SCF和TGF-β反义寡核苷酸对CD34~ 造血细胞的协同作用

转化生长因子-β1(TGF-β1)反义寡核苷酸能使骨髓中幼稚的CD34~ 细胞从静息期进入细胞周期,从而促进CFU-GEMM及早期BFU-E的集落形成。由于干细胞因子(SCF)对CD34~ 细胞的集落形成也有类似的作用,作者对SCF的作用是否与阻断TGF-β的抑制效应有关进行了研究。结果表明,与TGF-β1反义核酸、SCF单用相比,两者合用对骨髓CD34~ 细胞集落形成的促进作用优于递加作用,对脐血的促进作用略低于递加作用。这说明SCF仅可使部分被TGF-β维持在静息期的脐血造血细胞进入细胞周期。当TGF-β1反义寡核苷酸和SCF合用时,脐血中CFU-GEMM的绝对数比骨髓中CD34~ 细胞多4倍。这与我们曾观察到的脐血所含的CD34~ CD38~-细胞,即对TGF-β1反义寡核苷酸有反应的细胞群比骨髓中多4倍的结果相一致。     

反义寡核苷酸在肾纤维化中的应用

反义寡核苷酸是指序列与特定mRNA互补的含有15～20个核苷酸的DNA合成片断。其作为一种调控特定基因的手段，主要作用机制是通过与靶序列结合后激活RnaseH降解mRNA来达到抑制靶基因表达的目的。     

反义转化生长因子β1抑制Ⅲ度烫伤愈合中瘢痕形成的实验研究

背景瘢痕的形成涉及多种因素,其中之一是转化生长因子β1(TGFβ1)的高表达,为达到抑制TGFβ1过度表达的目的,尝试用反义TGFβ1抑制瘢痕形成的方法,将基因治疗技术运用于临床医学.目的探讨反义TGFβ1对Ⅲ度烫伤愈合中瘢痕生成的抑制作用.设计随机对照、重复测量设计.地点和对象在上海第二医科大学生物化学教研室完成.清洁级雄性SD大鼠105只,体质量(250±20)g,购于中科院上海实验动物中心.干预SD大鼠Ⅲ度烫伤后,分3组进行处理①反义TCFβ1脱氧寡核苷酸.②反义TGFβ1重组质粒.③空白对照.分别于烫伤后1,3,5,14 dRT-PCR、免疫组化检测TGFβ1mRNA和蛋白质的表达.烫伤后5,14,21,28,60 d原位杂交检测Ⅰ型胶原mRNA的表达变化,病理检测炎性细胞浸润反应和胶原分布状况.主要观察指标①烫伤后1,3,5,14 d RT-PCR,TGFβ1mRNA和蛋白质的表达.②烫伤后5,14,21,28,60 d Ⅰ型胶原mRNA的表达变化.③病理检测炎性细胞浸润反应和胶原分布状况.结果反义ODN组和反义重组质粒组在烫伤后第1天TGFβ1mRNA表达水平与对照组相比无降低,14 d分别为0.176±0.014和0.213±0.071,表达均减少.反义作用组TGFβ1蛋白质的表达在烫伤后3周内均为低表达.原位杂交显示对照组在14 dⅠ型胶原mRNA开始表达,28 d达到高峰,随后减少,反义作用组无此现象,一直保持低表达.病理染色显示反义作用组炎性细胞浸润少,炎性反应低,胶原合成减少.结论反义TGFβ1可抑制Ⅲ度烫伤愈合中瘢痕的形成.     

神经元谷氨酸转运体反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经保护作用

目的:测定神经元谷氨酸转运体(excitaforyaminoacidcarrierl,EAAC1)反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响,探讨脑缺血神经保护新方法。方法:将大鼠分为假手术组、模型组、反义寡核苷酸组(简称反义组)和正义寡核苷酸组(简称正义组),用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Westernblot法、神经功能缺损评分、TTC染色、尼氏染色观察缺血区EAAC1表达和EAAC1反义寡核苷酸对缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响。结果:模型组缺血区EAAC1表达(0.61±0.03)明显高于假手术组(0.20±0.01),差异有显著性意义(F=49.49,P<0.01),而反义组表达(0.31±0.01)低于模型组,差异有显著性意义(F=49.33,P<0.05)。反义组大鼠梗死体积(101.33±15.08)mm3显著小于模型组(140.5±20.27)mm3,差异有显著性意义(F=6.66,P<0.01),反义组大鼠神经功能缺损评分(3.33±0.41)分,显著高于模型组(1.42±0.34)分,差异有显著性意义(F=48.51,P<0.01),海马各区数密度值均高于模型组(P<0.01和P<0.05)。结论:EAAC1反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤有神经保护作用。     

STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌放射治疗的增效作用

目的：评价STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌细胞A549增殖抑制作用及辐射增敏作用，探讨新的肺癌分子靶向治疗药物。方法：2003-10／2004-11于解放军第二军医大学放射医学教研室，应用阳离子脂质体介导STAT3反义寡核苷酸转染人肺腺癌A549细胞，westem blot检测STAT3总蛋白和p—STAT3蛋白的表达；MTT法检测细胞增殖状态；流式细胞术检测细胞周期；用克隆形成分析和SF2研究人肺腺癌细胞A549辐射敏感性的变化。结果：STAT3反义寡核苷酸转染人肺腺癌A549后STAT3蛋白的表达和磷酸化水平下降，细胞增殖受抑制，出现Gl阻滞；照射后12d．反义寡核苷酸组测定SF2值是(46．78％&;#177;3．25％)．较对照组(61．52％&;#177;2．74％)明显降低(P&;lt;0．01)。结论：STAT3反义寡核苷酸可以抑制STAT3蛋白表达和细胞增殖，对人肺腺癌细胞A549有辐射增敏作用。     

TGF-β1,反义c-myc和反义bcr/abl基因转导诱发细胞凋亡的电镜观察(英文)

程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)是一主动性细胞“自杀”过程,是细胞内部基因引导的一系列精密生化级联反应的结果。凋亡(apoptosis)是PCD的形态学指征,探讨何种基因并以何种途径诱发PCD是当前研究的热点,也是本研究的动机。基因转导是从分子水平研究基因调控的一种手段。本研究采用基因转导法结合电镜观察细胞凋亡,选择的目的基因分别是构建在真核表达载体pMAMneo中人TGF-β1cDNA基因全长,采用磷酸钙共沉淀法,体外转染贴壁生长的人肺巨细胞癌PLA-801D株细胞,以及构建在逆转录病毒载体pDORneo中的反义c-myc、反义bcr/abl基因片段,采用Lipofectin体外转染悬浮培养的人白血病HL-60或K562细胞,除进行一系列分子细胞生物学指标的检测外,重点对转染后不同阶段细胞进行了透射电镜观察。结果发现转染TGF-β1的人肺癌细胞多呈现典型的“凋亡”改变;核异染质凝聚呈“半月形”、细胞出芽(budding),形成大量“凋亡小体”,胞浆细胞器尚完好,凋亡小体内亦见完整压扁的细胞器,并可见吞噬有染色质凝块的癌细胞,而转染反义c-myc,反义bcr/abl的HL-60或K562细胞更多出现核“新月体”,亦见“球形”、“面包圈”状凝聚异染质,并见吞噬“凋亡小体”现象。转染TGF-β1细胞DNA电泳呈现的“DNA梯带”更进一步证实上述     

脂质体转染反义寡核苷酸对重型β-地中海贫血红系细胞α-珠蛋白的调控作用

目的 研究脂质体转染反义寡核苷酸(ASON)对重型β-地中海贫血(β-地贫)患者红系细胞α-珠蛋白基因的调控作用,为基因治疗β-地贫提供新的思路.方法 将前期实验筛选获得的高效抑制α-珠蛋白基因表达的ASON以最佳浓度作用于体外培养的重型β-地贫患者红系细胞,并没空白对照组,经实时荧光定量RT-PCR分析ASON组和空白对照组中红系细胞α、β、γ-珠蛋白基因表达情况,观察ASON对相应珠蛋白基因表达的影响,通过高效液相色谱法(HPLC)检测ASON作用后血红蛋白水平,并经透射电子显微镜(电镜)观察ASON作用前后红系细胞内α-珠蛋白肽链沉积情况,了解ASON对β-地贫患者红系细胞内过剩α-珠蛋白肽链的影响.结果 实时荧光定量RT-PCR结果显示ASON组α-珠蛋白基因mRNA表达(9.04±0.29)较空白对照组(24.23±0.29)减低(P<0.01),α/(β+γ)珠蛋白比例失衡得到改善[ASON组、空白对照组分别为(0.79±0.02)、(2.26±0.06),P<0.01];HPLC检测表明ASON作用后α-珠蛋白基因表达下调,HbA2和HbF表达增加;透射电镜结果证实ASON作用后革型β-地贫患者红系细胞内过剩的α-珠蛋白肽链沉积减少,特别是在早期幼稚红细胞中,在空白对照组中沉积物无明显变化.结论 高效ASON可抑制体外培养的重型β-地贫患者红系细胞α-珠蛋白基因表达,有助于改善珠蛋白基因α/(β+γ)比例失衡,并减少过剩α-珠蛋白肽链在红系细胞内的沉积,为基因治疗β-地贫提供新的思路.     

β1受体反义基因对肾性高血压大鼠心脏β受体的影响

目的观察阳离子脂质体混合物与β1受体反义寡核苷酸（β1-AS-ODN）单次注射对两肾一夹肾性高血压大鼠血压及心脏β受体mRNA、受体密度的影响。方法用SD大鼠制作两肾一夹肾性高血压模型,将动物随机分为5组,每组18只：β1-AS-ODN组,β1-IN-ODN组,2K1C组,假手术组,SD组。于术后第4周经鼠尾静脉注射阳离子脂质体/β1-ODN的混合物（摩尔比2．0）,注射剂量为0．5mg·kg^-1,Tail-cuff法检测血压,半定量RT-PCR测定β1mRNA水平,放射免疫法测定受体密度,Western blot测定蛋白水平。数据采用one-way ANOVA分析,两两比较用Newman-Keuls法。结果与2K1C组相比,β1-AS-ODN可使血压下降维持4周（P〈0．05）,可以使血压最大下降39mmHg;β1-AS-ODN组与高血压组β1受体mRNA水平无明显差异,但β1受体蛋白水平明显降低（P〈0．05）;与2K1C组比较,注射后第2、7、30天反义组的β1受体水平明显降低,分别为29．5％、35．5％、20．4％（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;三组陧受体水平差异无统计学意义。结论以β1受体为靶基因的反义基因治疗降压效果显著,β1反义寡核苷酸在转录后发挥作用抑制目的基因表达;β1反义寡核苷酸的降压效果与其特异性地和心脏β1受体结合相关,而与β2受体无关。     

Survivin联用bcl-2反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨survivin、bcl-2反义寡核苷酸(ASODN)联用对白血病细胞凋亡的诱导作用。方法:设计并合成靶向survivin ASODN和bcl-2的ASODN,应用脂质体Lipofectamine TM2000作为载体,转染寡核苷酸入白血病K562细胞。实验分为空白对照组、脂质体空转染组、无关序列寡核苷酸组、survivin ASODN组、bcl-2ASODN组和survivin、bcl-2ASODN半量联用组。转染48h后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR半定量检测K562细胞survivin mRNA表达。结果:survivin ASODN和bcl-2ASODN对K562细胞均有一定的增殖抑制作用,抑制率分别为48.78%、40.24%。而survivin、bcl-2ASODN半量联用组的细胞增殖抑制率为60.98%,明显高于单用组(P<0.01)。与非ASODN组相比,survivin ASODN和bcl-2ASODN均可诱导K562细胞凋亡,凋亡率分别为(13.36±4.03)%、(10.40±1.71)%,两者联用凋亡率提高到(26.14±4.39)%(P<0.01)。Survivin、bcl-2ASODN半量联用组survivin mRNA水平明显低于survivin ASODN组和bcl-2ASODN组。结论:survivin、bcl-2ASODN联用可协同抑制K562细胞的增殖,增强凋亡诱导作用,可为白血病基因治疗提供一项新策略。     

STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌放射治疗的增效作用

目的:评价STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌细胞A549增殖抑制作用及辐射增敏作用,探讨新的肺癌分子靶向治疗药物。方法:2003-10/2004-11于解放军第二军医大学放射医学教研室,应用阳离子脂质体介导STAT3反义寡核苷酸转染人肺腺癌A549细胞,westernblot检测STAT3总蛋白和p-STAT3蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖状态;流式细胞术检测细胞周期;用克隆形成分析和SF2研究人肺腺癌细胞A549辐射敏感性的变化。结果:STAT3反义寡核苷酸转染人肺腺癌A549后STAT3蛋白的表达和磷酸化水平下降,细胞增殖受抑制,出现G1阻滞;照射后12d,反义寡核苷酸组测定SF2值是(46.78%±3.25%),较对照组(61.52%±2.74%)明显降低(P<0.01)。结论:STAT3反义寡核苷酸可以抑制STAT3蛋白表达和细胞增殖,对人肺腺癌细胞A549有辐射增敏作用。     

β1整合素反义寡核苷酸对人结肠癌细胞黏附和侵袭抑制作用

目的研究β1整合素反义寡核苷酸（ASODN）对人结肠癌HT-29细胞侵袭的抑制作用。方法以脂质体为载体将硫代磷酸修饰的β1整合素ASODN及无义寡核苷酸（NSODN）转染人结肠癌HT-29细胞,通过RT-PCR及Western-Blot试验,分别测定ASODN组、NSODN组和空白对照组β1整合素mRNA和蛋白的表达,MTT法和Transwell小室法分别测定其黏附力和侵袭力。结果与NSODN组和空白对照组相比较,ASODN组中β1整合素mRNA和蛋白表达强度明显降低;ASODN组和NSODN组转染的人结肠癌HT-29细胞侵袭力均下降,但前者下降较为明显。结论β1整合素ASODN转染HT-29细胞后,通过降低其β1整合素mRNA和蛋白表达水平,从而抑制其对细胞外基质的侵袭。     

肿瘤基因治疗学研究：血管内皮生长因子反义寡核苷酸对小鼠Lewis肺癌生长的抑制

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASPODN)治疗肺癌的可能性。方法：实验于2002—12／2004—05在哈尔滨医科大学第一临床医学院中心实验室完成。制备C57BL／6小鼠皮下肺癌模型30只，随机分为3组(每组10只)：VEGF—ASPODN治疗组，VEGF正义寡核苷酸(SPODN)治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后24h内，分别皮下注射AS—PODN及SPODN进行治疗，对照组只注射生理盐水，2次／周，连续4周；观察各组小鼠肿瘤的生长情况、游标卡尺测量肿瘤体积大小。断颈处死小鼠，光镜及电镜下观察肿瘤组织形态学改变及超微结构变化。结果：与对照组瘤质量[(7．83&;#177;0．78)g]比较，VEGF—ASPODN组[(4．49&;#177;0．43)g]能明显抑制小鼠肿瘤生长(P&;lt;0．01)，VEGF—SPODN组[(7．73&;#177;0．69)g]则无明显作用(P&;gt;0．05)。VEGF-ASPODN组和VEGF-SPODN组抑瘤率分别为42．7％和5．9％。组织形态学及超微结构观察，VEGF-ASPODN能明显抑制肿瘤细胞生长，降低增殖活性。结论：肿瘤原位注射VEGF—ASPODN能抑制小鼠肺癌生长。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对小鼠在体肺癌细胞的抑制作用

目的：探讨血管内皮生长因子反义寡核苷酸基因治疗方法对模型小鼠在体肺癌细胞的抑制作用。方法：于2001-05／2002-01在哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心制作C57BL／6小鼠皮下肺癌模型30只，分为血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗组、血管内皮生长因子正义寡核苷酸治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后24h内，用反义寡核苷酸及正义寡核苷酸皮下注射进行治疗，对照组只注射生理盐水，观察小鼠肿瘤的生长情况。用免疫组化方法检测血管内皮生长因子蛋白表达，强阳性为卅，弱阳性为+。通过反转录多聚酶链反应检测血管内皮生长因子mRNA的表达，计算血管内皮生长因子与β-actin比值作为血管内皮生长因子表达水平参数。结果：30只模型鼠均进入结果分析。①平均瘤质量：对照组、血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗组、血管内皮生长因子正义寡核苷酸治疗组分别为(7．83&;#177;0．78)，(4．49&;#177;0．43)和(7．73&;#177;0．69)g。②血管内皮生长因子在癌周表达强度高于癌内，在对照组及血管内皮生长因子正义寡核苷酸组多呈强阳性，而血管内皮生长因子反义寡核苷酸组多呈弱阳性。③血管内皮生长因子120／β-actin：血管内皮生长因子反义寡核苷酸组(0．1594&;#177;0．025)低于对照组[(0．4020&;#177;0．032)，P&;lt;0．01]，低于血管内皮生长因子正义寡核苷酸组【(0．3805&;#177;0．030)，P&;lt;．01】。④血管内皮生长因子164／β-actin：血管内皮生长因子反义寡核苷酸组(0．3073&;#177;0．021)低于对照组[(0．878O&;#177;0．029)，P&;lt;0．01]，低于血管内皮生长因子正义寡核苷酸组[(0．8481&;#177;0．020)，P&;lt;0．01]。结论：血管内皮生长因子反义寡核苷酸与肿瘤血管的生成密切相关。原位注射血管内皮生长因子反义寡核苷酸能抑制小鼠在体肺癌细胞的生长。     

Id反义寡核苷酸对A549肺癌细胞的抑制及意义

【目的】观察Id反义寡核苷酸（IdASOD）对A549细胞中Id蛋白、mRNA表达及细胞的影响。【方法】体外培养A549细胞,并转染Id反义寡核苷酸;运用RT-PCR与Western-blot检测反义寡核苷酸对A549细胞中Id基因的抑制及蛋白表达的变化;用MTT法与细胞贴壁率检测转染反义寡核苷酸后A549细胞生物学特征的变化。【结果】转染反义寡核苷酸后A549中IdmRNA与蛋白表达水平明显低于未转染组（P〈0．05）,细胞存活率与活性明显下降（P〈0．05）。【结论】IdASOD对A549细胞及Id基因与蛋白表达有明显的抑制作用。     

移植肾TGF-β1表达与远期肾功能关系的临床研究

【目的】探讨移植肾早期转化生长因子beta1(TGF β1)表达与移植肾远期功能的关系。【方法】2 0 0 0年 9月至 2 0 0 1年 10月 ,对 37例肾功能正常肾移植后达 1年时的患者检测了血、尿TGF β1浓度和移植肾组织TGF β1mRNA和TGF β1蛋白的表达 ,以后连续进行了至少 3年的随访。随访期内有 7例因肾功能不全诊断为慢性移植肾肾病 (CAN)。将上述 37例患者的尿TGF β1浓度与各自移植肾内TGF β1的表达量以及 3年后的肾功能作相关性分析 ;将 7例CAN患者与 30例非CAN(N CAN)患者的血、尿TGF β1浓度分别进行比较。【结果】肾移植患者于术后达 1年时 ,尿TGF β1浓度与移植肾内TGF β1的表达 (TGF β1mR NA、TGF β1蛋白 )以及 3年后肌酐清除率 (CCr)之间有显著的相关性 (均P <0 .0 1) ;CAN与N CAN患者于肾移植达 1年时血TGF β1浓度分别为 :(39.1± 11.7)和 (38.7± 12 .0 )ng/ml,两者差异无显著性 (P >0 .0 5 )、尿TGF β1浓度分别为 :(371.6± 73.5 )和 (192 .7± 88.2 ) pg/ (mg .Cr) ,两者有显著差异 (P <0 .0 1)。【结论】尿TGF β1与CAN的发生有着密切的关联 ;尿TGF β1与肾TGF β1的分泌有关 ;肾移植后早期尿TGF β1浓度明显升高的患者 ,远期肾功能差。     

TGFβ1反义寡核苷酸对人腹膜间皮细胞增殖和纤维连接蛋白的影响

目的探讨阳离子脂质体介导的TGFβ1反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotides,ASON)对人腹膜间皮细胞(HPMC)体外增殖及其分泌纤维连接蛋白(FN)的影响,初步探索腹膜间皮细胞对腹膜纤维化影响和TGFβ1反义寡核苷酸对其的干预作用,为临床防治腹膜纤维化寻找有效途径。方法①人腹膜间皮细胞原代培养,第三代用于实验;②合成特异性针对TGFβ1mRNA转译起始区ASON及正义、错义寡核苷酸,并和阳离子脂质体形成复合物;③将合成的寡核苷酸与第三代腹膜间皮细胞共同孵育24、48h,分为对照组(F12培养基组)、TGFβ1反义寡核苷酸组、TGFβ1正义寡核苷酸组和TGFβ1错义寡核苷酸组,采用MMT法观察细胞增殖,ELISA法测定细胞上清液内FN蛋白含量以及RT-PCR测定FNmRNA表达。结果①TGFβ1反义寡核苷酸作用人腹膜间皮细胞24、48h后,其细胞增殖率明显低于其它各组(P均<0.05);②TGFβ1反义寡核苷酸作用人腹膜间皮细胞24、48h后其上清液中FN蛋白质的含量明显降低;TGFβ1正义寡核苷酸组明显升高(P<0.05);③正义、反义和错义各组寡核苷酸作用人腹膜间皮细胞24h时FNmRNA表达与对照组比较,正义组上调22%,而反义组和错义组分别下调22%和11%。结论TGFβ1反义寡核苷酸能够抑制人腹膜间皮细胞增殖和FN的过度表达。     

TGF-β1对鼠肾小球白蛋白通透性的影响

[目的]探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠离体肾小球白蛋白通透性的影响及可能的作用机制.[方法]正常雄性SD大鼠,用标准筛技术游离肾小球,应用电视显微术通过肾小球体积变化计算肾小球白蛋白的通透性(Palb).大鼠离体肾小球分别与不同浓度(1 ng/ml、2.5 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml)TGF-β1孵育30 min;与10 ng/ml TGF-β1孵育不同时间(15 min、30 min、45 min、60 min);与5 ng/ml、10 ng/ml TGF-β1及超氧化物歧化酶(SOD)孵育60 min;在没有TGF-β1下与SOD一起孵育60 min,观察不同情况下Palb.[结果]大鼠离体肾小球与1或2.5 ng/ml TGF-β1孵育30 min对Palb无明显影响,与5或10 ng/ml TGF-β1孵育导致Palb显著增加(P＜0.01),且10 ng/ml TGF-β1对Palb影响更为显著;与10 ng/mlTGF-β1一起孵育15、30、45、60 min,Palb均较对照组明显增加(P＜0.01),且随时间延长Palb逐渐增加,孵育60 min时Palb最大;与5 ng/ml、10 ng/mlTGF-β1及SOD一起孵育60 min,Palb无明显增加;与SOD一起孵育Palb亦无明显增加.[结论]TGF-β1呈剂量时间依赖性增加鼠肾小球Palb,TGF-β1可能通过活性氧簇(ROS)介导P出增加,导致蛋白尿;而SOD可减少白蛋白排泄而有肾保护作用.     

穿心莲内酯和吡非尼酮联合给药对TGF-β1诱导的肝星状细胞活化的影响及作用机制

[目的]探讨穿心莲内酯(AG)联合吡非尼酮(PFD)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞LX-2活化的影响及作用机制.[方法]以LX-2作为研究对象,常规体外培养后分为Control组、TGF-β1组、AG组、PFD组、AG+PFD组.采用M T T法测定各组细胞活力,采用qRT-PCR检测各组纤维标...     

WT1反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解ＷＴ１反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 应用ＷＴ１基因的反义寡核苷酸（ＷＴ１ＡＳＯ）处理Ｋ５６２、Ｕ９３７、ＨＬ－６０细胞系,白血病患以及正常人骨髓细胞,然后以台盼蓝拒染法、细胞集落法及流式细胞仪检测法确定白血病细胞的增殖和凋亡。结果 ＷＴ１ ＡＳＯ能够抑制ＷＴ１表达阳性的Ｋ５６２细胞生长,对ＷＴ１表达阴性的Ｕ９３７细胞则无抑制作用;ＷＴ１ ＡＳＯ对８例急性髓系白血病患