构建毛果芸香碱急性致痫小鼠模型

目的：建立毛果芸香碱诱导的小鼠急性癫痫模型，并探讨其特点。方法：实验于2001—10／2002—10在上海复旦大学华山医院神经病学实验室完成。取健康雄性C57BL／6小鼠199只，随机分为生理盐水组（n=66）和致痫组（n=133）。所有小鼠皮下注射硝酸东莨菪碱1mg／kg。30min后致痫组腹腔注射毛果芸香碱350mg／kg（10k/L），生理盐水组腹腔注射生理盐水35μL／g。注射后连续6h观察小鼠是否有痫性发作并分级（0级，无抽搐；Ⅰ级，耳、面部抽搐；Ⅱ级，肌阵挛，但无直立位；Ⅲ级，肌阵挛，伴直立位；Ⅳ级，全身强直阵挛发作；Ⅴ级，强直阵挛发作，并失去体位控制），当小鼠持续痫性发作达1h时给予地西泮4mg／kg腹腔注射，如不能缓解痫性发作，可重复给予地西泮一两次，直到痫性发作被解除。对照组6只和致痫组30只同时描记脑电图。结果：199只小鼠全部进入结果分析。①痫性发作情况：生理盐水组小鼠均无痫性发作；致痫组全部出现痫性发作，其中Ⅰ级15只，Ⅱ级7只，Ⅲ级9只，Ⅳ级21只，V级81只，呈Ⅲ～Ⅴ级持续发作（即癫痫持续状态）97只，死亡31只。癫痫持续状态模型成功率为50％。②脑电图结果：Ⅱ级以上发作的小鼠均可见到爆发性高波幅慢波、棘波或棘慢波。结论：毛果芸香碱致痫小鼠急性模型同相应的大鼠模型一样，具有制作简便、痫性发作潜伏期短、致痫率高等特点，其所产生的慢性癫痫模型具有与人类颞叶癫痫相似的行为、脑电与神经病理改变。     

褪黑素对毛果芸香碱致痫大鼠行为和海马Fos蛋白表达的影响

目的：探讨褪黑素对毛果芸香碱致病大鼠的抗惊厥作用及其作用特点。方法：实验于2003-08／12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室完成。建立毛果芸香碱致病大鼠模型，依据褪黑素不同的给药时间、给药剂量进行分组，观察褪黑素对癫痫大鼠行为学和海马Fos蛋白表达的影响。结果：17：00给药时，褪黑素10-50mg／kg腹腔注射组均可明显延长毛果芸香碱致病大鼠首次痫性发作出现的潜伏期(P&;lt;0．01)，并可显著抑制海马Fos蛋白的表达(P&;lt;0．01)，上述作用尤以褪黑素25mg／kg腹腔注射组明显。结论：褪黑素在毛果芸香碱致病大鼠模型中具有抗惊厥作用，且这种作用呈一定的剂量、时间依赖性。     

毛果芸香碱滴眼液致全身中毒反应1例

1病历摘要 女，69岁。因右眼突然胀痛，伴同侧头痛，视物模糊，恶心和呕吐2d就诊。跟部检查：VoD：指数／跟前，右跟结膜混合充血，角膜水肿如毛玻璃状，色素样KP，房水闪辉，瞳孔扩大，直径7．0mm，光反应及调节反应均消失，晶体混浊，眼底朦胧，眼压：右眼81mmHg（1mmHg=0．133kPa）。诊断：右眼急性闭角型青光眼急性发作期。急诊治疗：嘱右跟用1％毛果芸香碱滴眼液（山东正大福瑞达药业）滴跟，每5min1次，每次1滴，共4次后改为每15min1次，共6次。家属自作主张，将左眼也频滴用该药液共约5ml。滴跟后4h患者自觉出汗、流涎、气促、心慌、乏力、作呕、上腹部疼痛。经急诊处理：停用毛果芸香碱滴眼液，静脉推注50％葡萄糖40ml加维生素C500mg；静脉点滴5％葡萄糖1000ml和维生素C1．0g。4h后症状消失。     

褪黑素对毛果芸香碱致痫大鼠行为和海马Fos蛋白表达的影响

目的:探讨褪黑素对毛果芸香碱致痫大鼠的抗惊厥作用及其作用特点。方法:实验于2003-08/12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室完成。建立毛果芸香碱致痫大鼠模型,依据褪黑素不同的给药时间、给药剂量进行分组,观察褪黑素对癫痫大鼠行为学和海马Fos蛋白表达的影响。结果:17:00给药时,褪黑素10～50mg/kg腹腔注射组均可明显延长毛果芸香碱致痫大鼠首次痫性发作出现的潜伏期(P<0.01),并可显著抑制海马Fos蛋白的表达P<0.01),上述作用尤以褪黑素25mg/kg(腹腔注射组明显。结论:褪黑素在毛果芸香碱致痫大鼠模型中具有抗惊厥作用,且这种作用呈一定的剂量、时间依赖性。     

毛果芸香碱致眼部过敏反应15例分析

毛果芸香碱是治疗急性闭角型青光眼的首选良药，正确使用能够迅速缩小瞳孔，开放房角，从而降低眼压，缓解疼痛。但过度治疗将诱发眼部及全身的不良反应。对我院5a来诊治的毛果芸香碱致眼部过敏反应15例分析如下。     

幼鼠致痫后海马区神经元损伤及苔藓纤维发芽的实验研究

背景成鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后出现海马CA1区、CA3区及齿状回广泛的神经元脱失和苔藓纤维发芽已成为大量实验的共识,但有关幼鼠该方面研究得出的结论不一.目的观察幼鼠致痫后海马区神经元的组织病理学改变.设计随机对照实验研究.地点和对象实验地点北京大学人民医院实验动物中心进行.健康生后15～20 d Wistar幼鼠54只.随机分成3组,每组18只.生理盐水对照组,地西泮干预组,实验组.每组中用于光镜检查、电镜检查和Timm染色各6只.干预实验组幼鼠采用氯化锂-毛果芸香碱腹腔注射制成幼鼠癫痫持续状态模型,生理盐水对照组以相同液体量的生理盐水取代毛果芸香碱.地西泮干预组在给予毛果芸香碱30 min前给予地西泮腹腔注射.在光镜下观察海马结构的形态学改变.透射电镜下进行超微结构观察.Timm法观察苔藓纤维发芽情况.主要观察指标①各组大鼠海马区的神经元形态学改变.②各组大鼠超微结构改变.③各组大鼠苔藓纤维发芽情况.结果实验组CA1区和CA3区及齿状回可见许多神经元发生变性和固缩性坏死.CA2区未见明显改变.电镜下海马区神经元胞体浓缩变性,粗面内质网增生,内质网的核糖体脱落,胶质细胞可见有空泡变性.生理盐水对照组和地西泮干预组无明显的超微结构改变.Timm染色见齿状回内分子层和CA3区下锥体层苔藓纤维发芽增加[生理盐水对照组为(1.83±0.39)分,地西泮干预组为(0.42±0.52)分,实验组(0.42±0.52)分,生理盐水对照组与实验组比较,差异有显著性意义(q=8.00,P＜0.01).结论成鼠癫痫持续状态后可导致海马区神经元损伤,幼鼠癫痫持续状态后也同样能造成海马区苔藓纤维发芽的增加.     

联合使用曲伏前列腺素与毛果芸香碱对葡萄膜巩膜房水外流

目的 　通过形态学观察的方式探讨单独及联合使用前列腺素衍生物曲伏前列腺素与胆碱能药物毛果芸香碱对葡萄膜巩膜房水外流途径的影响。方法 　28只正常无色素兔随机选取4只为对照组,24只随机分为毛果芸香碱组、曲伏前列腺素组和联合用药组,每组8只。对照组在双眼滴用生理盐水1 d时以及3个药物处理组分别在使用2%毛果芸香碱、0.004%曲伏前列腺素、2%毛果芸香碱+0.004%曲伏前列腺素后7、14和24 d时各处死无色素兔2只,摘取双眼眼球,通过HE染色和抗平滑肌抗体染色在光镜下观察兔眼睫状肌纵形肌形态、肌间隙;对照组在双眼滴用生理盐水1 d时以及3个药物处理组在用药24 d时各处死无色素兔2只,在电镜下观察兔眼睫状肌细胞及细胞外胶原束的形态结构。结果 　单独使用毛果芸香碱组兔睫状肌细胞间隙减小,单独使用曲伏前列腺素组兔睫状肌细胞间隙增大。联合用药组睫状肌纵行肌细胞前1/3排列紧密,肌间隙减小,与单独使用毛果芸香碱组相似,后2/3肌细胞疏松,肌细胞间隙与单独使用曲伏前列腺素组相似;联合用药组睫状肌细胞间胶原的分解情况比单独用曲伏前列腺素组明显。结论 　联合用药与单独使用曲伏前列腺素比较后部睫状肌间隙无变化,还可能因为增加细胞外胶原分解程度而增加这一途径的房水外流。     

毛果芸香碱对放射性口腔干燥症患者的影响

口腔干燥症是鼻咽癌放疗后最常见的后遗症之一，我们应用国产毛果芸香碱（瑞尔欣）对放射性口腔干燥症患进行了干预性试验，取得了较满意的结果，现报告如下。     

联合使用曲伏前列腺素与毛果芸香碱对葡萄膜巩膜房水外流途径影响的形态学观察

  目的  通过形态学观察的方式探讨单独及联合使用前列腺素衍生物曲伏前列腺素与胆碱能药物毛果芸香碱对葡萄膜巩膜房水外流途径的影响。  方法  28只正常无色素兔随机选取4只为对照组, 24只随机分为毛果芸香碱组、曲伏前列腺素组和联合用药组, 每组8只。对照组在双眼滴用生理盐水1 d时以及3个药物处理组分别在使用2%毛果芸香碱、0.004%曲伏前列腺素、2%毛果芸香碱+0.004%曲伏前列腺素后7、14和24 d时各处死无色素兔2只, 摘取双眼眼球, 通过HE染色和抗平滑肌抗体染色在光镜下观察兔眼睫状肌纵形肌形态、肌间隙; 对照组在双眼滴用生理盐水1 d时以及3个药物处理组在用药24 d时各处死无色素兔2只, 在电镜下观察兔眼睫状肌细胞及细胞外胶原束的形态结构。  结果  单独使用毛果芸香碱组兔睫状肌细胞间隙减小, 单独使用曲伏前列腺素组兔睫状肌细胞间隙增大。联合用药组睫状肌纵行肌细胞前1/3排列紧密, 肌间隙减小, 与单独使用毛果芸香碱组相似, 后2/3肌细胞疏松, 肌细胞间隙与单独使用曲伏前列腺素组相似; 联合用药组睫状肌细胞间胶原的分解情况比单独用曲伏前列腺素组明显。  结论  联合用药与单独使用曲伏前列腺素比较后部睫状肌间隙无变化, 还可能因为增加细胞外胶原分解程度而增加这一途径的房水外流。     

家兔急性肺栓塞影像模型的制备

目的:通过家兔急性肺栓塞影像模型的制备并与DSA和MRPA及病理对照研究,验证用明胶海绵制作家兔肺栓塞影像模型的可行性和准确性。方法:在DSA下经家兔颈静脉插管至右心房,将明胶海绵自导管注入,栓塞前后分别做肺动脉造影和增强磁共振肺动脉成像,最后经病理解剖来验证肺栓塞模型的可靠性。结果:在MRPA和DSAPA图像上,肺栓塞表现为肺动脉分支截断?熏 病理镜下可见肺动脉管腔内有明胶海绵栓塞物。结论:此方法制备肺栓塞模型是客观有效的,为肺栓塞的影像学研究提供了一种较好的方法。     

氯化锂-匹罗卡品致大鼠急性癫痫模型

目的：建立氯化锂-匹罗卡品化学诱导的大鼠急性癫痫模型。方法：雄性Wistar大鼠55只，随机分为生理盐水对照组、地西泮组和致痫组。氯化锂腹腔注射后10～10h后给予匹罗卡品。结果：生理盐水对照组大鼠均为0级发作，地西泮组中8只大鼠为0级发作，2只出现Ⅰ级发作；致痫组均达到Ⅲ级以上的痫性发作，其中Ⅲ级2只(2／35)，Ⅳ级3只(3／35)，Ⅴ级30只(30／35)。致痫组大鼠在匹罗卡品腹注射后10～90min内全部出现急性痫性发作。结论：氯化锂-匹罗卡品诱导的大鼠急性癫痫模型具有制作方便、致痫成功率高和动物死亡率低等特点，具有同人类癫痫持续状态和颞叶癫痫相似的行为和脑电图改变。     

低频经颅磁刺激对匹罗卡品致痫大鼠癫痫发作及海马细胞神经肽Y表达的影响

目的 观察低频经颅磁刺激（LF-TMS）对匹罗卡品（PLO）致痫大鼠皮质脑电图及大鼠海马各区神经肽Y（NPY）表达的影响。方法雄性SD大鼠40只，随机分为对照组（PLO组）、干预组（PLO＋LFTMS组）。各组给予相关干预处理后腹腔注射PLO建立癫痫模型，观察皮质脑电图及海马HE染色、NPY免疫组化染色观察。结果两组间皮质脑电图指标比较，发现磁刺激干预后潜伏期延长、痫波频率及大发作次数降低。HE染色显示，对照组海马各区神经元显著变性、死亡，以海马CA3区明显；干预组海马各区神经元损害减轻。NPY的免疫组化染色显示对照组各时间点海马各区NPY阳性细胞增多，明显高于干预组，差异有统计学意义。结论 LF—TMS不仅可以延迟PLO癫痫点燃的形成．还可以缓解点燃后的癫痫发作程度；LF—TMS可明显影响海马各区NPY阳性细胞数。NPY与癫痫发作程度相关，提示NPY表达与癫痫之间关系紧密，NPY可能具有抗痫和神经保护作用。     

直线加速器诱发大鼠急性放射性肠炎模型的建立

目的 建立急性放射性肠炎大鼠模型.方法 选择雄性SD大鼠为实验动物,采用直线加速器单次腹盆腔局部照射,观察对比照射后大鼠摄食饮水量、体质量、排便情况及自主活动情况,光镜下观察小肠组织病理学改变,确立最佳照射剂量为12 Gy.通过透射电镜观察小肠黏膜超微病理学变化,对模型进行综合评价.结果 12 Gy剂量照射后大鼠摄食饮水量减少,消瘦明显,出现稀便、黏液脓血便,光镜下观察可见黏膜层小片状脱落,固有层腺体轮廓欠完整,结构紊乱,排列稀疏,黏膜下大量炎细胞浸润,血管充血明显,多灶溃疡形成.透射电镜下观察小肠腺体结构破坏,表面绒毛稀疏,局部脱落、缺失,基底细胞线粒体破坏,形成小空泡.结论 直线加速器单次腹盆腔局部照射12 Gy,能成功地诱导大鼠急性放射性肠炎.该模型能较准确地反映放射性肠炎的临床特征和病理特征,可用于实验研究.     

GIRK通道在匹罗卡品癫痫模型中的表达改变

目的:研究匹罗卡品诱导癫痫发作后不同时期G蛋白门控内向整流钾离子(GIRK)通道在大鼠海马神经元细胞膜表面表达变化情况,并探索可能的调控机制.方法:将成年雄性SD大鼠随机分为对照组和匹罗卡品造模组.利用致痫剂匹罗卡品诱导癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后,分别在急性期(24 h)和慢性期(30...     

应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型

背景:在免疫增强剂的研究中,常用到免疫抑制模型,如何建立免疫抑制模型成为免疫增强剂作用评价的关键。目的:应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型。方法:将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺50mg/kg5d组,环磷酰胺80mg/kg3d组,环磷酰胺80mg/kg5d组,环磷酰胺100mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg隔天给药组。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.1mL,连续5d。环磷酰胺50mg/kg5d组,环磷酰胺80mg/kg3d组,环磷酰胺80mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg5d组小鼠分别以环磷酰胺50,80,80,100mg/kg腹腔注射连续5,3,5,5d。环磷酰胺100mg/kg隔天给药组小鼠腹腔注射100mg/kg环磷酰胺,隔天1次,共注射3次。结果与结论:与正常对照组比较,腹腔注射环磷酰胺可导致小鼠外周血中CD3+T,CD3+CD4+T及CD3+CD8+T细胞明显下降(P<0.05);谷丙转氨酶(除环磷酰胺50mg/kg5d、80mg/kg3d组)、谷草转氨酶、尿素显著升高(P<0.05),其中环磷酰胺80mg/kg5d组、环磷酰胺100mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg隔天给药组对肝肾功能的影响更为明显。提示腹腔注射环磷酰胺可建立CD3+T,CD3+CD4+T及CD3+CD8+T细胞明显下降的免疫抑制模型,其中以环磷酰胺50mg/kg5d和80mg/kg3d方式对肝肾功能的损伤较小。     

不同剂量博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的比较

背景:经气管注射博莱霉素是制作动物肺纤维化模型最常用的方法,但博莱霉索最佳造模剂量目前国内外尚无统一定论.目的:对比观察不同剂量的博莱霉素对小鼠肺纤维化模型的效果,寻找一种较为合理可靠的小鼠造模剂量.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-09/2008-04在上海市发育生物学重点实验室完成.材料:SPF级健康雌性C57BU6J小鼠60只,体质量18～22 g,用于制备小鼠肺纤维化模型.方法:60只小鼠随机数宁表法分为博莱霉素组(n=45)和对照组(n=15),博莱霉素组各选15只动物分别气管内注射不同剂量(2,3.5,5 mg/kg)的博莱霉素,对照组气管内注射相同体积的生理盐水,所有小鼠于造模后第28天处死并取其左肺叶制作病理切片,右肺叶作羟脯氨酸含量测定.主要观察指标:小鼠28 d内的存活情况;光镜观察肺部炎症和纤维化程度;取右肺叶做羟脯氨酸测定.结果:①实验开始后前7 d,博莱霉素组和对照组均无小鼠死亡,第8天博莱霉索组小鼠死亡率高丁对照组(P<0.05);博莱霉素3个剂量组之间死亡率由高到低分别为5,3.5,2 mg/kg博莱霉素组,但差异无显著性意义(P>0.05).②光镜下可见对照组肺泡形态正常,问质中无炎症细胞浸润;博莱霉素组可见肺实变和胶原沉积,剂量越高,肺纤维化程度越重,以5 mg/kg博莱霉素组最明显.③各组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量从高到低依次为5 mg/kg博莱霉素组、3.5 mg/kg博莱霉素组、2 mg/kg博莱霉奈组和对照组.结论:经气管注射博莱霉素制作小鼠肺纤维化模型应兼顾造模效果和动物的存活率,3.5 mg/kg是较为理想的小鼠造模剂量.     

应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型

背景：在免疫增强剂的研究中,常用到免疫抑制模型,如何建立免疫抑制模型成为免疫增强剂作用评价的关键。目的：应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型。方法：将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺50mg/kg5d组,环磷酰胺80mg/kg3d组,环磷酰胺80mg/kg5d组,环磷酰胺100mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg隔天给药组。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.1mL,连续5d。环磷酰胺50mg/kg5d组,环磷酰胺80mg/kg3d组,环磷酰胺80mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg5d组小鼠分别以环磷酰胺50,80,80,100mg/kg腹腔注射连续5,3,5,5d。环磷酰胺100mg/kg隔天给药组小鼠腹腔注射100mg/kg环磷酰胺,隔天1次,共注射3次。结果与结论：与正常对照组比较,腹腔注射环磷酰胺可导致小鼠外周血中CD3＋T,CD3＋CD4＋T及CD3＋CD8＋T细胞明显下降（P〈0.05）;谷丙转氨酶（除环磷酰胺50mg/kg5d、80mg/kg3d组）、谷草转氨酶、尿素显著升高（P〈0.05）,其中环磷酰胺80mg/kg5d组、环磷酰胺100mg/kg5d组和环磷酰胺100mg/kg隔天给药组对肝肾功能的影响更为明显。提示腹腔注射环磷酰胺可建立CD3＋T,CD3＋CD4＋T及CD3＋CD8＋T细胞明显下降的免疫抑制模型,其中以环磷酰胺50mg/kg5d和80mg/kg3d方式对肝肾功能的损伤较小。