细胞内高钙对小鼠小脑浦肯野细胞动作电位编码的影响

目的：通过向细胞内微量注射IP3受体激动剂诱发细胞内高钙,探讨细胞内高钙对小鼠小脑浦肯野细胞内在电生理特性变化的影响。方法：取小鼠小脑蚓部做矢状切片（400μm）。采用Axoclamp-2B放大器全细胞记录模式,记录细胞内Ca2＋浓度升高前后浦肯野细胞动作电位的阈电位和绝对不应期 电信号输入pClamp9.2软件获取和分析群集发放的动作电位峰间距和动作电位峰时程标准差,进行数据采集和分析,观察细胞内Ca2＋浓度升高早期浦肯野细胞内在电生理特性的变化。结果：细胞内Ca2＋浓度升高后的短时间内,与高钙前相比,小脑浦肯野细胞群集发放动作电位的不应期缩短和激发动作电位的阈电位降低（P〈0.001）。结论：细胞内高钙改变动作电位的不应期和阈电位,使浦肯野细胞兴奋增加,动作电位的编码能力降低。     

针刺预处理对脑缺血大鼠小脑浦肯野细胞动作电位的影响

目的探讨针刺预处理特定穴位对脑缺血早期大鼠小脑浦肯野细胞动作电位发放的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分 为单纯脑缺血组（包括正常对照组和脑缺血组）和针刺预处理脑缺血组（包括针刺预处理脑缺血前和脑缺血后组）,每组20只。 采用减慢脑片灌流速度模拟在体缺血性脑中风的脑缺血模型,针刺预处理组针刺部位选择百会穴和双侧足三里穴,每日2次,间 歇5 min捻转1次,留针30 min,连续针刺7 d。应用全细胞膜片钳记录方法,观察各组大鼠小脑浦肯野细胞缺血早期动作电位发 放的变化。结果与正常对照组比较,单纯脑缺血早期浦肯野细胞动作电位发放表现为峰间距缩短、编码精确性降低和阈电位 降低（P<0.01）,即浦肯野细胞过度兴奋,而针刺预处理能够减轻脑缺血早期浦肯野细胞动作电位峰间距缩短、编码精确性降低 和阈电位降低的程度。结论针刺预处理特定穴位能够改善小脑浦肯野细胞的兴奋性损伤,稳定脑缺血后浦肯野细胞动作电位 的发放,对缺血性脑中风起到一定的保护作用。     

金雀异黄酮对大鼠小脑浦肯野细胞缺血后动作电位编码的影响

目的:观察金雀异黄酮(genistein,GEN)对大鼠小脑浦肯野细胞缺血后动作电位编码的影响。方法:采用微电极技术和全细胞膜片钳方法,观察大鼠小脑浦肯野细胞在200μmol/L GEN培养10 min后缺血时动作电位编码的变化。结果:缺血诱导大鼠小脑浦肯野细胞序列发放的动作电位峰间距缩短,动作电位峰时程标准差增大,细胞过度兴奋,动作电位编码的精确性降低。GEN能抑制脑缺血后序列发放的动作电位峰间距缩短及动作电位峰时程标准差显著增大。结论:GEN能预防小脑浦肯野细胞的过度兴奋,稳定缺血后细胞动作电位的编码能力。     

酸中毒对小鼠大脑皮层GABA能神经元电生理特性的影响

目的 探讨胞外酸中毒对小鼠大脑皮层γ-氨基丁酸（GABA）能神经元动作电位发放和突触传递功能的影响。方法 选择出生后27～30 d的小鼠20只,做大脑冠状切片,随后分为正常对照组和细胞外酸中毒组:大脑冠状切片灌流pH值为7.4的人工脑脊液,采用膜片钳全细胞电流钳模式记录动作电位阈电位、绝对不应期和动作电位峰间距,电压钳模式记录自发性兴奋性突触后电流,为正常对照组;随后将灌流人工脑脊液的pH值调为6.5,模拟胞外酸中毒,为细胞外酸中毒组。再次记录神经元动作电位和自发性兴奋性突触后电流,比较两组间以上各项指标的差异。结果 与正常对照组对比,胞外酸中毒使GABA能神经元动作电位峰间距和绝对不应期延长（P<0.01）,阈电位升高（P<0.01）,自发性兴奋性突触后电流幅度和频率增加（P<0.01）。结论 胞外酸中毒损伤大脑皮层GABA能神经元动作电位的发放和突触传递,这可能是酸中毒诱导脑功能损伤的机制之一。     

附子汤对蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

目的:观察附子汤对蟾蜍离体坐骨神经动作电位阈刺激、不应期及传导速度的影响,研究其对坐骨神经电生理特性的作用。方法:将制备的蟾蜍坐骨神经干分为阈刺激、不应期、传导速度3组,引导神经干动作电位,分别测其正常时与加药后的阈刺激、不应期、传导速度的变化。结果:附子汤能够提高蟾蜍离体坐骨神经阈刺激,延长不应期,与对照组比有显著性差异(P<0.05,P<0.01);可减慢传导速度,但无显著性差异。结论:附子汤对蟾蜍坐骨神经动作电位的抑制作用与提高阈刺激、延长不应期相关。     

左心室条束的电生理特性

实验应用玻璃微电极细胞内记录方法。研究了左心室条束的电生理特性。在左心室条束可记录到心室肌细胞、浦肯野纤维和移行细胞的跨膜静息电位和动作电位。暗红色条束与乳白色条束的电生理特性不同,其差异有显著性。乳白色条束难以探测到细胞的生物电活动。左心室条束纵轴上的细胞跨膜动作电位时程不等.自条束近侧端向远侧端逐渐延长。同时讨论了左心室条束电生理特性的临床意义。     

杭白菊乙酸乙酯提取物对大鼠实验性心律失常的影响及其机制

目的:研究杭白菊乙酸乙酯提取物(CME)对大鼠实验性心律失常、心肌易损性与动作电位的影响及其机制.方法:采用乌头碱诱发的整体大鼠心律失常模型研究CME对大鼠实验性心律失常的影响.采用Langendorff离体心脏灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30 min后复灌复制局部缺血/复灌模型,测定心肌缺血复灌前后的心室电生理学参数:舒张期兴奋阈(DET)、有效不应期(ERP)、室颤阈(VFT).采用常规微电极技术记录大鼠右心室乳头肌动作电位,观测静息电位(RP)、动作电位幅度(APA)、有效不应期(ERP)、动作电位的时程(APD90)、动作电位0期最大除极速率(Vmax).结果:与对照组相比,CME明显降低室性心动过速发生次数,缩短其持续时间,延迟室性早搏、室性心动过速出现时间,心律失常评分显著降低.与对照组相比,CME明显延长离体大鼠心脏的ERP,并对缺血/复灌所致的ERP缩短和VFT降低有明显的减弱作用.与对照组相比,CME明显延长大鼠右室乳头肌动作电位APD50和APD90,降低动作电位Vmax,对动作电位的其他参数影响不显著.结论:CME具有降低大鼠心室易颤性、抗心律失常的作用,其机制可能涉及延长心肌动作电位时程及有效不应期,提高大鼠心脏电生理稳定性.     

缺血性心室浦肯野纤维跨膜电位和起搏离子流的影响

采用细胞内微电极和双微电极及电压箝制术观察缺血对绵羊心室浦肯野纤维跨膜电位和起搏离子流的影响。结果；模拟缺血灌流３０ｍｉｎ，浦肯野纤维最大舒张电位动作电位幅度明显减少，动作电位时程ＡＰＤ５０ＡＰＤ９０明显缩短；起搏离子流幅度降低，激活曲线向超极化方向移位，最大激活时间及半最大激活时间延长。     

杭白菊乙酸乙酯提取物对大鼠实验性心律失常的影响及其机制

目的：研究杭白菊乙酸乙酯提取物（CME）对大鼠实验性心律失常、心肌易损性与动作电位的影响及其机制。方法：采用乌头碱诱发的整体大鼠心律失常模型研究cME对大鼠实验性心律失常的影响。采用Langendorff离体心脏灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30min后复灌复制局部缺血／复灌模型,测定心肌缺血复灌前后的心室电生理学参数：舒张期兴奋阈（DET）、有效不应期（ERP）、室颤阈（VFT）。采用常规微电极技术记录大鼠右心室乳头肌动作电位,观测静息电位（RP）、动作电位幅度（APA）、有效不应期（ERP）、动作电位的时程（APD90）、动作电位0期最大除极速率（Vmax）。结果：与对照组相比,CME明显降低室性心动过速发生次数,缩短其持续时间,延迟室性早搏、室性心动过速出现时间,心律失常评分显著降低。与对照组相比,CME明显延长离体大鼠心脏的ERP,并对缺血／复灌所致的ERP缩短和VFT降低有明显的减弱作用。与对照组相比,CME明显延长大鼠右室乳头肌动作电位APD50和APD90,降低动作电位Vmax,对动作电位的其他参数影响不显著。结论：CME具有降低大鼠心室易颤性、抗心律失常的作用,其机制可能涉及延长心肌动作电位时程及有效不应期,提高大鼠心脏电生理稳定性。     

山莨菪碱对两种烟碱型受体阻断作用的的实验研究

目的 探讨山茛苦碱对两种烟碱型受体阻断作用的差异。方法 采用生物电的细胞内记录和肌肉收缩曲线记录技术，分别观察Ａｎｉ对离体蟾蜍交感神经节和坐骨神经一腓肠肌突触传递的影响。结果用浓度为０．１，０．３，１．０ｍｍｏｌ／Ｌ，Ａｎｉ－灌源１５－２０ｍｉｎ可使电刺激交感神经节前纤维诱发的顺行动作电位起始段上升速度减慢，超极化后电位增大，去极化电位减小１．０ｍｍｏｌ／Ｌ Ａｎｉ可使５７％的细胞顺行动作电位发放     

下丘脑冠状切片视上核神经元的电生理特性

目的了解下丘脑冠状切片视上核神经元的电生理特性。方法在下丘脑冠状切片（厚５００μｍ）对视上核神经元进行细胞内生物电记录。结果测得静息电位（－５８±７） ｍＶ（ｘ± ｓ, ｎ＝４４）,膜斜率电阻（１９５±８３）ＭΩ,时间常数（１０．８± ５．０）ｍｓ,膜电容（６０±２０）ｐＦ,动作电位幅度（６７± ９）ｍＶ,阈电位（－４２ ±８）ｍＶ,半幅时程（２．１±１．１）ｍｓ,超射（１１±５）ｍＶ。在记录的１１３个细胞中,３１．９％的细胞有自发锋电位发放,其中５．５％为持续型（紧张型）放电,７０．６％为时相型放电,其余为不规则放电。在时相型放电的细胞可观察到自发的慢去极化电位。长时程去极化时锋电位发放呈明显的适应现象。顺行电刺激可诱发兴奋性突触后电位,并具有刺激强度依赖性。结论提示视上核神经元作为神经内分泌细胞具有与其他神经元不同的电生理特性。     

大鼠皮质-纹状体-黑质脑片中等多棘神经元的电生理特性

目的 通过制备大鼠皮质-纹状体-黑质脑片,在可视条件下观察纹状体中等多棘神经元(MSN)的电活动,探讨其电生理特性.方法 选用出牛7～10 d的健康SD大鼠,制备皮质-纹状体-黑质旁矢状位脑片,通过红外微分干涉相差(IR-DIC)显微镜直视下定位纹状体MSN,并采用膜片钳放大器全细胞记录,电流钳模式下记录MSN的自发性电活动,采用步阶电流注入,观察膜电位变化.结果 成功记录的92个MSN表现为三种状态:14个细胞为持续的极化状态,无动作电位发放;61个细胞表现为持续的极化状态间隔短阵的去极化至阈电位水平伴发动作电位;17个细胞为持续的极化状态间隔突然出现的去极化状态.三种表现形式细胞的静息电位、阈电位均数差异无统计学意义(P>0.05).注入电流时,膜电位变化表现为一定程度的延迟,电位变化随注入电流增强有减少趋势.结论 旁矢状位脑片中的纹状体MSN保留了在体的电生理特性,为深入研究黑质-纹状体通路电信号的发生和传递在帕金森病发病机制中的作用奠定了基础.

Abstract：

Objective To establish the neocortex-striatum-substantia nigra brain slices of rats and observe the medium spiny neurons of striatum under a visible condition so as to explore their electrophysiological characteristics. Methods The brain slices containing the neocortex-striatum-substantia nigra were prepared from SD rats of postnatal 7 - 10 days. With infrared differential interference contrast (IR-DIC) microscope and patch clamp amplifier whole-cell recording technique, the medium spiny neurons were located in striatum and their spontaneous electrical activity was recorded in the current clamp mode. By infusing the step current, we observed the variation of membrane potentials. Results There were three types of conditions in the 92 medium spiny neurons successfully recorded. Among them, 14 were in persistent down state without action potential firing; 61 displayed persistnet down state accompanied with interval temporal depolarizing to the threshold potential with action potential firing; and the remaining 17 showed persistent down state with the interval emergent up state. There was no statistical significance in the difference of mean resting and threshold potentials in three neuronal types ( P > 0. 05 ). When the neurons     

家兔急性心肌不完全缺血时心肌不应期兴奋恢复离散度及室颤阈的变化

本实验采用以TP801微处理机为中心的“可编程刺激器”观察了急性不完全缺血心肌不应期、离散度及室颤阈的变化,探讨了室颤的机制。证实:1.不完全缺血心肌不应期呈现出多种变化,其中以不应期延长与缩短同时存在于缺血区为主,即使同一个点,不应期也可能出现延长与缩短交替出现的变化。2.心肌兴奋恢复离散度明显高于缺血前(p<0.01)。3.不完全缺血20分钟内左室室颤阈明显低于缺血前(P<0.01)。根据实验结果认为,急性心肌不完全缺血可能是发生室颤的一个重要原因。     

脑立体定位斜插法在小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞纤维投射研究中的应用

目的 探讨脑立体定位斜插法靶向注射小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶的可行性,并观察该方法对小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞纤维的神经投射。方法 利用脑立体定位直插法(进针方向与水平方向垂直)或斜插法(进针方向与水平方向的垂直线呈30°夹角)标记Pcp2-Cre小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶,对比两种手术方式对小鼠颈部上方肌肉组织的影响;选择梯度剂量(500、300、150 nL)的顺行示踪病毒,探索适宜的病毒注射剂量;通过斜插法在小鼠小脑蚓部第Ⅸ小叶注射重组酶依赖性顺行示踪病毒,观察该小叶浦肯野细胞的传出神经投射。结果 相较于脑立体定位直插法,斜插法中小鼠头部皮肤切口更小,且不易破坏小鼠颈部上方肌肉;在前囟后6.00 mm、中线旁开0.00 mm、深4.08 mm坐标处,采用斜插法能靶向定位到小脑蚓部第Ⅸ小叶;同时,150 nL低剂量的病毒可较好的标记小脑蚓部第Ⅸ小叶浦肯野细胞,且不发生泄漏;通过病毒顺行示踪,在小鼠小脑顶核中间部、前庭小脑核、前庭内侧核巨细胞部以及前庭下核均检测到来自第Ⅸ小叶浦肯野细胞的神经投射纤维。结论 脑立体定位斜插法能在一定程度上减轻手术对小鼠颈部上方肌肉的破坏,通过该方法注射顺行示踪病毒能精确靶向小脑蚓部第Ⅸ小叶,并观察到该小叶浦肯野细胞的传出神经投射。     

慢病毒介导siRNA干扰Sez6对小鼠小脑浦肯野细胞发育的影响

目的通过Sez6siRNA慢病毒感染小鼠小脑组织切片细胞,干扰Sez6基因表达后,观察浦肯野细胞生长发育变化。方法使用Sez6siRNA慢病毒感染体外培养的刚出生（P0）的小鼠小脑组织切片细胞后;免疫组化标识浦肯野细胞,观察细胞树突发育。结果Sez6基因表达下调明显,浦肯野细胞树突分支数量减少（P〈0．05）,发育延迟;浦肯野细胞胞体排列不整齐。结论Sez6的表达与浦肯野细胞树突发育相关,还可能跟浦肯野细胞迁移排列相关。     

Electrophysiological properties of neurons of guinea pig celiac ganglia

Summary The present study was carried out to investigate electrophysiological properties of neurons of guinea pig celiac ganglia in vitro. The mean value of resting membrane potential was-59.3 ±5.6 mV (n = 29). The mean values of membrane resistance, time constant and membrane capacity were 53.7±19.8mΩ, 18.4±8.5 ms, and 375.9±175.0 pF (n = 24) respectively. When depolarizing electrotonic potentials induced by application of depolarizing current pulses reached the threshold level, all of the neurons could be made to discharge action potentials. The mean values of amplitude, overshoot, duration of the spikes were 68.0±15.3 mV, 11.7 ±4.6mV, and 2.7±0.6ms (n = 29) respectively. 75% of the neurons tested (n = 29) produced tonic (slow adapting) firing in response to depolarizing current lasting 5 s. The remaining neurons (25%) produced phasic (fast adapting) firing. In addition, fast excitatory postsynaptic potentials or orihodromic action potentials were recorded from 80% of the neurons, antidromic action potentials were recorded from ihe remaining neurons during stimulation of the splanchnic nerves.