人食管鳞癌EC9706细胞线粒体DNA与凋亡的关系

目的：建立人食管鳞癌EC9706细胞的无线粒体DNA（ρ°）细胞,探讨食管癌线粒体DNA与凋亡的关系。方法：在细胞培养液中加EB 50μg/ml、尿嘧啶50μg/ml、丙酮酸100μg/ml,进行连续传代培养,获得完全缺失mtDNA的细胞（ρ°细胞）;运用实时荧光定量PCR技术,检测EB处理后不同时间的人食管鳞癌细胞EC9706 mtDNA的拷贝数,并采用琼脂糖凝胶电泳对mtDNA进行定性检测;采用TUNEL染色和流式细胞技术,检测EB处理后不同时间人食管鳞癌细胞EC9706的凋亡情况。结果：成功建立了人食管鳞癌细胞EC9706的ρ° 细胞,经实时荧光定量PCR鉴定,发现在EB存在下,随着细胞分裂,mtDNA拷贝数进行性减少,直到12天,mtDNA完全丢失;流式细胞术检测结果显示,EC9706细胞EB处理后,第4天、8天及12天细胞凋亡率（%）分别为（2.78±1.04）、（11.68±1.85）、（26.62±1.06）,与对照组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;TUNEL检测结果与上述一致,从第4天到第12天凋亡也逐渐增加。结论：成功建立了EC9706 ρ° 细胞。随着EC9706细胞mtDNA拷贝数量的逐渐减少,细胞凋亡率逐渐增加,表明mtDNA在诱导细胞凋亡中起着一定调控作用,提示选择性地诱导食管癌细胞mtDNA损伤,使食管癌细胞mtDNA拷贝数量明显减少,进而诱导细胞凋亡,可望成为食管癌生物治疗的一个新靶点。     

定量和定位检测EB病毒在鼻咽癌组织中的感染状态

背景与目的EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)与鼻咽癌密切相关,但EBV是鼻咽癌的致瘤因素还是仅仅是伴随关系有待进一步研究,而且EBV在鼻咽癌发生过程中的潜伏状态也不明确,本研究通过检测EBV在不同鼻咽组织中的表达变化,为进一步阐明EBV与鼻咽癌发生的关系提供线索。方法应用荧光定量PCR(real-timePCR)技术定量检测47例鼻咽低分化鳞癌患者癌、癌旁及相对正常鼻咽粘膜组织中的平均EBV拷贝数;并采用原位杂交技术(地高辛标记的EBER-1探针)对鼻咽癌、癌旁、对侧正常鼻咽粘膜中的EBV进行定位检测。以10例正常人鼻咽粘膜组织作对照。结果正常人鼻咽粘膜EBV检出率为80%(8/10),平均拷贝数为6.7×102/滋gDNA;100%(47/47)鼻咽癌和癌旁组织以及72.3%(34/47)的对侧正常鼻咽粘膜组织检出EBV,平均拷贝数分别为6.9×105/滋gDNA、1.5×105/滋gDNA、9.8×103/滋gDNA。正常人鼻咽粘膜、鼻咽癌患者对侧正常鼻咽粘膜之间感染EBV的几率、潜伏感染EBV的数量没有显著性差异(P>0.05);鼻咽癌及其癌旁、对侧正常粘膜组织三者之间,鼻咽癌与癌旁组织之间,癌旁和对侧正常粘膜组织之间EBV拷贝数存在显著性差异(P<0.01)。EBER-1原位分子杂交发现,对侧正常粘膜上皮细胞未检测到EBER-1的表达信号,癌旁靠近癌一侧的部分不典型增生细胞检测到EBER-1弱阳性信号,而在癌组织中的所有癌细胞均有EBER-1强阳性信号。结论无论是鼻咽癌患者还是健康人,EBV在鼻咽组织中的潜伏感染是一种普遍现象,但从鼻咽癌患者对侧正常鼻咽粘膜到癌旁再到癌组织EBV感染的量发生了改变,说明鼻咽上皮细胞中EBV感染量和表达信号的改变很可能是EBV致鼻咽癌的重要环节。     

胃癌线粒体DNA拷贝量降低:一种新的肿瘤标志物?

目的:比较线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数在胃癌和癌旁正常组织间的差异,探究mtDNA与胃癌发生的关系.方法:PCR分别扩增胃癌组织和癌旁正常粘膜组织各20例共40个样本的线粒体D-loop区两个高变区HV1(Hypervariable region)和HV2;并以核基因组的β-actin作为定量标准物.聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polvacrylamide gel electrophoresis,PAGE)银染比较mtDNA拷贝数在癌和正常组织间的差异.结果:HV1和HV2拷贝量(用β-actin标准化)在胃癌组织和胃正常组织间有显著的差异,P＜0.01;其拷贝量与环腺苷酸磷酸二酯酶(cAMp-PDE)和环鸟苷酸磷酸二酯酶(cGMP-PDE)表达有统计学联系,P＜0.05.结论:胃癌发生与mtDNA拷贝量的减少有着密切的关系,可能成为一种新的肿瘤分子标志物.     

食管鳞癌中GPX3基因的甲基化特征及其临床意义

目的:采用将食管鳞癌组织和癌旁组织相对比,并将食管鳞癌患者的血浆与正常人的血浆相对比的策略,检测GPX3的甲基化状态和频率。结合患者的临床病理特征,分析GPX3基因甲基化在食管鳞癌中的意义。 方法:收集42例食管鳞癌组织标本和相对应的癌旁组织标本,同时收集42例食管鳞癌患者和50例正常人的血浆标本;应用甲基化特异性PCR（MSP）结合琼脂糖凝胶电泳检测GPX3在组织和血浆中的甲基化情况,对比分析。 结果:GPX3在肿瘤组织中的甲基化频率为54.8%,显著高于癌旁组织9.5%（P＜0.001）。GPX3在肿瘤患者血浆中的甲基化频率为40.5%,在正常对照组的血浆中没有检测到甲基化。组织中的甲基化频率在病理分期为T3组和N2组分别显著高于病理分期为T1-T2组和N0-N1组。血浆中的甲基化频率在病理分期T3组明显高于病理分期T1-T2组。结论:GPX3在食管鳞癌组织的甲基化频率高于癌旁组织,在食管鳞癌患者血浆中的甲基化频率显著高于正常人,且临床分期越晚的甲基化频率越高。     

脾酪氨酸激酶与食管鳞状细胞癌的关系

目的：探讨脾酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase,Syk）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测30例食管鳞癌组织、27例食管鳞癌癌旁组织及30例相对正常食管黏膜组织中Syk mRNA的表达;应用免疫组化技术检测39例食管鳞癌组织、27例食管鳞癌癌旁组织及38例相对正常食管黏膜组织中Syk蛋白的表达并分析其与临床病理学指标间的关系。结果：食管鳞癌组织中Syk mRNA表达高于癌旁组织和正常食管黏膜组织,但差异无统计学意义（P〉0.05）。Syk蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率（34/39,87.2%）明显高于食管鳞癌癌旁组织（18/27,66.7%）和正常食管黏膜组织（26/38,68.4%）（P〈0.05）。Syk蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤大小、临床分期均无明显相关关系（P均〉0.05）。结论：Syk mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中表达增高,但Syk蛋白表达与临床病理学指标无相关关系。     

STAT3基因在乳腺癌组织中的表达及意义

背景与目的：STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如乳腺癌、头颈部癌、胃癌等中均有异常表达和活性增强。本实验研究乳腺肿瘤组织中癌基因STAT3mRNA丰度及其蛋白的表达阳性率,探讨其与组织类型、淋巴结转移、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及癌胚表达抗原（CerbB-2）表达的关系。方法：采用实时荧光定量RT-PCR技术检测32例乳腺癌和10例乳腺良性病变中STAT3 mRNA的丰度表达,EnVision免疫组化法检测45例乳腺癌和12例癌旁乳腺组织标本中p-STAT3蛋白的表达阳性率,并进行相关统计分析。结果：EnVi-sion免疫组化法检测45例乳腺癌和12例癌旁乳腺组织标本中,pSTAT3在癌旁组织和癌组织中的阳性表达率分别为16.7%（2/12）和60%（27/45）,两者相比统计学差异有显著性（P〈0.05）;在无淋巴结转移和有淋巴结转移乳腺癌组织中分别为48.1%（13/27）和77.8%（14/18）,两者相比统计学差异有显著性（P〈0.05）;在孕激素阴性和孕激素阳性乳腺癌组织中分别为37.5%（6/16）和72.3%（21/29）,两者相比统计学差异有显著性（P〈0.05）。实时荧光定量RT-PCR技术检测32例乳腺癌和10例乳腺良性病变中,STAT3 mRNA的相对丰度在乳腺良性病变和乳腺癌中的分别为：6×10^-3±3×10^-3和34×10^-3±17×10^-3,两者相比统计学差异有显著性（P〈0.05）;在无淋巴结转移和有淋巴结转移乳腺癌组织中分别为26×10^-3±13×10^-3和39×10^-3±18×10^-3,两者相比统计学差异有显著性（P〈0.05）;在孕激素阴性和孕激素阳性乳腺癌组织中分别为28×10^-3±10×10^-3和39×10^-3±19×10^-3,两者相比统计学差异有显著性（P〈0.05）。pSTAT3蛋白阳性率和mRNA的丰度均与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小及ER、CerbB-2阳性与阴性组未见相关性（P〉0.05）。结论：STAT3基因表达增强可能与乳腺癌淋巴结转移以及孕激素有关。     

食管鳞癌组织中 CDK10基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的：探讨周期素依赖性激酶10（CDK10）在食管鳞癌中基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的关系。方法：应用甲基化特异性 PCR 检测 CDK10基因启动子在55例食管鳞癌组织及相应癌旁组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果：在食管鳞癌组织中 CDK10甲基化阳性率（69．1％,38／55）显著高于癌旁对照组织（9．1％,5／55）（P ＜0．01）。CDK10甲基化与食管鳞癌淋巴结转移与临床分期显著相关（P ＜0．05）。结论：CDK10基因甲基化与食管癌淋巴结转移和临床分期密切相关。     

ＲＴ-ＰＣＲ法检测ＳＨＨ和ＰＴＣＨ在食管鳞状细胞癌中的表达

目的：检测ＳＨＨ和ＰＴＣＨ基因在食管鳞癌中的表达情况。方法：应用ＲＴ-ＰＣＲ法检测３５例食管鳞癌及癌旁组织中ＳＨＨｍＲＮＡ和ＰＴＣＨｍＲＮＡ的表达情况。结果：食管鳞癌中ＳＨＨｍＲＮＡ和ＰＴＣＨｍＲＮＡ的表达阳性率分别为６５.７％（２３／３５）和６０.０％（２１／３５）,与癌旁组织相比有显著性差异（Ｐ＜０.０５）。结论：与癌旁组织相比,食管鳞癌中Ｈｈ信号传导通路成员ＳＨＨｍＲＮＡ和ＰＴＣＨｍＲＮＡ呈现高表达,表明该通路可能参与大多数食管鳞癌的发生过程。     

miR-520a在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨miR-520a在人食管鳞癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测59例食管鳞癌组织和45 例癌旁组织中miR-520a的表达,分析其与临床病理特征之间的关系。结果:miR-520a在食管鳞癌组织中的表达明显低于癌旁组织（P＜0.05）,并与患者淋巴转移明显相关（P＜0.05）。结论:miR-520a在食管鳞癌中低表达,提示其可能发挥抑癌基因的功能。     

鼻咽癌组织中EB病毒定量检测的临床意义

目的:探讨鼻咽癌组织中EB病毒(EBV)定量检测的意义。方法:应用荧光定量PCR(real-timePCR)技术定量检测30例鼻咽低分化鳞癌患者癌组织、癌旁组织及15例正常健康人鼻咽黏膜组织中的EBV拷贝数,并比较三者检测结果。结果:正常人鼻咽黏膜EBV检出率为73.3%(11/15),平均拷贝数为6.5×102μg-1;鼻咽癌和癌旁组织EBV检出率为100%(30/30)和76.7%(23/30),平均拷贝数分别为6.7×105μg-1DNA和1.3×105μg-1DNA。正常人鼻咽黏膜、鼻咽癌患者癌旁组织感染EBV的概率差异无统计学意义(P>0.05);鼻咽癌组织、癌旁和正常黏膜组织3者之间,鼻咽癌与癌旁组织之间,癌旁和正常黏膜组织之间EBV拷贝数差异有统计学意义(P<0.01)。结论:鼻咽癌与癌旁组织感染EBV的数量明显高于正常鼻咽黏膜,EBV感染量是鼻咽癌致病的重要因素,定量检测鼻咽癌组织中EB病毒有助于临床判断病情。     

Ringworm in animals in a farm in Assiut

Bericht über das Auftreten von Hautmykosen bei Tieren auf der Farm der Landwirtschaftlichen Fakultät der Universität Assiut. Von 70 Kälbern waren 42 pilzkrank, davon 22 durch T. mentagrophytes, 20 durch T. verrucosum. Von 180 Kühen waren 8 pilzbefalien, sämtlich durch T. mentagrophytes. Von 2 kranken Bullen wurde T. verrucosum isoliert. Auch die 3 Pferde und 2 Maultiere der Farm waren pilzinfiziert; Erreger war in diesen Fällen T. equinum. Auch ein Kalb war von T. equinum befallen. Die gleiche Pilzart wurde ferner von 3 Tierpflegern isoliert, die Pilzherde am Hals und an den Armen aufwiesen.     

Statistical challenges in preprocessing in microarray experiments in cancer

Many clinical studies incorporate genomic experiments to investigate the potential associations between high-dimensional molecular data and clinical outcome. A critical first step in the statistical analyses of these experiments is that the molecular data are preprocessed. This article provides an overview of preprocessing methods, including summary algorithms and quality control metrics for microarrays. Some of the ramifications and effects that preprocessing methods have on the statistical results are illustrated. The discussions are centered around a microarray experiment based on lung cancer tumor samples with survival as the clinical outcome of interest. The procedures that are presented focus on the array platform used in this study. However, many of these issues are more general and are applicable to other instruments for genome-wide investigation. The discussions here will provide insight into the statistical challenges in preprocessing microarrays used in clinical studies of cancer. These challenges should not be viewed as inconsequential nuisances but rather as important issues that need to be addressed so that informed conclusions can be drawn.     

Trends in zygomycosis in children

Zygomycosis, or mucormycosis, is associated with significant morbidity and mortality in both children and adults. Studies in adults have shown an increase in the incidence of zygomycosis, particularly among haemtopoietic stem cell transplant (HSCT) recipients and patients with haematologic malignancies. There is a paucity of data on the epidemiology of zygomycosis in children. We performed a retrospective analysis to describe trends in zygomycosis between 1 January 2003 and 31 December 2010. We used the Pediatric Health Information System (PHIS) database to identify paediatric patients who were diagnosed with zygomycosis during the study period. Administrative data on diagnoses, demographics, underlying conditions and clinical experiences were collected. Summary statistics were calculated and tests for trend were conducted. We identified 156 unique patients with zygomycosis. The prevalence of zygomycosis did not significantly increase over time (P=0.284). The most common underlying condition was malignancy (58%) and over half received intensive care. Voriconazole utilisation among all hospitalised children significantly increased during the period (P=0.010). Our study demonstrates that the incidence of zygomycosis is not significantly increasing. During the time period there was a significant increase in the use of voriconazole among children.     

Hemoglobin in lymphogranulomatosis in children

The peculiarities of hemoglobin content and properties in lymphogranulomatosis were studied in children by different methods. In most patients the content of fetal hemoglobin and methhemoglobin was found to increase and the rate of ferricyanide oxidation of hemoglobin also increases. Simultaneously, the rate of non-homogenicity of basic hemoglobin fractions was observed to increase on account of immunologically different components.     

Dermatomycosis in Goats in India

Summary: In an extensive survey involving 2176 goats 1.56% of goats manifested clinical lesions of ringworm infection. Animals below the age of 6 months were affected most (4.20%). The incidence of infection was higher during the winter months. T. verrucosum, T. mentagrophytes and M. gypseum were isolated from the skin scrapings of 12, 4, and 2 goats respectively. It is suggested that the infected animals could be a source of disease to human population in which the zoophilic dermatophyte invasion is characterized by severe inflammatory lesions of the skin. The zoonotic importance of different dermatophytes is stressed.
Zusammenfassung: In einer ausgedehnten Untersuchung an 2176 Ziegen wurden bei 1,56% klinische Zeichen einer Hautmykose festgestellt. Tiere, die jühger als 6 Monate alt waren, zeigten mit 4,20% am häfigsten Krankheitssymptome. In den Wintermonaten war die Erkrankungshäufigkeit am gröBten. T. vermcosum, T. mentagrophytes and M. gypseum wurden jeweils von 12,4 bzw. 2 Ziegen isoliert. Die inflzierten Tiere köinnen eine Infektionsquelle für die menschliche Bevölkerung darstellen und dort Mykosen mit stark entzündlichen Veränderungen auslösen. Die Bedeutung verschiedener Dermatophyten als Erreger von Zoonosen wird hervorgehoben.     

Sex hormones in women in rural China and in Britain

Plasma concentrations of certain hormones linked to breast cancer risk were measured in age-pooled samples from 3,250 rural Chinese women in 65 counties, and 300 British women, all aged 35-64. In age-groups 35-44, 45-54 and 55-64 respectively, mean oestradiol concentrations were 36% (P = 0.043), 90% (P less than 0.001) and 171% (P = 0.001) higher in the British than in the Chinese women, and mean testosterone concentrations were 48% (P less than 0.001), 68% (P less than 0.001) and 53% (P = 0.001) higher in the British than in the Chinese women. The difference in testosterone concentrations between the two countries appeared to be due largely to the lower average body weight in the Chinese women. Sex hormone binding globulin did not differ significantly between the two countries in age groups 35-44 and 45-54, but was 15% (P = 0.002) lower in the British than in the Chinese women at ages 55-64. Prolactin concentrations did not differ significantly between the two countries in any age group.