不同浓度胰岛素对Ishikawa细胞IGFBP-1 mRNA表达的影响

目的 体外研究胰岛素对子宫内膜上皮细胞胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1) mRNA表达的影响.方法 Ishikawa细胞培养液中分别添加雌二醇(E2)200 pg/mL以模拟增殖晚期正常子宫内膜上皮细胞(A组),E2200 pg/mL和孕酮(P)20 ng/mL模拟分泌中期(B组);再将A、B组分别予0、10、30、100 mU/L的胰岛素水平供培养.采用RT-PCR法检测Ishikawa细胞IGFBP-1 mRNA的表达情况.结果 ①A、B组IGFBP-1 mRNA表达均为阳性,B组表达高于A组(P<0.0001).②A、B组不同浓度下,IGFBP-1 mRNA的表达有统计学意义(P<0.0001),且随胰岛素浓度的升高,IGFBP-1 mRNA表达量下降.③A、B组间30 mU/L与100 mU/L胰岛素浓度的IGFBP-1 mRNA表达无统计学意义(P>0.05).结论 ①Ishikawa细胞分泌中期分泌IGFBP-1较增殖晚期增加,孕激素可上调IGFBP-1的表达.②Ishikawa细胞IGFBP-1 mRNA的表达不依赖于胰岛素的作用,但胰岛素可抑制IGFBP-1 mRNA,具有浓度依赖性.③高浓度胰岛素可能可以拮抗孕激素对IGFBP-1 mRNA表达的促进作用.     

基于网络药理学探讨逍遥散调控多囊卵巢综合征子宫内膜容受性的作用机制及实验验证

目的 基于网络药理学及实验验证初步探究逍遥散调控多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）子宫内膜容受性的核心中药、活性成分、药物靶点和作用机制。方法 通过TCMSP、ETCM数据库筛选逍遥散活性成分及潜在作用靶标,应用GeneGards和OMIM数据库检索PCOS疾病靶点,GEO数据库筛选子宫内膜容受性相关差异表达基因,取其交集获得PCOS子宫内膜容受性相关靶点;再将药物与PCOS子宫内膜容受性相关靶点取交集;通过STRING数据库对交集基因进行PPI分析,对交集基因进行GO和KEGG功能富集分析;运用Cytoscape软件,初步构建逍遥散调控PCOS子宫内膜容受性的“中药-核心成分-潜在靶点-通路”网络。验证实验以Ishikawa细胞为受试对象,通过Western blot及qRT-PCR检测逍遥散及其核心中药含药血清对Ishikawa细胞VEGF、VEGFR2、COX2、PKC和整合素αvβ3的蛋白及mRNA表达的影响。结果 GeneGards和OMIM数据库获得5451个疾病基因,GEO数据库获得375个差异表达基因,取交集获得102个PCO...     

二甲双胍治疗对PCOS患者子宫内膜胰岛素抵抗的影响

目的:探讨PCOS患者子宫内膜GLUT4,INS蛋白的表达情况,明确二甲双胍治疗对子宫内膜胰岛素抵抗的影响。方法:收集胰岛素抵抗的肥胖PCOS患者(PCOS组)20例及非PCOS肥胖患者(对照组)20例。测定2组患者血清FSH、LH、E2、T、FSG、FINS水平,并应用免疫组化法检测两组患者子宫内膜GLUT4、INS蛋白表达,对PCOS组应用二甲双胍治疗(500 mg/次,3次/d,连续3个月),比较治疗前后上述指标的改变。结果:PCOS组T、FINS水平高于对照组(P<0.01),子宫内膜GLUT4表达低于对照组,INS表达高于对照组。二甲双胍治疗后,子宫内膜GLUT4表达升高,INS表达降低,3组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:PCOS患者子宫内膜存在IR,二甲双胍可能通过上调PCOS患者子宫内膜GLUT4水平从而改善子宫内膜IR状况。     

二甲双胍治疗后多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜Hoxa10的表达及意义

目的：探讨二甲双胍治疗前后多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠子宫内膜组织中Hoxa10及胰岛素（INS）、INS受体（INS-R）蛋白表达的变化．方法：选取85日龄SD雌性大鼠54只，随机分为：①对照组（20只）；②PCOS组（17只）；③二甲双胍治疗组（17只）．后两组先参照PoretskyL等方法复制PCOS大鼠模型，造模成功后，PCOS组喂服安慰剂，治疗组喂服二甲双胍，14d后断头处死各组大鼠并取材．采用免疫组织化学ElivisionTM Plus两步法检测三组子宫内膜Hoxa10及INS，INS-R蛋白的表达．并取外周血测定INS和睾酮含量．结果：PCOS组大鼠子宫内膜Hoxa10和INS．R表达下降（P〈0．01，P=0．012），INS表达增加（P=0．003）；二甲双胍治疗后子宫内膜Hoxa10表达增加（P〈0．01），INS水平下降（P=0．043），但均低于对照组水平（P〈0．01，P=0．037）；INS—R无明显变化；治疗后血INS和血睾酮水平均下降（P〈0．01，P=0．048）．结论：PCOS大鼠子宫内膜可能存在INS抵抗和容受性下降，治疗后可部分逆转此变化．     

超排卵对围着床期小鼠子宫内膜白血病抑制因子LIF表达的影响

目的通过研究比较超排卵和生理水平时围着床期小鼠子宫内膜白血病抑制因子（leukemia inhibitory faetor，LIF）表达的情况，探讨超排卵是否影响子宫内膜容受性。方法将实验动物随机分为超排卵妊娠组（超排卵组）和自然妊娠组（对照组）2组，每组30只，分别选取动情周期当天、合笼后发现阴道栓第2、4、6、8天共5个时间点取小鼠子宫内膜，用免疫组化和原位杂交法测定小鼠子宫内膜LIF的蛋白表达和LIFmRNA的表达。结果超排卵组和对照组LIF在围着床期子宫内膜上的表达上有相似的规律：即随着妊娠天数的增加，LIF蛋白和LIFmRNA在小鼠围着床期子宫内膜的表达增加，继之呈下降趋势，但其峰值在时间上有所不同，超排卵使LIF在围着床期子宫内膜上表达峰值提前。结论超排卵对围着床期子宫内膜LIF表达有影响，使其表达峰值提前，而白血病抑制因子是参与子宫内膜容受性形成的一个重要的细胞因子，从而可以推测超排卵对子宫内膜容受性有负面影响，导致种植后妊娠率的下降。     

LIF、HOXA10在PCOS患者中的表达

目的:探讨沧州地区PCOS患者不同组织学分期的子宫内膜LIF、HOXA10的表达情况与子宫内膜容受性的关系。方法:50例已婚PCOS患者和26例已婚不孕症(非PCOS)患者采集其子宫内膜标本,采用免疫组织化学法检测内膜LIF、HOAX10的表达。结果:LIF、HOXA10在PCOS组增生期及分泌中期子宫内膜的表达水平均低于其相应的对照组(p0.01)。结论:检测PCOS患者中LIF、HOXA10可为PCOS不孕患者临床细胞因子的综合诊断及治疗提供新思路。     

加减苍附导痰汤对痰湿阻滞型多囊卵巢综合征患者子宫内膜胰岛素及其受体作用研究

目的 探讨加减苍附导痰汤对痰湿阻滞型多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜胰岛素及其受体的影响.方法 收集痰湿阻滞型多囊卵巢综合征患者30例为观察组,予加减苍附导痰汤治疗.连续治疗3个月经周期.对照组为输卵管性不孕患者30例.以免疫组化法检测治疗前后子宫内膜胰岛素（INS）及胰岛素受体（INS-R）的表达.结果 观察组治疗前INS-R的表达低于对照组（P＜0.01）,INS表达高于对照组（P＜0.01）;治疗后INS-R的表达升高（P＜0.05）、INS表达则下降（P＜0.05）,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 加减苍附导痰汤能升高痰湿阻滞型PCOS患者子宫内膜INS-R的表达,降低内膜局部INS的表达,有利于子宫内膜局部的糖代谢,改善局部胰岛素抵抗情况.     

针刺对克罗米芬治疗的多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜容受性的影响

目的 观察针刺对促排卵治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜容受性的影响,探讨其作用机制.方法 对24日龄雌性SD大鼠皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)的麻油溶液制作多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,对照组(Con)同期皮下注射麻油.PCOS大鼠随机分为模型组(M)、克罗米芬组(C)、克罗米芬+针刺组(C+A),其中M组不作任何处理,其它各组均于80日龄起进行干预5 d.治疗结束后,各组部分大鼠断头处死,留取子宫和子宫内膜标本.以RT-PCR法检测各组大鼠子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、同源盒基因A10(HOXA10)、白血病抑制因子(LIF)mRNA表达,Western blot法检测ER、PR、HOXA10、LIF及整合素αvβ3(Integrin αvβ3)蛋白的表达.各组其余大鼠与雄鼠交配,于妊娠第8天处死,观察大鼠胚泡着床情况.结果 与C组相比,C+A组大鼠子宫内膜发育更好,上述子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达水平也更接近对照组(P<0.05).结论 针刺能显著改善克罗米芬促排卵治疗导致的子宫内膜容受性不良状态,可能通过调节子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达而实现.     

C-FOS、STAT 3在PCOS患者着床窗口期子宫内膜的表达及意义

目的：探讨C-FOS,STAT3对多囊卵巢综合征（PCOS）患者窗口期子宫内膜容受性的影响。方法选取15例已婚PCOS患者（PCOS组）,14例其他原因导致不孕的妇女（对照组）,在窗口期收集其子宫内膜组织,经HE染色判断组织学分期,用免疫组织化学SP法检测C-FOS,STAT 3在窗口期子宫内膜的表达。结果 PCOS组窗口期C-FOS表达高于对照组,STAT3表达低于对照组,二者呈显著负相关,差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论 C-FOS高表达、STAT3低表达可能影响PCOS组窗口期子宫内膜容受性的建立,是造成PCOS患者妊娠率低、流产率高的原因之一。     

二甲双胍治疗后多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜Hoxa10的表达及意义

目的:探讨二甲双胍治疗前后多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜组织中Hoxa10及胰岛素(INS)、INS受体(INS-R)蛋白表达的变化. 方法: 选取85日龄SD雌性大鼠54只,随机分为:①对照组(20只);② PCOS组(17只);③二甲双胍治疗组(17只). 后两组先参照Poretsky L等方法复制PCOS大鼠模型,造模成功后,PCOS组喂服安慰剂,治疗组喂服二甲双胍,14 d后断头处死各组大鼠并取材. 采用免疫组织化学ElivisionTM Plus两步法检测三组子宫内膜Hoxa10及INS,INS-R蛋白的表达. 并取外周血测定INS和睾酮含量. 结果: PCOS组大鼠子宫内膜Hoxa10和INS-R表达下降(P＜0.01, P=0.012),INS表达增加(P=0.003);二甲双胍治疗后子宫内膜Hoxa10表达增加(P＜0.01),INS水平下降(P=0.043),但均低于对照组水平(P＜0.01, P=0.037);INS-R无明显变化;治疗后血INS和血睾酮水平均下降(P＜0.01, P=0.048). 结论: PCOS大鼠子宫内膜可能存在INS抵抗和容受性下降,治疗后可部分逆转此变化.     

葡萄糖、胰岛素对Colon26肿瘤细胞分泌VEGF的影响

目的：观察不同浓度的葡萄糖和胰岛素对结直肠癌细胞株Colon26肿瘤细胞分泌VEGF的影响．方法：体外培养Colon26肿瘤细胞,根据培养液中加入的葡萄糖和胰岛素终浓度的不同,将实验所用细胞分成12组．每组设3个复孔,培养48h,收集细胞培养上清,ELISA法检测VEGF的浓度．结果：B,C,D组（培养液分别加5,10,25mmol／L的葡萄糖）的VEGF浓度与A组（培养液未加葡萄糖和胰岛素,为对照组）的VEGF浓度相比无显著性差异（P〉0．05）．G组（培养液加125mU／L的胰岛素）的VEGF浓度明显高于A,E,F组（培养液分别加0,5,25mU／L的胰岛素）的VEGF浓度,差异有显著性（P〈0．01）,而A组、E组与F组之间无显著性差异（P〉0．05）．K、L组（培养液分别加5,25mmol／L的葡萄糖和125,125mU／L胰岛素）的VEGF浓度均明显高于A组的VEGF浓度,差异有显著性（P〈0．01）,而K、L组组间无差异．H,M,N组（培养液分别加5,5,1．25mU／L的胰岛素和5,25,25mmol／L的葡萄糖）的VEGF浓度与A组相比无显著性差异（P〉0．05）．结论：葡萄糖的浓度对Colon26肿瘤细胞分泌VEGF无明显影响．高浓度的胰岛素可增加Colon26肿瘤细胞VEGF分泌．     

孕酮、他莫西芬对子宫内膜癌细胞增殖及雌激素受体相关受体表达的影响

目的探讨孕酮及他莫西芬（tamoxifen,TAM）对子宫内膜癌细胞生长的影响及其对雌激素受体相关受体（ERRα）表达的影响。方法体外培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,采用MTT法检测不同浓度孕酮及TAM对子宫内膜癌细胞生长的影响,同时采用Western Blot方法检测细胞中ERRα蛋白水平的变化。结果不同浓度孕酮对Ishikawa细胞体外增殖具有抑制作用,呈剂量-时间依赖性。TAM对Ishikawa细胞体外增殖具有双向作用,在×10-9~×10-7mol/L TAM作用下促进细胞增殖,并呈剂量-时间依赖性;在×10-5mol/L TAM作用下抑制细胞增殖。×10-9~10-6mol/L TAM作用后下调细胞中ERRα蛋白表达,×10-5mol/L TAM及孕酮作用后上调ERRα蛋白表达。结论孕酮及高浓度他莫西芬（×10-5mol/L）可抑制子宫内膜癌细胞的增殖,这种抑制作用可能通过调控细胞中ERRα表达实现;而低浓度他莫西芬则促进子宫内膜癌细胞的增殖。     

三氟拉嗪对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的抑制作用

目的观察盐酸三氟拉嗪（TFP）在体外对人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和增殖的影响,探讨可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度TFP体外干预对Ishikawa细胞生长的抑制作用,计算药物的半抑制浓度（IC50）并选择最佳作用时间。流式细胞仪分析TFP对Ishikawa细胞周期的影响;Real—TimePCR检测TFP对Ishikawa细胞内叉头框转录因子O亚族1（FOXO1）和抑癌基因Kruppel样因子6（KLF6）表达的调控作用。结果不同浓度TFP对Ishikawa细胞的生长均有抑制作用,呈剂量和时间依赖性,IC50为16．56μmol／L;20μmol／L作用24h的抑制效果最佳。20μmol／LTFP干预Ishikawa细胞24h,S期细胞比例明显降低（P〈0．01）,KLF6mRNA表达显著上调（P〈0．05）。结论三氟拉嗪体外干预可抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的生长和增殖,其作用机制可能与抑癌基因KLF6表达上调有关。     

唾液酸酶对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨唾液酸酶与子宫内膜癌细胞Ishikawa浸润、增殖和凋亡的关系。 方法 培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,并分成对照组和处理组,处理组给予唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理,比对两组细胞上清液的唾液酸酶活性后通过免疫荧光检测、流式细胞学或MTT实验检测对照组和处理组细胞基质金属蛋白酶（MMPs）表达水平、细胞增殖核抗原（PCNA）水平、凋亡和增殖情况。 结果 处理组上清液唾液酸酶活性减弱且细胞MMPs的表达降低,处理组的细胞凋亡率明显降低,各组细胞的增殖能力无差异。 结论 唾液酸酶可影响Ishikawa细胞的侵袭性和凋亡率,但对细胞的增殖能力无明显影响。     

吡格列酮对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的治疗研究

目的探讨吡格列酮对多囊卵巢综合征（PCOS）患者全身及子宫内膜局部胰岛素抵抗的治疗效果。方法实验组为伴有胰岛素抵抗的PCOS25例,诱发排卵组为实验组中服用毗格列酮3个月后监测有排卵者8例,对照组1为同期输卵管性不孕者15例,对照组2为同期PCOS自发排卵者8例。实验组给予吡格列酮15mg bid口服3个月,观察血清胰岛素的变化。诱发排卵组、对照组1及对照组2均于排卵后第7天采集子宫内膜,应用免疫组化方法测定胰岛素受体（IR）的表达。结果实验组服药后空腹、2h血清胰岛素及胰岛素稳态模型指数（HOMA～IR）较服药前明显降低;诱发排卵组与对照组1相比内膜间质和腺体的IR表达无显著性差异;诱发排卵组与对照组2相比腺体上IR表达明显增高,内膜间质的IR表达没有差异。结论吡格列酮可以改善PCOS患者全身及子宫内膜局部的胰岛素抵抗。     

葡萄糖和胰岛素对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1的影响

目的本实验模拟2型糖尿病病程中葡萄糖、胰岛素的浓度改变,研究不同浓度的葡萄糖、胰岛素对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1的影响。方法体外培养SW480肿瘤细胞。依据培养液中加入葡萄糖、胰岛素浓度的不同,将实验细胞分为六组：0组（对照组）：RPMI1640细胞培养液;第1组：RPMI1640细胞培养液＋5mmol／L葡萄糖和5uIU／ml胰岛素;第2组：RPMI1640细胞培养液＋5mmol／L葡萄糖和125gIU／ml胰岛素;第3组：RPMI1640细胞培养液＋25mmol／L葡萄糖和125uIU／ml胰岛素;第4组：RPMI1640细胞培养液＋25mmol／L葡萄糖和5uIU／ml胰岛素;第5组：RPMI1640细胞培养液＋25mmol／L葡萄糖和1．25uIU／ml胰岛素。每个组设3个复孔,于37℃、5％CO2饱和湿度的培养箱中培养48h,培养结束后,收集细胞培养上清,用ELISA方法检测IGF-1的浓度。结果在高浓度的胰岛素组（第2组、第3组,培养液中均含有125uIU／ml的胰岛素）IGF-1的浓度[（286．85±23．51）ug／L、（293．43±30．57）ug／L]高于对照组0组[（197．99±22．50）ug／L],差异有统计学意义（F=9．726,P〈0．01）;而第1、4、5组（培养液中分别含有5uIU／ml、5uIU／ml、1．25uIU／ml的胰岛素）IGF-1的浓度[（203．22±28．89）ug／L、（209．47±25．77）ug/L、（195．33±20．88ug/L）]与对照组0组相比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论高浓度的胰岛素能够上调SW480肿瘤细胞IGF-1的表达。     

Notch信号通路在胰岛素调节子宫内膜癌细胞生长及凋亡中的作用

目的 探讨抑制Notch信号传导对胰岛素诱导子宫内膜癌细胞增殖及相关凋亡蛋白表达水平的影响.方法 将子宫内膜癌Ishikawa 3-H-12细胞行体外原代及传代培养,将培养好的细胞分为:对照组(加入磷酸盐缓冲液3 mL)、胰岛素组(加入1×106 mol/L胰岛素单独刺激)及MW167组(应用不同剂量γ分泌酶抑制剂MW167预处理后再用胰岛素刺激),培养48 h后应用噻唑蓝(MTT)比色法测定各组子宫内膜癌细胞生长抑制情况,应用蛋白质印迹法(Western blot)测定半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8及Notch1蛋白表达情况.结果 胰岛素可促进子宫内膜癌细胞中Notch1蛋白表达,刺激48 h后Notch1蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.05),MW167可抑制胰岛素诱导Notch1蛋白表达,且抑制作用具有浓度依赖性.不同组别子宫内膜癌细胞在培养24、48、72 h后570 nm处吸光度(A570)值存在明显差异(P＜o.05),其中胰岛素组各时间点A570值均高于对照组(P＜0.05),胰岛素促子宫内膜癌细胞增殖在48 h时达到最高水平.MW167以浓度及时间依赖的方式抑制胰岛素促子宫内膜癌细胞增殖,在48 h时20 μmol/L MW167可持久抑制胰岛素促子宫内膜癌细胞的增殖.胰岛素组各时间点Caspase-3、Caspase-8蛋白表达水平低于对照组(P＜0.05),MW167以浓度及时间依赖的方式促进细胞Caspase-3、Caspase-8蛋白表达.结论 MW167可通过抑制Notch信号通路传导而抑制胰岛素促子宫内膜癌细胞增殖及促进相关凋亡蛋白表达,诱导子宫内膜癌细胞凋亡.     

胰岛素对高糖诱导人脐静脉内皮细胞分泌血栓调节蛋白的影响

[目的]研究胰岛素对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞可溶性血栓调节蛋白(solubility Thrombomodulin,sTM)分泌的影响和可能机制.[方法]将体外培养的人脐静脉内皮细胞分为葡萄糖组(5.5、20和40 mmol/L)、胰岛素组(10 IU/mL)、高糖(40mmol/L)环境下的胰岛素组(10 IU/mL)和对照组(不含葡萄糖和胰岛素),于0、6、24、48和72h等不同时间点收集细胞上清液,采用ELISA法双抗体夹心法检测sTM水平,同时将各时间的细胞上清液与正常血浆等比例混合后测定活化部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplastin time,APTT).[结果]在培养的48 h内,高糖环境下(葡萄糖浓度40 mmol/L)内皮细胞分泌sTM的水平随着时间的延长逐渐升高且均高于对照组(P＜0.05),但培养72h后sTM的水平不再升高,反而下降(P＜0.05),高糖环境下(葡萄糖浓度40 mmol/L),APTT值逐渐降低且均低于对照组(P＜0.01)；胰岛素组内皮细胞在不同培养时间,分泌sTM的水平逐渐升高且均高于对照组(P＜0.05),与单独应用高糖(葡萄糖浓度40 mmol/L)相比较均降低(P＜0.05),APTT值随着培养时间的延长逐渐升高,但仍低于对照组(P＜0.01).[结论]生理浓度胰岛素可降低高糖环境下内皮细胞分泌sTM的水平,在一定程度内可以抵消高浓度葡萄糖对内皮细胞的损伤作用.     

血清性激素及胰岛素水平与子宫内膜增生程度的相关性分析

目的探讨血清性激素及胰岛素水平与子宫内膜增生过长患者病变程度的相关性。方法选择2011年1月～2013年6月浙江省瑞安市人民医院100例月经失调患者为研究对象,根据诊断性刮宫病理结果将其分为三组,其中子宫内膜处于增生期或分泌期者为对照组（46例）;子宫内膜简单性或复杂性增生过长者为轻度组（36例）;子宫内膜不典型增生以及内膜癌者为严重组（18例）。比较三组患者的血清性激素如卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E：）、孕酮（P）、脱氢表雄酮（DHEA）水平;比较三组患者空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的差异;应用Logistic回归分析上述各种指标水平与子宫内膜增生程度的关系。结果严重组血清P、DHEA、空腹胰岛素及HOMA—IR水平[（7．5＋0．4）ng／mL、（8．9＋1．2）μg／L、（t5．6±3．1）mU／L、（3．5＋1．O）mU／L]高于轻度组『[（5．9±0．5）ng／mL、（6．7±1．0）μg／L、（11．2±213）mU／L、（2．8±0．7）mU／L],差异均有统计学意义（均P〈0．05）,且轻度组血清P、DHEA、空腹胰岛素及HOMA—IR高于对照组[（4．6±0．6）ng／mL、（2．6±0．9）μg／L、（7.4±1．6）mU／L、（2．1±0．4）mU／L1,差异有统计学意义（均P〈0．05）。而三组FSH、LH及E2水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。Logistic回归分析显示血清DHEA及HOMA-IR指标是子宫内膜增生的危险因素（OR=1．263、1．546;P=0．036、0．027）。结论血清DHEA及HOMA-IR联合检测能有效评估子宫内膜增生过长患者的病变程度。     

葡萄糖和胰岛素对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA表达的影响

目的本试验模拟糖尿病病程不同阶段患者体内葡萄糖和胰岛素浓度的变化,研究不同浓度的葡萄糖和胰岛素对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA表达的影响。方法体外常规培养Colon 26肿瘤细胞。根据所用培养液外加葡萄糖和胰岛素浓度的不同,将实验所用细胞共分12组：A组（对照组）RPMI 1640培养液;B组加5 mmol/L葡萄糖;C组加10 mmol/L葡萄糖;D组加25 mmol/L葡萄糖;E组加5μIU/ml胰岛素;F组加25μIU/ml胰岛素;G组加125μIU/ml胰岛素;H组加5 mmol/L葡萄糖＋5μIU/ml胰岛素;K组加5 mmol/L葡萄糖＋125μIU/ml胰岛素;L组加25 mmol/L葡萄糖＋125μIU/ml胰岛素;M组加25 mmol/L葡萄糖＋5μIU/ml胰岛素;N组加25 mmol/L葡萄糖＋1.25μIU/ml胰岛素。每组设3个复孔,置37℃5%CO2饱和湿度的培养箱培养48 h,收集细胞后抽提总RNA,RT-PCR同时扩增目的片段TGF-β1和内参照β-actin,琼脂糖凝胶电泳,扩增产物在凝胶成像系统上扫描分析,计算TGF-β1 mRNA相对表达量。整个实验过程均重复3次。结果D组TGF-β1 mRNA的表达（0.768±0.017）高于A组（0.540±0.012）,差异有显著性（P〈0.01）;而B、C组TGF-β1 mRNA的表达（0.545±0.033、0.558±0.035）与A组相比均无显著性差别（P〉0.05）。E、F、G组对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达（分别为0.566±0.039、0.549±0.030、0.531±0.022）与A组相比无显著性差别（P〉0.05）。L、M、N组的TGF-β1 mRNA表达（分别为0.889±0.028、0.764±0.027、0.752±0.035）均高于A组（0.540±0.012）,差异有显著性（P〈0.01）;而H、K组的TGF-β1 mRNA表达（0.550±0.037、0.537±0.025）与A组相比均无显著性差别（P〉0.05）。结论高浓度的葡萄糖能够上调Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达,不同浓度的胰岛素不影响Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达,高浓度的葡萄糖和胰岛素同时作用能够上调Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达