兴奋性氨基酸递质系统在乐果诱导星形胶质细胞活化中的作用

目的 探讨兴奋性氨基酸递质系统在乐果染毒后皮层星形胶质细胞活化中的作用.方法 新生大鼠皮层神经细胞传代3次后获得纯化的星形胶质细胞,分别加入终浓度为10-6、10-5、10-4mol/[的乐果,并用50和100 μmol/LN-甲基-N-天门冬氨酸(NMDA)受体非竞争性拮抗剂MK801对10-4mol/L乐果染毒组进行干预.染毒后48 h收获细胞,高效液相色谱-荧光检测系统(HPLC-FLD)方法测定细胞内兴奋性氨基酸递质含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测NMDA受体NR2B亚基、谷氨酸(Glu)、谷氨酸转运体(GLT-1)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及S100β mRNA表达的变化,免疫荧光染色半定量检测GFAP以及S100β的蛋白表达.结果 各剂量染毒组GLASTmRNA表达下降为对照组的67.8%、68.6%和76.2%,差异有统计学意义(P＜0.05);10-4 mol/L染毒组Glu、Asp含量与对照组相比明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与对照组比较,10-4mol/L染毒组GFAP和10-5mol/L染毒组S100βmRNA表达,10-5、10-4mol/L染毒组GFAP蛋白表达,10-4mol/L染毒组S100β蛋白表达明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01),有剂量依赖趋势.对10-4mol/L染毒组给予50和100 μmol/L MK801干预后,GLT-1、GLAST mRNA表达水平较10-4 mol/L染毒组明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01),NR2B mRNA表达进一步升高,与未干预前相比,差异无统计学意义(P＞0.05),但均明显高于对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);100 μmol/L MK801干预后,Glu的含量升高为10-4mol/L染毒组的1.81倍,差异有统计学意义(P＜0.01);50和100μmol/LMK801干预后,GFAP转录及蛋白水平较未干预前明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01),50 μmol/L干预组S100β蛋白表达水平仍然高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 乐果对兴奋性氨基酸递质系统的影响参与了星形胶质细胞的活化;NMDA受体阻断剂MK801有助于控制星形胶质细胞胶质化.

Abstract：

Objective To study the involvement of excitatory amino acid system in astrocytes activation caused by dimethoate. Methods Pure-cultured astrocytes were gained by three passages from primary cultured rat nerve cells, then treated with 10-6,10-5,10-4 mol/L dimethoate for 48 h, 50 μmol/L and 100μmol/L MK801, a NMDA receptor blocker, was used to intervene the effects induced by 10-4 mol/L dimethoate.HPLC-FLD was utilized to measure the concentrations of excitatory amino acid (EAA), RT-PCR was used to detect the expression levels of NR2B, GLT-1, GLAST, GFAP and S100β mRNA, and immunofluresence staining method was applied to measure the expression levels of GFAP and S100β proteins. Results The expression levels of GLAST mRNA in all exposure groups were 67.8% ,68.6% and 76.2% of control level,respectively, which were significantly lower than that of control group (P＜0.05); The concentrations of EAA significantly decreased in 10-4 mol/L dimethoate group, as compared with control group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA in 10-4 mol/L dimethoate group, of S100β mRNA in 10-5 mol/L dimethoate group, of GFAP protein in 10-4 mol/L and 10-5 mol/L dimethoate groups and S100β protein in 10-4 mol/L dimethoate group were significantly higher than those in control group (P＜0.01). The expression levels of GLT-1 and GLAST mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01), the expression levels of NR2B mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μmol/L MK801 groups increased significantly, as compared with control group (P＜0.05 or P＜0.01); the concentration of Glu in 10-4 mol/L dimethoate plus 100 μ mol/L MK801 group increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA and protein in10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups decreased significantly (P＜0.01); S100β protein expression level in 50 μ mol/L MK801 intervention group was significantly higher than thatl in control group (P＜0.01). Conclusion Excitatory amino acid system involved in astrocytes activation caused by dimethoate. MK801 was useful to control astrocytes gliosis.     

美金刚对急性氧乐果中毒的实验治疗研究

目的研究美金刚(MEM)对急性氧乐果中毒的疗效。方法(1)小鼠用氧乐果(20 mg/kg)灌胃染毒后,经腹腔注射生理盐水(未治疗组)、10 mg/kg MEM(MEM治疗组)或15 mg/kg阿托品(At治疗组),观察3组动物中毒表现和死亡结局。(2)大鼠用氧乐果(40 mg/kg)灌胃染毒后,经腹腔注射生理盐水(未治疗组)或18 mg/kgMEM(MEM治疗组),观察两组动物的中毒表现和死亡结局。结果(1)小鼠MEM治疗组惊厥和呼吸困难发生率均较未治疗组减少,肌颤出现的时间延后,程度减轻,存活率(70%)明显高于未治疗组(10%),差异有统计学意义(P<0.05);(2)大鼠MEM治疗组惊厥、呼吸困难和肌颤出现时间延迟,肌颤程度减轻,存活率(70%)明显高于未治疗组(20%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论MEM对急性氧乐果中毒有一定的治疗作用。     

兴奋性氨基酸递质系统在乐果诱导星形胶质细胞活化中的作用

Objective To study the involvement of excitatory amino acid system in astrocytes activation caused by dimethoate. Methods Pure-cultured astrocytes were gained by three passages from primary cultured rat nerve cells, then treated with 10-6,10-5,10-4 mol/L dimethoate for 48 h, 50 μmol/L and 100μmol/L MK801, a NMDA receptor blocker, was used to intervene the effects induced by 10-4 mol/L dimethoate.HPLC-FLD was utilized to measure the concentrations of excitatory amino acid (EAA), RT-PCR was used to detect the expression levels of NR2B, GLT-1, GLAST, GFAP and S100β mRNA, and immunofluresence staining method was applied to measure the expression levels of GFAP and S100β proteins. Results The expression levels of GLAST mRNA in all exposure groups were 67.8% ,68.6% and 76.2% of control level,respectively, which were significantly lower than that of control group (P＜0.05); The concentrations of EAA significantly decreased in 10-4 mol/L dimethoate group, as compared with control group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA in 10-4 mol/L dimethoate group, of S100β mRNA in 10-5 mol/L dimethoate group, of GFAP protein in 10-4 mol/L and 10-5 mol/L dimethoate groups and S100β protein in 10-4 mol/L dimethoate group were significantly higher than those in control group (P＜0.01). The expression levels of GLT-1 and GLAST mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01), the expression levels of NR2B mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μmol/L MK801 groups increased significantly, as compared with control group (P＜0.05 or P＜0.01); the concentration of Glu in 10-4 mol/L dimethoate plus 100 μ mol/L MK801 group increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA and protein in10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups decreased significantly (P＜0.01); S100β protein expression level in 50 μ mol/L MK801 intervention group was significantly higher than thatl in control group (P＜0.01). Conclusion Excitatory amino acid system involved in astrocytes activation caused by dimethoate. MK801 was useful to control astrocytes gliosis.     

双复磷加阿托品联合呼吸机治疗氧乐果中毒呼吸肌麻痹的疗效

目的 探讨不同剂量双复磷加阿托品联合呼吸机治疗氧乐果中毒所致呼吸肌麻痹的疗效。方法 实验大鼠均给予2倍LD50剂量的氧乐果染毒，以10mg/kg的阿托品对抗胆碱能症状。当大鼠呼吸频率减慢、呼吸困难时即行气管插管并辅助机械通气，阿托品＋呼吸机治疗组阿托品继续原剂量治疗，阿托品＋呼吸机＋双复磷8、15、20mg/kg组于呼吸机治疗即刻及治疗后1、2、3h肌肉注射双复磷，阿托品减至首剂量的1／3－2／3，以维持阿托品化为度。经联合治疗后1、2、3h试行脱机，若大鼠在上述时间中任何一次脱机超过60min，则为联合治疗成功。一次脱机后大鼠存活超过60min或第3次脱机后迅速死亡，均取游离膈神经膈肌标本经MS－302生理药理分析仪测定膈肌功能。结果 阿托品＋呼吸机治疗组大鼠膈肌功能恢复不佳，无一只大鼠脱机成功；阿托品＋呼吸机＋双复磷8、15、20mg/kg组大鼠膈肌功能均恢复良好，3h脱机成功率均在80％以上，与阿托品＋呼吸机治疗组比较，差异均有显著性（P＜0．01）。外加乙酰胆碱（ACh)后，阿托品＋呼吸机＋双复磷8、15、20mg/kg组大鼠膈肌功能均随加ACH后的时间延长而逐渐下降。结论 适量双复磷联合阿托品并辅助呼吸机治疗氧乐果中毒所致的呼吸肌麻痹，能加速中毒大鼠膈肌功能恢复，降低中毒大鼠死亡率。     

氯解磷定对急性氧乐果中毒大鼠的疗效和作用机制

目的　探讨肟类药物氯解磷定 (PAM Cl)对急性氧乐果中毒大鼠的疗效和作用机制。方法　比较氧乐果染毒 ( 5 0mg/kg ,灌胃 )大鼠PAM Cl治疗组与未治疗组中毒症状及全血胆碱酯酶 (ChE)活力的变化 ,并用电刺激单纤维肌电图 (SSFEMG)研究PAM Cl对急性氧乐果中毒大鼠神经肌肉传导 (NMT)的影响。结果 ( 1)氧乐果染毒大鼠在给予PAM Cl治疗后 ,中毒症状减轻 ,症状出现时间延迟 ,存活时间明显延长 ;( 2 )PAM Cl治疗和未治疗组全血ChE活力无明显差异 (t =0 19,P >0 0 5 ) ;( 3 )急性氧乐果中毒大鼠腓肠肌的单肌纤维动作电位平均连续差 (MCD)[( 3 2 78± 5 79) μs]比正常对照大鼠MCD [( 19 3 3± 1 3 0 ) μs]明显延长 ,差异有显著性 (t =7 87,P <0 0 0 1) ;在给予PAM Cl治疗后 ,MCD [( 2 4 2 7± 6 48) μs]明显低于治疗前 (配对t=14 2 ,P <0 0 0 1) ,而与正常对照大鼠MCD差异无显著性 (t=1 67,P >0 0 5 )。结论　PAM Cl对急性氧乐果中毒有治疗作用 ,该作用是通过改善神经肌肉传导阻滞来实现的 ,即“非ChE重活化效应”。     

腺苷预处理对糖氧剥夺损伤星形胶质细胞的保护作用

目的：观察糖氧剥夺对星形胶质细胞的影响及腺苷的保护作用。方法：取体外培养第三代或第四代星形胶质细胞,传代至96孔板或24孔板内,细胞贴壁并长出突起后,随机分为三组：正常对照组（normal control group）、糖氧剥夺组（OGD group）、腺苷预处理组（ADO group）,进行糖氧剥夺/复氧处理。观察糖氧剥夺8h复氧糖24h后星形胶质细胞形态、细胞活性。结果：糖氧剥夺复氧糖24h后,正常对照组星形胶质细胞生长状态良好;OGD模型组星形胶质细胞胞体水肿变圆,细胞形态由不规则变成梭形,突起明显变短或消失;ADO组细胞水肿较轻。OGD模型组星形胶质细胞活力下降,OD值明显低于正常对照组（P〈0.01）;ADO组细胞活力显著高于OGD模型组,表明ADO能明显改善细胞活力（P〈0.01）。结论：糖氧剥夺可引起星形胶质细胞严重损伤,星形胶质细胞形态、活性与缺氧缺糖呈对应变化,腺苷能减少糖氧剥夺后星形胶质细胞形态学改变及细胞凋亡,提示腺苷对糖氧剥夺的星形胶质细胞有一定的保护作用。     

急性一氧化碳中毒患者血清酶活力的动态变化

目的探讨血清酶变化在急性一氧化碳(CO)中毒中的临床意义.方法检测62例急性CO中毒患者血清酶活力及心电图(ECG),并进行动态观察.结果急性CO中毒者5种血清心肌酶活力在中毒后24h开始增高,天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活力分别为(20.2±12.3)、(151.6±91.8)、(146.8±50.4)、(154.8±47.7)、(13.8±8.1)U/L,对照组分别为(12.1±6.7)、(90.6±17.3)、(118.7±13.5)、(89.9±27.9)、(5.9±3.3)U/L,两组的差异均有显著性(P＜0.01);3 d后分别为(21.3±12.3)、(105.8±51.4)、(144.8±51.4)、(159.8±35.4)、(16.2±9.1)U/L;7、12 d后α-HBDH和CK-MB活力仍较对照组增高,差异均有显著性(P＜0.01).乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、乳酸脱氢酶同工酶2(LDH2)活力中毒后24h内增高,并达峰值,分别为(35.3±5.8)、(43.8±5.7)U/L,3 d时LDH1、LDH2和7 d时LDH1与对照组的差异均有显著性(P＜0.01).轻、中度中毒组同期比较,7 d时LDH1与12 d时的差异有显著性(P＜0.01).LDH1血清酶检查异常率最高达78.7%,LDH2为58.3%,LDH为45.2%,CK-MB为37.1%,α-HBDH为33.6%.ECG检查异常率＜10%.结论CO中毒可引起心肌损害,血清酶活力检测可提示心肌损害,有助于此种损害的的早期诊治、疗效观察及预后判断.     

急性氧乐果中毒大鼠血清酶的变化及维生素C保护作用

目的探讨急性氧乐果中毒大鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的动态变化及维生素C的保护作用.方法 72只Wistar大鼠皮下注射不同浓度(0.1、0.5LD50)的氧乐果制备急性有机磷中毒(AOPP)模型,并给予维生素C 200mg/kg治疗,动态检测各组大鼠血清MDA、SOD、GSH-Px含量.结果 0.1LD50和0.5LD50组MDA含量明显高于对照组(P＜0.05),SOD和GSH-Px含量明显低于对照组(P＜0.05):而0.5LD50组MDA含量明显高于0.1LD50组(P＜0.05),SOD和GSH-Px含量明显低于0.1LD50组(P＜0.05);而给予VitC治疗后,MDA含量明显降低,SOD和GSH-Px含量明显升高.结论急性有机磷中毒时氧自由基参与了组织细胞的损伤,VitC治疗有一定的保护作用.     

急性乐果中毒恢复期“反跳与迟发死亡”的临床研究（附11例报告）

急性重症乐果中毒恢复期“反跳与迟发死亡”,至今尚未能有效地控制。因此,对急性乐果中毒恢复期“反跳与迟发死亡”的防治仍是值得关注的问题。本文就重症乐果中毒恢复期“反跳”的救治问题作一探讨。     

一起急性氧中毒抢救失败报告

1985年7月4日晚某乡办啤酒厂在吊装冷却排管时，不慎滑落砸及液氨管道，致使进氨管断裂，约有100多公斤液氨外溢，造成10人中毒。患者均为男性，年龄19～51岁。其中轻度中毒4例。     

小鼠急性氧乐果中毒后肌无力的肌肉病理研究

目的 观察小鼠有机磷中毒后肌无力的情况及病理改变。方法 将117只昆明种小鼠分为7个实验组（1—7d观察组），每组15只，1个正常对照组（6只）及1个生理盐水对照组（6只）。对实验组以50mg/kg氧化乐果腹腔注射染毒（1—7d）；正常对照组不予任何处理；生理盐水对照组给予生理盐水0．9ml腹腔注射。观察小鼠出现肌无力情况．并留取膈肌和股直肌行HE染色和乙酰胆碱酯酶（ACHE）染色，观察肌肉病理改变及运动终板数目及着色变化。结果 105只小鼠急性氧乐果中毒后43只出现肌无力，肌无力发生率40．1％；急性期小鼠死亡7只，死亡率为6．7％；肌无力主要表现为肢体力弱，屈颈肌无力及呼吸困难不明显。肌肉病理染色结果显示。HE染色中实验组肌无力与非肌无力小鼠镜下均呈炎性改变，表现为肌膜核增加，核内移，肌间质炎细胞浸润。肌无力小鼠的肌肉运动终板数目较对照组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）；肌无力组膈肌2、3、7d和股直肌1、3、5、7d的运动终板数明显低于非肌无力组，差异有统计学意义（P〈0．05）；各时间点肌无力组肌肉的运动终板数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 小鼠急性氧乐果中毒后部分出现肌无力；肌无力小鼠肌肉光学显微镜下表现为非特异性炎性改变．AChE染色运动终板数目减少．但不随时间延长而减少。     

大黄对急性氧化乐果中毒大鼠血浆胆碱酯酶和超氧化物歧化酶影响的实验研究

目的研究大黄对急性氧化乐果中毒急诊抢救治疗的辅助作用。方法用sD大鼠作为研究对象。将80只SD大鼠随机分为4组：轻度氧化乐果染毒组、重度氧化乐果染毒组、重度染毒后大黄治疗组和正常对照组。用不同剂量毒物对实验动物进行染毒,造成轻重不同程度的两组染毒动物模型（重度染毒2组、轻度染毒1组）,然后将重度染毒组中的一组给予大黄治疗。结果大黄治疗组动物行为明显优于对照组,而且该组血浆中不同时间点的胆碱酯酶（ChE）和超氧化物歧化酶（SOD）明显高于其它两个中毒对照组（P〈0．01,P〈0．05）。结论大黄对急性氧化乐果中毒急诊抢救治疗有明显的辅助作用。     

Predictors of survival after acute paraquat poisoning

Acute paraquat poisoning is often fatal. Many studies have investigated successful treatment modalities, but no standard treatment yet exists. The purpose of this study was to determine the predictors of survival after acute paraquat poisoning in 602 patients. The paraquat exposure was assessed based on the amount of ingested paraquat and a semiquantitative measure of the urine level of paraquat. Initial clinical parameters including vital signs, hemoglobin, white-blood-cell count, pH, PaCO2, PaO2, blood urea nitrogen, creatinine, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, total bilirubin, amylase, and glucose were obtained at the time of arrival at the emergency room. Outcomes after acute paraquat poisoning were categorized as survivors and nonsurvivors. Multiple logistic regression analysis was applied to assess the predictors of survival after acute paraquat poisoning. Some patients (55.5%) survived after oral ingestion of paraquat, whereas all those exposed to paraquat percutaneous or inhalational route survived. The amount of paraquat (24.5% concentrate of 1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridium dichloride) ingested was 45.6 +/- 74.1 mL (mean +/- SD). In addition to degree of paraquat exposure, survival after acute paraquat poisoning was associated with age, respiratory rate, pH, PaCO2, hemoglobin, white-blood-cell count, blood urea nitrogen, amylase, and the number of failed organs in multiple logistic regression analysis. In conclusion, young age, percutaneous or inhalational route, exposure to less paraquat, and lesser degrees of leukocytosis, acidosis, and renal, hepatic, and pancreatic failures on admission are good prognostic factors of survival after acute paraquat poisoning.     

脑纹状体多巴胺系统在急性CO中毒后的变化研究

目的观察急性一氧化碳(CO)中毒后纹状体多巴胺(DA)及其代谢产物含量的动态变化,探讨单胺氧化酶B(MAO-B)及DA系统变化在急性CO中毒迟发性脑病(delayed neruopsychologic sequelae,DNS)发病中的意义。方法采用腹腔注射CO法制备急性CO中毒大鼠模型,利用阿朴吗啡诱导旋转实验鉴定DNS模型,分析不同模型脑组织纹状体DA系统、MAO-B活性变化。结果急性CO中毒后纹状体MAO-B活性即明显降低,仅为对照组水平的43%;同时用清醒动物脑微透析实验观察纹状体DA及其代谢产物浓度变化发现,CO中毒后1 h DA浓度即增加,其代谢产物则明显降低,提示急性CO中毒早期DA代谢显著降低;中毒14 d后DNS模型大鼠纹状体MAO-B活性显著增加,为对照组活性的1.7倍,DA浓度则显著降低,仅为对照组的29%,代谢产物浓度明显增加,提示出现运动功能障碍的DNS模型脑纹状体MAO-B活性显著升高,DA代谢明显增加。结论急性CO中毒DNS大鼠脑纹状体MAO-B活性可异常升高,加速DA代谢,影响DA神经系统保持锥体及锥体外系运动协调功能,同时生成的大量DA代谢产物具有毒性作用,可进一步加重脑循环...     

重度急性一氧化碳中毒超敏C-反应蛋白动态变化观察

目的 探讨重度急性一氧化碳中毒超敏C-反应蛋白动态变化. 方法将46例重度ACMP患者于入院后第1、4、8、16天测定C-反应蛋白水平.结果 所有患者的C-反应蛋白水平入院后第1天即明显升高,于第4天达到高峰,第8天开始下降,第16天降至接近正常水平.四个时间点比较均有极显著差异（P〈0.01）.结论 C-反应蛋白水平的高低与急性一氧化碳中毒致脑水肿的消长有密切关系.     

一氧化碳吸入致家兔迟发性脑病动物模型建立

目的 建立一氧化碳中毒迟发性脑病实验兔模型。方法 通过静式染毒20 min,然后在染毒柜密闭6h。通过测量耳缘静脉碳氧血红蛋白的含量,磁共振测量兔脑皮层的ADC(appearant diffusion coefficient value)值,并分别与中毒前比较,于60 d处死动物解剖,取脑进行病理检查。结果 所有染毒家兔在染毒后1 h兔脑皮层均出现ADC值不同程度下降,部分结构出现了异常信号;未出现迟发性脑病的家兔各时间点脑皮层ADC值与染毒前比较差异均无统计学意义。而出现迟发性脑病的家兔组染毒后1 h脑皮层ADC值与染毒前比较差异有统计学意义(P<0.05)。通过外周血碳氧血红蛋白动态观察,发现在染毒后0.5 h就出现升高,至4 h出现高峰,24 h接近正常。病理学表现与影像学表现一致。结论 通过一氧化碳的吸入,50%动物可以出现迟发性脑病模型,并具有典型的影像学和病理学改变,影像学的检查可以早期识别迟发性脑病的发生。     

急性丙烯腈重度中毒后帕金森综合征一例

丙烯腈（也称氰基乙烯Acrylonitrile,ACN）,是有机合成的重要单体,广泛用于制造腈纶纤维、丁腈橡胶、ABS工程塑料及某些合成树脂,也可用于生产烟草熏蒸剂、杀虫剂等.随着ACN生产量的逐年上升,由其引起的中毒事件不断增加.现将急性丙烯腈重度中毒后帕金森综合征1例报告如下.