汉防己甲素治疗的矽肺大鼠肺内酸溶性胶原的变化

本研究比较了正常大鼠、矽肺大鼠和汉防己甲素治疗矽肺大鼠肺内酸溶性胶原在含量、羧甲基纤维素柱层析和氨基酸组成等方面的差异。矽肺大鼠肺中总胶原和酸溶性胶原的含量都增高。在酸溶性胶原中出现了与α_1(Ⅰ)不同的α_1(Ⅰ)~b峰,它随肺纤维化的程度而增高。汉甲组的酸溶性胶原中含有大量被降解的胶原片段,包括α_1链的前体。对上述结果作了初步讨论,并试图解释汉甲抑制矽肺纤维化发生的原因。矽肺组织中胶原蛋白大量增加,但人们对其组成特点却了解甚少。不久前,久保等报道了矽肺组织中胶原蛋白的类型。我们对矽肺大鼠肺中胶原的组成也做了一些观察。本文报道对矽肺大鼠,经汉防己甲素(简称汉甲)治疗的矽肺大鼠和正常大鼠肺中酸溶性胶原的含量、类型、羧甲基纤维素柱层析行为及若干组份的氨基酸组成的研究结果。酸溶性胶原是组织中可为稀酸提取的胶原,其主要成份是Ⅰ型胶原[α_1(Ⅰ)]_2α_2,为两种α肽链组成的三链螺旋。期望此项工作能为阐明二氧化矽引起肺纤维化和汉甲抑制矽肺纤维化的机理提供线索。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对TGF-β1介导Smad通路调节在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

[目的]观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化肺组织中胶原含量、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3和Smad 7表达的调节,探讨AcSDKP拮抗矽肺纤维化的作用机制. [方法]选用非暴露式气管灌注法制作大鼠矽肺模型,并给予AcSDKP,采用羟脯氨酸测量法和Western-blot法定量分析肺组织中胶原蛋白的含量.Western-blot法检测肺组织内TGF-31、phospho-Smad2/3及Smad7蛋白的表达. [结果]AcSDKP治疗组胶原含量和Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达低于相对应的矽肺模型组.与相应的对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内TGF-β1、phospho-Smad2/3蛋白表达均增加,而Smad7蛋白表达减弱.与相应矽肺模型组相比,给予AcSDKP后,大鼠肺组织内TGF-β1、phospho-Smad2/3蛋白表达表达均明显降低.而Smad7蛋白表达增强. [结论]AcSDKP可能是通过对TGF-β1介导Smad通路调节而发挥抗矽肺纤维化的作用.     

AcSDKP经由PDGF介导的细胞外信号调节激酶1/2的调节通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周和8周组)、AcSDKP治疗组(抗纤维化治疗组和预防治疗组)。采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养。HE染色观察肺组织形态学变化,Western blot法检测肺组织、肺成纤维组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和ERK1/2及磷酸化-ERK1/2蛋白的表达以及肺组织PDGF及其受体蛋白的表达。与对照比较,矽肺大鼠肺内PDGF及其受体蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白以及磷酸化-ERK1/2蛋白表达均增强,而AcSDKP治疗组则见上述蛋白表达减弱;在培养的肺成纤维细胞,PDGF能够刺激其Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,同时上调磷酸化-ERK1/2蛋白的表达,而AcSDKP则显示出与PD98059(细胞外信号调节激酶通路特异性抑制剂)相同的作用,即能够抑制PDGF刺激成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达和上调磷酸化-ERK1/2蛋白表达...     

氮氧喹哌不同给药方法的实验性疗效比较

作者用灌胃和腹腔注射的给药方法,观察氮氧喹哌对大鼠实验性矽肺的治疗效果,发现两者均可降低肺重量和胶原蛋白、氨基多糖、肺组织磷脂、血磷脂的含量;矽结节纤维化轻微。肺Ⅱ型细胞增殖,均具有延缓矽肺发展的治疗效果。两者疗效无显著性差异,与磷酸喹哌纽的效果基本一致。     

汉丹肝乐预防肝纤维化的实验研究

采用注射ＣＣｌ４、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激，建立大鼠肝纤维化模型，观察汉丹肝乐对肝纤维化形成的影响。结果表明：汉丹肝乐可明显减轻大鼠肝纤维化程度，降低肝内胶原蛋白含量，增加尿ＨＹＰ排出，降低血清ＡＬＴ，降低血清及肝组织ＬＰＯ，升高红细胞ＳＯＤ。提示汉丹肝乐对肝纤维化形成有预防作用，其作用机制可能与促进胶原蛋白降解及抗脂质过氧化有关     

抗纤维化短肽对大鼠矽肺纤维化MCP-1、ED-1表达的影响

目的探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、ED-1表达的影响在拮抗矽肺纤维化形成过程中的作用。方法气管内灌尘法制作大鼠矽肺纤维化动物模型,实验大鼠随机分为6组,包括:对照1组,对照2组和矽肺模型1组,矽肺模型2组,矽肺抗纤维化治疗组,矽肺预防治疗组。采用HE染色对矽肺纤维化病变及其变化特点进行形态学观察;采用羟脯氨酸法对矽肺大鼠肺内胶原含量进行检测;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中MCP-1的表达与巨噬细胞(ED-1阳性)的数量。结果抗纤维化治疗组与矽肺模型1组与2组相比,矽结节面积下降到84.28%和67.93%,羟脯氨酸含量下降到70.89%和58.18%,MCP-1蛋白表达下降到82.3%和84.1%,MCP-1阳性细胞数下降到67.4%和72.5%,ED-1蛋白表达下降到78.7%和79.3%,ED-1阳性细胞数下降到54.4%和66.8%;预防治疗组与矽肺模型2组相比,矽结节面积下降到61.13%,羟脯氨酸含量下降到60.27%,MCP-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到85.2%和86.3%,ED-1蛋白表达和阳性细胞数分别下降到87.2%和74.9%。结论AcSDKP具有拮抗矽肺纤维化的作用,这可能与其抑制巨噬细胞在肺内的浸润、聚集,减轻了尘性肺泡炎的程度相关。     

阿斯匹林预防性治疗实验性矽肺疗效研究

目的　探讨阿斯匹林预防性给药对实验性矽肺的疗效。方法　观察组大鼠染尘 [5 0mg/ (ml·只 ) ]后每次 2 0mg/ml的阿斯匹林溶液 1ml灌胃 ,每周 3次 ,给药 4周后测BALF中细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞数、细胞内羟脯氨酸含量、血清铜蓝蛋白活性、全肺干重及胶原蛋白含量 ,取肺脏作组织切片 ,观察病理变化。结果　治疗组大鼠所有指标的测定值均显著低于染尘组。结论　阿斯匹林有抑制尘源性炎症和实验性矽肺的纤维化的作用。     

尘源性炎症反应与矽肺纤维化的关系

目的研究不同剂量石英粉尘所致的肺内炎症反应和纤维化病变间可能的联系。方法用不同剂量的石英粉尘染尘后,对１天组和４周组大鼠分别测定其支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的细胞总数和分类计数,４周组大鼠还测定了ＢＡＬＦ细胞中羟脯氨酸量（ＨＯＰ）、血清铜蓝蛋白含量（ＣＰ）和全肺胶原蛋白量,并观察肺组织的病理变化。结果随着染尘剂量增加,１天组大鼠的细胞总数和中性粒细胞数增多,４周组大鼠的细胞总数和各分类计数增多,ＨＯＰ、ＣＰ和全肺胶原蛋白量增加;４周组大鼠的炎症和纤维化各指标间有良好的相关性。结论石英所致的肺内炎症反应可能与矽肺纤维化发生发展有关。     

矽肺及汉防己甲素治疗的大鼠肺中Ⅰ型胶原的免疫荧光研究

本文采用间接免疫荧光技术研究了矽肺大鼠和汉防己甲素(简称汉甲素)治疗矽肺的大鼠肺中Ⅰ型胶原的变化。Ⅰ型胶原是肺间质的重要成分。在发生矽肺纤维化时,肺泡间隔中的Ⅰ型胶原含量明显地高于正常的肺泡间隔。在矽结节中,可见到发射绿色荧光的Ⅰ型胶原纤维束排列致密,表明Ⅰ型胶原参与了矽肺纤维化。用汉甲素治疗后,矽肺纤维化受到抑制,胶原纤维松解、断裂,互相缠绕,说明汉甲素可减低胶原纤维的聚合程度,并对胶原有一定的降解作用。汉甲素治疗的大鼠矽肺中存在大量大细胞,大细胞胞浆内可见发射绿色荧光的Ⅰ型胶原,可能为大细胞所吞噬从而加速胶原的分解。     

Ac-SDKP经由Epac信号抑制矽肺肌成纤维细胞分化的作用及机制

[目的]观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartly-lysyl-proline,AcSDKP)能否通过对环腺苷酸活化的交换蛋白(exchange protein activated by cAMP,Epac)信号的活化,抑制矽肺大鼠及促血管生成素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的肌成纤维细胞分化. [方法]构建矽肺大鼠模型,分为对照组(4、8周组),矽肺模型组(4、8周组),Ac-SDKP抗纤维化治疗组及Ac-SDKP预防治疗组;采用Ang Ⅱ诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5向肌成纤维细胞分化,并予以Ac-SDKP和Epac特异性活化剂8-Me-cAMP(8-pCPT-2'-O-Me-cAMP)预处理.HE及Masson染色观察肺组织病理形态.免疫组织(细胞)化学染色法观察α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth mucle actin,α-SMA)的定位,Western blot法检测Ⅰ型胶原、α-SMA和Epac蛋白的表达. [结果]在矽肺模型组中,出现明显矽结节,结节内可见α-SMA标记的肌成纤维细胞阳性表达;Western blot法检测矽肺组织中Ⅰ型胶原、α-SMA表达上调,而Epacl表达下调;给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗能够抑制该变化.给予Ang II诱导,可见MRC-5细胞胞浆内出现明显的α-SMA阳性显色;Westernblot法中可见α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达上调;而予以8-Me-cAMP或Ac-SDKP预处理,能够上调Epacl,抑制Ang II诱导的α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达的上调. [结论]Ac-SDKP能够通过对Epac信号的活化,在体内外抑制矽肺大鼠肌成纤维细胞分化和胶原沉积,从而发挥抗矽肺纤维化的作用.     

饮酒对男性精液质量的影响

[目的]探讨饮酒对男性精液质量的影响。[方法]应用伟力彩色精子质量分析系统对127例不育饮酒男性和112例正常生育不饮酒男性精液的精液量、液化时间、精子总数、精子密度、精子活力、精子活率等参数作对照组进行分析。[结果](1)不育饮酒组、与正常对照组比较,精子密度、精子活力、精子活率等参数显著降低(P﹤0.05~0.01),而精液量、液化时间和精子总数之间差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]饮酒对男性精液参数的影响存在量效和时效关系,饮酒可能对男性生育有不良影响。     

矽宁治疗实验性矽肺的剂量-效应关系研究

观察了不同剂量组的矽宁(2.5、5、10、20mg/kg)对大鼠实验性矽肺的疗效关系,疗程1个月。实验结果表明,各治疗组的全肺干重及胶原蛋白含量均明显低于矽肺对照组(P<0.01),表明该药具有明显抑制矽肺病变进展的作用。各治疗组随着矽宁给药剂量的增加,其全肺胶原蛋白含量相应降低,呈明显的负相关(r=-0.99)。矽宁经口半数致死量为1960mg/kg,经口半数有效量为2.4mg/kg,治疗指数为816。     

芪丹颗粒剂预防和延缓鼠矽肺纤维化的作用

目的 探讨芪丹颗粒剂预防性治疗矽肺纤维化的作用。方法 40只Wistar大鼠分为：正常对照组、模型组、芪丹组、汉甲组4个组。除正常对照组外,其余各组采用气管注射染尘（每只鼠50mg）方法建立动物模型,芪丹组和汉甲组分别从造模后第2天灌注芪丹颗粒剂（3125mg／kg）和汉防己甲素（22mr／kg）;5个月后处死,进行肺泡灌洗,取支气管肺泡灌洗液（ bronchoalveolar lavage fluid, BALF）、肺脏、肾脏标本。称取大鼠体重、鼠肺湿重,计算大鼠肺系数;用碱水解法测定羟脯氨酸含量;用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定肺泡灌洗液中转化生长因子β1（TGF-131）的表达;同时对肺组织作HE染色、VG染色和网状纤维染色（gomorri）,普通光镜下观察各组矽结节的细胞构成,胶原纤维及网状纤维改变;同时取肾组织作HE染色,普通光镜下观察肾脏病理改变。结果 芪丹组、汉甲组的肺系数、羟脯氨酸含量、BALF中TGF-131的表达均低于模型组,差异有统计学意义。模型组主要以Ⅲ～Ⅳ级矽结节为主,胶原纤维粗大、排列致密,网织纤维稀疏,芪丹颗粒及汉防己甲素预防治疗组主要以Ⅱ级矽结节为主,胶原纤维细小、排列疏松,网织纤维密集;汉甲组大鼠出现肾损伤,其余各组大鼠肾组织正常。结论 芪丹颗粒剂有预防和延缓矽肺纤维化的作用,安全无肾毒性。     

矽肺大鼠和病人肺组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维的分布及相对含量的研究

免疫酶标法用于观察肺组织中胶原的分布。显微分光光度法用于研究大鼠与矽肺病人的纤维化组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原的相对含量。染色中应用大鼠及人的抗Ⅰ型与Ⅲ型胶原多克隆抗体。Ⅰ型胶原分布于正常肺泡间隔及间质中。Ⅲ型胶原也在相同的部位存在。在由石英所致的大鼠纤维化肺组织中,Ⅰ型与Ⅲ型胶原在极度扩展的间质中聚集。Ⅲ型胶原是早期纤维化肺中主要增生的胶原。Ⅰ型胶原是纤维化后期主要增生的胶原。在矽肺病人肺组织中也见到同样的现象。染电焊烟尘的大鼠肺,直至180天以前,Ⅲ型胶原为主要积聚的胶原,而在180天以后,Ⅰ型胶原的增加才占优势。     

矽宁、汉防己甲素及磷酸羟基喹哌对实验性矽肺疗效的比较

对矽宁、汉防己甲素(汉甲)和磷酸羟基喹哌在等毒条件下进行了大鼠实验性矽肺的疗效研究,结果表明,治疗3个月后全肺湿、干重及肺胶原蛋白含量明显低于矽肺对照组,差别显著,但治疗组之间无明显差异;病理形态显示矽宁和汉甲组对矽肺纤维化有更明显的抑制作用,病灶间和肺泡腔内具有大量泡沫样细胞浸润。治疗组的肺巨噬细胞内均有细小的棕褐色颗粒。矽宁治疗组血清中SOD和铜蓝蛋白的含量明显低于其它治疗组。     

Observation of the effect of tetrandrine on experimental silicosis of rats

It was proved in this experiment that tetrandrine, one of the bisbenzylisoquinoline alkaloids, may inhibit the development of experimental silicosis on rats whether the drug was given to the animal right after dusting or after the formation of silicotic nodules. As compared to the silicotic control rats, lowering of total weight and collagen content of the lungs were shown and some degradation of collagen fibers was also indicated from the histopathological examination.     

经SiO2活化的硅肺患者肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞的增殖作用

[目的]探讨硅肺患者肺灌洗液中巨噬细胞(AM)经SiO2粉尘刺激,得到的AM培养上清对肺成纤维细胞(FB)增殖的作用。[方法]收集硅肺患者支气管肺泡灌洗液中的AM,进行SiO2再次染尘,取得培养上清,刺激肺成纤维细胞。应用MTT法检测FB的增殖情况,流式细胞仪法分析FB各期细胞分布比例(即细胞增殖情况)的改变。[结果]经SiO2刺激硅肺患者AM培养上清,可使FB增殖活性增强,细胞增殖指数(proliferous index,PI)明显增加。[结论]经SiO2活化的硅肺患者肺泡AM对肺成纤维细胞有促增殖作用。     

搪瓷喷花粉尘致肺纤维化的实验研究

目的：研究搪瓷喷花粉尘的致肺纤维化作用。方法：３组ＳＤ大鼠气管内分别注入搪瓷喷花（白下底料）粉尘、石英石粉尘和生理盐水,染尘后６０ｄ和１８０ｄ宰杀,称取肺鲜重,测定肺胶原含量,肺组织病理学改变。结果：熟料粉尘组大鼠的肺鲜重和肺胶原含量高于生理盐水组,但明显低于石英尘组。病理观察结果显示,熟料粉尘能在肺内形成异物结节及周围轻度纤维增生。结论：一定量的搪瓷喷花粉尘进入肺内不至引起进行性肺纤维化,而是引     

室内装修作业对工人精液质量的影响

[目的]探讨室内装修作业对工人精液质量的影响。[方法]对82名室内装修工人（装修组）和270名非装修人员（对照组）进行精液质量检测及统计分析。[结果]装修组与对照组在精液量、精子密度、活率、活动能力方面的差异均无统计学意义（P〉0．05）；两组精子畸形率差异有统计学意义（P〈0．01）。从事装修工作2～5年与6-10年两组的精液量、精子密度、精子活率差异均无统计学意义（P〉0．05）两组的精子活动能力和畸形率差异有统计学意义（P〈0．05）。[结论]从事室内装修作业的工人精液的精子畸形率较高，长时间从事室内装修工作还可造成精子活动能力下降。     

联合用药治疗实验性矽肺的研究

经动物实验及临床试用证实，克矽平、磷酸羟基哌喹、柠檬酸铝和汉防己甲素具有保护巨噬细胞、抑制矽性胶原化的作用。为探讨提高疗效、降低毒副反应，现提出不同或相同作用机制的药物联合用药治疗矽肺的设想。选用克矽平（气管注入）与汉防己甲素（口服）、柠檬酸铝（肌注）与磷酸羟基哌喹（口服）和汉防己甲素与磷酸羟基哌喹配合用药。联合用药组一种药物的剂量为各单独用药组的１／２，观察预防性治疗（３０～９０天）、病后治疗（９０～１８０天）及停药（９０天）后再治疗（９０天）对大鼠实验性矽肺的疗效。实验结果表明：在选用剂量条件下，各联合用药组，无论是预防性治疗还是病后治疗均表现出药效的相加作用——其疗效相当于或优于各相应单独用药组。停药后各组病变有不同程度的进展，联合用药组进展较缓；再给药后联合用药各组对病变恶化的控制作用优于相应的单独用药组。联合用药治疗矽肺的方案值得进一步讨论并推广应用