鼻咽脱落细胞的AgNOR定量观察对鼻咽癌的诊断意义

本文对临床诊断为鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）者２０８例分别行鼻咽脱落细胞、病理活检、组织印片及血清免疫酶测定ＶＣＡ－ＩｇＡ，结果发现活检（第１次）准确率为８５．７％，组织印片为８８．９％，涂片ＨＥ染色为６３．４％，涂片ＡｇＮＯＲ为９０．５％，ＶＣＡ－ＩｇＡ为７８．６％。以脱落细胞涂片ＡｇＮＯＲ染色准确率最高。认为该方法简便，快速，不失为ＮＰＣ诊断的一种有意义的辅助方法。     

P~(15)蛋白在鼻咽癌中的表达

本实验采用华西医科大学第一附属医院门诊１９９２年上半年获取的５５例鼻咽部低分化鳞癌（ＮＰＣ）的活检存档标本，用１５例正常人鼻咽部组织蜡块作对照。所有标本作免疫组化ＬＳＡＢ法染色，测定Ｐ蛋白的表达。并对所有ＮＰＣ患者进行５年随访。结果表明，Ｐ蛋白在鼻咽部正常组织表达阳性率为１００％，鼻咽部低分化鳞癌阳性率为７０．９％，二者差别有统计学意义（Ｘ２＝４．１３，Ｐ＝０．０４７２）。Ⅰ－Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期ＮＰＣＰ蛋白表达阳性率分别为８３．３％、８０．０％、６０．７％，差别有统计学意义（Ｋｗ＝８．３０５０，Ｐ＝０．０４７３）；Ｔ１－Ｔ２、Ｔ３和Ｔ４期ＮＰＣ的Ｐ蛋白表达阳性率分别为８０．８％、７２．２％、４５．５％，差别有统计学意义（Ｋｗ＝１５．３４，Ｐ＝０．０３９４）；无颈淋巴结转移与有颈淋巴结转移组Ｐ蛋白表达阳性率分别为７７．８％、７０．３％，差别无统计学意义（Ｋｗ＝６．２７９３，Ｐ＝０．０５５７）；Ｐ表达阴性组与阳性组的５年生存率分别为：５６．７％、６８．１％，二者差别无统计学意义（Ｐｒ＝０．４７７５）。通过本实验提示：在ＮＰＣ的发生发展过程中有Ｐ１５蛋白丢失的参与；Ｐ１５蛋白表达可作为ＮＰＣ生物学行为的一个参考指标     

鼻咽癌中P＿（53）蛋白表达的研究

本组用免疫组化ＳＰ法观察１１９例鼻咽癌（ＮＰＣ）中Ｐ＿（５３）蛋白表达，半定量研究发现：①Ｐ＿（５３）表达阳性率为５５．５％（６６／１１９），表达的阳性细胞强度和阳性细胞数量与ＮＰＣ的恶性度、组织学类型及淋巴结转移相关（Ｐ＜０．００５），尤其在未分化癌中有超表达现象。②在正常柱状、鳞状上皮，粘膜慢性炎症伴有单纯性增生者均阴性。而在不典型增生的鳞状上皮中有数量不等的轻或中度阳性表达，提示其基因突变趋向。③Ｐ＿（５３）表达阴性和阳性者平均生存期为６４．５和３１．１个月，两组间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结果提示，检测ＮＰＣ中Ｐ＿（５３）蛋白表达，可作为了解其生物学特性及预测预后的指标之一。     

鼻咽癌活检组织中HLA、EBNA及间质中T淋巴细胞亚群的分布

本实验对人类白细胞抗原（ＨＬＡ）、爱波斯坦－巴尔病毒核抗原（ＥＢＮＡ）、Ｔ细胞亚群的表达及分布进行综合分析，探讨其在癌变过程中的作用。用单克隆抗体Ｗ＿６／３２（抗ＨＬＡ－Ａ，Ｂ，Ｃ）、ＣＲ＿３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ）、和Ｔ＿４、Ｔ＿８、Ｔ＿（１１），以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）和用鼻咽癌患者血清以抗补体Ｃ＿３免疫荧光法，检测鼻咽癌（２５例）及慢性鼻咽炎（１０例）活检组织中ＨＬＡ、Ｔ细胞亚群分型和ＥＢＮＡ的表达。结果显示，鼻咽癌癌细胞多有ＨＬＡ－Ⅰ和Ⅱ型抗原表达，而以ＨＬＡ－Ⅱ型抗原表达为明显；慢性鼻咽炎上皮细胞表达ＨＬＡ－Ⅰ和Ⅱ型抗原较弱，与癌细胞比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。提示在癌变过程中，存在着ＨＬＡ表达的异常，体内ＥＢ病毒特异性Ｔ细胞可能不能识别带ＨＬＡ－Ⅱ型抗原的癌细胞，因而使其逃脱了机体的免疫监视。鼻咽癌组织中，癌细胞ＥＢＮＡ呈阳性和强阳性；癌间质中Ｔ细胞总数、Ｔ辅助、Ｔ杀伤细胞数量均减少，证明鼻咽癌局部细胞免疫功能降低。     

原位免位PCR检测喉癌中人类乳头状瘤病毒E6蛋白

针对常规免疫组化检测石蜡包埋的喉癌组织中人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型Ｅ６蛋白阳性率低、信号模糊等缺点，我们探索出一种敏感而有效的检测方法———原位免疫ＰＣＲ（ＩｎＳｉｔｕＩｍｍｕｎｏ－ＰＣＲ，ＩＳＩ－ＰＣＲ），报告如下：１　材料与方法１．１　材料：９例１６／１８型ＨＰＶＤＮＡ阳性的喉癌高分化鳞癌石蜡包埋组织。生物素标记ＰａＴＥＬ１４／ＥｃｏＲＩＤＮＡ片断。ＰＣＲ引物：５’－ＡＴＡＣＣＴＡＴＴＧＣＣＴＡＣＧＧＣＡＧ－３’；５’－ＣＧＴＴＡＧＴＡＡＡＴＧＡＡＴＴＴＴＣＴ－３’。１．２　方法…     

鼻咽癌中郎格罕细胞与患者预后的关系

在１１９例鼻咽癌和１９例鼻咽部粘膜中用Ｓ－１００蛋白和Ｌｙｓｏｚｙｍｅ抗体、ＳＰＡ酶标法检测郎格罕细胞（Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓｃｅｌｌ，ＬＣ）和巨噬细胞。定量研究发现，癌组织中有不同密度的ＬＣ和巨噬细胞分布，前者主要位于肿瘤细胞间，后者分布于癌巢周围。而ＬＣ密度与组织学分型、平均生存期密切相关。伴有ＬＣ浸润的病人较无浸润者其生存要长，浸润密度为阴性（－）、阳性（＋）和强阳性（＋＋）者，平均生存期为２６．９，５１．７和７２．６个月（Ｐ＜０．００５），而病人的预后与巨噬细胞浸润无关（Ｐ＞０．２５）。结果提示，ＬＣ参与肿瘤免疫，它可作为判断预后的检测指标之一。     

增殖细胞核抗原在鼻咽癌中表达的定量研究

为了增加鼻咽癌的诊断和预后判定指标，应用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单克隆抗体，采用免疫组化染色ＬＡＳ－ＳＰ法及图象分析技术，对８２例鼻咽鳞状细胞癌和２５例鼻咽粘膜炎症组织标本进行了定量研究，并对鼻咽癌患者５年生存率与ＰＣＮＡ表达情况进行了相关性分析。结果：①根据ＰＣＮＡ阳性细胞计算的鼻咽癌细胞增殖指数与鼻咽癌的病理分级呈明显的正相关，与患者５年生存率呈明显负相关。②图像处理检测的ＰＣＮＡ表达量与     

鼻咽脱落细胞的AgNOR定量观察对鼻咽癌的诊断意义

本文对临床诊断为鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）者２０８例分别行鼻咽脱落细胞、病理活检、组织印片及血清免疫酶测定ＶＣＡ－ＩｇＡ，结果发现活检（第１次）准确率为８５．７％，组织印片为８８．９％，涂片ＨＥ染色为６３．４％，涂片ＡｇＮＯＲ为９０．５％，ＶＣＡＩｇＡ为７８．６％。以脱落细胞涂片ＡｇＮＯＲ染色准确率最高。认为该方法简便，快速，不失为ＮＰＣ诊断的一种有意义的辅助     

喉鳞癌中增殖细胞核抗原和p53蛋白表达的临床意义及其相互关系

本文以ＬＳＡＢ免疫组化方法，用单克隆抗体ＰＣ１０和ＤＯ－１对３０例喉鳞癌及１０例对照组（声带息肉）的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与ｐ５３蛋白表达进行研究，探讨其生物学意义。结果发现：１）喉鳞癌组织ＰＣＮＡ阳性表达率为１００％（ＰＣＮＡ－ＬＩｓ１６％～９２％），强阳性率为３６７％（１１／３０），对照组６例阴性，４例弱阳性表达（ＰＣＮＡ－ＬＩｓ＜１０％），试验组阳性表达率及表达程度明显高于对照组（Ｐ＜００５）。２）ｐ５３蛋白在喉鳞癌中阳性表达率为６６７％，对照组全部阴性，有显著差异（Ｐ＜００５）。３）在喉鳞癌组织中，ＰＣＮＡ和ｐ５３蛋白表达与临床分型、Ｔ分期及病理分化程度无显著关系（Ｐ＞００５），与淋巴转移及术后生存率关系密切（Ｐ＜００５）。４）ＰＣＮＡ与ｐ５３蛋白表达正相关。提示：１）喉鳞癌的增殖活性显著增强，ｐ５３基因突变与喉鳞癌的发生和发展有关。２）检测ＰＣＮＡ和ｐ５３蛋白有助于喉鳞癌的早期诊断和鉴别诊断，帮助治疗决策及判断预后。３）ｐ５３对ＰＣＮＡ有调节作用，为研究肿瘤的发生机理和寻找防治对策提供了新的理论依据。     

喉鳞癌中增殖细胞核抗原和p53蛋白表达的临床意义及其…

本文以ＬＳＡＢ免疫组化方法，用单克隆抗体ＰＣ１０和ＤＯ－１对３０例喉鳞癌及１０例对照组（声带息肉）的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与ｐ５３蛋白表达进行研究，探讨其生物学意义。结果表明；１）喉鳞癌组织ＰＣＮＡ阳性表达率为１００％（ＰＣＮＡ－Ｌｌｓ１６％～９２％），强阳性率为３６．７％（１１／３０），对照组６例阴性，４例弱阳性表达（ＰＣＮＡ－ＬＩｓ〈１０％），试验组阳性表达率及表达程度明显高于对照组（Ｐ〉     

硝普钠耳毒作用的内耳靶组织

作为细胞内及细胞间的一种信息传递分子，一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，Ｎ０）成为近年来医学界的一个研究热点。而硝普钠（ｓｏｄｉｕｍｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ，ＳＮＰ）作为ＮＯ的供体亦被广泛应用于动物及临床实验。晚近报道，ＳＮＰ可抑制听神经复合动作电位（ｃｏｍｐｏｕｄａｃｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＣＡＰ），其耳毒作用机制尚不清楚。本实验旨在结合各种电生理学方法及病理学检查，探讨ＳＮＰ耳毒作用的靶组织，并间接观察ＮＯ对耳蜗各结构功能的影响。结果发现：圆窗膜上或鼓阶内给予不同浓度ＳＮＰ１μｌ后，豚鼠耳蜗血流量增加，而蜗内电位（ｅｎｄｏｃｏｃｈｌｅａｒｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＥＰ）迅速下降，ＣＡＰ反应阈明显提高，耳蜗微音电位（ｃｏｃｈｌｅａｒｍｉｃｒｏｐｈｏｎｉｃ，ＣＭ）及耳声发射畸变产物（Ｆ２－Ｆ１）之耳蜗微音电位（ｃｏｃｈｌｅａｒｍｉｃｒｏ－ｐｈｏｎｉｃｑｕａｄｔａｔｉｃｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔ，ｃｍＱＤＴ）下降；基底膜振动速度反应（ｖｅｌｏｓｉｔｙｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｂａｓｉｌａｒｍｅｍｂｒａｎｅｖｉｂｒａｔｉｏｎ，ＶＲＢＭＶ）下降；内放射纤维水肿。实验揭示，ＳＮＰ急性耳毒作用具有浓度及时间相关性，     

喉癌病人血浆血栓素B_2和6—酮一前列腺素F_（1α）的测定

采用放射免疫法对３０例喉鳞状细胞癌病人、２０例声带息肉病人和２０例正常人进行血浆血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）和６－酮－前列腺素Ｆ＿（１ａ）（６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ））测定。结果表明，喉癌病人血浆ＴＸＢ＿２和６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）含量及ＴＸＢ＿２／６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）比值较正常对照组和声带息肉组增高；已发生转移的喉癌病人血浆ＴＸＢ＿２含量较无转移者增高。结果提示血浆ＴＸＢ＿２和６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）含量测定有助于喉癌的辅助诊断，与喉癌的转移可能有关。     

鼻咽癌细胞中蛋白酶ICH—1和增殖细胞核抗原表达的研究

目的：探讨蛋白酶ＩＣＨ－１与鼻咽癌发生的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法研究４６例鼻咽癌组织中ＩＣＨ－１和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果：４６例鼻咽癌中１６例ＩＣＨ－１Ｌ阳性，２２例ＩＣＨ－１Ｓ阳性，阳性率分别为３４８％和４７８％，ＩＣＨ－１Ｌ阳性细胞百分率为５４２％，ＩＣＨ－１Ｓ阳性细胞百分率为６８４％，较良性鼻咽上皮增加。４６例鼻咽癌细胞ＰＣＮＡ增殖指数为４９８±７２％，较良性鼻咽上皮增加，ＰＣＮＡ表达与癌细胞分化有关。结论：蛋白酶ＩＣＨ－１异常表达可能与鼻咽上皮癌变有关。ＰＣＮＡ可作为反映鼻咽癌细胞分化的一项指标。     

Nd-YAG激光汽化结合光动力学治疗对鼻咽癌患者SIL-2R、IL-2水平及NK活性的影响

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法、３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和１２５Ｉ－ＵｄＲ释放法对２４例鼻咽癌（ＮＰＣ）患者ＹＡＧ激光汽化结合光动力学治疗前后外周血可溶性ＩＬ－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）、白细胞介素２（ＩＬ－２）水平和自然杀伤细胞（ＮＫ）活性分别进行测定。结果表明鼻咽癌患者在接受激光光动力学治疗后ＳＩＬ－２Ｒ水平呈明显下降（Ｐ＜０．０００５），而ＩＬ－２水平和ＮＫ活性显著上升（Ｐ＜０．０００５）。结果提示激光光动力学治疗对恢复鼻咽癌患者免疫功能起促进作用。     

鼻咽癌患者鼻咽组织和血清中EBV检测

目的：比较血清爱泼斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）抗体滴定度测定与癌组织ＥＢＶ基因组检测对鼻咽癌（ＮＰＣ）的诊断价值。方法：１４６例患者采用双盲法测定血清ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ,ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ和活检组织ＥＢＶ－ＤＮＡ（ＰＣＲ）。全组病例按活检病理检查结果分析：ＮＰＣ组,非ＮＰＣ组（对照组）。结果：ＮＰＣ组中ＥＢＶ－ＤＮＡ（ＰＣＲ）,ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ和ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ的阳性率分别为９０．８％     

鼻咽癌活检组织中HLA,EBNA及间质中T淋巴细胞亚群的…

本实验对人类白细胞抗原（ＨＬＡ）、爱波斯坦－巴尔病毒核抗原（ＥＢＮＡ）、Ｔ细胞亚群的表达及分布进行综合分析，探讨其在癌变过程中的作用。用单克隆抗体Ｗ６／３２（抗ＨＬＡ－Ａ，Ｂ，Ｃ）、ＣＲ３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ）、和Ｔ４、Ｔ８、Ｔ１１，以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）和用鼻咽癌患者血清以抗补体Ｃ３免疫荧光法，检测鼻咽癌（２５例）及慢性鼻咽炎（１０例）活检组织中ＨＬＡ、Ｔ细胞亚群     

免疫球蛋白kappa轻链基因在鼻咽癌中表达的初步研究

目的：为了探讨Ｉｇｋ是否参与了鼻咽癌的癌变过程及可能机制，对Ｉｇｋ在鼻咽癌中的表达进行了研究，并初步探讨Ｉｇｋ与ＥＢ病毒潜伏膜蛋白基因ＬＭＰ－１在鼻咽癌中的相关性。方法：分别运用原位杂交技术和免疫组化技术检测鼻咽癌活检组织中Ｉｇｋ的ＲＮＡ和蛋白质水平的表达。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析两株鼻咽癌细胞系（ＣＮＥ１和ＣＮＥ＿ＣＭＰ）ｋａｐｐａ蛋白的表达及强度差异。结果：原位杂交技术显示１００％（４２例／４２     

增殖细胞核抗原在鼻咽癌中表达的定量研究

为了增加鼻咽癌的诊断和预后判定指标，应用抗增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｅｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）单克隆抗体，采用免疫组化染色ＬＡＳ－ＳＰ法及图象分析技术，对８２例鼻咽鳞状细胞癌和２５例鼻咽粘膜炎症组织标本进行了定量研究，并对鼻咽癌患者５年生存率与ＰＣＮＡ表达情况进行了相关性分析。结果：①根据ＰＣＮＡ阳性细胞计算的鼻咽癌细胞增殖指数与鼻咽癌的病理分级呈明显的正相关，与患者５年生存率呈明显负相关。②图像处理检测的ＰＣＮＡ表达量与鼻咽癌的病理分级也呈明显的正相关，与５年生存率呈负相关，但泡状核细胞癌虽属低分化鳞癌却不符合上述规律。结论：ＰＣＮＡ能很好地反映鼻咽癌的增殖活性，在临床病理上具有应用前景，可作为对鼻咽癌预后判定及指导临床治疗的指标     

激光扁桃体部分凝固术

应用ＹＡＧ激光时５０例慢性扁桃体炎患者的扁桃体组织作部分凝固术，通过对激光治疗前后的血清ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ及补体Ｃ＿３浓度的检测；急性时相反应蛋白（ＡＰＲＰｓ）中的ｘ＿１－酸性糖蛋白（α＿１－ＡＧＰ），ｘ＿１－抗胰蛋白酶（ｘ＿１－ＡＴ）及转铁蛋白（Ｔｆ）浓度的检测；局部组织光镜、透射电镜检查；结合临床随访６～１２个月，认为本方法可达到消除局部炎症，又保留扁桃体免疫功能的目的。     

自由基清除剂二甲基亚砜对庆大霉素耳蜗毒性的影响

观察豚鼠同时注射二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）与庆大霉素（ＧＭ）及单独注射ＧＭ等几组动物后，耳蜗听功能、扫描电镜所见及耳蜗和血清中脂质过氧化物（ＬＰＯ）丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果表明ＧＭ＋ＤＭＳＯ组动物ＡＰ阈值较ＧＭ组明显降低，ＡＰ（Ｎ＿１）潜伏期ＧＭ组较ＧＭ＋ＤＭＳＯ组显著延长，耳蜗扫描电镜显示ＧＭ＋ＤＭＳＯ组毛细胞受损程度较ＧＭ组明显为轻。耳蜗中ＭＤＡ检测表明，ＧＭ组耳蜗中ＭＤＡ含量较ＧＭ＋ＤＭＳＯ组明显增高（Ｐ＜０．０１）。提示自由基引起耳蜗ＬＰＯ可能是ＧＭ耳毒性机制之一；ＤＭＳＯ可减轻ＧＭ的耳毒性。