不同剂量多疗程地塞米松对早产大鼠肺WNT信号转导途径的影响

目的 探讨产前孕鼠应用不同剂量多疗程地塞米松对早产大鼠肺WNT信号转导途径的影响.方法 孕SD大鼠12只随机分为对照组、地塞米松小剂量组和地塞米松大剂量组,每组4只.于孕第16、17、18天,连续3 d腹腔注射药物.对照组予9 g/L盐水;地塞米松小剂量组予地塞米松0.4 ms/(ks·d);地塞米松大剂量组予地塞米松0.8 mg/(kg·d),均用9 g/L盐水稀释至0.5 mL.取孕19 d胎鼠肺组织,RT-PCR法检测WNT信号转导途径中WNT7b、WNT5a、WNT2、糖原合成酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-cate-nin)基因mRNA的表达.结果 地塞米松小剂量及大剂量组胎肺WNT7b(0.55±0.19、0.64±0.54)及β-catenin基因mRNA的表达量(2.03±0.58、2.40±0.89)均显著高于对照组(WNTTb:0.18±0.10,β-catenin:1.77±0.54)(Pa<0.01),WNT5a mRNA(0.57±0.26、1.13±0.53)和GSK-3β基因mRNA(1.04±0.46、1.09±0.56)表达量均显著低于对照组(WNT5a:1.48±0.70,GSK-3β:2.22±1.02)(P<0.05,0.01),WNT2的表达量与对照组相比差异无统计学意义.结论 产前给予地塞米松影响胎肺WNT7b、WNT5a、β-catenin及GSK-3β基因的表达,可能通过引起WNT信号转导途径障碍导致胎肺形态发育异常,造成胎肺功能缺陷.     

地塞米松和倍他米松对大鼠胎肺骨形态发生蛋白信号转导的影响

目的：比较产前地塞米松、倍他米松给药对大鼠胎肺骨形态发生蛋白(BMP)信号转导通路的影响。方法：15只孕鼠随机分成5组：对照组、地塞米松治疗1 d组、3 d组和倍他米松治疗1 d组及3 d组。孕鼠妊娠第19天剖腹取胎鼠肺组织,通过RT-PCR、免疫组化和Western blot技术检测各组胎肺BMP4、BMP受体2（BMPR-II）、Smad1、转录活化因子2（ATF-2）基因转录及蛋白表达水平。结果：(1) BMP4 mRNA、BMPR-II mRNA、Smad1 mRNA的表达在倍他米松3 d组、1 d组及地塞米松3 d组均高于对照组(P＜0.05)。(2)免疫组化结果显示：与对照组相比,BMP4、BMPR-II、pSmad1、ATF-2在地塞米松3 d组、倍他米松1 d组及3 d组表达量显著增加(P＜0.01)。(3) Western blot检测显示与对照组相比,BMP4、BMPR-II蛋白在地塞米松3 d组及倍他米松1 d组、3 d组中表达丰富(P＜0.01)。结论：倍他米松、地塞米松可能参与调控大鼠胎肺BMP信号转导过程。对BMP信号转导分子BMP4、BMPR-II、Smad1表达的上调可能是其促胎肺成熟的重要机制之一。［中国当代儿科杂志,2010,12(11)：891-896］     

盐酸氨溴索、地塞米松产前用药对大鼠胎肺形态发育影响的对比

目的比较产前3d给盐酸氨溴索、地塞米松及单次给地塞米松对大鼠胎肺形态发育的影响。方法孕鼠12只随机分为9g／L盐水对照组和产前盐酸氨溴索3d治疗组、地塞米松3d及1d治疗组4组，每组3只。孕d19每只孕鼠取6只胎鼠肺组织，通过光镜观察及电镜技术比较2种药物及不同疗程对胎肺形态发育的影响。结果1．光镜下3个治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于对照组（Pa〈0．01），平均肺泡间隔厚度均低于对照组（Pa〈0．01）。2．光镜下地塞米松3d治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于地塞米松1d治疗组，平均肺泡间隔厚度低于地塞米松1d治疗组（Pa〈0．01）。3．光镜下地塞米松3d及1d治疗组每视野肺泡计数、平均肺泡表面积均高于盐酸氨溴索治疗组，平均肺泡间隔厚度低于盐酸氨溴索治疗组（Pa〈0．01）。4．透射电镜观察：治疗组Ⅱ型肺泡上皮内多见板层小体，尤以地塞米松3d治疗组更为多见，且染色深、致密，线粒体等细胞器多；对照组难见板层小体，少见细胞器。结论产前应用地塞米松、盐酸氨溴索均能显著促进胎肺发育；多次地塞米松优于单次地塞米松治疗；多次及单次地塞米松疗效均优于盐酸氨溴索治疗。     

盐酸氨溴索和地塞米松对胎鼠肺表面活性蛋白基因表达的影响

目的　探讨盐酸氨溴索和地塞米松对发育期胎鼠肺表面活性蛋白 (SPs)基因表达的影响。方法　将胎鼠 4 2只随机分为生理盐水对照组和盐酸氨溴索、地塞米松两个干预组 ,剖宫取孕19d的胎鼠肺组织作为早产鼠肺模型 ,用原位杂交研究胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内SP B基因的表达 ,逆转录PCR(RT PCR)观察分析各组肺表面活性蛋白SP A、SP B和SP CmRNA表达变化 ,用 β actinmRNA扩增产物为内参照密度扫描半定量分析。结果　 (1)发育 19d的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内SP BmRNA表达阳性 ;(2 )鼠胚胎发育后期 ,支气管周围也分布着肺泡Ⅱ型上皮细胞 ;(3)生理盐水对照组SP A、SP B、SP CmRNA表达与 β actinmRNA比值分别为 0 81± 0 2 6、0 97± 0 2 0、0 88± 0 11。盐酸氨溴索干预SP A、SP B、SP CmRNA表达比值分别为 1 0 4± 0 16、1 2 8± 0 2 9、1 0 9± 0 2 5 ,与对照组比较显著性增加 (P <0 0 5 )。地塞米松干预后的胎鼠肺SP A、SP B、SP CmRNA表达比值分别为 1 0 8±0 2 5、1 2 3± 0 35、1 2 1± 0 2 5 ,与对照组比较显著性增加 (P <0 0 5 )。 (4 )对比盐酸氨溴索与地塞米松在促进SP A、SP B、SP C基因表达上 ,两者差异没有显著意义 (P >0 0 5 )。结论　盐酸氨溴索和地塞米松产前用药对发育期的胎鼠SPs基     

Wnt7b在Nitrofen诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的 研究Wnt7b在Nitrofen诱导的先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)胎肺中的表达特点,探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测Wnt7b基因在妊娠E17.5、E19.5、E21.5的Nitrofen诱导CDH大鼠模型胎肺及正常对照大鼠胎肺中的相对表达量,并用免疫组化方法检测Wnt7b蛋白在胎肺中的表达.结果 正常对照组和CDH组胎肺中Wnt7b mRNA的表达水平均随着胎龄的增加呈下降趋势,其中E17.5胎龄CDH组胎肺中Wnt7b mRNA的表达水平与对照组相比,差异无统计学意义;而E19.5、E21.5胎龄CDH组胎肺中Wnt7b mRNA的表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).对E21.5胎龄对照组和CDH组的标本进行免疫组化检测,结果显示Wnt7b免疫阳性细胞主要分布在支气管和细支气管上皮,且CDH组Wnt7b免疫阳性程度(以平均光密度值表示)较正常对照组升高,有统计学差异.结论 Wnt7b mRNA表达量随大鼠胎肺逐渐发育成熟而下降,提示其在胎肺中的表达量与胎肺发育的成熟度有关.CDH组中E19.5、E21.5胎龄时Wnt7b mRNA的表达水平明显高于对照组,是CDH孕晚期胎肺发育滞后的分子基础之一,提示Wnt7b在CDH孕晚期胎肺中表达增高可能参与了肺发育不良.Wnt7b蛋白在肺发育中特异性定位于气道上皮,提示信号町能在肺上皮与间质细胞之间有重要联系,协同促进上皮和间质的发育.     

胎肺扩张对肺发育的影响

先天性隔疝主要的死亡原因是该病所并存的肺发育不良。近年来,为提高该病的生存率,人们对肺发育及其影响因素进行了广泛而深入的探讨,其中胎肺扩张与肺发育间的关系的研究尤为引人注目。本文就胎肺扩张在肺发育中的作用及其临床意义作一概述。一、肺的发育［１］通常将...     

表皮生长因子与地塞米松对早产大鼠肺发育的影响

目的 探讨表皮生长因子(EGF)和地塞米松(DEX)对早产大鼠呼吸窘迫综合征的防治作用.方法 将72只胎鼠随机分为EGF、DEX 2个干预组和9 g/L盐水对照组,于孕19 d剖腹取胎鼠,称取胎鼠体质量;通过光镜、图像分析观察胎鼠肺的形态结构;用免疫组织化学方法检测胎鼠肺组织表面活性蛋白A和B(SP-A及SP-B)的表达,并通过计算免疫组织化学平均灰度值比较各组SP-A及SP-B的表达.结果 EGF组胎鼠体质量与对照组比较无明显差异[(1.398 60±0.073 05)g,(1.386 30±0.037 27)g],DEX组胎鼠体质量明显低于对照组[(1.319 20±0.053 26)g,(1.386 30±0.037 27)g].光镜下EGF组与DEX组胎肺可见到明显的肺泡腔结构,对照组肺泡腔尚未发育;图像分析表明EGF组与DEX组胎肺的肺泡腔与肺泡间隔面积之比均大于对照组(Pa<0.01).SP-A及SP-B在3组中均有表达,与对照组比较,SP-A及SP-B在EGF组和DEX组中的表达强度均显著增强(Pa<0.01).结论 EGF和DEX在SD大鼠妊娠第16-18天作用于母体,均能促进胎鼠肺的形态发育和表面活性物质的合成,对早产大鼠呼吸窘迫综合征的发生具有防治作用.二种药物对胎鼠肺的影响程度无明显不同,但产前应用DEX会降低胎鼠体质量,EGF无此不良反应.     

孕鼠叶酸缺乏对子代心脏叶酸结合蛋白1基因及WNT信号转导途径的影响

目的探讨孕鼠叶酸缺乏(FD)对子代心脏发育过程中叶酸结合蛋白1(Folbp1)基因表达及WNT信号转导途径的影响。方法成熟雌性SD大鼠36只随机分为实验组和对照组各18只,分别喂以缺乏叶酸和添加叶酸的纯合饲料。2周后与成熟SD雄性大鼠交配,分别取孕13.51、7.5 d胚胎鼠及新生鼠心脏。用RT-PCR方法检测Folbp1基因及WNT信号转导途径中Wnt和-βcatenin基因mRNA表达。结果Folbp1、Wnt及-βcatenin基因mRNA在孕13.51、7.5 d胚胎心脏及新生鼠心脏中的表达量,实验组均显著低于对照组(P均<0.05)。结论FD影响Folbp1、WNT及-βcatenin基因表达,可能引起叶酸受体功能低下和WNT信号转导途径障碍,从而可能导致心脏发育中形态异常,造成心脏功能缺陷。     

地塞米松对先天性膈疝胎鼠肺发育的影响

目的研究地塞米松对先天性膈疝(Congenital Diaphragmatic Hernia,CDH)胎鼠肺发育的影响,并探讨其可能机制。方法采用Nitrofen法制作胎鼠CDH模型并分组,地塞米松组予以产前地塞米松治疗,Nitrofen组则不予地塞米松治疗,另取正常胎鼠为对照组;采用组织学检查方法评价肺发育情况,免疫组化和图像分析方法检测地塞米松作用前后胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin-like Growth Factor,IGF-Ⅰ)在胎肺中的表达及相对含量。结果与Nitrofen组相比,地塞米松组肺组织中IGF-Ⅰ的表达明显降低,且肺组织发育明显改善。结论胎儿期地塞米松通过下调肺组织中IGF-Ⅰ的表达,来改善肺组织的发育。     

产前使用盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺血小板源性生长因子-A表达的影响

目的探讨产前给盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺血小板源性生长因子-A（PDGF-A）表达的影响。方法9只孕鼠随机分为盐酸氨溴索治疗组、地塞米松治疗组和9g/L盐水对照组,每组3只。分别于孕16、17、18d连续腹腔注射给药,孕19d每只孕鼠取4只胎鼠肺组织用反转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PDGF-AmRNA表达水平,每只孕鼠取5只胎鼠肺组织用免疫组织化学法检测PDGF-A蛋白水平表达。结果1.盐酸氨溴索治疗组、地塞米松治疗组PDGF-AmRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组（Pa〈0.01）。2.盐酸氨溴索治疗组PDGF-AmRNA和蛋白表达水平显著低于地塞米松治疗组（Pa〈0.01）。结论PDGF-A表达于胎肺组织。产前给盐酸氨溴索、地塞米松均能显著促进PDGF-A表达,PDGF-A高表达可能是盐酸氨溴索、地塞米松促胎肺成熟重要机制之一。     

Notch信号通路在肾母细胞瘤中的表达及其意义

目的 探讨Notch信号通路因子在肾母细胞瘤中的表达及其意义.方法 本研究中实验组为收集2010年6月至2014年3月在我院经手术活检诊断为肾母细胞瘤组织的标本.对照组标本为同期由于肾外伤、重复肾等疾病行手术切除获得.所有病例中,肿瘤组患儿共计31例,男17例,女14例,年龄4～144个月,平均年龄37.4个月,肿瘤分期Ⅰ期9例,Ⅱ期8例,Ⅲ期8例,Ⅳ期6例,尚无Ⅴ期病例.对照组为17例患儿,男10例,女7例,年龄23～157个月,平均年龄95.6个月.首先利用临床收集的肾母细胞瘤及非瘤肾脏组织标本,通过RT-PCR方法检测其中notch1的RNA表达水平;同时通过Western blot方法检测DAPT处理后的SK-NEP-1(人肾母细胞瘤细胞系)中Notch信号通路因子与Wnt信号通路因子,以及VEGF的表达水平并进行统计学分析.结果 不同分期WT中notch1的表达:肿瘤组notch1基因mRNA表达较对照组明显增高,且肿瘤分期越高,notch1基因的mRNA表达也相应越高;DAPT作用SK-NEP-1后的表达:分别利用不同浓度的DAPT作用于SK-NEP-1后,SK-NEP-1中Notch信号通路的notch1、Jagged1蛋白表达水平随DAPT浓度增高逐渐下降,且Wnt信号通路中的wnt1、B-catenin蛋白表达水平同样明显下降,在10μmol/L浓度DAPT时上述蛋白表达量较PBS组比较具有明显统计学差异(P＜0.05);而且利用DAPT抑制之后,SK-NEP-1中的血管内皮生长因子(VEGF)表达也明显降低.结论 Notch信号通路蛋白的高表达与肾母细胞瘤的发生及恶性程度存在关系,同时Notch信号通路作为肿瘤治疗靶点也为我们将来治疗肾母细胞瘤提供新的线索和重要依据.     

地塞米松对年幼期哮喘大鼠Toll样受体4信号转导的调节机制

目的研究地塞米松(DXM)对哮喘大鼠肺组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响,探讨TLR4对嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡的调控机制。方法清洁级SD大鼠27只,随机分为对照组、哮喘组、DXM组,每组9只。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型。光镜观察肺组织病理变化;BALF中EOS及其他炎症细胞计数;ELISA测定血清OVA-sIgE含量;原位杂交测定肺组织TLR4mRNA表达;TUNEL法检测EOS凋亡。结果(1)肺组织病理变化:哮喘组支气管及血管周围、肺间质及肺泡腔内炎性细胞浸润,支气管黏膜下水肿,黏液腺增生,黏膜皱褶增多,部分黏膜上皮细胞脱落,可见气道黏液栓;DXM组上述现象明显减轻。(2)BALF中炎症细胞计数:哮喘组BALF中细胞总数(4·29±0·12)×109/L、EOS绝对计数(33·94±5·04)×107/L和EOS占细胞总数的百分比(8·50±0·56)%均高于对照组,分别为(2·01±0·10)×109/L、(1·25±0·27)×107/L、(0·56±0·18)%(均P<0·01);DXM组分别为(2·14±0·10)×109/L、(4·78±1·23)×107/L、(2·17±0·25)%,均低于哮喘组(均P<0·01)。(3)血清OVA-sIgE含量检测:哮喘组(83·40±6·80)μg/ml,高于对照组(14·38±4·25)μg/ml(P<0·01);DXM组(45·02±7·47)μg/ml明显低于哮喘组(均P<0·01)。(4)肺组织TLR4mRNA的检测结果(吸光度):TLR(A值)哮喘组(25·81±3·56),对照组(24·71±0·85)(P>0·05);DXM组(33·94±3·28)表达明显高于哮喘组(P<0·01)。(5)EOS凋亡率检测结果,哮喘组(7·39±1·93)%与对照组(9·06±1·52)%比较,两组差异有统计学意义(P<0·05);DXM组(13·33±1·09)%与哮喘组比较明显增高(均P<0·01)。相关分析结果显示,TLR4mRNA表达与EOS凋亡率有中度正相关(r=0·612,P<0·01)。结论DXM降低血清中OVA-sIgE水平,诱导哮喘大鼠肺组织EOS凋亡,可能与激活TLR4信号通路有关。     

胆汁淤积性肝纤维化中信号通路的研究进展

肝纤维化在慢性肝脏损伤中属于损伤-修复应答的模型,并且肝星状细胞为产生肝脏细胞外基质的主要细胞,在肝纤维化的进程中发挥决定性作用,其活化、增殖是肝纤维化发生的中心环节.胆汁淤积是指在肝细胞水平或胆管水平发生的胆汁生成、分泌或流动障碍,存在于肝细胞与胆管细胞膜上的众多蛋白质是胆汁形成与分泌的重要转运体.近年来对肝纤维化的信号转导通路取得了很多进展,有关胆汁淤积性肝纤维化的研究也日益完善,随着对这些转运体的认识以及对影响胆汁酸盐合成、转运的复杂信号网络系统的深入了解,该文主要就TGF-β/Smad、MAPK、JAK/STAT、NF-κB、Wnt等信号通路在胆汁淤积性肝纤维化的研究进展进行探讨.     

经典Wnt 信号通路在心脏瓣膜发育中的作用

心脏瓣膜的形成是脊椎动物心脏发育过程中的重要环节。心脏瓣膜的发育异常会导致心功能不全,是人类先天性心脏病的常见表征之一。经典Wnt 信号通路在心脏发育的不同时期分别作用于心肌细胞、心内皮细胞以及瓣膜原基细胞的增殖、分化和迁移过程,并调控心内膜垫形成过程中的内皮-间充质细胞转化(EndMT)过程,具有多面性和时效性。该文将总结经典Wnt 信号通路在心脏瓣膜发育领域的最新研究进展,分别阐述经典Wnt 信号通路在不同瓣膜发育阶段中的功能变化,并展示经典Wnt 信号通路与其他瓣膜发育相关的信号通路及表观遗传修饰间的相互关系,最后分析心脏发育后期Wnt 信号通路对瓣膜间充质干细胞发挥潜在功能的作用。     

地塞米松对急性哮喘大鼠肺组织15-脂氧合酶表达的影响

目的 15-脂氧合酶(15-LO)是一种表达于哮喘肺组织,参与抗炎和促炎物质生成的过氧化物酶。基因队列研究认为它可能对过敏性哮喘起保护作用。本研究通过观察哮喘大鼠肺组织15-LO的表达以及地塞米松对其表达的影响,探讨15-LO在哮喘中的作用。方法将27只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为:正常对照组、哮喘组、地塞米松组。采用卵清白蛋白(OVA)致敏、激发,建立支气管哮喘大鼠气道炎症模型。ELISA法测定肺组织匀浆15-LO蛋白含量;RT-PCR法检测肺组织15-LO mRNA表达水平。结果哮喘组大鼠肺组织匀浆15-LO蛋白含量(2080±73μg/mL)及肺组织15-LO mRNA转录水平(0.51±0.14)均显著低于正常对照组的(2472±106μg/mL)和(0.76±0.15)(P<0.01);地塞米松干预后15-LO蛋白(2562±218μg/mL)及mRNA(1.02±0.34)表达均上调(P<0.01)。结论哮喘大鼠肺组织15-LO表达低下,地塞米松可能部分通过上调哮喘大鼠肺组织15-LO而发挥抗炎作用。     

亚溶量C5b-9与足细胞损伤及其信号传导的研究进展

膜性肾病的发病机制与亚溶量C5b-9(SC5b-9)诱导足细胞损伤有关.SC5b-9刺激足细胞产生的氧化剂、蛋白酶、前列腺素类、细胞外基质及各种细胞因子对足细胞有损伤作用.SC5b-9对足细胞的作用主要表现为引起足细胞凋亡、足细胞脱落以及对细胞周期的影响.MAPK通路在SC5b-9导致足细胞损伤中起到重要的作用.     

Wnt通路中Wif-1和β-catenin在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达

目的研究Wnt通路中Wnt通路抑制因子1(Wif-1)和β连环蛋白(β-catenin)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及可能的作用。方法收集初发并且诱导缓解治疗第33天完全缓解的35例ALL患儿的临床资料,以治疗前作为初发组,第33天达完全缓解时作为缓解组,对照组为15例非恶性血液病患儿。RT-PCR方法检测Wif-1和β-cateninm RNA的表达,ELISA法测Wif-1蛋白的表达。结果初发组Wif-1m RNA及蛋白的表达明显低于对照组和缓解组,β-cateninm RNA的表达高于对照组和缓解组(P0.05)。在初发组和缓解组,高危患儿的β-cateninm RNA表达均高于中危和低危患儿,Wif-1m RNA、蛋白表达低于中危和低危患儿(P0.05)。在初发组和缓解组,T-ALL患儿β-cateninm RNA的表达高于B-ALL患儿,Wif-1m RNA、蛋白表达低于B-ALL患儿(P0.05)。各组Wif-1和β-cateninm RNA表达呈负相关(P0.05)。结论 Wif-1表达下降、β-catenin表达增高是儿童急淋发病机制之一,Wif-1下降和/或β-catenin增高的程度可能与预后相关。     

骨桥蛋白在哮喘小鼠肺组织中的表达及地塞米松的干预作用

目的 探讨哮喘气道炎症与骨桥蛋白(OPN)表达的相关性,以及地塞米松(DXM)对OPN表达的影响.方法 50只小鼠随机分为正常对照组、不同程度哮喘组(卵清蛋白OVA激发1周和2周组)及DXM治疗1周和2周组,每组10只;OVA致敏、激发建立急性哮喘模型;苏木精-伊红染色观察各组小鼠气道炎症情况;ELISA法检测血清OVA-sIgE水平;免疫组化和Western blot法分别定位和定量分析肺组织OPN表达;Real-time PCR检测肺组织OPN mRNA水平.结果 哮喘组气道病理学改变较对照组和DXM组明显,且OVA激发2周哮喘组改变较激发1周组明显.哮喘组血清OVA-sIgE水平较对照组和DXM组明显升高(PPPP结论 OPN可能是哮喘发病机制中的重要因素,哮喘气道炎症越重,OPN表达水平可能越高;DXM可能通过抑制OPN的表达来减轻哮喘炎症.