亚甲基四氢叶酸还原酶基因型对叶酸降同型半胱氨酸的影响

背景 高血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性是心脑血管疾病的重要危险因素,叶酸降低Hcy水平,从而降低心血管事件已成为心血管领域研究的热点问题,但叶酸、MTHFR基因多态性、Hcy三者之间关系国内外研究的甚少且结论存在差异.目的 探讨MTHFR基因C677T多态性对叶酸...     

同型半胱氨酸代谢异常的分子遗传学机制研究进展

高同型半胱氨酸血症是心脑血管性疾病的危险因素.血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平受遗传和环境等因素的影响,近几年来人们开始致力于从分子遗传学角度分析Hcy的代谢通路以筛选与血浆Hcy水平有确切关联的候选基因.文章对影响Hcy代谢通路的最常见关键酶N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、编码叶酸结合蛋白(Folbp1)的基因FOLR1和编码内因子即维生素B12受体(cubilin)的基因CUBN的分子遗传学及其与Hcy代谢关系的研究作了综述.     

血浆同型半胱氨酸水平亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与强直性脊柱炎的相关性研究

目的 探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与强直性脊柱炎(AS)间的联系,分析AS患者MTHFR基因C677T突变的多态性,并探讨MTHFR基因多态性与AS的相关性.方法 运用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定100例AS患者及60名健康志愿者血浆Hcy浓度,应用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RELP)分析MTHFR基因的多态性.结果 AS患者血浆Hcy浓度明显高于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.01);AS组T/T型、C/T型、C/C型基因频率分布及T、C等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);AS组T/T基因型突变的比例与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);AS组和对照组T/T型的血浆Hcy水平明显高于C/T型和C/C型(P＜0.01).Logistic回归分析显示高Hcy血症是AS发病的独立危险凶素(P＜0.01,OR=4.582,95%CI=1.984～10.585).结论 AS患者血浆Hcy浓度明显高于健康志愿者,高Hcy血症是AS发病的独立危险因素.MTHFR基因T/T型突变是血浆Hcy浓度升高的一个重要影响机制,MTHFR基因T/T型突变可能与AS的发生有相关性.     

MTHFR基因多态性与腔隙性脑梗死的相关性研究

腔隙性脑梗死(LI)是较为常见的缺血性脑血管病之一,尽管LI病变面积不大,但也可以造成严重功能障碍,并可能是痴呆的原因。血清同型半胱氨酸(Hcy)升高可损伤血管内皮细胞,是脑梗死的独立危险因素;亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是Hcy代谢过程中的重要酶之一,其C677T的突变可影响酶的耐热性,导致血清Hcy升高。国内外研究发现,MTHFR基因C677T的多态性与脑血栓形成的脑梗死有相关性,可能是脑梗死的危险因素之一。但对不同于动脉粥样硬化性脑血栓形成的LI的研究较少。2003年11月～2004年10月,我们观察了血清Hcy水平及MTHFR基因C677T多态性与LI的相关性。现报告如下。     

甲烯四氢叶酸还原酶基因多态性与糖尿病大血管病变的关系研究

目的探讨甲烯四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位碱基突变与2型糖尿病患者同型半胱氨酸(Hcy)水平和糖尿病大血管病变的关系。方法将患者分为对照组、糖尿病颈动脉内中膜厚度(IMT)正常组、糖尿病IMT增厚组。应用酶联免疫法测定Hcy水平,采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测MTHFRC677T基因型,用高分辨彩色多普勒检查颈动脉内中膜厚度(IMT)。结果糖尿病IMT增厚组MTHFR基因的TT基因型和T等位基因频率显著增高,与糖尿病IMT正常组及对照组存在统计学差异(P<0.05)。对照组与糖尿病IMT正常组之间T等位基因频率无统计学差异。MTHFR基因突变者血浆Hcy增高。糖尿病组MTHFR基因突变者IMT值明显高于无基因突变者。结论糖尿病IMT增厚组T等位基因频率增高。MTHFR基因C677T点突变组血浆Hcy水平升高,颈动脉IMT增厚。推测MTHFR基因C677T点突变可能是糖尿病合并大血管病变发病的重要遗传因素。     

风湿性疾病中高同型半胱氨酸血症的临床研究

目的　分析多种风湿性疾病患者血浆中同型半胱氨酸(Hcy)水平及其相关因素。方法脊柱关节病(uSpA)患者和 62例正常对照的Hcy、VitB12、叶酸的水平和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因 677位的多态性。结果　(1)各疾病组Hcy水平分别为:SLE组 (19 04±6 86)μmol/L,RA组(19 07±7 43)μmol/L,AS组(16 47±6 50)μmol/L,uSpA组(16 59±6 72)μmol/L,对照组(12 24±3 58)μmol/L,各疾病组Hcy水平明显较对照组高,其差异有统计学意义 (P<0 01 ); ( 2 )Hcy与VitB12、叶酸呈负相关,相关系数分别为-0 701和-0 443,P<0 01; (3)MTHFR基因 677位C→T的突变使Hcy水平升高, CC型 ( 13 41±5 78 )μmol/L,CT型 ( 16 81±4 22 )μmol/L,TT型(20 88±6 60)μmol/L,P<0 01;TT基因型是高Hcy血症的易感基因 (OR=84 46,P<0 05);TT基因型还是SLE的易感基因(OR=7 56,P<0 05)。结论　(1)SLE、RA、AS、uSpA4种疾病患者普遍存在高Hcy血症。(2)导致高Hcy血症的原因可能有叶酸、VitB12的水平降低和MTHFR基因的突变。(3)TT型基因是Hcy异常升高的易感基因,也是SLE的易感基因。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性对同型半胱氨酸水平及脑梗死的影响

目的　探讨 5 ,10 亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因多态性对同型半胱氨酸 (homocysteine,Hcy)水平的影响及与脑梗死发病的关系。方法　选取年龄、性别匹配的脑梗死患者 97例 (脑梗死组 ) ,对照组 94例 ,测定空腹血浆Hcy浓度 ,采用限制性内切片段多态性分析法检测MTHFR基因两个位点的基因表型。结果　Hcy水平在脑梗死组与对照组的分布有显著性差异 [( 2 7.4 2± 34.91) μmoL Lvs( 13.82± 12 .18) μmoL L ,P <0 .0 0 1]。C6 77T位点突变对Hcy有影响 ,其中以TT表型者Hcy水平最高 ,A12 98C位点突变对Hcy无影响 ;logistic回归分析表明 ,C6 77T突变者患脑梗死的OR =1.87。结论　MTHFR基因C6 77T位点多态性与脑梗死的发生相关 ,显著影响Hcy水平 ,可能是脑梗死的一项独立遗传危险因素     

同型半胱氨酸及其代谢酶基因多态性与冠心病的关系

目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平及其代谢酶MTHFR C677T、MTHFR A1298C、MS A2756G、MTRR A66G基因多态性与冠心病的相关性。方法在川东北地区汉族人群中221例冠心病患者(冠心病组)和与之性别、年龄匹配的210例非冠心病患者(对照组)为研究对象。采用Hcy检测试剂盒(速率法)测定两组患者血浆Hcy水平,采用改良多重连接反应检测技术(i MLDR)检测目的基因,进行单核苷酸多态性(SNP)分型,分析两组之间Hcy水平及其Hcy代谢酶基因多态性分布情况。结果 (1)冠心病组血浆Hcy水平明显高于对照组(15.39±6.89μmol/L比12.90±6.44μmol/L,P0.05),Hcy在两组之间比较OR值为1.060(95%CI 1.021~1.100),差异具有统计学意义(P0.05)。(2)MTHFR C677T、MTHFR A1298C、MS A2756G、MTRR A66G在两组之间比较,无论是基因型分布频率还是等位基因分布频率均无统计学差异(P均0.05);基因-基因间交互作用分析发现,这四个基因位点在冠心病的发病过程中不存在交互作用(P0.05);基因-环境间交互作用分析发现,MTHFR C677T与吸烟、甘油三酯之间也不存在交互作用(P均0.05)。(3)血浆Hcy水平在冠心病MTHFR TT基因型组(19.72±11.51μmol/L)最高,且分别高于CC基因型组(13.99±4.77μmol/L,P0.05)及CT基因型组(15.44±6.25μmol/L,P0.05)。结论 Hcy可能增加川东北地区汉族人群冠心病的患病风险,MTHFR C677T TT基因型的冠心病患者血浆Hcy水平较高,未发现MTHFR C677T、MTHFR A1298C、MS A2756G、MTRR A66G基因多态性与冠心病发病相关。     

血浆Hcy及其代谢酶基因多态性与Alzheimer病的关系

目的探讨血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)及其相关代谢酶N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(N5,N10-methylenetetrahydrofolatereductase,MTHFR)胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因多态性与阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)的关系。方法对104例AD患者、100例健康对照组运用高压毛细管电泳紫外检测法测定血浆Hcy水平,采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测MTHFR基因第4外显子C677T、CBS基因第8外显子844ins68的多态性。结果AD患者血浆Hcy(16.18±3.35)μmol/L非常显著高于健康对照者Hcy(12.24±3.96)μmol/L。AD组和对照组受试者间MTHFRC677T和CBS基因844ins68的各基因型分布和等位基因频率均无显著性差异,仅MTHFR的T等位基因与受试者血浆Hcy水平升高有关。结论AD患者的血浆Hcy水平高于健康人群,可能与疾病的发生发展有关;并可能主要由环境因素所致,而非MTHFR和CBS基因变异引起。补充VitB12和叶酸有助于AD的治疗。     

急性脑梗死患者MTHFR基因多态性与血浆同型半胱氨酸水平的关系

目的 探讨急性脑梗死（ACI）患者N5,N10-亚甲四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性与血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平的关系.方法 采用多聚酶链反应2-限制性内切酶片段长度多态性技术（PCR2-RFLP）检测48例ACI患者MTHFR基因C677T位点多态性,同时测定血浆总Hcy及血清叶酸、维生素B12、尿酸（UA）.结果 ACI患者MTHFR基因T/T型频率为35.43％,T/C型频率为56.32％,C/C型频率为8.25％;T等位基因频率为63.59％,C等位基因频率为36.41％.MTHFR基因T/T型ACI患者血浆Hcy显著高于其他两型,T/C型与C/C型血浆Hcy水平较比较无显著差异.Hcy中度与轻度增高者MTHFR基因分布比较,P≤0.05.3组基因型间叶酸、维生素B12及UA水平均无显著差异.结论 ACI患者MTHFR基因C677T突变与Hcy水平显著相关,MTHFR基因纯合突变可能是引起高Hcy的一个重要遗传因素.     

系统性红斑狼疮患者基因组DNA甲基化水平的初步研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者基因组DNA甲基化水平，分析影响基因组DNA甲基化水平的因素。方法 测定26例SLE患者和20名正常对照的同型半胱氨酸(Hcy)、S-腺苷蛋氨酸(SAM)和S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)的水平和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677位的多态性。结果 ①SLE组与对照组相比，SAM明显降低。SAH明显升高，其差异有统计学意义：提示SLE患者基因组DNA甲基化水平明显降低；②SAM与同型半胱氨酸(Hcy)呈负相关，SAH与Hcy呈正相关，相关系数分别为-0．897、0．927，P＜0．01；③MTHFR基因677位C→T的突变不仅导致Hcy水平升高，同时使基因组DNA甲基化水平降低。结论 ①SLE患者普遍有基因组DNA甲基化水平降低：②基因组DNA低甲基化可能与MTHFR基因的突变和高Hcy血症有关。     

老年缺血性脑梗死患者胱硫醚β-合酶基因C572T突变频率的研究

近年来的研究认为,高同型半胱氨酸血症(Hhcy)是动脉粥样硬化(AS)性血管疾病新的独立危险因素[1,2].胱硫醚β合酶(Cystathionine β-synthase,CBS)为同型半胱氨酸(Hcy)代谢途径的关键酶,其编码基因CBS基因突变可引起酶活性改变,从而影响Hcy代谢.CBS C572T是CBS基因的高频率突变位点,在欧美一些国家的人群中比较常见,且突变可导致Hhcy[3～5].     

亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因多态性的研究进展

正近年来,国内外一系列研究证实高同型半胱氨酸血症(HHcy)是心血管疾病的独立危险因子[1]。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是同型半胱氨酸(Hcy)代谢关键酶之一,其基因突变可引起血浆中Hcy水平轻中度升高[2]。现已发现人类MTHFR有15种点突变类型,其中最常见最重要的是C677T的突变。对于不同民族、不同地域人群来说,其基因型分布存在差异。早期发现其基因型并实施有效干预,对于有效控制我国脑卒中及心血管疾病的发生发展具有重     

同型半胱氨酸及亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的关系

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)水平及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的关系。方法:选取新疆哈萨克族高血压病患者189例(高血压病组),血压正常者165例(对照组),应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测MTHFR C677T的基因型,采用酶标免疫吸附检测法检测血浆Hcy水平。结果:高血压病组血浆Hcy水平高于对照组(P<0.05)。高血压病组中,男性血浆Hcy水平高于女性(P<0.05)。2组MTHFR C677T多态位点的基因型和等位基因的频率分布均差异无统计学意义;MTHFR C677T3种基因型的血浆Hcy水平也均差异无统计学意义。Logistic回归分析结果显示,BMI和血浆Hcy水平是新疆哈萨克族高血压病的独立危险因素,而年龄、性别、吸烟史、饮酒史及MTHFR C677T位点多态性不是新疆哈萨克族高血压病的独立危险因素。结论:Hcy是新疆哈萨克族原发性高血压的危险因素,但MTHFR C677T位点突变可能不是影响血浆Hcy水平的重要遗传因素。     

同型半胱氨酸及其相关酶基因多态性与糖尿病周围神经病变的关系

研究对象为 2型糖尿病 (DM )有周围神经病变组 (60例 )、2型DM无周围神经病变组 (4 6例 )和正常对照组 (5 0例 )。分别测定 3组血浆同型半胱氨酸 (Hcy) ,血清叶酸、维生素B12 水平及Hcy代谢关键酶亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)的基因型。结果显示 ,高Hcy及低叶酸、维生素B12 水平与 2型DM患者伴发周围神经病变相关 ,而MTHFR的基因多态性只与DM有关而与DM周围神经病变无相关性。     

MTHFR基因G1793A多态性与青年动脉粥样硬化血栓性脑梗死的相关性研究

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因G1793A多态性与青年动脉粥样硬化血栓性脑梗死(ATCI)的关系。方法选择50例青年ATCI病人作为病例组,同期健康体检者30名作为对照组,应用高通量测序技术检测MTHFR G1793A基因多态性,电化学发光免疫分析技术测定血清叶酸、维生素B12和同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果病例组病人血清Hcy水平明显高于对照组(P0.05),两组MTHFR基因1793位点AA纯合型基因携带者的血清Hcy水平均明显高于GA杂合型和GG野生型基因携带者(P0.05),而GA杂合型和GG野生型基因携带者间的血清Hcy水平差异无统计学意义(P0.05)。结论 MTHFR基因G1793A多态性与血清Hcy水平有相关性,AA纯合型变异可能导致血清Hcy水平升高,但MTHFR基因G1793A多态性与青年ATCI无明显相关性,血清Hcy水平与青年ATCI有相关性。     

类风湿关节炎患者基因组DNA甲基化水平的初步研究

目的研究类风湿关节炎(RA)患者基因组DNA甲基化水平及影响基因组DNA甲基化水平的因素：并分析其与CD4~ T细胞表面LFA-1表达水平的联系,探讨基因组DNA甲基化水平变化与RA发病的关系。方法测定21例RA患者和20名正常对照的血浆Hcy、s-腺苷蛋氨酸(SAM)和s-腺苷同型半胱氨酸(SAH)的水平,CD4~ T细胞表面LFA-1的表达水平,以及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677位的多态性。结果①RA组与对照组相比,SAM明显降低,SAH明显升高,其差异有统计学意义；提示RA患者基因组DNA甲基化水平明显降低；②SAM与Hcy呈负相关,SAH与Hcy呈负相关,相关系数分别为-0．932、0．924,P＜0．01；③RA组CD4~ T细胞表面LFA-1表达较对照组增高,与Hcy呈正相关(r=0．557,P＜0．01),与SAM呈负相关(r=-0．651,P＜0．01)；④MTHFR基因677位C→T的突变不仅导致Hcy水平升高,同时使基因组DNA甲基化水平降低,使CD4~ T细胞表面LFA-1表达增多。结论①RA患者普遍有基因组DNA甲基化水平降低；②基因组DNA低甲基化可能与MTHFR基因的突变和高Hcy血症有关；③基因组DNA低甲基化可能通过影响RA患者的某些基因的表达异常参与疾病的发生发展。     

同型半胱氨酸及代谢酶基因多态性与脑卒中的相关性研究

目的 进一步确定亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、胱硫醚β-合成酶(CBS)基因844ins68、T27796C和甲硫氨酸合成酶(MS)基因A2756G这4种基因突变在脑卒中发病中的意义。方法 选择年龄及性别基本匹配的脑梗死组78例、脑出血组26例、神经系统其他疾病组29例和健康老年组50例，采用酶联免疫分析法测定受检者血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度，并运用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术，检测基因表型。结果 脑梗死组和脑出血组血Hcy浓度明显高于神经系统其他疾病组和健康老年组。CBS844ins68及MSA2756G突变频率较国外报道明显低。此外，C677T纯合突变型的Hcy水平均高于野生型和杂合突变型，CBST27796C基因杂合子突变则可能使Hcy水平降低；而4种基因各组之间基因型频率差异无统计学意义。结论 Hcy水平与脑卒中的发生有一定联系。CBS844ins68和MSA2756G突变可能存在种族或地域差异，MTHFRC677T纯合子突变可能是导致血浆总Hcy(tHcy)水平升高的遗传决定簇，而CBST27796C基因杂合子突变可能引起tHcy水平的降低；4种基因突变符合遗传平衡定律。     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞MTHFR基因mRNA表达的影响及叶酸的拮抗效应

目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCd)5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因mRNA表达的影响及叶酸(FA)可能的干预作用.方法 正常人脐动脉血管平滑肌细胞(HVSMCs)体外堵养,在培养基中加入临床相关浓度(30、100、200、500、1 000 μmol/L Hcy,100 μmol/L Hcy+100 μmol/L FA,500μmol/L Hcy+100 μmol/L FA,100 μmol/L FA)的干预液,并孵育72 h.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定MTHFR mRNA的表达水平.结果 不同浓度Hcy处理HVSMCs后,MTHFR mRNA表达增加,其mRNA表达水平在100μmol/L Hcy时达到高峰,直至极高浓度.Hcy时仍刺激MTHFR mRNA呈高表达,与对照组相比有显著差异.而FA能明显抑制Hcy所引起的MTHFR mRNA 高表达,对正常细胞无显著差异.结论 Hcy可促进人血管平滑肌细胞MTHFR mRNA表达增加.由于MTHFR是促使Hcy转化的关键酶,高Hcy诱导的MTHFR基因mRNA表达增加的效应应是一种代偿性的调节反应.FA可一定程度的拮抗这种效应.     

系统性红斑狼疮与高同型半胱氨酸血症的临床研究

目的　观察系统性红斑狼疮 (SLE)患者血浆中同型半胱氨酸 (Hcy)水平 ,分析影响Hcy的因素和某些心血管因素的变化。 方法　测定 2 7例SLE和 31名正常对照的Hcy、维生素B12 、叶酸、C反应蛋白 (CRP)、氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)、一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)的水平和亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因 6 77位的多态性。结果　①SLE组Hcy水平明显较对照组高 ,其差异有显著性 [SLE组 (19± 7) μmol/L ,对照组 (12± 4 ) μmol/L ,P <0 0 0 1];②Hcy与维生素B12 、叶酸呈负相关 ,相关系数分别为 - 0 76 7和 - 0 6 7,P <0 0 0 0 1;③MTHFR基因 6 77位CT的突变使Hcy水平升高 [CC型 (12 8± 6 2 ) μmol/L ,CT型 (16 0± 2 1) μmol/L ,TT型 (18 9± 5 7) μmol/L ,P<0 0 0 1];TT基因型是高Hcy血症的易感基因 ,相对危险度 (RR) =31 4 9,P <0 0 5 ;TT基因型是SLE的易感基因 ,RR =6 913,P <0 0 5 ;④Hcy水平与NO、MDA、oxLDL呈正相关 ,并与CRP呈正相关。结论　①SLE患者普遍有高Hcy血症。②导致高Hcy血症的原因包括叶酸、维生素B12 的水平降低和MTHFR基因的突变 ,TT型基因是Hcy异常升高的易感基因。③TT型基因也是SLE的易感基因。④高Hcy血症可能通过损伤血管内皮 ,大量产生氧自由基 ,加速低密度