抗猪囊尾蚴单克隆抗体的初步研究

猪囊尾蚴(Cysticercus cellulosae,C.C)病在我国东北、西北和华北流行较为广泛。C.C可在人体的肌肉、内脏及中枢神经系统等各处寄生引起C.C病。尤其是在中枢神经系统寄生时,可引发癫痫发作,以及脑局灶性症状、精神症状及颅内压增高等[1]-系列严重反应。目前,对于囊虫病的诊断及检查仍以检出血清或脑脊液中特异性抗体和(或)抗原做为重要的辅助诊断,为了对囊虫病的免疫诊断提供有价值的抗血清,我们应用杂交瘤技术制备了抗猪囊尾蚴单克隆抗体,使囊尾蚴病的特异性免疫诊断成为可能。 作者用猪体内猪囊尾蚴制得尿素溶性抗     

猪囊虫抗原的提纯及ELISA试剂诊断应用研究

本文报告用Sephadex G-200层析技术纯化猪囊尾蚴的囊液及囊体粗抗原,将所得6种纯化抗原组分和2种粗抗原在相同条件下,对74例囊虫病人血清、42例脑囊虫病人脑脊液、91例健康人血清及30份正常脑脊液进行检测,结果表明:纯化囊液抗原CF_1组分对病人血清和脑脊液标本的检出阳性率分别为94.6%和95.2%,都明显高于其它各抗原组分(阳性率血清为78.4%～48.6%,脑脊液为83.3%～40.5%),对91例健康人血清标本和30例正常脑脊液标本检测均无假阳性反应,其它各抗原组分对91例健康人血清标本检测假阳性率为6.59%～19.78%,对30例正常脑脊液标本检测无假阳性反应。提示CF_1抗原是较敏感、特异的囊虫病ELISA试验诊断抗原。     

灭囊灵对体外猪囊尾蚴抑制作用的扫描电镜观察

为了验证灭囊灵对猪囊尾蚴的抑制作用，应用扫描电镜观察了药物体外作用于猪囊尾蚴的结果。20%火囊灵和0．04%吡喹酮作用后均未见脱囊，二对猪囊尾蚴的囊壁具有明显破坏作用，表现为囊壁萎缩，皮层外质膜受损，微毛结构不清或脱落，表面布满颗粒状物；1%丙硫咪唑组有16．7%囊尾蚴已脱囊，对脱囊尾蚴的颈节上皮有一定损伤作用。上述结果表明灭囊灵对猪囊尾蚴具有明显杀伤作用。     

4例眼内猪囊尾蚴病超声断层显像诊断

临床上见到的眼内囊猪尾蚴,多位于玻璃体内和视网膜下。当晶状体混浊,球内出血、渗出及机化物等遮盖时,诊断往往发生困难。超声断层显象检查,不受上述各种因素的影响,对眼内寄生虫,尤其是猪囊尾蚴的诊断,有重要的帮助。眼猪囊尾蚴病罕见,国内外文献极少报告。现将近年来我们积累的4例眼内猪囊尾蚴的超声断层显像诊断,分析报道如下。     

灭囊灵对体外培养的猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响

为探讨灭囊灵杀灭猪囊尾蚴的作用机制，应用PAGE和薄层扫描技术观察了灭囊灵对体外培养猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响。结果表明，灭囊灵组囊尾蚴蛋白经PAGE可分离出17－25条蛋白带。经薄层扫描分析，灭囊灵0．6ml、1．2ml和2．4ml三个剂量组在70－75区段蛋白扫描无峰；0．6ml组在105－110区段峰值最高，1．2ml和2．4ml组在110－115区段峰值最高。峰面面积分值占8％以上为高峰带，0．6ml和2．4ml组可见6个高峰 ，1．2ml组可见5个高峰。以上3项指标与原囊尾蚴和空白对照组均有明显差别。结论：灭囊灵对猪囊尾蚴虫体蛋白质组分和含量均有明显影响。     

猪囊尾蚴两种抗原的对比分析

近几年来用尿素提取寄生虫抗原的研究日渐增多,结果均证明尿素溶性抗原比水溶性抗原敏感和特异。因此我们用Sepharose4B分别提纯猪囊尾蚴Ag—W和Ag—W,用ELISA对这些抗原进行对比分析,以寻求既敏感又特异的抗原组份。     

灭囊灵与其主要成分对猪囊尾蚴体外抑制作用的透射电镜观察

为进一步探讨来囊灵对猪囊尾蚴的抑制效果,对灭囊灵及其主要成分全蝎、矾石、硝石等对钎囊尾蚴体外抑制作用超微结构变化进行观察。结果表明,灭囊灵对猪囊尾蚴皮层、基底膜、肌层和裨层均有明显损伤作用;矾石和硝石对细胞结构的研究作用优于全蝎。结论：灭囊灵对囊尾蚴 上皮结构和神经索的损伤明显优于其各个成分。     

灭囊灵对体外培养的猪囊尾蚴虫体游离氨基酸组成成分与含量的影响

为探讨灭囊灵对猪囊尾蚴的氨基酸代谢是否有影响,应用日立825—50氨基酸自动分析仪测定灭囊灵生理盐水浸剂作用于体外培养猪囊尾蚴的氨基酸组成及含量变化。结果显示,空白对照组囊尾蚴含15种氨基酸,包括6种必需氨基酸。经灭囊灵作用后,除脯氨酸和精氨酸以外,其它13种游离氨基酸的含量随着灭囊灵浓度的增高而呈明显上升趋势,其中以1.2ml 剂量组增高的比例为最大。结论:灭囊灵对猪囊尾蚴的氨基酸代谢有明显影响。     

基于IgY的ELISA用于囊尾蚴循环抗原的检测

目的 建立基于IgY的双抗体夹心ELISA用于囊尾蚴病的诊断.方法 制备并纯化抗囊尾蚴循环抗原(CA)卵黄抗体(IgY),建立以抗CA的IgY为捕获抗体,酶标记抗CA的单克隆抗体1A5为检测抗体的双抗体夹心ELISA法,共检测样品450份,并与捕获抗体和检测抗体均为单克隆抗体的ELISA法比较,验证方法的敏感性、特异性与实用性.结果 成功制备并鉴定了特异性IgY抗体,建立了基于Igy的双抗体夹心ELISA检测体系.IgY-ELISA和双单抗-ELISA检测囊尾蚴CA的灵敏度分别为8.3 μg/L和13.9 μg/L.IgY-ELISA检测囊尾蚴病患者血清与脑脊液的CA阳性率分别为100％ (139/139)与89.5％ (17/19),囊尾蚴病猪血清的阳性率100％ (222/222),健康人与健康猪血清的阴性率为100％.结论 建立的基于lgY的双抗体夹心ELISA检测囊尾蚴CA用于囊尾蚴病诊断,具有较高的特异性和敏感性,可用于囊尾蚴病的辅助诊断.     

粪便 HPSA 检测法筛查 HP感染的临床诊断价值

目的：评价粪便HP抗原检测方法的临床价值。方法与金标法检测幽门螺杆菌、13 C-尿素呼气试验（13C-UBT）检测幽门螺杆菌在临床实验统计数据基础上进行灵敏性、特异性及准确性分析。结果 HPSA法与金标法、13C-UBT法临床实验数据比较分析可知,在敏感性、特异性及准确性上无明显差异,但HPSA法较其它两种检测方法具有简便、易行、省时及经济,尤其适用于儿童、老年人、胃癌患者的筛查及无法开展13C或14C-尿素呼气试验的人群。结论粪便HP抗原检测法是采用纯化抗人多克隆抗体和酶标抗体双抗体夹心免疫法对 HPSA进行检测。该方法值得进行普遍推广。     

ELISA诊断囊尾蚴病抗原改进的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中抗囊尾蚴抗体,通常采用囊液为抗原。为摸索抗原来源的新途径,我们对囊尾蚴抗原进行了提取及其初步试验观察。材料与方法一、聚苯乙烯反应板(10×4孔):上海第三     

灭囊灵体外抑制猪囊尾蚴活性的初步实验研究

为了探讨灭囊灵灭活猪囊尾蚴的作用-对灭囊灵复方的水和醇提取物，雷丸、槟榔醇提取物及矾石，丙硫眯唑进行了体外对猪囊尾蚴灭活作用的实验研究。结果表明,灭囊灵复方醇和水提取物的灭活率均为100％，50%雷丸和37.5%槟榔醇提取物的灭活率分别为75%和80％，l0％和2．5％矾石灭活率均为100%，1%和0．5％丙硫咪唑的灭活率分别为53．3%和40％。上述结果表明灭囊灵复方和单味药对猪囊尾蚴的体外抑制作用均明显优于丙硫眯唑。     

区带离心在肾综合征出血热（HFRS）纯化疫苗生产中的应用

根据区带离心原理和肾综合征出血热病毒的特点，采有蔗糖作为梯度介质，经区带离心，纯化出效抗原成分囊膜糖蛋白和核壳蛋白，除去非特异性杂蛋白，以此为基础建立了肾综合征出血热疫苗纯化工艺。     

应用酶联免疫吸附实验检测肠出血性大肠村菌Ｏ１５７：Ｈ７

目的：制备和纯化Ｏ１５７：Ｈ７抗原,免疫家兔和豚鼠,获得高效价的抗Ｏ１５７：Ｈ７免疫血清并进行纯化及酶标记。建立对Ｏ１５７：Ｈ７感染患者快速诊断方法,做到早期发现及时治疗,有效控制疫情的蔓延。方法：ＥＬＩＳＡ双抗休夹心法检测Ｏ１５７：Ｈ７抗原,步骤：包被特异性抗体,加处理后的粪便等标本,然后加入抗Ｏ１５７：Ｈ７酶结合物,最后加入底物显色。结果：本课题所研制的抗Ｏ１５７：Ｈ７呈阳性反应,而与其他相关细菌无交叉反应。结论：应用酶联免疫吸附试验（即双抗体夹心法）对肠出血大鼠肝菌Ｏ１５７：Ｈ７抗原的检测较常规法实验程序简捷、快速、敏感。临床和现场验证结果表明,其方法具有灵敏度高,特异性强操作简单等特点,为肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７的鉴定及快速诊断提供了一种新的检测手段。     

IHA方法对早期脑囊虫病的诊断意义

绦虫病患者往往伴有脑囊虫病,前者易于诊断治疗,后者诊断较为困难,尤其是无临床症状的早期脑囊虫病患者更不易早期发现。我们用 IHA(间接血凝试验)方法,对治愈后的绦虫病患者进行动态观察。对 IHA 持续阳性者做进一步检查,查出无明显临床症状的脑囊虫病患者。这个方法对脑囊虫病的早期发现有一定意义。方法一、IHA 方法:从新鲜猪囊尾蚴中,吸出囊液,经透析后,离心,上清液为抗原,将1:10抗原用等量0.125%戊二醛醛化羊红细胞混合,37℃致敏30分钟后,洗去多余抗原,配成1%浓度。患者血清加在96孔 V 型血凝板上,以1:2～1:1024倍稀     

灭囊灵对体外培养的猪囊尾蚴摄取~3H-葡萄糖的影响

为研究中药灭囊灵对猪囊尾蚴的杀灭机制,用SL-5018型闪烁计数器比较了4种浓度的灭囊灵生理盐水浸剂对体外培养的猪囊尾蚴摄取~3H-葡萄糖的变化。结果表明,灭囊灵组反映放射性强度的脉冲数(CPM)随着剂量增加而增大,各剂量组CPM均明显高于空白对照组;阿苯达唑剂量组的CPM亦均高于空白对照组,但随着剂量增加,其CPM反而相应减少。结论:灭囊灵和阿苯达唑二者对猪囊尾蚴糖代谢均有明显干扰作用,但其作用途径和干扰方式存在着差异。     

竞争性蛋白结合法检测囊尾蚴病患者血浆中cAMP含量

人体感染囊尾蚴后,患者血清中具有高水平的总IgE;并与特异性IgE同步增加。经间接非特异性及特异性肥大细胞脱颗粒试验进一步证实,囊尾蚴病患者的血清中确实存在特异性IgE,致敏的肥大细胞在囊尾蚴抗原作用下发生脱颗粒反应;释放出组织胺等生物活性物质。鉴于IgE及其介导的免疫反应还涉及cAMP的含量,因此,本文应用竞争性蛋白结     

松籽油中γ-亚麻酸的纯化研究

目的探讨松籽油中γ-亚麻酸的纯化工艺。方法采用尿素包合法。结果最佳工艺条件是脂肪酸、尿素与甲醇的质量比为1：5：5，包合温度60℃，包合时间0．5h。结论本方法可较好地纯化松籽油中γ-亚麻酸。     

不同tPSA、f/tPSA截点对前列腺癌诊断的价值

目的：探讨不同的总前列腺特异性抗原（tPSA）值、游离前列腺特异性抗原（fPSA）与tPSA比值（f/tPSA）在筛查及诊断前列腺癌（PCa）中的意义。方法：采用化学发光免疫分析法检测134例前列腺疾病病人的tPSA、fPSA,计算f/tPSA。结果：（1）PCa和良性前列腺增生（BPH）组患者tPSA〈10ng/ml时,两组差异无显著性;tPSA〉10ng/ml时,两组差异有显著性。且f/tPSA比值差异有显著性（P〈0.05）。（2）当PSA〈20ng/ml时,f/tPSA值取0.15有较好敏感性、特异性及诊断效率;当PSA水平〉20ng/ml,f/tPSA值取0.1其特异性与诊断效率较好。结论：在tPSA值为4～10ng/ml时,f/tPSA值取0.15为截点较合适,当tPSA值为10～20μg/L时,f/tPSA值取0.15为截点较合适,当tPSA值〉20μg/L时,f/tPSA值取0.1为截点较合适,能有效筛查前列腺疾病那些需要穿刺或重复穿刺的患者。     

^14C—尿素呼气试验检测幽门螺杆菌感染的临床应用

目的：探讨^14C-尿素呼气试验(UBT)检测幽门螺杆菌(Hp)感染的临床应用价值。方法：选取60例患并通过胃镜检查以快速尿素酶试验(RUT)检测结果作为诊断Hp的标难对照，评价^14C-尿素呼气试验诊断Hp感染的特异性，敏感性和准确性。结果：在快速尿素酶检测Hp呈阳性的45例中，^14C-尿素呼气试验检测Kp阳性为43例，阴性的为2例，其诊断HP感染的敏感性95．6％(43／45)，特异性100%(15／15)，难确性96．7％(58／60)。结论：^14C-尿素呼气试验具有较高的敏感性和特异性，是一种简便可靠的非侵入性Hp检测方法。