研究显示,心脏神经嵴细胞与胚胎时期心脏锥干部发育密切相关.一些影响心脏神经嵴发育的相关基因也已经被发现,这些基因通过影响心脏神经嵴细胞的分化及迁移而导致心室肌细胞及心室流出道结构的发育异常.因此,了解这些基因的功能有助于进一步揭示锥干部畸形的先天性心脏病的发病机制.     

神经嵴细胞与先天性心脏病发病机制

先天性心脏病的发病机制十分复杂,近年来的研究显示,心脏神经嵴细胞与胚胎时期心脏锥干部发育密切相关.一些影响心脏神经嵴发育的相关基因也已经被发现,这些基因通过影响心脏神经嵴细胞的分化及迁移而导致心室肌细胞及心室流出道结构的发育异常.因此,了解这些基因的功能有助于进一步揭示锥干部畸形的先天性心脏病的发病机制.     

小儿三维超声心动图检查及诊断规范(下)

三、法洛四联症(一)病理解剖基础:法洛四联症(tetralogyoffallot,TOF)是最常见的青紫型先心病,与完全性大血管转位、纠正型大血管转位、右室双出口、永存动脉干等均为圆锥动脉干畸形,除因心脏圆锥或漏斗部的发育异常所致的心室大血管连接异常的共同解剖特征外,法洛四联症的基本     

先天性巨结肠症的病因学研究进展

先天性巨结肠症病因学主要研究进展是遗传因素及胚胎早期微环境改变.遗传因素包括RET-GDNF系统、EDNRB-EDN3系统及其参与调控的基因(SOX10、NRG-1、FoxD3、PHOX2B、HOXB5、ZFHX1B等),为神经嵴细胞迁移和分化所必需.胚胎早期微环境变化包括Cajal质细胞、细胞黏附分子L1、Ca2+等.细胞黏附分子L1可能是神经嵴来源细胞迁移与分化的基础,Ca2+依赖途径的表达减少造成平滑肌收缩活性异常.     

Ras相关的C3肉毒素底物1在神经嵴细胞中的作用研究进展

Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)是Rho三磷酸鸟苷(GTP)酶家族的成员,具有GTP酶活性,是多种细胞信号转导过程中的"分子开关",可参与细胞迁移、黏附、增殖及凋亡等过程。Rac1可通过调控神经嵴细胞的肌动蛋白的聚合、膜突起的形成等过程影响神经嵴细胞的迁移,进而可能与先天性巨结肠、心脏流出道缺陷等神经嵴迁移异常的疾病有关。现就Rac1的主要生物学功能及其在肠神经嵴细胞发育机制中的研究进行综述。     

阴茎胚胎发育与尿道下裂发生的研究进展

阴茎是男性外生殖器的一部分, 其结构和功能的异常会产生严重生理影响和社会心理影响。在胚胎发育的早期, 原始胚基是双向分化的, 直到18周左右才形成严格意义上的阴茎, 其过程对理解尿道下裂等先天畸形的发生以及手术修复的探索有指导意义。本文旨在综述近年来阴茎组织胚胎学发育和尿道下裂发生的研究进展, 包括正常情况下的早期胚胎发育、胚胎时期尿道及包皮的发育过程, 以及发育异常情况下尿道下裂的发生过程。     

Cbfa1与成骨细胞分化和骨发育

成骨细胞系是由起源于中胚层的间充质细胞逐步分化而形成的终末细胞系,分化转录因子Cbfa1在该过程中发挥着重要作用。它通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。其表达异常可阻碍膜内成骨和软骨内成骨,影响胚胎期、胎儿期和出生后骨组织的生长。Cbfa1基因的突变可导致锁骨颅骨发育异常     

不同胎龄脊髓脊膜膨出胎鼠膀胱和脊髓神经损害的形态学观察

目的 通过不同胚胚胎期脊髓脊膜膨出(MMC)胎鼠膀胱平滑肌的发育和神经支配情况及脊髓神经损害的形态学观察,了解这种损害的时间和空间上的变化及其相互关系.方法 胎鼠分为MMC组和正常对照组,每组再根据胎龄各分3小组,共6小组.用免疫组织化学法检测各组腰骶段脊髓GFAP、VAChT的表达和膀胱α-Actin和neurotubulin-β-Ⅲ的表达；另取各组腰骶段脊髓及膀胱切片作HE染色.Image-Pro Plus 5.1软件分析免疫组织化学照片相关部分的光密度,SPSS 16.0软件对数据进行进行统计分析,以P≤0.05为差异有统计学意义.结果 在胚胎16d,2组胎鼠的膀胱肌层内就已经可以检测出neurotubulin-β-Ⅲ的表达；胚胎16、18和20 d时,MMC组胎鼠膀胱内的neurotubulin-β-Ⅲ表达较相同胚胎期的正常对照组显著降低.在胚胎16、18、20 d,2组的膀胱肌层内都能看到较多的α-Actin的阳性显色；且各胚胎期,2组膀胱内的α-Actin表达差异无统计学意义.在胚胎16d和18d,正常组和MMC组及胚胎20 d正常组的脊髓内,GFAP染色均很少,没有明显的星形胶质细胞显示,在胚胎20 d的MMC组胎鼠的脊髓背侧,可见大量的GFAP阳性的星形胶质细胞显影,其表达显著高于正常组.MMC组各个胚胎期脊髓VAChT的表达都较少,在胚胎20d组的背外侧核仅见少量阳性表达的神经元；而正常组VAChT的表达相对较多,在胚胎20d组的背外侧核可见较多阳性表达的神经元；2组间各胚胎期VAChT表达差异均有统计学意义.结论 MMC胎鼠膀胱平滑肌的分化和发育与正常组差别无统计学意义.MMC胎鼠胚胎16 d,膀胱肌层内可见神经支配,但神经纤维减少,与脊髓内骶副交感神经核和背外侧核的胆碱能神经元减少是同步.MMC胎鼠脊髓损伤后的神经修复过程,星形胶质细胞的出现要晚于胚胎18d.     

Cbfal与成骨细胞分化和骨发育

成骨细胞系是由起源于中胚层的间充质细胞逐步分化而形成的终末细胞系，分化转录因子Ｃｂｆａｌ在该过程中发挥着重要作用。它通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。其表达异常可阻碍膜内成骨和转骨内成骨，影响胚胎期、胎儿期和出血后骨组织的生长。Ｃｂｆａｌ基因的突变可导致锁骨颅骨发育异常。