肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合征出血热病毒(HFRSV)陈氏株免疫获得5株单克隆抗体(McAb).B_9株McAb具有血凝抑制和体内保护活性:F_-3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性;B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部分发生反应.与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株均发生反应.B_(11)、F_3、H_7、H_(11)等4株McAb可用于酶联免疫吸附试验。     

肾综合症出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合症出血热病毒(HFRSV)陈株免疫获得5株单克隆抗体(McAb)。B_9株McAb具 有血凝抑制和体内保护活性;F_3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性。B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部份反应,与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株都反应。B_(11),F_3、H_7、H_(11)4株McAb可用于酶联免疫吸附试验(FLISA )。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究进展

近年来,各种不同特性的抗HFRS病毒McAb不断产生。并得到广泛应用。在病原学方面,McAb不仅能区分HFRS病毒的型别,还可对其抗原性作进一步分析,并为深入研究HFRS病毒各种结构蛋白的抗原位点、特性及功能,病毒对机体的感染与免疫,以及疫苗(特别是亚单位疫苗)的研制等提供了有力的工具。在HFRS检验诊断和流行病学调查方面,采用McAb建立了一些新检测方法,敏感性和特异性得到提高。另外,通过McAb对HFRS病毒感染乳鼠保护作用的研究,为特异性治疗HFRS提供了实验依据。     

家鼠型肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备与鉴定

以家鼠型HFRS病毒R22株免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0-Ag14融合,获得了23株能稳定分泌HFRS病毒特异性McAb的杂交瘤细胞系。以18株不同型别的HFRS病毒株进行分析,结果表明上述McAb中有些为HFRS病毒组特异性的,有些为家鼠型特异性的。有2株McAb对家鼠型HFRS病毒株具有较高的中和活性,对HFRS病毒R22株感染乳鼠也有明显的保护作用。     

分泌抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的研制及其应用的研究

研制肾综合征出血热(HFRS)病毒血凝素单克隆抗体(McAb),用亲和层析法纯化该病毒血凝素,对探讨其血凝素性质、致病与免疫机理中的作用,临床检验诊断、疫苗效果评定,亚单位疫苗及特异性免疫治疗制剂的研制均有重要意义。本文从7个方面进行总结。(1)建立分泌抗HFRS病毒血凝素McAb杂交瘤细胞系56株,鉴定其中10株证明9株为抗血凝素McAb,6株有中和     

肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的研制与鉴定

本文报道,从肾综合征出血热病毒(HFRSV)感染乳鼠鼠脑中提取高滴度的血凝素(HAN),以该血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合。融合率为60％和78％,阳性孔率为15％和44％。IFA筛选后共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中1A_8,2A_(11),1B_3,3D_8,2F_7,1G_4,1G_9,3G_1,3G_(11),2H_1十株细胞系用有限稀释法进行了3～4次克隆化,阳性克隆率达到100％。杂交瘤细胞系经连续传代培养     

肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的研制与鉴定

本文报道,从肾综合征出血热病毒(HFRSV)感染乳鼠鼠脑中提取高滴度的血凝素(HAN),以该血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合。融合率为60％和78％,阳性孔率为15％和44％。IFA筛选后共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中1A_3,2A_(11),1B_3,3D_8,2F_7,1G_4,1G_9,3G_1,3G_(11),2H_1十株细胞系用有限稀释法进行了3～4次克隆化,阳性克隆率达到100％。杂交瘤细胞系经连续传代培养巳6个多月,仍能稳定地分泌单克隆抗体。冻存的细胞系经复苏后仍能稳定地分泌McAb。应用血凝抑制(Hl)试验证明其中9株为特异性分泌抗HFRSVHHAN McAb 的杂交瘤细胞系,1株(2A_(11))是抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系,其中(1:81920)和3G_1(1:40960)具有高滴度的血凝抑制活性。应用微量细胞培养中和试验(NT)证明其中6抗1A_8,1B_3,3D_8,1G_4,3G_1,3G_(11))具有中和活性.尤其3D_8(1:5120)和3G_1(>1:10240)有较高的中和效价。IFA测定了10株杂交瘤细胞的McAb与HFRSV陈株抗原片反应的抗体效价,其中培养上清为1:40～1:320,杂交瘤腹水为1:1万～1:8万。10种单克隆抗体与JEV、HSV-I和正常Vero-E_6细胞抗原片均无交叉反应。但均能与不同疫区、不同宿主分离的HFRSV陈株81-14A,A9和R_(22)抗原片反应,说明HFRSV血凝素McAb具     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的抗独特型抗体的制备与初步鉴定

本文用HFRS病毒McAbs免疫家兔,制备了抗Id抗体(Ab_2),用小鼠γ球蛋白-Sepharose4B免疫亲和层析柱纯化了Ab_2,并以ELISA试验对其特异性作了鉴定。结果表明,所制备的Ab_2具有良好的Id特异性,并能与所用的小鼠抗HFRS病毒单抗、兔抗HFRS病毒抗体和HFRS病人血清结合。同时提示,这种Ab_2可能具有替代抗原的免疫潜能。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的抗独特型抗体的制备与初步鉴定

本文用HFRS病毒McAbs免疫家兔,制备了抗Id抗体(Ab_2),用小鼠γ球蛋白-Sepharese AB免疫亲和层析柱纯化了Ah_2,并以ELISA试验对其特异性作了签定。结果表明,所制备的Ab_2具有良好的Id特异性,并能与所用的小鼠抗HFRS病毒单抗、兔抗HFRS病毒抗体和HFRS病人血清结合。同时提示,这种Ah_2可能具有替代抗原的免疫潜能。     

肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体亲和力及抗原…

应用非竞争ＥＬＩＳＡ和ＥＬＩＳＡ相加试验对８株抗肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体进行了抗体亲和力和抗原结合位点的测定。结果提示这些ＭｃＡｂ至少可识别ＨＦＲＳＶ核壳蛋白上６种不同抗原决定簇，并且表明ＮＰ上可能存在ＨＦＲＳＶ组、亚组、型或亚型抗原决定簇。ＭｃＡｂ亲和常数测定的高低排序结果为ＫＦ１２＞ＤＥ１１＞Ｘ１０＞ＣＨ１０＞ＩＧ４。     

亲和层析法纯化肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体

应用小鼠抗大鼠Ｋａｐｐａ轻链单克隆抗体亲和层析系统，对抗肾综合征出血热病毒大鼠ＭｃＡｂ进行了纯化研究，使用该系统具有ＭｃＡｂ回收率好，纯度高，能较好地保持ＭｃＡｂ免疫学活性，操作，快速，可一步除去腹水中宿主杂蛋白，并能适应不同类别ＭｃＡｂ纯化的特点，此外还对自制盐析纯大鼠Ｋａｐｐａ轻链ＭｃＡｂ柱与进口亲和纯大鼠Ｋａｐｐａ轻链ＭｃＡｂ柱进行了比较和探讨。     

特异性单克隆抗体对肾综合征出血热病毒人工感染新生乳鼠保护作用的观察

本文报道以本室研制的肾综合征出血热(HFRS)病毒单克隆抗体(McAb)对人工感染HFRS病毒新生乳小鼠进行体内保护试验,取得了较满意的结果。 一、HFRS病毒感染乳鼠试验 取F_1M_8陈株鼠脑悬液10~(-1)～10~(-7)浓度腹腔感染(0.05ml)乳鼠,发现有规律的发病与死亡。病毒浓度越大,发病死亡时间越快(10~(-1)第7～8天,而     

用肾综合征出血热病毒结构蛋白体外免疫正常人外周血淋巴细胞制备单克隆抗体

用亲和层析提取的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５０ｋＤ和６７ｋＤ）为抗原，在体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）。ＰＢＬ经亮氨酸甲基酯处理后，在含有ｓＰＷＭ－Ｔ、ＩＬ－２及不同浓度抗原的培养基中培养６ｄ，计数存活ＰＢＬ数量。结果表明，在上述体外免疫条件下存活ＰＢＬ的数量与抗原剂量呈正相关。将此体外免疫的ＰＢＬ与人－鼠杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，获得了３株分泌抗ＨＦＲＳＶ人单抗的杂交瘤细胞，表明在体外免疫条件下，正常人ＰＢＬ能够对ＨＦＲＳＶ结构蛋白发生特异性免疫应答。     

肾综合征出血热病毒分型单克隆抗体的建立与初步应用

用肾综合征出血热病毒(HFRSV)83011株与84-FLi株免疫BALB/c小鼠,建立杂交瘤,筛选出野鼠型McAb4F5株。用HFRSV家鼠分离株R22与Seoul株免疫鼠,筛选出家鼠型分型McAb 3D5株。用分型McAb,对采自陕西、湖北,辽宁3省的24个病毒株,进行血清学分型,所得结果与毒株来源宿主完全相符,并证明来源于病人或     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体抗独特型抗体的分类鉴定

肾综合征出血热病毒单克隆抗体抗独特型抗体的分类鉴定娄元梅，朱德钟，刘启富（重庆第三军医大学微生物学教研室，６３００３８）抗独特型抗体（Ａｎｔｉ－Ｉｄ，Ａｂ２）在结合活性和功能特性方面具有高度特异性，对其分类甚为重要。Ｊｅｒｎｅ（１９８２）首先将Ａｂ２...