粒细胞集落刺激因子对心脏缺血—再灌注损伤大鼠心功能的影响

将32只Wistar大鼠在缺血—再灌注的复灌过程中分别灌入粒细胞集落刺激因子（G-CSF）0 ng/ml（I/R组）、10 ng/ml（G10组）、50 ng/ml（G50组）、300 ng/ml（G300组）,测定左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压上升最大速率（＋dp/dtmax）、左心室内压下降最大速率（-dp/dtmax）;用氯化三苯基四氮唑染色法检测心肌梗死面积。结果G10组的心功能指标（除LVEDP外）与I/R组相比无统计学差异（P〉0.05）;G50组LVSP高于I/R组,LVEDP低于I/R组（P〈0.05）;与I/R组相比,G300组LVSP、＋dp/dtmax和-dp/dtmax显著升高、LVEDP显著降低,G50组、G300组梗死面积百分比显著降低（P均〈0.01）。提示一定剂量的G-CSF可改善大鼠离体心脏的心功能,缩小心肌梗死面积。     

益气活血药对腹主动脉结扎术后早期心功能不全大鼠血流动力学的干预作用研究

目的研究丹参等活血药对心功能不全大鼠的血流动力学的干预作用。方法腹主动脉结扎造模术后的SD大鼠,随机分为假手术组(正常组)、模型组、中药组、西药组、中西医结合组。模型组和正常组给予生理盐水灌服。中药组给予活血药浸膏,西药组给予卡托普利,中西医结合组给予中药联合卡托普利片灌胃,治疗4周和8周后检测血流动力学。包括左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压上升下降最大速率(±dp/dtmax)、心率(HR)、外周平均动脉压(MBP)等。结果中药和卡托普利干预治疗4周后,中西医结合组LVSP、LVEDP明显低于模型组(P0.05或P0.01),而舒张末期最大下降速率(-dp/dt)明显高于模型组(P0.01)。中西医结合组治疗8周后LVEDP明显低于模型组((P0.01);而+dp/dtmax、-dp/dtmax明显高于模型组(P0.01)。结论丹参等活血药方与西药卡托普利的联合使用能显著改善心功能不全大鼠的血流动力学,从而对心脏具有一定的保护作用。     

心复康口服液对心力衰竭大鼠心肌肌酸、牛磺酸的影响

目的研究中药复方制剂心复康口服液对压力负荷型充血性心力衰竭大鼠心肌组织肌酸、牛磺酸水平的影响机制。方法将75只Wistar大鼠随机分为假手术组(SH)、腹主动脉缩窄模型组(CAA)、心复康口服液治疗组(XFK),每组25只。建立慢性压力负荷型心力衰竭大鼠模型,分别于药物干预6、12 w时检测各组大鼠心功能参数、心肌组织肌酸、牛磺酸的含量。结果①造模6、12 w后CAA组大鼠心功能明显降低,左室重量指数(LVMI)、左室舒张期末压(LVEDP)显著升高,左心室内压上升、下降的最大变化速率(±dp/dtmax)显著下降。XFK组大鼠心功能各项指标较模型组明显改善(P<0.01);与6 w比较,12 w时LVMI、LVEDP下降及+dp/dtmax升高显著(P<0.05,P<0.01),而-dp/dtmax则无显著性差异。②与SH组相比,造模后第6周,CAA组大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平显著降低(P<0.01);造模后12 w时,上述改变更加显著(P<0.01)。与CAA组相比,造模后6 w起,XFK组大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平不通程度升高(P<0.05,P<0.01);于12 w时,肌酸、牛磺酸水平则显著升高(P<0....     

辛伐他汀联合卡托普利治疗对糖尿病大鼠心功能和心肌纤维化的影响

目的了解辛伐他汀和卡托普利对糖尿病大鼠心功能和心肌纤维化的影响。方法糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病对照（DM）组、辛伐他汀（DM-S）组、卡托普利（DM-C）组、辛伐他汀＋卡托普利（DM-CS）组,分别给药4周后测量左室平均心室峰压（LVSP）、平均心室舒张末压（LVEDP）、平均左室内压最大上升（＋dp/dtmax）和下降速率（-dp/dtmax）等心功能参数。结果 DM-CS组LVSP、＋dp/dtmax、-dp/dtmax及其较正值较DM组明显增加（p〈0.05）,心肌间质纤维化受抑。结论辛伐他汀联合卡托普利可改善糖尿病大鼠心肌间质结构和心脏舒缩功能。     

乌司他丁对心肺复苏大鼠脑组织IL-1β、TNF-α水平及心功能的影响

目的探讨乌司他丁(UTI)对大鼠心肺复苏(CPR)后脑组织白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平以及心功能的影响。方法随机将30只SD大鼠分为空白对照组、CPR组以及UTI组各10只。应用窒息法建立大鼠心脏骤停模型,进行CPR,自主循环恢复(ROSC)后6 h,检测各组左室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)水平及左心室压力上升(+dp/dtmax)、下降最大速率(-dp/dtmax)。ROSC后24 h处死大鼠后取出心、脑组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织中IL-1β、TNF-α的含量,并采用投射电镜观察心肌细胞超微结构的变化。结果 ROSC后6 h CPR组、UTI组LVSP及±dp/dtmax明显降低(P<0.05),LVEDP明显升高(P<0.05)。与空白对照组相比,ROSC后6 h CPR组、UTI组LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax均显著下降(P<0.05),而LVEDP显著上升(P<0.05);与CPR组相比,ROSC后6 h UTI组LVSP上升,LVEDP下降(P<0.05)。CPR组、UTI组IL-1β、TNF-α含量均显著高于空白对照组(P<0.05),而UTI组IL-1β、TNF-α含量均显著低于CPR组(P<0.05)。结论 UTI可以抑制体内IL-1β和TNF-α的表达,同时减轻心肌组织的损伤,改善CPR后心功能。     

丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠模型心血管的影响

目的 观察丹酚酸与氨氯地平联合使用对高血压合并高脂血症大鼠模型的心血管效应.方法 取24只自发性高血压大鼠,高脂饲料饲喂2周后,造成高血压合并高脂血症大鼠模型,并根据血压、血脂、体重水平分成4组,即空白对照组、氨氯地平组、氨氯地平阿托伐他汀组和联合用药组,每组6只,连续给药4周,每周尾套法测血压,给药结束后测心脏血流动力学参数,取血浆测定BNP和NO、Ang-Ⅱ水平,并取心肌,测定组织中Ang-Ⅱ水平.结果 与空白对照组比较,各药物干预组均能显著降低血压、HR和LVEDP以及血浆和心肌组织中Ang-Ⅱ水平（P＜0.05,P＜0.01）,显著升高LVDP（P＜0.01）;同时,氨氯地平阿托伐他汀组和联合用药组均能明显升高LVSP和＋dp/dtmax（P＜0.05,P＜0.01）,降低血浆BNP水平（P＜0.05）,且联合用药组能明显升高-dp/dtmax和NO水平（P＜0.01）;另外,联合用药组的HR明显低于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组（P＜0.05,P＜0.01）,-dp/dtmax和NO水平均明显高于氨氯地平组（P＜0.05）.结论 丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠模型的心血管具有协同保护效应,其可能通过保护血管内皮功能,抑制RAAS系统激活实现.     

骨髓间充质干细胞移植治疗心力衰竭

目的 探讨骨髓间充质干细胞移植对阿霉素诱导的心力衰竭大鼠心功能的影响.方法 无菌条件下取8周龄F344大鼠的股骨和胫骨,获得骨髓间充质干细胞(MSCs),在体外纯化、扩增后 ,用5-溴-2'脱氧尿苷(BrdU)进行标记,然后注射到心力衰竭模型细胞移植组和对照组大鼠的心肌组织内,细胞移植后4周,采用生理记录仪测量3组大鼠的心功能 ,处死动物,心脏切片行免疫组化了解移植细胞在受体心脏的存活情况.结果 细胞移植后4周,细胞移植组大鼠死亡率为6.2%,明显低于假细胞移植组12.5%(P<0.01);在受体大鼠的心脏切片上有BrdU标记的移植细胞存活.心功能测定显示:与对照组相比,细胞移植组最大左室收缩末压(LVSP)、心率(HR)、左室内压最大(最小)变化速率(LV±dp/dtmax)均明显下降(P<0.01),而左室舒张末压(LVDP)明显升高(P<0.01);与对照组相比,细胞移植组大鼠的LVSP、HR、LV±dp/dtmax均有明显升高(P<0.01),而LVDP明显降低(P<0.01);与假移植组相比,细胞移植组大鼠的HR、 LV±dp/dtmax仍有明显下降(P<0.01),而LVDP明显升高(P<0.01).结论 MSCs移植可有效改善阿霉素诱导的扩张型心力衰竭大鼠的心功能,减少心力衰竭大鼠的死亡率.     

UrotensinⅡ对心力衰竭大鼠心功能的影响及其作用机制探讨

目的观察不同浓度UrotensinⅡ(UⅡ)对心力衰竭大鼠心功能的影响,及特异性的PKA抑制剂(KT5720)对UⅡ作用于心力衰竭大鼠心脏效应的影响。方法在Langendorff离体心脏灌注模型上,观察给予不同浓度的UⅡ后大鼠心功能的变化(UⅡ组);KT5720加UⅡ处理组,在灌流KT5720基础上给予UⅡ(>IC50),观察大鼠心功能指标的变化;KT5720对照组,给予KT5720后观察大鼠心功能的变化。结果UⅡ组给予不同浓度的UⅡ灌注后,大鼠心功能指标灌注压、LVEDP升高,其余指标呈明显下降趋势,KT5720加UⅡ处理组, dp/dtmax降低了3.27%,-dp/dtmax降低3.15%,与UⅡ组的±dp/dtmax抑制率组间比较,有统计学意义(P<0.01);KT5720对照组,给予KT5720后, dp/dtmax降低2.84%,-dp/dtmax降低2.96%,与KT5720加UⅡ处理组比较无统计学意义。结论UⅡ对大鼠心脏功能呈剂量依赖性抑制,KT5720可以阻断UⅡ对大鼠心脏的抑制作用,UⅡ对心功能的抑制作用可能是通过PKA途径起作用。     

潘生丁对冠脉不同程度狭窄的心脏功能影响

在21条开胸狗心上,用微米狭窄器造成冠状动脉左旋支不同程度的狭窄。分别静注潘生丁（0.56mg/kg）。用创伤性方法检测用药前后左心室收缩功能的改变。轻度狭窄给予潘生丁后,LVDP 降低,CBF、dp/dtmax 和-dp/dtmax 有升高趋势,表明心功能改善。临界狭窄给予潘生丁后,LVDP 升高,而 CBF、LVSP、dp/dtmax、-dp/dtmax 均明显下降,表明心功进一步恶化。本实验可部分解释临床冠心病人做潘生丁试验所表现的不同结果,并为临床合理使用潘生丁提供了新的依据。     

免疫球蛋白对心梗后心衰大鼠心功能及非梗死区胶原的影响

目的 研究免疫球蛋白对心肌梗死后心衰大鼠心功能的影响及非梗死区胶原的抑制作用.方法 将结扎左冠状动脉前降支并饲养6 w的24只存活雌性Wistar大鼠,分为假手术组、模型组及免疫球蛋白组,每组8只.连续腹腔注射给药4 w后测定大鼠血流动力学参数,Masson染色观察非梗死区心肌胶原的沉积.结果 免疫球蛋白能明显升高左心室内压最大上升和最大下降速率(+dp/dtmax及-dp/dtmax),能明显升高左心室收缩压(LVSP),降低左心室舒张末压(LVEDP)(P＜0.05或P<0.01),但对心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)无明显影响(P>0.05).Masson染色可见非梗死区心肌胶原沉积明显减轻.结论 免疫球蛋白对梗死后心衰大鼠非梗死区心肌间质胶原重构有显著的抑制作用,其作用机制与减轻胶原沉积有关.     

14-3-3蛋白在心肌细胞缺氧预处理中的表达及意义

目的:研究14-3-3蛋白在心肌细胞缺氧预处理中的表达及意义。方法:实验用SD新生大鼠(1～3d龄),雌雄不拘,无菌取出乳鼠心脏,经分离附着组织,胰蛋白酶消化,纯化制成心肌细胞。在培养的第4天随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧预处理(APC)组。各组分别进行以下指标观察:①心肌细胞搏动频率;②细胞存活率(MTT法);③培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;④透射电镜观察细胞超微结构;⑤Western Blotting法检测14-3-3蛋白的表达变化。RT-PCR法检测14-3-3蛋白η、σmRNA的表达变化。结果:A/R组和APC组的14-3-3蛋白表达均上调,分别是正常对照组的(3.61±0.37)倍和(5.52±0.49)倍,A/R组和APC组与正常对照组比较、A/R组与APC组比较,均P<0.01。A/R组、APC组心肌细胞14-3-3η亚型mRNA分别为正常对照组的(1.82±0.30)倍、(2.93±0.52)倍,差异均有统计学意义(P<0.01);APC组与A/R组比较,差异亦有统计学意义(P<0.01)。A/R组、APC组心肌细胞14-3-3σ亚型mRNA表达量分别为正常对照组的...     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3疫苗免疫保护性的观察

目的　研究日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白1433(rSj1433)作为血吸虫病疫苗分子的潜能,并探讨rSj1433、rSjGST两种重组蛋白作为疫苗的协同作用及结核杆菌低分子量耐热多肽(Mtb)激活的γδT细胞在抗血吸虫病中的作用。　方法　用SDSPAGE、电洗脱和透析的方法制备rSj1433和rSjGST抗原,将两种抗原(分别用福氏佐剂和Mtb为佐剂)分别免疫BALB/c小鼠后,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6wk后,剖杀小鼠计算各组的减虫率。　结果　各组的减虫率为rSj1433+福氏佐剂组32.20%,rSj1433+rSjGST+福氏佐剂组31.10%,rSj1433+Mtb佐剂组27.96%,rSj1433+rSjGST+Mtb佐剂组26.00%,rSjGST+Mtb佐剂组27.10%;各组的减卵率分别为(按以上组序)50.40%、53.30%、51.10%、58.60%和51.30%。　结论　rSj1433具有一定的抗血吸虫潜能,有可能成为抗日本血吸虫疫苗,但未见rSj1433和rSjGST的协同作用;Mtb激活扩增的γδT细胞在抗血吸虫免疫中的效果与福氏佐剂产生的免疫作用类似。     

肾上腺髓质素对低氧大鼠肺动脉压的调节作用

目的　探讨肾上腺髓质素 (ADM)对肺循环的影响及低氧大鼠肺组织和血浆ADM浓度的变化。方法　将 5 0只Wistar大鼠分为对照组 (10只 )和低氧组 (40只 ) ,低氧组大鼠采用常压低氧处理 3周建立大鼠肺动脉高压模型 ;以微导管法检测大鼠平均肺动脉压 (mPAP) ,采用图像分析技术测定大鼠肺小动脉壁增厚情况 ;以放射免疫法测定大鼠肺组织及血浆ADM浓度 ;另将 30只低氧组大鼠分为 3个小组 (每组 10只 ) ,分别给予剂量为 0 5nmol/kg、1 0nmol/kg和 2 0nmol/kg的ADM静脉注射 ,观察其对大鼠肺动脉压和股动脉压的作用。结果　低氧组大鼠mPAP(30± 4 )mmHg (1mmHg =0 133kPa) ,与对照组 [(16± 3)mmHg]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;图像分析表明 ,低氧大鼠存在明显的肺小动脉壁增厚 ;低氧组大鼠血浆ADM浓度 [(2 88± 2 4 )pg/ml]与对照组 [(16 8± 2 5 )pg/ml]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,低氧组大鼠肺组织匀浆ADM浓度 [(2 319± 2 38)pg/g]与对照组 [(115 3± 12 7)pg/g]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,两者均与大鼠mPAP呈正相关 (r分别 =0 5 6 7、0 6 12 ,P均 <0 0 1) ;低氧组大鼠经静脉注射ADM后 ,其肺动脉压出现显著降低 (P <0 0 1) ,维持时间为 5～ 15min ,同时其体动脉压亦有所下降 ,其效应呈     

ATP钾通道开放剂对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的作用

目的：研究ATP敏感性钾通道开放剂左旋克罗卡琳（levcromakalim)和克罗卡啉（cromakalim)对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道（KATP)和低氧性肺动脉高压的作用。方法：90只Wistar大鼠随机分为正常对照组（15只）和低氧组（75只）。应用膜片钳技术，在对称性高钾溶液中，将急性分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞的内面向外式膜片上，分离出ATP敏感性KATP电流。应用右心插管技术，测定给药前、后大鼠平均肺动脉压（mPAP)。结果：慢性低氧3周大鼠肺动脉平滑肌细胞KATP通道活性与正常组大鼠比较无明显变化。但钾通道开放剂levcromakalim和cromakalim可明显激活慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞KATP电流。给低氧大鼠静脉注射levcromakalim和cromakalim，可对其mPAP产生剂量依赖性的降压作用，而对平均体动脉压也有一定的降低作用。结论：虽然KATP可能没有直接参与大鼠慢性低氧性肺动脉高压的产生，但levcromakalim和cromakalim可通过激活KATP通道而拮抗低氧对其它钾通道的抑制作用，levcromakalim和cromakalim可降低慢性缺氧大鼠低氧性肺动脉高压。     

缺氧肺动脉高压大鼠肺组织中白细胞介素6和Janus激酶表达的变化

目的　研究缺氧肺动脉高压 (HPH)肺组织中白细胞介素 6(IL 6)及Janus激酶 (JAKs)表达的变化。方法　雄性Wistar大鼠 60只 ,随机分为缺氧 1周 (H1)、缺氧 2周 (H2 )、缺氧 3周 (H3)、缺氧4周 (H4)和常氧 (N)组 ,每组 12只。常压缺氧舱复制HPH大鼠模型。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测肺组织IL 6和JAKsmRNA的表达水平 ;免疫组化法检测肺组织JAKs蛋白的含量和细胞形态学变化。结果　 (1)H1、H2 和H3 组大鼠肺组织IL 6mRNA水平 (分别为 1 67± 0 0 9、2 2 6± 0 12、1 55± 0 11)显著高于N组 (1 2 0± 0 11,P均 <0 0 1) ;H1、H2 和H3 组大鼠肺组织JAK1mRNA水平 (分别为 2 11± 0 0 9、2 85± 0 12、2 3 6± 0 13 )显著高于N组 (1 62± 0 10 ,P均 <0 0 1) ;H1、H2 和H3 组大鼠JAK2mRNA水平 (分别为 1 41± 0 0 7、2 0 2± 0 13、1 3 6± 0 0 9)显著高于N组 (1 0 1± 0 0 9,P均 <0 0 1) ;H1、H2 和H3 组大鼠肺组织JAK3mRNA水平 (分别为 0 86± 0 11、1 45± 0 10、0 91± 0 13 )显著高于N组 (0 55± 0 0 8,P均 <0 0 1) ;H1、H2 组大鼠肺组织TYK2mRNA水平 (分别为 1.3 6± 0 .10 ,1.76± 0 .11)显著高于N组 (0 .57± 0 .0 7,P均 <0 .0 1) ;其中H2 组大鼠肺组织表达IL 6和J     

低氧性肺动脉高压形成中气体信号分子硫化氢对一氧化碳/血红素加氧酶途径的影响

目的研究新型气体信号分子硫化氢(H2S)在大鼠低氧性肺动脉高压形成中对一氧化碳(CO)/血红素加氧酶(HO1)体系的调节作用,以深入探讨H2S在大鼠低氧性肺动脉高压形成中的病理生理意义。方法将27只大鼠随机分为4组对照组(7只),低氧组(7只),低氧 硫氢化钠(NaHS)组(7只),低氧 炔丙基甘氨酸(PPG)组(6只)。低氧21d后分别测定肺动脉平均压、血浆H2S及CO含量,观察肺动脉平滑肌HO1蛋白及HO1mRNA表达。结果随着低氧性肺动脉高压的形成,血浆H2S的含量显著下降,低氧组[(196±22)μmol/L]与对照组[(294±26)μmol/L]比较差异有显著性(P<005);而CO含量、大、中、小各级肺动脉平滑肌HO1蛋白表达[对照组、低氧组分别为(0313±0020)μmol/L、(0348±0021)μmol/L,066±008、079±008,064±005、077±008,054±005、076±009]及其mRNA表达(对照组、低氧组分别为0573±0148、0813±0052,0532±0131、0831±0043,0473±0102、0819±0032)显著升高(P均<005);外源性给予H2S的供体后,低氧 NaHS组血浆H2S含量[(324±33)μmol/L]显著高于低氧组[(196±22)μmol/L,P<005],肺动脉压显著下降(P<005),且血浆CO含量[(0393±0032)μmol/L]、大、中、小各级肺动脉平滑肌HO1蛋白表达(088±004、089±005、089±006)及mRNA表达(0913±0022、0     

一氧化碳体系对慢性肺心病大鼠肺血管结构重建的抑制作用

目的　研究内源性一氧化碳体系对慢性肺心病肺血管结构重建的调控作用。方法　将36只SD大鼠随机分为正常对照组 (A组 )、4周低O2 高CO2 组 (B组 ) ,4周低O2 高CO+ 2 血晶素组 (C组 ) ,每组 12只。测定各组大鼠肺动脉平均压 (mPAP)、右心室 / (左心室 +室间隔 )重量比 [RV/ (LV +S) ]、肺细小动脉显微和超微结构、血CO浓度、血清及肺组织匀浆上清液血红素氧合酶 1(HO 1)活性和肺细小动脉HO 1及其基因表达的变化。结果　 (1)B组mPAP为 (2 0 1± 0 8)mmHg(1mmHg =0 .133kPa)、RV/ (LV +S)为 (35 5± 1 7) %、与A组 [(15 3± 1 4 )mmHg、(2 6 7± 1 7) % ]及C组[(16 5± 3 7)mmHg、(30 2± 1 6 ) % ]比较差异有显著性 (P均 <0 0 1)。 (2 )B组肺细小动脉血管结构重建的显微形态测定指标与A、C组比较差异也有显著性 (P <0 0 1)。 (3)B组全血CO含量、血清及肺组织匀浆HO 1活性、肺细小动脉HO 1及其mRNA分别为 (2 1± 0 9) %、(73± 18)nmol·L-1·h-1、(175 1± 311)pmol·mg-1·h-1、0 191± 0 0 12和 0 30 1± 0 0 17,与A组 [(0 5± 0 3) %、(2 5± 8)nmol·L-1·h-1、(385± 4 6 )pmol·mg-1·h-1、0 0 5 9± 0 0 0 5、0 131± 0 0 11]和C组 [(4 9± 2 1) %、(132±39)nmol·L-1·h-1     

慢性缺氧抑制肺动脉平滑肌细胞钾通道活性

目的研究慢性缺氧性肺动脉高压发生机制中钾通道活性改变的作用，及其开放剂卡吗克林（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）对钾通道活性的调控作用。方法２０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为对照组１０只和缺氧组１０只，缺氧组大鼠缺氧３周，每天缺氧８小时；运用急性酶分离法对Ｗｉｓｔａｔ大鼠肺动脉平滑肌细胞进行了分离；应用膜片钳小片膜单通道技术，分别对正常和慢性缺氧３周大鼠的肺动脉平滑肌细胞的钾离子通道进行了测定；记录并比较了两组大鼠肺动脉平滑肌细胞钙、ＡＴＰ激活性钾通道（Ｋ＋ＣａＡＴＰ）和延迟整流性钾通道的活性，并观察了ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ对缺氧组大鼠钾通道的影响。结果慢性缺氧组大鼠肺动脉平滑肌细胞钙、ＡＴＰ激活性钾通道（Ｋ＋ＣａＡＴＰ）和延迟整流性钾通道的活性均比正常组低，ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可使慢性缺氧组Ｋ＋ＣａＡＴＰ的活性明显增高（Ｐ均＜０．０１）。结论慢性缺氧可明显抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞钾通道活性，这可能在慢性缺氧性肺动脉高压的发病机制中发挥重要的作用，钾通道开放剂ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可作为降低缺氧性肺动脉高压的有效药物。     

Discovery and structural characterization of a small molecule 14-3-3 protein-protein interaction inhibitor

The 14-3-3 family of phosphoserine/threonine-recognition proteins engage multiple nodes in signaling networks that control diverse physiological and pathophysiological functions and have emerged as promising therapeutic targets for such diseases as cancer and neurodegenerative disorders. Thus, small molecule modulators of 14-3-3 are much needed agents for chemical biology investigations and therapeutic development. To analyze 14-3-3 function and modulate its activity, we conducted a chemical screen and identified 4-[(2Z)-2-[4-formyl-6-methyl-5-oxo-3-(phosphonatooxymethyl)pyridin-2-ylidene]hydrazinyl]benzoate as a 14-3-3 inhibitor, which we termed FOBISIN (FOurteen-three-three BInding Small molecule INhibitor) 101. FOBISIN101 effectively blocked the binding of 14-3-3 with Raf-1 and proline-rich AKT substrate, 40 kD(a) and neutralized the ability of 14-3-3 to activate exoenzyme S ADP-ribosyltransferase. To provide a mechanistic basis for 14-3-3 inhibition, the crystal structure of 14-3-3ζ in complex with FOBISIN101 was solved. Unexpectedly, the double bond linking the pyridoxal-phosphate and benzoate moieties was reduced by X-rays to create a covalent linkage of the pyridoxal-phosphate moiety to lysine 120 in the binding groove of 14-3-3, leading to persistent 14-3-3 inactivation. We suggest that FOBISIN101-like molecules could be developed as an entirely unique class of 14-3-3 inhibitors, which may serve as radiation-triggered therapeutic agents for the treatment of 14-3-3-mediated diseases, such as cancer.     

血管紧张素1-7与糖尿病及糖尿病肾脏内质网应激关系的研究

目的 调查糖尿病患者血管紧张素1-7(Ang1-7)水平和评价Ang1-7对糖尿病大鼠肾脏内质网应激的影响.方法 选取2014年12月至2015年6月于天津市海滨人民医院未诊断为糖尿病的95名体检人员为研究对象,所有受试者均进行口服葡萄糖耐量试验,根据血糖水平分为健康组(n=31)、血糖异常组(n=32)和糖尿病组(n=32).检测其体重、腰围、血压、肝功能、肾功能、Ang1-7、血管紧张素转换酶(ACE)2等指标.分析血糖与Ang1-7、ACE2的相关性.另外,选取10只150～200 g健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠,通过腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型,全部成功,根据随机数字法,分为糖尿病组和Ang1-7组,每组5只,分别皮下泵人生理盐水和Ang1-7,另选取5只健康SD大鼠作为正常组.干预2周后处死所有大鼠,留取肾组织标本,Western印迹和实时荧光定量PCR检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录活性因子4(ATF4)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)水平.结果 与健康组相比,血糖异常组和糖尿病组甘油三酯、ACE2、Ang1-7水平均升高;糖尿病组较健康组升高更明显(F=5.57,6.12,5.44,P均＜0.01).Pearson相关分析显示,糖尿病组、血糖异常组的空腹血糖、餐后血糖均与Ang1-7呈正相关(r=0.69,0.45,P均＜0.01;r =0.54,0.52,P均＜0.01).与正常组相比,糖尿病组大鼠肾脏GRP78、ATF4和CHOP水平明显升高;与糖尿病组相比,Ang1-7组GRP78、ATF4和CHOP水平明显下降(t=20.3,25.7,19.6,P均＜0.05).与同期正常组比较,糖尿病组大鼠肾组织GRP78、ATF4和CHOP的mRNA均显著上调.与糖尿病组比较,Ang1-7组大鼠肾组织GRP78、ATF4和CHOP的mRNA的表达受到显著抑制(t=15.1,11.6,12.3,P均＜0.05).结论 Ang1-7水平随着受试者血糖浓度的升高而升高,另外,Ang1-7可降低糖尿病大鼠肾脏内质网应激蛋白水平.