人类第6型疱疹病毒感染与特发性血小板减少性紫癜

探讨人类第６型疱疹病毒（ＨＨＶ－６）感染与特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）的关系。方法采用聚合栈 反应（ＰＣＲ）方法检测１０５例ＩＴＰ患者骨髓单个核细胞（ＢＭＭＮＣ）ＨＨＶ－６ＤＮＡ及部分患者微小病毒Ｂ１９、巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ序列;用竞争性ＥＬＩＳＡ方法检测６６例ＩＴＰ患者血小板相关抗体（ＰＡＩｇ）,并采用间接免疫荧光法动态观察１９例ＩＴＰ患者抗ＨＨＶ－６血清抗体滴度变化。结果①ＩＴＰ患     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

复合PCR检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，建立了复合ＰＣＲ，并对临床标本进行检测，５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；１０例慢性ＮＡＮＢ抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶ－ＲＮＡ，１例ＨＢＶ－ＤＮＡ和     

儿童B系急性淋巴细胞白血病TEL-AML1融合基因的研究

目的了解ＴＥＬＡＭＬ１融合基因在儿童Ｂ系急性淋巴细胞白血病（急淋）中的发生率及其与临床诊断和预后的关系,并比较巢式逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和双标记荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）两种方法。方法采用巢式ＲＴＰＣＲ和双标记ＦＩＳＨ技术检测ＴＥＬＡＭＬ１融合基因。结果和结论ＲＴＰＣＲ检测发现儿童Ｂ系急淋中２２．５％（４０例中９例）的患者有ＴＥＬＡＭＬ１融合基因转录本,这类患者预后较好,完全缓解率达１００％。ＲＴＰＣＲ和ＦＩＳＨ技术是检测ＴＥＬＡＭＬ１的有效方法,并为临床诊断和预后估计提供了有一定价值的手段。     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，建立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式「ＨＣＶ非编码区（５ＮＣＲ）与ＮＳ５联合」技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献赠及３７例输血后丙型肝炎患 血清ＨＣＸＶＲＮＡ。结果 １０例抗ＨＣＶ阳性一献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ     

丙型肝炎病毒不同区抗原酶免疫试剂研究

目的　探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ） 不同区抗原的反应性,为建立抗ＨＣＶ 酶免疫测定（ＥＩＡ） 确认试剂提供依据。方法　利用基因工程技术,重组所表达的ＨＣＶ 不同区抗原片段（ ＨＣＶＣ、ＮＳ３ 、ＮＳ４ 、ＮＳ５） ,建立了ＨＣＶ 单片段抗原ＥＩＡ 检测方法,检测了７４７ 份四川地区献血员血清。对其中３７３ 份血清,用２ 个厂生产的经批检合格的抗ＨＣＶＥＩＡ 试剂进行检测比较,对个别结果不符的样品进一步进行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ ＰＣＲ） 分析。结果　献血员中抗ＨＣＶＣ 等４ 种抗体阳性检出率分别为４ ．６８ ％ （３５／７４７） 、５ ．２ ％ （３９／７４７） 、１ ．１ ％ （８／７４７） 、１ ．２ ％ （９／７４７） ,２ 家试剂阳性检出率均为４ ％（１５／３７３） 。结论　ＨＣＶ 不同区抗原片段的抗体检出率差异较大,ＮＳ３ 检出率最高,其次为Ｃ 区、ＮＳ５ 、ＮＳ４ 。说明抗ＨＣＶＥＩＡ 检测试剂以ＨＣＶ ＮＳ３ 区和Ｃ 区为主要抗原片段。     

EB病毒－脱氧核糖核酸检测对鼻咽癌早期诊断的应用

ＥＢ病毒－脱氧核糖核酸检测对鼻咽癌早期诊断的应用中国人民解放军广州军区广州总医院耳鼻喉科郭小谦，陈勇挺我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了７１例免疫球蛋白（Ｉｇ）Ａ／病毒壳膜抗原（ＶＣＡ）阳性（＞１：５）患者的鼻咽脱落细胞中ＥＢ病毒（ＥＢＶ）脱氧...     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

庚型肝炎病毒不同基因区的聚合酶链反应扩增

分别在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因５′端非编码区（５′－ＵＴＲ）、非结构（ＮＳ）３及区非结构（ＮＳ）５区设计套式引物，建立逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）检测血清ＨＧＶ ＲＮＡ。在２９９份不同血汪标本中ＨＧＶ ＲＮＡ阳性者４１例，基于５′－ＵＴＲ、ＮＳ３区及ＮＳ５区引物ＰＣＲ的阳性率分别为８７．８％、８０．５％和９７．６％。本研究结果表明根据中国株ＨＧＶ基因ＮＳ５区部分序列设计引     

丙型肝炎病毒不同基因区的聚合酶链反应扩增

目的探讨提高聚合酶链反应（ＰＣＲ）对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）病毒血症的检出率和对变异较大区域的扩增效率的方法。方法分别以ＨＣＶ基因组５＇端非编码区（５＇ＵＴＲ）、非结构基因４区（ＮＳ４）及ＮＳ５ｂ区的引物检测ＨＣＶ，并比较双退火温度与单一退火温度对ＨＣＶ基因扩增效率的影响。结果ＨＣＶ不同基因区（５′ＵＴＲ、ＮＳ４、ＮＳ５ｂ）引物的ＰＣＲ扩增阳性率分别为９２％、６２％、５９％。以双退火温度扩增ＮＳ４区与ＮＳ５ｂ区基因，扩增阳性率分别提高到７７％与７９％。将血清按原血清、１０－１～１０－１０系列稀释后检测，发现２份血清单退火温度ＰＣＲ的检出水平分别为１０－５与１０－７，双退火温度ＰＣＲ检出水平则分别提高至１０－８与１０－９稀释血清。结论５′ＵＴＲ引物对ＨＣＶＲＮＡ的检出率明显高于ＮＳ４区与ＮＳ５ｂ区引物。双退火温度ＰＣＲ可显著提高ＨＣＶＲＮＡ检出的敏感性     

髓母细胞瘤PCNA和c-erbB-2表达与预后关系的研究

目的：探讨ＰＣＮＡ和ｃ－ｅｒｂＢ－２表达与髓母细胞病人预后的关系。方法：应用免疫组化（ＳＰ法）结合临床随访,检测ＰＣＮＡ和ｃ－ｅｒｂＢ－２在６２例中ＰＣＮＡ和ｃ－ｅｒｂＢ－２组织和１０例正常脑组织中的表达并分析其与病人预后的关系。结果：在６２例髓母细胞瘤组织中,ＰＣＮＡ表达明显增强,且表达水平不一,其中４５例ＰＣＮＡ表达阳性（增殖指数≥２５％）。４３例有ｃ－ｅｒｂＢ－２表达,其中２２例ｃ－ｅｒｂＢ     

重组抗原在戊型肝炎病毒感染诊断中的应用

目的探讨重组抗原在戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）感染诊断中的应用。方法用ＨＥＶ重组抗原建立酶免疫试验（ＥＩＡ）检测肝病患者和健康人群血清中抗戊型肝炎病毒抗体（抗－ＨＥＶ）。结果５５份用新加坡ＤＢＬ公司抗－ＨＥＶ诊断试剂盒检测为抗－ＨＥＶ阳性的肝炎患者血清中，５３份（９６．４％）用本方法检测也为阳性；４５份ＤＢＬ试剂盒检测为抗－ＨＥＶ阴性的血清中，本法检测有３份为抗－ＨＥＶ阳性。检测甲、乙、丙型肝炎患者血清各３０份，抗－ＨＥＶ阳性率分别为１３．３％（４／３０）、１３．３％（４／３０）和１０．０％（３／３０）。健康人抗－ＨＥＶ阳性率为５．０％（８／１６０）。重组抗原与合成肽抗原混合用于ＥＩＡ，可以检出两种抗原单独阳性的抗－ＨＥＶ。结论以重组抗原为基础的ＥＩＡ特异性强、灵敏度高、快速简便，是戊型肝炎血清学诊断及流行病学调查的一种可靠方法     

新型多抗原肽检测丙型肝炎病毒基因高变区1抗体

目的 寻求一种新的检测丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）感染血清中抗高变区１（ＨＶＲ１）抗体的方法,并探讨其与病毒血症的关系。方法 分别采用合成的ＨＣＶ－ＢＪ株（１ｂ型）ＨＶＲ１３９０～４１１ａａ序列共２２个氨基酸的线性表位多肽（ＬＰ）及多抗原肽（ＬＰ）及多抗原肽（ＭＡＰ,对称８分支）为抗原,以间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）,检测５９份丙肝患者血清及７５份其他类型肝炎患者血清中相应抗体;结合对血清Ｈ     

扁桃体炎,口腔癌中EB病毒的检测

为探讨Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒在扁桃体炎、口腔癌中的感染状况，本研究利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和酶联免疫反应（ＥＬＩＳＡ）检测５４例正常人、２８例慢性扁桃体疾患者及３０例口腔癌患者的口腔含漱液、术后组织标本的ＥＢＶ－ＤＮＡ和血清标本的ＩｇＧ－ＥＢＶＣＡ，表明：扁桃体炎、口腔癌者的ＥＢＶ－ＤＮＡ检出率与正常人相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５），而ＩｇＧ－ＥＢＶＣＡ的检出率与正常人相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５），慢性扁桃体疾患者、口腔癌患者的含漱液与术后组织标本的ＥＢＶ－ＤＮＡ检出率相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５），说明仅仅检测ＩｇＧ－ＥＢＶＣＡ较难反映患者的真实情况，检测口腔含漱液中的ＥＢＶ－ＤＮＡ能比较真实地反映ＥＢ病毒在扁桃体炎、口腔癌中的感染状况，在临床上有较高的应用价值     

丙型肝炎病毒NS5A区插入序列因子的初步研究

研究丙型肝炎病毒ＮＳ５Ａ区插入序列（ＩＳ） 因子及其来源。以ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＨＣＶ ＮＳ５Ａ区第６８７１至７１２１ 区段， 对扩增产物进行核苷酸测序并与ＨＣＶ－Ｊ株相应区段序列相比较。结果发现ＨＣＶ ＮＳ５Ａ 区插入一个４８ ｂｐ 的ＩＳ因子， 将ＩＳ因子与ＨＣＶ－Ｊ株全核苷酸序列进行同源性对照， 发现该片段来源于ＨＣＶ Ｅ１区。该研究首次报告了ＨＣＶ ＮＳ５Ａ区有来自Ｅ１区的漂移基因片段， 并对其临床和生物学意义进行了初步讨论。     

应用PCR检测258例乙肝患者血清HBV-DNA结果报告

我院自１９９７年１月至１９９８年５月,应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测乙型肝炎２５８例患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ,并同时检测乙肝病毒标志物（ＨＢＶＭ）,现报告如下。材料和方法２５８例患者均为住院病人,按１９９０年上海全国病毒性肝炎会议制定的病毒性肝炎防治方案进行诊断,急性肝炎（ＡＨ）６５例;慢性肝炎（ＣＨ）１４５例,其中轻度７０例、中度４６例、重度２９例;肝炎肝硬化（ＨＬＣ）４８例。全部病例皆采用酶联免疫（ＥＬＩＳＡ）法检测ＨＢＶＭ,并排除甲、丙、Ｅ、Ｇ肝炎。ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ试剂盒均由河南省洛…     

儿童急性淋巴细胞白血病 TEL／AML1融合基因的检测及其临床意义

目的 研究我国儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中伴有ｔ（１２；２１）易位的发生率及其临床预后特征。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＰＴ－ＰＣＲ）技术检测ＴＥＬ－ＡＭＬ１融合基因转录本。结果 在６０例儿童（Ｂ系４５例，Ｔ系１３例，Ｔ、Ｂ系双表达２例）中共发现８例Ｂ系ＡＬＬ中有ＴＥＬ－ＡＭＬ１融合基因转录本，治疗后８例均获得完全缓解（ＣＲ）。结论 ｔ（１２；２１）Ｂ系ＡＬＬ是儿童ＡＬＬ中最多见且预后     

输血后丙型肝炎患者不同功能区抗体的研究

为了了解丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不同功能区抗体的诊断价值，利用体外表达的ＨＣＶＣ、Ｅ１、Ｅ２／ＮＳ１、ＮＳ３、ＮＳ５蛋白作为重组抗原，按ＥＬＩＳＡ方法检测了已确诊为输血后丙型肝炎患者的血清１１２份。结果，检出率最高的是抗ＨＣＶ－Ｃ（８１．３％），最低的是抗ＨＣＶ－Ｅ１（１０．７％），输血后１个月内检出率最高的也是抗ＨＣＶ－Ｃ（８０％）。表明Ｃ蛋白是进行ＨＣＶ诊断的最重要抗原。另外，动态观察１０例输血     

PCR和巢式PCR直接检测血清中HIV核酸序列

采用ＰＣＲ和巢式ＰＣＲ方法对５３例ＨＩＶ抗体阳性和阴性标本进行了检测，以扩增ＨＩＶ特异性ＤＮＡ序列，结果美国ＡｂｂｏｔｔＨＩＶ阳性血清２份，新加坡阳性血清２份，国内阳性血清２份及ＨＩＶ－１病毒培养物１份，两套ＰＣＲ扩增反应物均为阳性，对其中一套ＰＣＲ扩增的ｇａｇ基因序列进行巢式ＰＣＲ也为阳性。采自西南边境地区的２３份ＥＬＩＳＡ和ＷＢ阳性血清，各种ＰＣＲ反应均为阳性；１１份ＥＬＩＳＡ可疑阳性、ＷＢ阴性标本中，有两例血清呈ＰＣＲ阳性，探针杂交亦为阳性。而１２例ＳＩＶ、ＳＲＶ及猴血清标本ＰＣＲ反应均为阴性。上述结果表明，采用ＰＣＲ方法检测血清中ＨＩＶ核酸序列是一种很有前途的ＨＩＶ感染诊断方法。     

通用型免疫—聚合酶链反应系统的建立及应用

目的 构建基因探针，建立通用型免疫－聚合酶链反应（ＰＣＲ）系统，检测极微量抗原抗体方法 以聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）作交联剂，构建成ＳＰＡ－ＤＮＡ基因探针，直接把生物素（Ｂｉｏ）与ＤＮＡ连接构建成Ｂｉｏ－ＤＮＡ基因探针，应用于免疫－ＰＣＲ中，分别对抗原抗体进行检测分析。结果 建立了通用型抗体抗原免疫－ＰＣＲ检测系统，分别用于人血清蛋白（ＨＳＡ）抗体抗原检测，ＨＳＡ抗体检测的最高稀释度可达１：１０＾９。Ｈ