丹参、三七药对配方颗粒单煎、合煎成分含量变化的对比研究

目的以丹参、三七药对为研究对象,分析丹参、三七饮片和配方颗粒单煎与合煎的化学成分变化,以期从化学成分角度阐明丹参、三七药对配伍的科学内涵。方法采用UPLC-MS/MS法;色谱柱:Acquity UPLC HSST3 column(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相:乙腈(A)-0.1%的甲酸水(B),梯度洗脱;质谱条件:采用ESI电喷雾离子源,MRM多反应监测模式;同时进行正、负离子检测。结果合煎液的丹参素含量均明显高于单煎液;三七配方颗粒中三七皂苷R1含量明显高于传统饮片;其他成分变化不明显。结论丹参、三七饮片合煎与单煎各成分含量存在差异;配方颗粒药对通过合煎能提高丹参素和三七皂苷R1的含量。     

基于高效液相色谱技术对冠心Ⅱ号抗抑郁作用物质基础的研究

目的：在前期冠心Ⅱ号具有抗抑郁作用的研究基础上,采用高效液相色谱（HPLC） 技术,通过分析冠心Ⅱ号主要活性成分在大鼠体内血清及脑组织的含量测定,揭示冠心Ⅱ号抗抑郁作用的物质基础。方法：SD 大鼠灌胃冠心Ⅱ号（2.5 g/kg）,30 min后处死取血清及脑组织,采用HPLC 检测血清及脑组织中羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B 的含量,并计算各单体成分的血脑屏障（BBB） 透过率。色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18 （250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈（A） -0.1%磷酸（B）;柱温：35 ℃;流速：1.0 mL/min。结果：血清中羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B 的线性回归方程分别为Y=3.976 5X+0.431 0（r=0.999 9）,Y=70.262X+69.141 0（r=0.999 9）,Y=34.729X-2.404 4（r=0.999 6）。脑组织中羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B 的线性回归方程分别为Y=4.586 9X-0.096 3（r=0.999 8）,Y=70.859X+100.040 0（r=0.998 1）,Y=42.176X+18.242 0（r=0.999 5）。3 种活性单体成分在血清及脑组织质量浓度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B 在大鼠正常状态的BBB 透过率分别为1.22%、1.27%及0.87%,三者均能透过BBB。结论：冠心Ⅱ号灌胃大鼠后血清及脑组织中均能检测到羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B 这3 种活性单体成分,这三者可能是冠心Ⅱ号抗抑郁作用的潜在物质基础,并且均能透过BBB。     

溶剂pH及与三七合煎对丹参药材水提效果影响的研究

 目的考察提取溶剂的pH值以及与三七共煎对丹参水溶性成分提取效果的影响。方法使用HPLC测定当溶剂pH值分别为4.0,7.0,8.2和9.2时丹参药材提取液以及丹参、三七合煎液中丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的含量,并比较了其他水溶性成分的化学组成差异。结果酸性条件下丹酚酸B的提取效果较好,而中性和碱性环境对原儿茶醛和丹参素的溶出较为有利。在酸性、中性和弱碱性溶剂中,与三七共煎对丹参中丹参素、原儿茶醛、和丹酚酸B的溶出产生抑制作用;而在pH为9.2时,效果则相反。结论此结果可为丹参提取工艺的优化提供实验依据。     

丹参不同居群的生物量与活性成分含量分析

目的：为优质丹参新品种选育研究提供依据。方法：采用HPLC测定来自不同居群丹参根的丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹参素和丹酚酸B的含量,采用分光光度法测定根的总丹参酮与总丹酚酸的含量。结果：四川中江丹参的单株生物量、山西丹参的丹参酮ⅡA、四川中江丹参的隐丹参酮和总丹参酮、河北的高茎类型的丹参素、四倍体丹参的丹酚酸B和总丹酚酸的含量分别高于其他样品。以单株生物量和各活性成分含量乘积为考察指标,四川中江丹参的各成分的单株乘积值均高于其他样品。结论：结合丹参的生物量与各活性成分含量可以认为,四川中江丹参可以作为一份质量较好的材料。     

丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱及主要化学成分变化研究

目的建立丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法, 探讨丹参-当归配伍对主要化合物溶出的影响。方法制备丹参、当归单煎及共煎溶液, 采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm), 以0.1%磷酸水溶液-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱, 流速1.0 ml/min, 柱温35 ℃, 检测波长280 nm, 建立丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱, 求取指纹图谱共有模式, 进行色谱峰归属;测定丹参素、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮ⅡA、阿魏酸、绿原酸、洋川芎内酯9种成分含量, 分析配伍前后各成分溶出度变化。结果 HPLC指纹图谱及含量测定方法精密度良好, 溶液中各待测成分在48 h内稳定, 各色谱峰RSD值均<5.0%, 9种成分在各自线性范围内均有良好的线性关系, 回收率均符合相关规定, 各样品指纹图谱相似度均>0.9;丹参-当归药对配伍后共标定出17个共有峰, 其中10个成分来自丹参, 7个成分来自当归, 该色谱条件下未发现有新化合物生成;丹参-当归药对配伍共煎后, 丹参中迷迭香酸、丹酚酸B及丹参素平均...     

炮制、煎煮方式对化痰祛湿活血方中18种成分含量的影响

目的：基于中药炮制理论和文献研究,探究炮制和煎煮方式对化痰祛湿活血方中18种有效成分含量的影响。方法：采用高效液相色谱法建立丹参素钠、绿原酸、阿魏酸、金丝桃苷、芦丁、橙皮苷、槲皮苷、丹酚酸B、槲皮素、柚皮素、水飞蓟宾、山柰酚、芹菜素、橙黄决明素、23-乙酰泽泻醇C、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷b1、丹参酮ⅡA等18种成分含量测定方法;采用聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）进行数据结果分析。结果：炮制前后混煎水煎液中绿原酸、芦丁、丹酚酸B、水飞蓟宾、山柰酚、芹菜素、柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2、丹参酮ⅡA含量均高于单煎水煎液;单煎水煎液中丹参素钠、阿魏酸、橙皮苷、槲皮素、柚皮素、23-乙酰泽泻醇C均高于混煎水煎液;无论单煎还是混煎炮制后的组方中柴胡皂苷b2含量升高,而原方绿原酸、阿魏酸、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、23-乙酰泽泻醇C、柴胡皂苷b1、丹参酮ⅡA含量降低;PCA结果分析表明,46.2%的差异由煎煮方式引起,29.8%由炮制引起的;芦丁、山柰酚、橙皮苷、柴胡皂苷b2、橙黄决明素、水飞蓟宾、阿魏酸是不同煎煮方式的差异成分,芦丁、丹参素钠、丹酚酸...     

HPLC测定尿塞通片中丹酚酸B含量

尿塞通片是由丹参、泽兰、桃仁、红花、赤芍、白芷等十三味药组成,具有理气活血、通经散结的作用.临床上用于治疗前列腺增生、尿闭等.丹参为方中主药,丹酚酸B为其主要有效成分.因丹参中丹酚酸B的含量常用HPLC法测定[1-3],故本试验采用高效液相色谱法测定尿塞通片中丹酚酸B的含量,为评价产品质量提供理论依据.     

柴葛煎中药物单煎和共煎对柴胡挥发油煎出量的影响

目的：探讨柴葛煎中药物单煎和共煎对柴胡挥发油煎出量的影响。方法：采用紫外分光光度法,对柴胡单煎液与合煎液中柴胡挥发油含量进行测定。并以此为指标,比较单煎和共煎对柴胡挥发油的溶出量。结果：共煎提取的挥发油含量明显高于柴胡单煎法,柴葛煎合煎提取挥发油含量明显高于药对合煎。结论：柴胡与大豆黄卷、黄芩、葛根及柴葛煎中其他药共煎会提高挥发油的煎出量。     

黄芪-丹参煎液HPLC指纹图谱及多指标定量测定研究

目的建立黄芪丹参煎液的HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析方法,为黄芪丹参煎液质量控制提供科学依据。方法采用HPLC-UV法,ODS Hypersil DIM色谱柱(250 mm×4.6 mm,3μm);以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,体积流量0.8 mL/min,进样量20μL,检测波长254 nm,建立HPLC指纹图谱;采用LC-MS法,建立黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪皂苷Ⅱ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、丹酚酸B、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸11个成分含量测定方法,并采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对测定结果进行识别。结果 10批黄芪丹参煎液的指纹图谱中有12个共有峰,通过与化学对照品比对,指认出7个色谱峰,分别为1号峰咖啡酸、3号峰毛蕊异黄酮葡萄糖苷、6号峰迷迭香酸、8号峰紫草酸、9号峰毛蕊异黄酮、10号峰丹酚酸B、11号峰芒柄花苷,10批样品的相似度≥0.995。黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪皂苷Ⅱ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、丹酚酸B、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸线性关系良好,r2值均大于0.995;回收率为89.3%～110.9%。通过PCA可将10批黄芪丹参煎液分成2类,并可看出不同产地、不同批次药材之间的质量存在差异,进一步采用OPLS-DA筛选出导致质量差异的两个物质丹酚酸B和芒柄花苷。结论根据黄芪丹参煎液指纹图谱的建立,结合质谱进行定量,能够为其质量控制提供更可靠的参考。     

斑马鱼脑出血模型的建立及丹参在该模型上改善脑出血的研究

目的:建立阿托伐他汀诱导的斑马鱼脑出血模型,评价丹参煎液及其水溶性单体成分对斑马鱼脑出血的影响。方法:选用转基因斑马鱼Tg(fli-1:EGFP)and Tg(gata1:DsRed)胚胎为研究载体,用阿托伐他汀诱导斑马鱼脑出血,建立脑出血斑马鱼模型,干预不同浓度的丹参煎液、丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素,在荧光显微镜下拍照观察,计算斑马鱼脑出血面积和出血率。结果:丹参煎液、丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素均可减少斑马鱼脑出血面积,丹参煎液的作用最为明显。而丹酚酸B不仅能减少出血面积,同时能够降低出血率。结论:丹参其煎液和部分水溶性成分丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素均对斑马鱼脑出血有改善作用。其中丹酚酸B改善斑马鱼脑出血的作用较为明显,值得进一步研究。     

丹参红花混煎液中丹参素、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的HPLC测定方法

目的:建立同时测定丹参红花混煎液中丹参素、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B含量的HPLC法.方法:采用梯度洗脱高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×100 mm,1.8μm);以甲酸-500 mmol·L-1甲酸铵-水(0.5:10:90)为流动相A,0.5％甲酸-乙腈为流动相B;检测波长280 nm(丹参素、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B)和380 nm(羟基红花黄色素A);流速0.5 mL·min-1;柱温30℃.结果:建立了同时测定丹参红花混煎液中5种成分含量的方法.丹参素、羟基红花黄色素A、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B质量浓度分别在3.51 ～ 84.2,3.48～83.5,1.90～ 45.6,2.47 ～59.3,37.9～909.6 mg·L-1与峰面积积分值线性关系良好(R2＞ 0.999 3),加样回收率分别为99.1％,102％,102％,98.5％,101％.建立的HPLC具有良好的精密度、重复性和稳定性.结论:该方法操作简便,精密度好,结果准确可靠.     

单煎和共煎对红花黄色素煎出量的影响

目的：探讨单煎和共煎条件对红花中红花黄色素（safflor yellow SY）含量的影响。方法：药材水提醇沉,紫外可见分光光度法波长为403nm处检测。结果：红花单煎的SY含量明显高于共煎法,红花与当归共煎后SY的含量明显小于与其他饮片共煎后的SY含量。结论：红花与当归、川芎、桃仁共煎会降低红花黄色素的煎出量。     

白虎加桂枝汤单煎与合煎提取物质量表征特性分析

为研究白虎加桂枝汤单煎和合煎提取模式中药学质量表征及药效质量表征的同异性,该实验以相同工艺参数分别制备白虎加桂枝汤单煎和合煎提取物,基于两者HPLC图谱、指标性成分的含量及其提取量比较分析其药学质量表征特性同异性,并基于两者在炎症模型和疼痛模型下的药效实验结果比较分析其药效质量表征特性同异性。研究发现两者HPLC图峰表征未见明显质的差异,但峰面积值表征反映出量的差异,主要表征特性为单煎提取物小于合煎提取物的色谱峰主要来源于知母和桂枝;而单煎提取物大于合煎提取物的色谱峰主要来源于炙甘草;指标性成分中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ的含量及其提取量为合煎提取物高于单煎提取物,甘草苷、甘草酸的含量及其提取量为合煎提取物低于单煎提取物,肉桂酸的含量及其提取量为合煎提取物与单煎提取物无明显差异。药效实验结果表明两者均在一定程度上显示了抗炎、镇痛作用;但合煎提取物显示了较快速的抗炎药效作用,较快且持续时间较长的镇痛作用。由此可知,白虎加桂枝汤方单煎与合煎具有相同的有效物质基础,且其合煎的模式有利于促进本方中知母和桂枝有效成分的溶出,继而可更有利于其相关疗效的发挥。     

丹参药材分级与相关指标含量关系的探讨

目的通过探讨不同外观等级的丹参药材和相关成分含量之间的一致性,为丹参饮片的分级管理提供依据。方法分别以丹参酮ⅡA和丹酚酸B为指标,用紫外分光光度法测定其脂溶性成分和酚酸性成分的含量,并进行方法学考察。结果通过研究发现不同外观丹参药材和相关成分含量之间有相关性,其中一级药材丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量均比特级药材含量高,丹参节药材丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量均较高,建议将丹参节入药。结论此方法简单,结果准确,可以用于指导研究丹参药材的分级管理。     

丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的不同提取方法的探讨

目的：研究丹参药材不同提取工艺的丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量高低。方法：采用HPLC法，比较了两种不同提取方法的丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量高低。结果：提取方法丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量明显高于药典方法。结论：该提取方法节省溶剂，重现性好。     

复方丹参注射液Ⅱ中丹酚酸B在大鼠体内的HPLC测定

目的:探讨复方丹参注射液Ⅱ的制备及其指标成分丹酚酸B在大鼠体内的含量测定方法。方法:通过羟丙基-β-环糊精包合增加降香挥发油溶解性;用HPLC法测定主成分丹酚酸B在大鼠体内的含量。结果:成功制备复方丹参注射液Ⅱ,建立注射液中指标成分丹酚酸B在大鼠体内的HPLC测定方法。结论:复方丹参注射液Ⅱ的制备工艺可行,指标成分丹酚酸B在大鼠体内的含量测定方法准确可靠。     

不同产地丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量比较

目的：测定和比较不同大规模栽培产地丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量。方法：采用高效液相色谱法,选用Synchropak PR100-5色谱柱,检测波长分别为270nm和286nm。结果：丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量均较高的是四川中江栽培品。山西芮城栽培品丹参酮ⅡA含量尽管最低,但丹酚酸B含量却最高。结论：丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量与产地关系较大,此研究结果可作为丹参药材采购及临床选用的参考依据。     

月安煎不同配伍对丹酚酸B提取率的影响

目的采用HPLC法测定月安煎不同配伍组方中丹酚酸B的量,比较月安煎不同配伍对丹参中丹酚酸B提取率的影响。方法色谱柱为Synergi Polar-RP 80A(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶59∶1),体积流量1.0 mL/min,检测波长286 nm,柱温30℃。利用均匀设计法设计月安煎中丹参的不同配伍组合,利用建立的HPLC法测定各组合中丹酚酸B的提取率,利用逐步回归法分析各配伍方药对丹酚酸B提取率的影响。结果丹酚酸B在0.72～5.76μg呈良好线性关系(r=0.999 8),平均回收率为95.66%,RSD为1.1%。丹参中丹酚酸B的提取率与香附、石菖蒲、丹参药量呈正比,与白术药量呈反比,而与菟丝子无关。结论复方月安煎中丹参与不同方药配伍对丹酚酸B的提取率具有一定影响,最佳配比值得深入研究。     

丹参、川芎、红花合煎剂对大鼠心肌缺血模型心肌细胞凋亡的影响

目的:观察冠心Ⅱ号核心组成药物丹参、川芎、红花合煎剂(丹川红)对大鼠心肌缺血模型心肌细胞凋亡的影响.方法:缺血前0.5 h给大鼠灌胃冠心Ⅱ号标准汤剂、丹川红或等容积生理盐水,采用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌缺血模型.3 h后收集大鼠心脏,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察大鼠心肌缺血区的心肌细胞凋亡情况或24 h后收集大鼠心脏,应用氯化三苯基四氮唑(TTC)组织化学染色法测量心肌梗死面积.结果:各给药组心肌梗死面积(Infarct Size)和心肌细胞凋亡指数(Apoptosis Index)显著低于模型对照组;其中,丹川红高剂量组与冠心Ⅱ号标准汤剂组、丹川红低剂量组相比,心梗面积和凋亡指数无统计学差异;丹川红低剂量组与冠心Ⅱ号标准汤剂组相比,结果有统计学差异.结论:由药物丹参、川芎、红花组成的丹川红合煎剂与原方冠心Ⅱ号疗效一致,都能通过抑制心肌细胞凋亡以减少心肌缺血损伤,起到保护心肌作用.     

丹参破壁饮片与传统饮片水溶性成分指纹图谱及丹酚酸B含量对比研究

目的建立10批丹参传统饮片、冷冻破壁饮片、普通破壁饮片的水溶性成分UPLC指纹图谱,同时测定水溶性指标成分丹酚酸B的含量,为丹参破壁饮片质量与安全性提供参考依据。方法采用UPLC法以Waters ACQUITY BEH C₁₈(2.1 mm×150 mm,1.7μm)为色谱柱,乙腈-0.02%的磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长270 nm;流速0.15 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;采用HPLC法按照2015版《中华人民共和国药典》测定丹酚酸B含量,并利用相似度评价软件与SPSS 22.0软件对指纹图谱与丹酚酸B含量进行分析。结果通过相似度软件分析冷冻破壁饮片、普通破壁饮片、传统饮片分别为12、13、14个共有峰,并通过对照品指认得到丹参素钠(3号峰)、原儿茶醛(4号峰)、咖啡酸(6号峰)、迷迭香酸(13号峰)、丹酚酸B(14号峰)等5种成分,丹酚酸B含量范围为2.354%~7.606%,利用SPSS 22.0的多个相关样本的非参数检验对10批3种粉碎方式指纹图谱与丹酚酸B含量分析得到3种粉碎方式的水溶性指纹图谱与丹酚酸B含量均无明显差异性。结论从定性与定量两个方面对丹参破壁前后水溶性化学成分进行研究,可为丹参破壁饮片的临床应用与开发提供依据。