PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较

目的:探讨PCR与ELISA 2种方法检测丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒的差异和临床意义.方法:随机抽取无偿献血者标本300份,分为ALT升高组和ALT正常组,用ELISA法检测抗-HCV和HbsAg,用RT-PCR检测HCV-RNA和HBV-DNA.结果:抗-HCV阳性标本26例阳性率为8.7%,经RT-PCR检测,HCV-RNA均为阳性,抗-HCV阴性的标本中有2例HCV-RNA为阳性.HCV-RNA的阳性率为16%,2种方法检测结果差异有统计学意义(P<0.01);300份标本中HBsAg阳性和HBV-DNA阳性比率分别为11.3%和12.7%,两者无明显差异(P>0.05).结论:ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象,应用RT-PCR检测HCV-DNA利于早期诊断,也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法.     

乙型肝炎患者血清HBV DNA与HBV-M检测比较分析

目的：探讨不同免疫标志物的乙型肝炎（乙肝）患血清HBVDNA阳性率及其临床意义。方法：用PCR方法检测乙肝患血清HBVDNA，用ELISA方法检测乙肝五项标志物即HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb。结果：212例HBsAg,HBeAg,HBcAb均阳性的标本HBVDNA也全部阳性，阳性率为100%；158例HBsAg,HBeAb,HBcAb均阳性的标本，HBVDNA62例阳性，阳性率为39.2%,HBsAg,HBcAb阳性标本55例。其中30例HBVDNA阳性，阳性率为54.5%; 三抗体HBsAb,HBeAb,HBcAb阳性标本40例，其中5例HBVDNA阳性，阳性率为12.5%。结论：PCR方法更灵敏。只有检测HBVDNA才能确证HBV的真实感染和得制情况。     

乙型肝炎病毒大蛋白检测的临床意义

目的分析乙型肝炎病毒大蛋白（L HBS）与HBV-DNA的相关性,探讨L HBS在乙型肝炎临床检测中的意义。方法以ELISA法检测样品L HBS和定量PCR法检测HBV-DNA。结果218例HBsAg阳性和HBeAg阳性的血清样本中,L HBS阳性率为95.41%,HBV-DNA的阳性率为92.66%,两者阳性率差异统计学意义（χ2=81.36,P〈0.001）;120例HBsAg阳性、HBeAg阴性的血清样本中,L HBS阳性率为65.00%,HBV-DNA的阳性率为68.33%,两者阳性率差异统计学意义（χ2=47.21,P〈0.001）。L HBS水平与HBV-DNA拷贝数呈直线正相关性（r=0.965）。结论L HBS和HBV-DNA的检测敏感新有差异,但相关性较强。L HBS可检测感染者体内病毒复制程度,特别是对HBeAg阴性的患者。     

乙型肝炎病毒大蛋白的临床检测意义

目的 通过临床检测乙型肝炎病毒大蛋白(LHBs)、乙肝两对半(HBVM)以及HBV DNA,探讨乙型肝炎病毒大蛋白在临床的检测意义.方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测LHBs、HBVM,采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA.结果 LHBs吸光度(OD值)与HBV DNA呈正相关关系(γ=0.982);乙肝大三阳患者中LHBs与HBV DNA检出率无显著性差异;135例小三阳乙肝患者血清中LHBs阳性率与HBV DNA阳性率无显著性差异,二者的检出一致率为84.44%[(63 51)/135].结论 乙型肝炎病毒大蛋白与HBV DNA有良好的正相关关系,在乙肝大三阳患者以及小三阳患者中检出率和HBV DNA有较高的一致性,LHBs可以很好地反映临床乙肝病毒复制水平,特别是在HBeAg阴性乙肝患者体内病毒复制情况有重要的意义.     

乙型肝炎病毒前S1抗原（Pre-S1）应用价值的探讨

目的：分析HBsAg阳性血清乙型肝炎前S1蛋白(Pre-S1)与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量检测的关系。探讨Pre-S1的应用价值。方法：用荧光定量PCR技术检测225例HHsAg阳性血清HBV-DNA的含量，同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测Pre-S1蛋白。结果：在HBsAg、HBeAg、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为89．3％、HBV-DNA阳性率为98．6％。在HBsAg、HBeAb、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为34.6％、HBV-DNA阳性率为30．7%。在不同HBV血清模式(HBV-M)中Pre-S1Ag的出现与HBV-DNA的含量有正相关的关系。结论：Pre-S1Ag与HBeAg、HBV-DVA有较好的相关性,Pre-S1Ag与HHV-DNA一样可以作为HBV复制的指标．对乙肝五项检测有重要补充作用，尤其适合县市级以下基层医院开展。     

ELISA法检测乙型肝炎病毒前S1蛋白的室内质量控制

目的 制备以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒前S1蛋白的室内质控物,并对其应用价值进行初步评价.方法 留取前S1蛋白阳性的人混合血清样本,并用正常人血清将上述收集的血清稀释至所需浓度,与日常标本一起检测,用酶标仪在450nm波长下测光密度值(OD值),计算s/co值的-x±s,CV值,并用Excel软件绘制质控图.结果 自制室内质控物的s/CO值-x=1.93,s=0.26,CV=13.6%.结论 临床实验室可以用前S1蛋白阳性的混合血清样本制备其定性检测的质控物,其制备简单,且可以用Excel软件绘制L-J质控图,有一定的临床实用价值.     

原位PCR检测肾组织内的乙型肝炎病毒

采用原位ＰＣＲ技术检测了肾小球肾炎患者活组织，证实乙型肝炎病毒相关肾炎患肾脏中ＨＢＶ的存在。从分子病理学水平为探讨ＨＢＶ相关性肾炎发病机理提供了新的依据。     

乙型肝炎病毒母婴传播检测分析

乙型肝炎病毒母婴传播检测分析李玉香李洁＊张庆华＊＊（济宁市妇幼保健院，２７２１００＊济宁骨伤医院＊＊任城区计生站）关键词乙型肝炎病毒；聚合酶链反应乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染母婴传播是导致人群ＨＢｓＡｇ慢性携带的主要原因之一［１］。为探讨有效的围产期保...     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测对判断病毒复制的临床意义

目的:了解HBV外膜大蛋白(HBV-LP)对HBV感染、复制和乙肝患者诊断、治疗和预后评估的作用。方法:收集104例乙型肝炎患者血清(HBsAg阳性),同时检测血清HBV-M、HBV-LP、HBV DNA,HBV-LP检测采用ELISA法,HBV DNA由广州达安基因股份有限公司提供检测;测定采用FQ PCR。结果:不同HBV-M模式中,HBV DNA、HBV-LP阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05),HBV DNA含量(拷贝数对数)与HBV-LP浓度均值呈正相关关系。在72例血清HBV DNA阳性患者中,HBV-LP阳性65例,阳性率90.3%。结论:HBV-LP在不同HBV-M感染模式中,与HBV DNA的阳性率比较吻合,而且HBV-LP浓度能较好的反映体内HBV DNA的存在状态。     

慢性乙型肝炎患者检测乙型肝炎病毒大蛋白的临床意义

目的：探讨乙型肝炎患者检测乙型肝炎病毒大蛋白（HBV-largeprotein,HBV-LP）的临床意义。方法：选择120例慢性乙型肝炎患者,采用免疫荧光法检测乙型肝炎病毒基因（HBvirus—DNA,HBV—DNA）,酶联免疫吸附法检测HBV—LP和乙型肝炎表面抗原（HBVeantigen,HBeAg）,比较HBV—DNA、HBV—LP及HBeAg的检出率,比较HBeAg阴性患者HBV—LP、HBV—DNA血清学检出率,分析HBV—DNA、HBV—LP及HBeAg的相关关系。结果：HBV—LP检出率为87．50％,显著高于HBV—DNA（70．00％）（x2=10．9804,P〈0．01）和HBeAg检出率（38．33％）（x2=62．1653,P〈0．01）;HBeAg阴性患者HBV—LP阳性检出率为82．43％,显著高于HBV—DNA检出率（44．59％）（x2=22．8589,P〈0．01）;相关性检验显示HBV—LP与HBV—DNA及HBeAg之间存在正相关关系（x=O．573,P〈0．05;rs=0．681,P〈0．05）。结论：HBV—LP是评价HBV患者体内病毒复制、疾病进展及抗病毒治疗效果的敏感指标。     

乙肝病毒外膜大蛋白检测在诊断乙型病毒性肝炎中的临床意义

目的通过检测乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV、DNA、以及乙肝两对半(HBVM),探讨HBV-LP与HBVDNA浓度的相关性.方法共检测354例乙肝患者血清标本,HBV-LP、乙肝前S1蛋白(Pre-SlAg)以及乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBV DNA.结果(1)在290份HBV DNA阳性标本中HBV-LP的阳性率(88.62%)明显高于乙肝病毒前S1的阳性率(48.97%),两者之间差异有显著性(P＜0.05);(2)HBV-LP吸光度值与HBV DNA拷贝数呈正相关性,相关系数r=0.939;(3)在HBeAg阳性和阴性标本中,Pre-SlAg的检出率则明显低于HBV-LP和HBV DNA.结论本研究结果显示HBV-LP与HBV DNA有良好的正相关性,HBV-LP检出与HBV DNA的符合率高于Pre-SlAg,HBV-LP检测可以用于反映乙肝患者病毒复制的血清免疫学指标.     

肝癌患者HBV血清学标志和HBV-DNA的关系

目的 为了探讨肝癌患血清中HBV标志物与HBV－DNA之间的相关性。方法 运用酶联免疫吸附试验和聚合酶链式反应同时检测血清中HBV标志物和HBV－DNA。结果 在427例肝癌患的血清中，HBV－M（＋）为74．0％，HBV－DNA（＋）为44．0％，与正常对照组差异非常显。结论 乙型肝炎病毒的感染与复制仍是肝癌的主要致病因素。     

乙型肝炎大蛋白在慢性乙型肝炎抗病毒疗效评估中的意义

目的:评估血清乙型肝炎大蛋白(HBV-LP)在慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒疗效评估中的临床价值.方法:120例CHB患者经恩替卡韦治疗96周.分别于用药0、12、24、36、48、72和96周检测HBV-LP和HBV DNA.结果:CHB患者中治疗前HBV-LP与HBV DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05),在抗病毒治疗中,HBV-LP与HBV DNA降低呈一致趋势(P<0.01),HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数呈明显正相关关系(P<0.01).结论:血清HBV-LP检测为抗病毒疗效评估提供有效参考指标.     

用逆转录套式PCR方法对西安地区HGV感染情况的调查

目的：为了了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况，得到一较好的ＨＧＶ检测方法。     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白与乙肝病毒核酸检测在抗病毒治疗中的价值分析

目的:探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)与乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)检测在抗病毒治疗中的临床价值.方法:选取300例乙型肝炎患者,均给予核苷(酸) 类似物抗病毒治疗,分别在治疗前和治疗后6、12个月采集血清标本进行HBV-LP、HBV-DNA检测,并对检测结果进行统计分析.结果:不同HBV-DNA拷贝组的HBV-LP吸光度差异有统计学意义(P<0.01).HBV-LP含量与HBV-DNA拷贝数具有正相关关系;HBV-LP、HBeAg、HBV-DNA阳性率均随着治疗时间的延长而降低,与治疗前相比差异均有统计学意义(P<0.01),但在治疗6个月及12个月HBV-LP的阳性率均高于HBV-DNA的阳性率(P<0.01).随着抗病毒治疗时间的延长,HBV-LP的灵敏度降低,特异度升高,阳性预测值降低,治疗后12个月时,HBV-LP的灵敏度最低(93.28%) ,特异性最高(53.01%).结论:HBV-DNA阴转并不意味着肝内乙型肝炎病毒复制的消失,联合检测HBV-LP以检测病毒复制,对抗病毒治疗监测具有重要的临床价值.     

荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值

目的：探讨荧光定量PCR（ FQ-PCR）检测乙型肝炎病毒（ HBV）-DNA的临床意义。方法：采用FQ-PCR检测265例乙型肝炎（乙肝）患者和150名健康体检者的血清HBV-DNA,并将结果与酶联免疫吸附试验测定的乙肝血清标志物进行比较。结果：不同血清标志物模式的各组均可检出 HBV-DNA 阳性,其中 HBsAg、HBeAg、HBcAb 阳性组和 HBsAg、HBeAg 阳性组的HBV-DNA阳性率和病毒拷贝数均显著高于其他血清标志物模式组和对照组（P〈0.01）。 HBV所致不同疾病类型的HBV-DNA阳性率差异均无统计学意义（P〉0.05）,但急性乙肝病毒拷贝数均明显高于其他疾病（P〈0.01）。结论：FQ-PCR检测HBV-DNA可以直接反映是否存在HBV感染,判断病毒的复制能力和传染性,指导临床用药和观察疗效,具有重要的临床意义。     

微孔杂交检测登革病毒及其分型方法的建立

目的建立特异、敏感、实用的登革病毒检测及分型方法：方法分析登革1～4型病毒基因组序列，分别设计针对登革病毒1～4型的特异性包被探针，扩增、克隆测序后包被聚乙烯微孔板。PCR上游引物5’端标记生物素，对待检样品进行扩增后用作检测探针进行微孔杂交（PC艮ELISA）反应，并通过设定不同的包被DNA浓度、包被时间、杂交温度、杂交时间．对PCR—ELISA反应进行优化：结果建立了快速，特异、敏感的登革病毒快速检测及分型方法．试验结果直观，阳性标本吸光度值存0．5以上，阴性结果吸光度值在0．1以下，S/N值在10以上。结论所建立的方法可用作登革病毒感染的早期诊断及分型。     

荧光定量-聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA及其临床价值

目的:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)技术检测血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA,评价其临床应用价值。方法:用FQ PCR和酶联免疫吸法(ELISA)检测298份血清HBVDNA拷贝数和免疫学血清标志。结果:27份HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本中,HBVDNA阳性率96.3%,平均拷贝数5.0×107mL;69份中检出率44.9%,平均拷贝数2.1×105mL;43份中检出率34.9%,平均拷贝数8.6×103mL。结论:FQ PCR可以准确、灵敏地判断HBV感染的实际情况及复制水平,可为选择治疗方案和评估药物疗效提供较可靠的理论依据。     

乙型肝炎病毒免疫学标志物与HBV-DNA的定量分析

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)二对半抗原抗体系统、前S1蛋白(Pre-S1)和HBV脱氧核糖核酸(HBV-DNA)之间的关系.方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测209份HBV感染者血清的HBV二对半抗原抗体系统,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA.结果:HBV-DNA滴度小于每毫升1×105copies者35份(16.7%),HBV-DNA滴度在1×105～1×107copies者88份(42.1%),HBV DNA滴度大于1×107copies者86份(41.1%).HBV-DNA滴度与HBeAg阳性率、Pre-S1阳性率呈正相关,相关系数分别为0.998(P=0.039)和0.882(P=0.024).结论:HBeAg和Pre-S1也是反应HBV复制的指标.对HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者检测Pre-S1,可帮助判断HBV复制情况.