低毒性的抗癌剂9位取代的喜树碱

自然界存在着具有强的抗癌活性的9-甲氧基喜树碱,但因含量很低未作深入研究。本专利以喜树碱为起始原料经硝化、还原、酰化或烷基化得到9位酰氨基或9位烷基胺基取代的喜树碱衍生物。经重氮化反应使氨基转化为重氮盐再与甲醇反应便得9位甲氧基喜树碱。将喜树碱溶于浓硫酸中,在冷却搅拌下,于室温慢慢滴加数倍量的浓硝酸,室温反应24至72h,将反应液倒入水中,以氯仿提取,氯仿层用无水硫酸镁干燥后移去溶剂,残渣经硅胶柱层析纯化得到收率为30％～40％     

HPLC法测定人血浆中9-硝基喜树碱内酯型浓度和总浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中9-硝基喜树碱内酯型浓度和总浓度的方法。方法:血浆样品采用—20℃甲醇快速沉淀蛋白后进行测定,其中色谱柱为shim-packCLS-ODS,流动相为甲醇∶1%三乙胺(冰醋酸调pH6.5)=55∶45,流速为1.0mL·min-1,检测波长370nm,进样量为50μL,柱温为40℃。测定总浓度的样品采用冰醋酸酸化上清液。并以该法测定了不同时间点离体人血浆中9-硝基喜树碱内酯型、羧酸盐型浓度和总浓度的变化。结果:9-硝基喜树碱血药浓度在0.10～10.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),定量下限为0.10μg·mL-1,平均方法回收率、酸化回收率各为101.02%、101.46%。结论:本法操作简便、快速,适用于9-硝基喜树碱内酯结构稳定性的研究。     

7-乙基-10-羟基喜树碱的合成

用喜树碱乙基化制得的7-乙基喜树碱在冰乙酸中用双氧水氧化成N-氧化物,再经光照重排制得7-乙基-10-羟基喜树碱,并优化了反应条件,总收率49%.     

喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的HPLC分析

目的:建立测定喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的反相高效液相色谱法,并用该方法测定9个产地喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量。方法:以Hypersil ODS(250 mm×4.0 mm,5.0 μm)为色谱柱;流动相A为水,B为甲醇;梯度洗脱:在0 min到40 min内流动相由A—B(60:40)到A—B(30:70);流速为1.0 mL·min~(-1);检测波长为254 nm;柱温为25℃。结果:喜树碱在0.10—1.00μg范围内线性关系良好,其低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.66%,100.3%,99.97%;RSD分别为0.57%,0.25%,0.43%。10-羟基喜树碱在0.30-4.00μg范围内线性关系良好,其低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.87%,99.98%,100.4%;RSD分别为0.32%,0.19%,0.34%。结论:该方法是一种灵敏、准确的分析法。     

基于液-质联用法研究10-羟喜树碱在大鼠体内的药动学行为

目的：建立测定大鼠血浆中10-羟喜树碱浓度的液相色谱-串联质谱（LC/MS-MS）分析方法，并用于10-羟喜树碱注射液经时血药浓度的验证评价。方法：血浆样品经乙酸乙酯（含0.2%冰醋酸）提取处理，以0.1%甲酸-乙腈与0.1%甲酸-水溶液为流动相，梯度洗脱。采用电喷雾离子源（ESI）在正离子条件下，通过多反应监测模式（MRM）进行检测。结果：10-羟喜树碱的血浆浓度在7.812 5~1 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好，日内与日间精密度的RSD均小于5%，提取回收率为91.73%~106.22%。结论：该方法快速且操作简单，适用于10-羟喜树碱及其一些制剂给药后的基础和临床药动学分析评价。     

喜树碱/聚天冬氨酸衍生物-接枝-聚乙二醇共聚物胶束的制备及性质研究

目的制备喜树碱/聚天冬氨酸衍生物-接枝-聚乙二醇的聚合物胶束,并对其化学结构进行表征。方法采用透析法制备喜树碱/聚合物胶束,采用动态激光散射法、透射电镜和核磁共振法测定胶束的粒径、形态及药物分布,采用高效液相色谱法测定喜树碱含量。结果喜树碱/聚合物胶束近似球形,粒径小于50nm,分布较窄,喜树碱被包裹在胶束内,在pH7.4的缓冲液中孵育12h,溶液组喜树碱70%被破坏,而被胶束组喜树碱仅有20%被破坏;在小鼠血浆中孵育12h,溶液组喜树碱90%多被破坏,而胶束组喜树碱约23%被破坏,喜树碱/聚合物胶束在pH7.4的介质中释药接近Higuchi模型。结论聚天冬氨酸衍生物-接枝-聚乙二醇聚合物胶束对喜树碱具有保护作用。     

高效液相色谱法测定人血浆中9-硝基喜树碱的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法检测人血浆中9-硝基喜树碱的浓度。方法:采用KromasilC18色谱分析柱,以甲醇-磷酸盐缓冲液(48∶52,pH2.5)作为流动相,流速为1.0mL·min-1,柱温30℃,检测波长370nm,喜树碱为内标,血浆样品用C18固相萃取小柱处理,采用加权最小二乘法计算回归方程。结果:9-硝基喜树碱的线性范围为5~1000μg·L-1,r=0.9999,最低检测限为5μg·L-1。该方法的提取回收率为83.5%~114.4%,批间和批内RSD<15%。结论:该方法简便、准确、重现性好且灵敏度高,适用于9-硝基喜树碱临床人体药动学研究。     

薄层扫描法测定不同产地喜树果中的喜树碱

目的 采用薄层扫描法测定喜树果中的喜树碱,评价不同产地喜树果药材的质量.方法 采用羧甲基纤维素钠作为黏合剂;展开剂为氯仿-丙酮(7∶3);单波长线性扫描法测定,λ<,s>=360 nm.结果 喜树碱0.0542～0.3252 μg与峰面积线的性关系良好,回归方程为:Y=97.19X-55.07(r=0.9928),平均回收率为97.13%,RSD=1.76%(n=6).结论 所建方法 准确可靠,不同产地喜树果药材中喜树碱含量有一定差异.     

HPLC同时测定羟喜树碱注射液的有关物质及含量

目的建立以高效液相色谱法同时测定羟喜树碱注射液的有关物质和含量的方法。方法采用Ultimate XB-C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（60∶40）,检测波长为370 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温35℃。结果有关物质：羟喜树碱与杂质分离度良好,羟喜树碱和其主要杂质喜树碱的线性范围均在0.2～1.0μg.mL-1之间,相关系数均在0.999 7以上,最低检测限分别为0.2 ng和0.3 ng。含量测定：羟喜树碱在4.0～36.3μg.mL-1内线性相关系数为1.000 0,根据3个不同生产厂家的处方工艺分别进行低、中、高3种浓度的回收率试验,结果均在100.0%～102.0%之间,RSD均在0.02%～0.71%之间（n=3）。结论本方法专属性强、准确性高,可全面系统地控制羟喜树碱注射液的质量。     

β-环糊精聚乙二醇羟基喜树碱高聚物的合成及其载药量研究

目的合成β-环糊精聚乙二醇羟基喜树碱高聚物(β-CD-PEG-HCPT)并研究其载药量。方法以β-环糊精和4-4′联苯二磺酰氯为起始原料,通过酰化反应、碘代反应、取代反应、酰化反应得到聚乙二醇-β-环糊精(β-CD-PEG)。采用羟基喜树碱(HCPT)为起始原料,利用乙酰基对10位羟基进行保护,再利用二氯甲烷/甲醇/乙酰氯这种温和的系统脱去乙酰基,得到乙酰羟基喜树碱甘氨酸酯(Ac-HCPT-Gly)。β-CD-PEG和Ac-HCPT-Gly反应得到目标产物β-CD-PEG-HCPT。结果合成了目标产物β-CD-PEG-HCPT,其结构通过1H-NMR确证。HCPT的载药量是4.3%。结论改进了β-CD-PEG-HCPT的合成工艺,操作简单、成本低、收率较高。     

20(S)-7-烷(芳)酰基喜树碱的合成

20(S)-喜树碱(2)在过硫酸铵和硫酸亚铁作用下,以75%硫酸为溶剂,分别与戊醛和糠醛进行Minisci反应,制得20(S)-7-戊酰基喜树碱(1a)和20(S)-7-(2-糠酰基)喜树碱(1b),收率分别为81.3%和56.0%.对1a、1b和2用SRB法进行了人白血病(HL-60)、人胃癌细胞(BGC-823)、人肝癌细胞(Bel-7402)和人鼻咽癌细胞(KB)的体外抗肿瘤活性试验.结果显示,1a、1b对HL-60、BGC-823的抑制作用较2强;对Bel-7402和KB的抑制作用较2弱.     

高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的建立高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法学。方法色谱柱为D iscovery C18(15cm×4.6mm,5μm),流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nm o.lL-1-磷酸二氢钾(70∶23∶7),75nm o.lL-1磷酸二氢钾中含1%三乙胺。流速为1.0m.lm in-1,柱温为40℃,荧光检测波长为λex363nm和λem 530nm。结果该方法的线性范围为13.7656~1957.4468ng.mL-1(r=0.9993)。提取回收率和方法回收率分别为80.90%~103.59%,102.72%~108.16%.日内RSD 7.49%,日间RSD 9.40%。最低检测限为5.2ng.mL-1。结论该方法专属性强,重现性好,操作简便,适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。     

顶空气相色谱法测定可博利-2号口服液中氯仿残留量

目的测定可博利2号口服液中有机溶剂氯仿残留量。方法采用顶空气相色谱法,电子捕获检测器(ECD):以GDX103(80～100目,2m玻柱)为固定相;柱温180℃;气化室温度250℃;检测器温度250℃;载气氮气。结果氯仿线性方程的相关系数r为0.9984,平均回收率为98.6%,RSD为0.66%(n=6);5批样品中氯仿残留量均符合规定。结论经方法学试验验证,该方法灵敏、准确,适用于可博利2号口服液中氯仿残留量的测定。     

羟基喜树碱联合方案化疗晚期胃癌

目的　观察羟基喜树碱、顺铂、四氢叶酸钙和 5 -氟尿嘧啶联合化疗对晚期胃癌的近期疗效与毒性反应。方法　 4 1例晚期胃癌患者均采用以羟基喜树碱为主化疗方案治疗 3周期 ,评价疗效和毒性。结果　 4 1例患者总有效率为 4 6 34% ,初治患者为 6 6 6 7% ,复治患者为 34 6 2 % ,二者在统计学上差别有显著性 (P <0 0 5 ) ;主要毒性反应为Ⅰ～Ⅱ度骨髓抑制和胃肠道反应。结论　羟基喜树碱为主联合化疗方案对晚期胃癌疗效好 ,毒性低 ,是一种有效的化疗方案     

羟基喜树碱磷脂复合物的溶解性考察与表征

目的:制备羟基喜树碱磷脂复合物,进行溶解度考察和表征,推测其形成机理并为下一步的制剂制备提供参考。方法:以四氢呋喃为复合溶剂制备羟基喜树碱磷脂复合物,考察磷脂复合物在正辛醇与氯仿2种溶剂中的溶解性能,并采用紫外(UV)、红外(IR)与差示扫描量热法(DSC)对复合物进行表征。结果:羟基喜树碱磷脂复合物在氯仿中的溶解度显著提高但不稳定。紫外、红外图谱与DSC结果验证了复合物的形成。结论:羟基喜树碱可能与磷脂的极性端复合形成复合物,药物的脂溶性与溶出速率得以提高。     

HPLC-FLD测定大鼠血浆中的10-羟基喜树碱方法学研究

目的 建立一种简单、准确的测定大鼠血浆中10-羟基喜树碱含量的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD).方法 用1%冰醋酸-甲醇溶液处理血浆样品,采用高效液相色谱-荧光检测器,以喜树碱为内标.色谱柱:Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:以5%乙腈为流动相A,乙腈为流动相B,流速为1.2 mL·min-1,荧光检测器激发波长和发射波长分别为Ex=380 nm,Em=515 nm.采用室温梯度洗脱,进样体积为50μL.结果 本试验采用两条分段函数,大鼠血浆中10-羟基喜树碱在1.25~20 ng·mL-1及20~320 ng·mL-1范围内线性良好,线回归系数分别为0.9998和0.9995.方法 准确度为98.9%~103.8%,10-羟基喜树碱高、中、低3个浓度的提取回收率均大于80%.日内精密度RSD<4.2%,日间精密度RSD<4.8%.结论 该方法 操作简便,灵敏度高,精密度和准确度好,适用于大鼠血浆中10-羟基喜树碱含量的测定.     

膀胱灌注10-羟基喜树碱的尿样分析

目的:采用高效液相色谱法分析膀胱灌注10-羟基喜树碱2h和4h的尿药浓度变化情况,为临床提供客观数据.方法:采用CLC-ODS色谱柱,甲醇-水(1:1)为流动相.流速为1.0ml/min,检测波长为265nm,外标法进样20μl.结果:以峰面积计算,10-羟基喜树碱尿样在0.7875～126μg/ml范围内呈良好线性(γ=0.9997),回收率96.58%,RSD=3.79%.结论:膀胱灌注4h后仍有75%～90%的羟基喜树碱较长时间作用于肿瘤细胞,膀胱灌注法可以维持较好的药效.     

4''''-溴甲基-2-联苯甲酸叔丁酯的合成

4'-溴甲基-2-联苯甲酸叔丁酯(1)是降压药替米沙坦(telmisartan)的合成中间体。本研究参考文献[1～3],用4'-甲基-2-氰基联苯(2)经水解、酯化、溴代制得1(图1),并进行了改进。2在乙醇-水(5∶1)中于80℃反应16h,得粗品纯度99%,可直接用于下步反应。酯化时,文献[1,2]用浓硫酸催化或直接通入异丁烯制取,用HPLC跟踪反应进程,经试验结果不理想。现改在0℃用叔丁醇加DCC酯化,收率90%(文献[2]:86.1%)。溴化时用氯仿代替四氯化碳[3]作溶剂。改进后的1总收率61%。实验部分4'-甲基-2-联苯甲酸(3)500ml三颈瓶中加入2(44.4g,0.23mol)、乙醇-水(5∶1,120…     

RP-HPLC法测定小鼠血浆中10-羟基喜树碱的浓度

目的:建立测定小鼠血浆中10-羟基喜树碱浓度的方法。方法:33只小鼠灌胃给予10-羟基喜树碱80mg·kg-1,于给药前及给药后0.17、0.33、0.67、1、1.5、2、4、8、12、24h时心脏取血,采用高效液相色谱法,测定其中血药浓度。色谱柱为Luna C18,流动相为水-甲醇,梯度洗脱,流速为1.2mL·min-1,内标为喜树碱,荧光检测器检测,激发波长为383nm,发射波长为553nm。结果:内源性杂质不干扰测定,10-羟基喜树碱检测浓度线性范围为1.25～80ng·mL-1(r=0.9997),平均方法回收率为96.46%～101.87%,平均萃取回收率为82.4%～109.6%,日内、日间RSD均≤5.00%。结论:该方法简便可靠、专属性好、精密度高,可用于10-羟基喜树碱的血药浓度检测。     

RP-HPLC法检查羟喜树碱的有关物质

目的:采用RP-HPLC法检查羟喜树碱的有关物质。方法:采用Diamonsil C_(18)(200mm×4.0mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇—水(40:60);检测波长分别为:254nm、266nm、373nm(喜树碱和羟喜树碱的最大吸收波长和两者等吸收系数点波长);柱温:40℃;流速:0.8ml/min。结果:254nm波长处:喜树碱在0.536μg/ml～5.36μg/ml浓度范围內呈良好的线性关系,回归方程Y=5695.7C+56.3,相关系数r=0.9995,最低检测浓度:0.268μg/ml最低检测量,5.36ng。结论:方法简便,快速,准确。可定量测定羟喜树碱中的主要杂质喜树碱。