双氢青蒿素对肝纤维化小鼠TGF-β1和TNF-α的影响

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量的变化。方法实验小鼠随机分成对照组、纤维化组和DHA干预组3组,通过向腹腔注射四氯化碳建立小鼠肝纤维化模型。DHA干预组口服DHA;对照组、纤维化组均口服等剂量的含二甲基亚砜的生理盐水。各组的肝组织切片经苏木素-伊红染色和天狼猩红染色法观察其形态结构变化;生物化学分析法检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的含量。ELISA测定肝组织中TGF-β1和TNF-α的含量。结果观察各组苏木素-伊红染色和天狼猩红染色后肝组织的形态结构表明肝纤维化动物模型的成功建立。纤维化组小鼠肝内肝细胞坏死,汇管区纤维组织和胆总管明显增生,血清中ALT[(142.952 3±23.762 4)U/L]和AST[(177.561 1±15.547 7)U/L]含量增加,肝组织中TGF-β1[(34.121 1±3.091 2)μg/L]和TNF-α[(48.675 3±4.221 3)ng/L]的含量升高,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P0.05)。经过DHA治疗后小鼠肝内肝组织坏死减少,肝内纤维组织增生降低,血清中ALT[(87.674 5±16.546 1)U/L]、AST[(127.644 3±21.345 2)U/L]含量减少,肝组织中TGF-β1[(25.901 1±3.567 1)μg/L]和TNF-α[(38.665 1±3.906 5)ng/L]的含量降低,与对照组相比差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 DHA可以拮抗小鼠肝纤维化,是通过减少小鼠肝组织中的TGF-β1和TNF-α的含量来发挥作用的。     

核因子-κBp65在乙醇诱导小鼠急性肝细胞损伤中的表达及意义

目的 观察核因子-κB(NF-κB)p65蛋白在乙醇诱导肝细胞损伤中的表达.方法 36只小鼠随机分成1个对照组和5个乙醇染毒组,每组6只.以0、62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0mmol/kg剂量的乙醇给予小鼠一次性灌胃染毒,16 h后检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)的活力;采用免疫组织化学法观察小鼠肝细胞中NF-κB p65蛋白的表达.结果 62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0 mmol/kg小鼠血清中的AST活力分别为(165.00±7.07)、(180.50±7.58)、(185.17±8.08)、(197.50±5.32)、(207.17±5.12)U/L,高于对照组[(156.67±5.16)U/L],差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0mmol/kg小鼠血清中ALT活力分别为(43.17±2.14)、(46.33±1.37)、(53.33±2.25)、(52.67±2.25)、(56.17±1.33)U/L,高于对照组[(37.33±2.58)U/L,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);免疫组织化学方法检测出乙醇染毒剂量组小鼠肝细胞胞浆、胞核内NF-κB p65的表达高于对照组.结论 NF-κB p65参与了小鼠酒精性肝细胞损伤的发展过程.     

软肝冲剂对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察软肝冲剂对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化模型的保护作用。方法将60只C57B/L小鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱对照组、软肝冲剂低剂量组和软肝冲剂高剂量组,每组12只。空白对照组腹腔注射100%花生油1 ml/kg,每周2次,共10周;其余各组均给予腹腔注射含20%CCl4的花生油1 ml/kg,每周2次,共10周造模;第3周起秋水仙碱对照组予秋水仙碱0.1 mg/(kg·d)灌胃,软肝冲剂低、高剂量组分别予软肝冲剂1 g/(kg·d)、5 g/(kg·d)灌胃。在第10周通过摘除眼球取血,检测小鼠血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、三型前胶原(PCⅢ)、四型胶原(Ⅳ-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)含量,检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,计算肝脏指数,观察小鼠肝脏的HE染色病理组织学改变。结果模型组小鼠血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、ALT和AST含量分别为(480.11±62.12)μg/L、(411.65±30.63)μg/L、(454.12±41.81)μg/L、(311.15±31.61)μg/L、(140.4±9.8)U/L和(198.2±9.7)U/L,均明显高于其它各组(P0.05);肝脏组织中SOD[(122.53±7.68)U/mg]低于空白对照组(P0.05);MDA[(5.59±0.33)nmol/mg]高于空白对照组(P0.05);肝脏指数[(4.7±1.5)%]高于空白对照组(P0.05)。病理切片显示肝细胞坏死并出现脂肪空泡、纤维组织增生和炎细胞浸润。软肝冲剂低剂量组与秋水仙碱组治疗效果相似。软肝冲剂高剂量组效果较好,小鼠血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、ALT和AST含量分别为(143.21±21.53)μg/L、(139.11±35.23)μg/L、(134.45±24.77)μg/L、(119.32±29.34)μg/L、(45.4±6.3)U/L和(53.6±7.1)U/L,均明显低于模型组(P0.05);肝脏组织中SOD[(189.5±7.5)U/mg]高于模型组(P0.05),MDA[(2.45±0.33)nmol/mg]低于模型组(P0.05);肝脏指数[(3.4±0.4)%]低于模型组(P0.05);病理检查显示肝脏组织中无炎性浸润、脂肪空泡和无纤维组织沉积。结论软肝冲剂可以改善肝脏功能,保护肝细胞和抑制肝纤维化,减轻CCl4诱导小鼠肝纤维化程度。     

委陵菜酸对小鼠急性肝损伤保护作用

目的观察委陵菜酸(TA)对脂多糖(LPS)/D-半乳糖胺(D-Gal N)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其可能机制。方法雄性C57BL/6小鼠90只,随机分为对照组、模型组、阳性对照组及委陵菜酸低、中、高剂量组,各组小鼠分别灌胃给予受试物,连续3 d,末次给予受试物8 h后,除对照组外,其余小鼠腹腔注射LPS/D-Gal N,1.5 h后眼球取血,6 h后处死小鼠,取肝脏,观察肝组织损伤程度;采用试剂盒测定小鼠血清中门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10水平;RT-PCR法检测TNF-α和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)基因表达;ELISA法测定NF-κB p65蛋白含量;Western blot法检测细胞色素C和Bcl-2含量;另外,取肝组织匀浆检测caspase-3、8、9活性。结果与对照组比较,模型组小鼠ALT、AST、TNF-α、NO含量[分别为(1 833.5±125.4)、(2 183.5±138.9)U/L、(656.8±64.7)pg/m L、(205.28±16.79)μmol/L]明显升高(P0.05),肝脏中NF-κB p65表达[(228.9±14.2)pg/mg]升高、Bcl-2蛋白表达(0.18±0.03)下降、Caspase-3蛋白表达(275.3±14.7)升高(P0.05);与模型组比较,委陵菜酸3 mg/kg组小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、NO含量[分别为(991.3±70.2)、(968.5±68.6)U/L、(226.5±35.9)pg/m L、(133.69±9.79)μmol/L]明显降低(P0.05)、肝脏中NF-κB p65表达[(151.2±6.5)pg/mg]降低、Bcl-2蛋白表达(0.35±0.02)升高、caspase-3蛋白表达(156.3±5.9)下降(P0.05)。结论委陵菜酸可保护LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制NF-κB信号通路减轻炎症反应、抑制凋亡蛋白表达、继而减少细胞凋亡有关。     

铁皮石斛无菌纳米粉抗肝损伤作用及机制

目的探讨铁皮石斛无菌纳米粉抗肝损伤的药理作用并探讨其可能的机制。方法 50只小鼠随机分为对照组、模型组、铁皮石斛纳米粉低、高剂量组和铁皮石斛普通粉组。试剂盒法检测小鼠血清碱性磷酸酶(ALP)、乙醇脱氢酶(ADH)活性和总抗氧化能力(T-AOC),肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活力;利用流式细胞仪检测肝细胞凋亡率;免疫组化法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测肝细胞Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结果与模型组比较,高剂量铁皮石斛纳米粉组小鼠血清ALP、ADH活力[分别为(31.82±3.35)U/L、(54.37±2.89)U/mL]均明显降低(P 0.01),T-AOC活力[(8.30±2.06)U/mL]明显升高(P 0.05);肝组织CAT、GPx活力和GSH含量[分别为(68.56±4.07)U/mg、(523.65±32.67)U/mg、(26.28±3.98)μmol/g]均明显升高(P 0.01);肝细胞凋亡率明显下降(P 0.01),肝组织中TNF-α表达下调(P 0.01),Bcl-2蛋白表达显著增加(P 0.01),Bax、caspase-3、8蛋白表达显著减少(P 0.01,P 0.001)。与铁皮石斛普通粉组比较,铁皮石斛纳米粉组小鼠各项指标改善更为明显。结论铁皮石斛无菌纳米粉对小鼠肝损伤的保护作用明显优于普通粉,其作用机制可能与抗氧化损伤、减轻肝细胞凋亡、抑制炎性细胞因子表达有关。     

人参皂苷Rg1对小鼠免疫性肝损伤保护作用

目的探讨人参皂苷Rg1对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制。方法实验设Rg1高、中、低剂量(60、30、15 mg/kg),灌胃给予15 d,尾静脉注射20 mg/kg刀豆蛋白A制备免疫性肝损伤小鼠模型;采用自动生化分析仪测定小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性;酶联免疫吸附实验测定小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)水平,并进行肝组织病理学观察。结果与对照组比较,模型组小鼠血清中AST、ALT含量[分别为(235.5±79.9)、(262.1±63.9)U/L]及TNF-α、IFN-γ水平[分别为(46.3±13.3)、(165.3±86.1)pg/m L]明显升高(P<0.01);与模型组比较,高剂量Rg1组小鼠血清中AST、ALT含量[分别为(57.1±19.9)、(44.1±16.2)U/L]及TNF-α、IFN-γ水平[(12.9±6.1)、(55.06±29.5)pg/m L]明显下降(P<0.01);组织学观察显示,Rg1各剂量组小鼠肝损伤程度明显轻于模型组。结论 Rg1对小鼠免疫性肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与降低炎性细胞因子、减轻T淋巴细胞毒性作用有关。     

芦丁激活腺苷酸活化蛋白激酶α蛋白表达减轻全氟辛酸染毒小鼠肝脏损伤

目的研究芦丁(rutin)对全氟辛酸(perfluorooctanoic acid, PFOA)染毒小鼠肝脏损伤的保护效应及机制。方法将24只雄性ICR小鼠随机分成3组,每组8只:对照组(双蒸水),PFOA组[PFOA 20 mg/(kg·d)],芦丁干预组[PFOA 20 mg/(kg·d)+rutin 20 mg/(kg·d)],正常饮食,经口灌胃,每日观察、称重、记录。14天后采血、处死后迅速剥离肝脏并称重。部分肝脏组织固定于4%多聚甲醛后苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色及糖原过碘酸希夫(periodic acid-schiff, PAS)染色;检测血清样品中谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase, GPT)活性,以及肝脏组织匀浆中甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、丙二醛(malondialhyde, MDA)等含量和相关酶的活性等;Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶α(AMP-activated protein kinase, AMPKα)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(phospho-AMP-activated protein kinaseα, p-AMPKα)的蛋白表达水平。结果 PFOA导致小鼠体重明显降低、肝脏重量与肝脏相对体重系数均显著性升高(P0.05);肝细胞索解离,肝细胞肿胀、溶解,有明显损伤,PAS染色阳性细胞明显减少;PFOA组GPT活性为(204.63±11.26)U/L,与对照组(28.80±4.51)U/L相比显著升高(P0.05);小鼠肝脏组织中TG、TC和MDA的含量分别为(4.89±0.51)mmol/g prot、(8.06±0.84)mmol/g prot和(315.38±60.79)nmol/mg prot,与对照组相比均明显增多(P0.05);T-SOD活性为(4175.56±334.96)U/mg prot,与对照组比显著降低(P0.05);芦丁干预后,与PFOA暴露组比较,小鼠体重没有显著性变化(P0.05),但是肝重和肝脏相对体重系数显著降低(P0.05),小鼠肝细胞肿胀情况好转,肝细胞索结构尚清,PAS染色阳性细胞明显增多,芦丁干预组GPT活性为(168.75±18.32)U/L,与PFOA组比显著下降(P0.05);小鼠肝脏组织中TC和MDA含量分别为(4.25±0.77)mmol/g prot和(211.27±44.44)nmol/mg prot,与PFOA组比显著减少(P0.05);T-SOD活性为(7368.88±673.09)U/mg prot,与PFOA组比显著升高(P0.05)。三组肝脏组织中AMPKα蛋白表达无明显差异,与PFOA组相比,PFOA+rutin组的p-AMPKα蛋白表达显著上调。结论 PFOA暴露可导致小鼠肝脏损伤,引起脂质堆积。而芦丁对该损伤有一定的保护效应,这可能与芦丁激活AMPKα蛋白表达从而有效纠正TG水平以及增强抗氧化酶类的活性有关。     

草苁蓉多糖对张氏肝细胞氧化损伤保护作用

目的探讨草苁蓉多糖对过氧化氢(H_2O_2)致张氏肝细胞氧化损伤的保护作用及机制。方法以张氏肝细胞为研究对象,用H_2O_2诱导建立细胞氧化应激损伤模型,噻唑蓝法检测细胞存活率;分光光度法测定细胞外液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)及细胞中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与对照组比较,模型组肝细胞存活率[(52.5±1.2)%]下降,细胞外液中ALT、AST、LDH活力[分别为(23.5±2.9)、(29.4±2.9)、(595.4±5.6)U/L]升高,细胞中SOD活性和GSH含量[分别为(163.1±6.1)U/mg prot、(8.91±1.26)mg/g prot]下降,丙二醛含量[(12.6±2.6)nmol/mg prot]升高;与模型组比较,50 mg/L草苁蓉多糖组肝细胞存活率[(79.0±5.5)%]升高,细胞外液中ALT、AST、LDH活力[分别为(10.4±2.9)、(14.4±3.2)、(374.4±12.5)U/L]降低,细胞中SOD活性和GSH含量[分别为(323.6±17.3)U/mg prot、(15.4±0.52)mg/g prot]升高,细胞MDA含量[(6.93±0.75)nmol/mg prot]降低。结论草苁蓉多糖对H_2O_2所致张氏肝细胞损伤具有一定保护作用,其机制可能与提高细胞抗氧化能力有关。     

高温复合烫伤对兔早期肝肾功能影响

目的 观察高温复合烫伤对早期兔肝肾病理形态及主要生化指标改变.方法 动物随机分为常温组、高温组、高温习服组,分别置于不同温度环境,烫伤,动态观察丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酐(Cr)的变化及比较伤后48 h肝肾脏器病理形态改变.结果 高温组有3只兔死亡,高温习服组有1只死亡,常温组无死亡;烫伤前,高温习服组兔血中ALT、Cr水平[(69.3±1.5) U/L、(72.0±6.5) μmol/L]明显高于常温组[(43.3±4.5) U/L、(61.0±3.6) μmol/L)]和高温组[(46.3±7.6) U/L、(61.3±3.6) μmol/L)](P＜0.05);烫伤后,高温习服组和高温组ALT、Cr各时相点均明显高于常温组,而伤后48 h高温习服组ALT、Cr值[(136.0±7.0) U/L、(211.5±7.2) μmol/L]明显低于高温组[(167.0±24.9)U/L、(211.5±7.2) μmol/L] (P＜0.05);高温组兔肝、肾组织损伤程度较其他2组严重.结论 高温及烫伤复合应激对机体有损害作用,高温习服有利于减轻这种复合应激对脏器功能的损伤.     

精浆生化分析在精索静脉曲张诊断中的临床意义

目的探索精浆锌、酸性磷酸酶、柠檬酸、果糖、α-葡萄糖苷酶在诊断精索静脉曲张中的临床意义。方法收集本院泌尿生殖科就诊的89份精索静脉曲张(VC)患者精浆锌、酸性磷酸酶、柠檬酸、果糖、α-葡萄糖苷酶的检测结果,同时以20份正常生育史的已婚男性作为对照组。结果VC组精浆生化分析结果中,果糖(28.43 mmol/L±5.05 mmol/L)、酸性磷酸酶(77.69 U/L±10.87 U/L)、柠檬酸(20.55 mmol/L±3.68 mmol/L)的浓度与对照组的果糖(28.43 mmol/L±6.23 mmol/L)、酸性磷酸酶(133.34 U/L±41.24 U/L)、柠檬酸(21.27 mmol/L±2.84 mmol/L)的浓度相比,差异无统计学意义(P0.05),而VC组精浆锌(1 519.2μmol/L±201.47μmol/L)、α-葡萄糖苷酶(51.49 U/ml±10.63 U/ml)的浓度明显低于对照组精浆锌(2 356.6μmol/L±259.34μmol/L)、α-葡萄糖苷酶(58.31 U/ml±4.40 U/ml)的浓度,差异有统计学意义(P0.05)。结论精索静脉曲张是影响精浆锌和α-葡萄糖苷酶浓度改变的一个重要原因,精浆生化检测为诊断VC提供了简单快速的方法。本研究为及时有效地治疗男性不育症提供了有力的临床实验基础。