壳聚糖温敏凝胶引导组织再生膜的制备及其细胞生物相容性

目的制备壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)膜,通过体外细胞培养评价新型引导组织再生膜的细胞生物相容性。方法利用CS/β-GP体系的温敏相转变特性,通过分子自组装技术合成温敏凝胶膜,采用红外光谱分析、扫描电镜、拉伸强度实验进行结构和力学测试。通过MTT比色法对体外培养的小鼠成纤维细胞L929生长及增殖情况进行初步评价,共分3组进行对比研究:实验A组(2%CS+0.5 gβ-GP)、实验B组(2%CS+1.0 gβ-GP)及空白对照组。结果 红外光谱分析提示,壳聚糖与β-甘油磷酸钠分子间存在静电作用和化学键结合,形成新的化合物;扫描电镜观察,壳聚糖/β-甘油磷酸钠膜具有多孔的表面结构和内部结构;L929细胞体外培养第3、4、5天,实验组与空白对照组吸光度(A)值组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶具有良好的成膜性,能促进成纤维细胞的体外增殖,是一种有应用前景的新型引导组织再生膜材料。     

新藤黄酸温敏原位凝胶剂的设计与研究

目的制备注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂。方法运用星点设计-效应面优化法确定注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂的最佳处方,并采用高效液相法对其体外释放进行含量测定。结果最佳处方为0.2%新藤黄酸+18.26%泊洛沙姆407(F127)+7.4%泊洛沙姆188(F68)+0.5%苯甲醇,胶凝温度为35.4℃。新藤黄酸温敏原位凝胶的体外释放方程为Y=0.983 5X+4.028,R=0.999 3,符合零级释药。结论星点设计-效应面优化法能很好地优化该制剂处方,优化后处方的体外释药稳定,达到预期要求。     

眼用小檗碱白蛋白纳米粒温敏原位凝胶的制备及性质研究

目的 制备眼用温敏型小檗碱白蛋白纳米粒原位凝胶（Ber-BSA-NPs-Gel）,并对其理化性质进行初步研究。方法 以泊洛沙姆407（F127）和泊洛沙姆188（F68）为凝胶基质,以凝胶胶凝温度为考察指标对处方进行优化;去溶剂化法制备小檗碱白蛋白纳米粒（Ber-BSA-NPs）,冷溶法制备Ber-BSA-NPs-Gel;使用NDJ—1型黏度计测定凝胶黏度;以模拟泪液为释放介质、UV法考察凝胶的体外释放特性。结果 经过处方优化,确定原位凝胶基质的处方为26% F127和4% F68,优化处方在30.9 ℃为自由流动的液体,经泪液稀释后在34.2 ℃能够发生相变形成凝胶。体外释放结果表明Ber-BSA-NPs-Gel具有较好的缓释作用。结论 制备得到的眼用温敏凝胶符合眼部应用要求,具有良好的应用前景。     

布地奈德直肠原位温敏凝胶的处方设计与优化

优化布地奈德直肠原位温敏凝胶的制剂处方。采用冷法配制凝胶溶液,反转试管法测定胶凝温度,以胶凝温度为指标,采用星点设计-效应面法,对泊洛沙姆407(P407)、泊洛沙姆188(P188)以及羟丙甲基纤维素(HPMC)的用量进行优化,并考察在大鼠体内的胶凝情况,以Franz扩散池法考察释放性能。确定的最优处方为布地奈德0.002%,HPMC 0.93%,P188 2.00%,P407 18.31%。优化确定了布地奈德直肠用原位温敏凝胶的制剂处方,其能够在直肠广泛与黏附,并长时间释放药物。     

温度敏感型盐酸小檗碱眼用原位凝胶的制备研究

目的:制备温度敏感型盐酸小檗碱眼用原位凝胶。方法 以泊洛沙姆407和188为温敏材料,采用搅拌子法测定溶液-凝胶相转变温度优化处方;采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱。结果:温度敏感型原位凝胶的胶凝温度随泊洛沙姆407浓度增大而降低,随泊洛沙姆188浓度增加先升高后降低,模拟泪液的稀释可使胶凝温度升高,建立了泪液稀释后相变温度与泊洛沙姆浓度的拟合方程,经Design-Expert软件优化盐酸小檗碱温敏型眼用原位凝胶的处方为25%泊洛沙姆407和4.19%泊洛沙姆188;优化处方在29.7 ℃为自由流动的液体,泪液稀释后在34.5 ℃能够发生相变形成凝胶。结论:该眼用温度敏感凝胶符合眼部应用要求,体现出良好的眼部应用前景。     

眼用N-三甲基壳聚糖包衣胰岛素纳米脂质体原位凝胶的研制及体外释药研究

目的以胰岛素(INS)为模型药物,制备眼用阳离子纳米脂质体-原位凝胶(ISG),并对其相关体外性质及体外释药行为进行考察。方法采用逆向蒸发法制备INS纳米脂质体(INSL),并用N-三甲基壳聚糖(TMC60)进行包衣;根据胶凝温度筛选出泊洛沙姆407的最佳质量浓度;采用无膜溶出模型考察凝胶的体外释药行为。结果 TMC60包衣前的INSL-ISG的平均粒径为(92.36±0.20)nm,Zeta电位为(-19.50±0.30)mV;TMC60包衣后的INSL-ISG的平均粒径为(93.93±0.19)nm,Zeta电位为(13.23±0.15)mV。泊洛沙姆407的最佳质量浓度为25%,经模拟泪液稀释前后的胶凝温度分别为23.9℃和34℃。TMC60-INSL-ISG的药物释放和凝胶溶蚀均呈现良好的零级释放特征。结论 TMC60-INSL-ISG兼有阳离子脂质体和原位凝胶的优势,延缓了药物的释放,为下一步探究提高其角膜滞留性奠定了基础。     

N-三甲基壳聚糖对睾酮凝胶在兔体内药动学的作用研究

目的 研究N-三甲基壳聚糖(N-trimethyl chitosan,TMC)对睾酮凝胶在兔体内药动学的作用,考察TMC的透皮吸收促进作用效果.方法 用壳聚糖及碘甲烷为主要原料,合成季铵化程度分别为40%和60%的TMC,即TMCA0和TMC60,通过1HNMR确定其季铵化程度.以泊洛沙姆P407为基质制备4份凝胶,以睾酮为模型药物,以月桂氮(廾卓)酮(2%)为阳性对照,以不加促渗剂为阴性对照,另两份凝胶分别含TMC40和TMC60各5%作为促渗剂.经皮给药后采用RP-HPLC测定兔血浆中的睾酮浓度,计算药动学参数,对4种凝胶进行比较,考察TMCA0,TMC60 的促渗效果.结果 经1H-NMR确定合成得到的TMCA0,TMC60季铵化程度分别为38.8%和67.2%.主要药动学参数tmax,ρmax,Ka,AUC经方差分析及双单侧t检验后,TMC60较空白组及月桂氮(廾卓)酮组各参数均具有显著性差异(P＜0.05),TMC40较空白组有明显促进作用(P＜0.05),较月桂氮(廾卓)酮组除参数Ka外无显著性差异(P＞0.05).结论 TMC60具有显著的促进睾酮凝胶透皮吸收作用,TMCA0较空白组促进吸收作用明显,但效果与2%月桂氮(廾卓)酮相比无显著性差异.     

辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后木兰脂素血浆含量的测定及药动学研究

目的 建立辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后大鼠血浆中木兰脂素的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)检测方法,并探讨其在大鼠体内的药动学特性.方法 大鼠滴鼻给予辛鹅鼻用温敏原位凝胶(1.5 mL/kg)后于不同...     

壳聚糖-β-磷酸三钙复合层状支架的制备与研究

目的 通过合成壳聚糖-β-磷酸三钙(CS-β-TCP)支架,测试其力学性能、生物相容性和体外成骨向分化能力,研究其作为生物支架修复骨缺损的可能性。方法 通过双向冻干技术制备CS-β-TCP支架,使用扫描电子显微镜电镜(SEM)、能量分散光谱(EDS)和X线衍射仪(XRD)对该支架进行结构表征、元素分布和组成成分分析,力学万能仪测试其压缩强度。通过CCK-8法和活死染色探究其生物相容性,采用荧光染色法检测复合组(CS-β-TCP)支架的细胞黏附生长情况。qRT-PCR法检测成骨相关基因：骨形态发生蛋白(BMP2),RUNX相关转录因子2(RUNX2)和Ⅰ型胶原(COL1)的表达,ALP染色检测BMSCs的成骨分化效果。结果 扫描电镜结果显示CS-β-TCP支架呈平行排列的薄层状结构,疏松多孔,β-TCP颗粒均匀的分布在壳聚糖骨架上,具有良好的机械性能,CS-β-TCP支架的CCK-8结果与对照组无明显差异,活死染色结果表明复合组支架上细胞具有较高的细胞活性。qRT-PCR和ALP结果表明复合组支架体外具有一定的骨诱导能力,能够促进间充质干细胞的成骨向分化。结论 复合组支架具备优异的机械性...     

地塞米松磷酸钠温敏凝胶的制备

目的设计和制备地塞米松磷酸钠(dexamethasone sodium phosphate,DSP)温度敏感原位凝胶,为其局部应用奠定基础。方法优选处方,考察各种附加剂对胶凝温度的影响,调节基质浓度以得到适宜的胶凝温度。采用差示扫描量热法(DSC)考察胶凝过程的热效应。结果确定以泊洛沙姆407为基质制备DSP温敏凝胶,得到优化处方:质量分数分别为14.1%的泊洛沙姆407,0.2%的透明质酸,10%的甘油,15%的丙二醇和2%的DSP。DSC测得其胶凝温度为26℃,而且胶凝过程热效应极低,焓变值为0.032 J.g-1.K-1。结论制备的DSP温敏凝胶在室温下为流体,在体温条件下可发生相变成为凝胶,值得进一步开发研究。     

原位凝胶传递系统的研究进展

目的介绍原位凝胶的研究和发展情况。方法检索分析文献资料,并进行综合、整理与归纳。结果原位凝胶作为一种新型药物传递体系,在眼部给药,鼻腔给药,注射给药和口服给药方面有着广泛的应用。结论原位凝胶虽还有一些问题有待解决,但却是一个很有发展潜力的药物传递系统。     

氢溴酸后马托品原位凝胶刺激性和药效学研究

目的:研究氢溴酸后马托品原位凝胶的眼刺激性和药效作用。方法:18只家兔被随机分为两组,分别进行眼刺激性试验和药效学研究。每组再分成氢溴酸后马托品原位凝胶组、氢溴酸后马托品滴眼液组和生理盐水对照组3个亚组,裂隙灯显微镜观察眼局部反应情况,斜视尺测量不同时间点瞳孔直径。结果:氢溴酸后马托品原位凝胶多次给药后,裂隙灯显微镜观察家兔眼角膜无混浊,虹膜和结膜未见红肿、充血、肿胀等异常现象。组织病理学检查显示,家兔眼给药后,与生理盐水组相比,给药组组织病理学改变无明显差异。药效学结果显示,氢溴酸后马托品原位凝胶散瞳时间长达8h。结论:氢溴酸后马托品原位凝胶是安全的,并能够有效地延长药物释放时间。     

重黄温敏凝胶中重楼皂苷Ⅵ含量测定及体外释放研究

[目的]建立重黄温敏凝胶中重楼皂苷VI的含量测定方法,并进行体外释放研究。[方法]采用HPLC-ELSD法,色谱柱为CAPCELL PAK C8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~15 min,25%~35%A;15~35 min,35%~40%A;35~40 min,40%~60%A),柱温25℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL,漂移管温度92℃,载气流速2.9 L/min。以体外溶蚀法,对重黄温敏凝胶的累积释放情况,进行考察。[结果]重楼皂苷VI在0.4300~4.3000 mg范围内线性良好,lgA=1.7969lgC+4.3989(r2=0.9999),定量限为0.0540 mg,平均回收率为101.70%(RSD=1.17%,n=9),体外释放符合Higuchi方程。[结论]该方法方便、稳定、高效,可用于重黄温敏凝胶体外释放研究。     

地塞米松磷酸钠温度敏感原位凝胶的体外释药特性

目的考察地塞米松磷酸钠温度敏感原位凝胶的体外释药特性。方法采用旋转流变仪测定黏度随温度的变化;无膜溶出法测定地塞米松磷酸钠温度敏感原位凝胶的溶蚀行为,以pH7．2的磷酸盐缓冲溶液为释放介质,温度（37±0．5）℃,水平振荡（频率50r／min,振幅2．5cm）;采用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）测定凝胶的释药行为,色谱柱：DiamonsilTM C18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相：三乙胺水溶液-甲醇-乙腈（38：28：34）,流速1．0mL／min,紫外检测波长242nm。结果当温度接近相转变温度时,黏度陡然上升。以2mlpH7．2的磷酸盐缓冲溶液为释放介质,体外凝胶的溶蚀和药物的释放均遵循零级动力学方程,其累积溶蚀百分量（Q1）和累积释放百分量（Q2）对时间t的回归方程分别为Q1=0．8238t（r=0．999,P〈0．01）和Q2=0．8431t（r=0．999,P〈0．01）,且2者线性相关,Q2=1．0232Q,（r=0．998,P〈0．01）。结论采用无膜溶出法测定地塞米松磷酸钠温度敏感型原位凝胶的累积溶蚀百分量与其累积释放百分量相等,体外的溶蚀行为与释放行为遵循零级动力学方程,二者间存在良好的线性关系。     

盐酸小檗碱离子型眼用原位凝胶的研究*

[目的]制备并评价眼用盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂.[方法]采用结冷胶作为离子敏感型高分子材料制备盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂;黏度计考察其流变学特征;采用荧光示踪法测定凝胶剂的眼部滞留时间;同体自身对照法考察凝胶剂的眼部刺激性.[结果]盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂为假塑性流体,对兔眼无刺激;该原位凝胶剂的滞留时间为3h,比滴眼液增加了6倍.[结论]盐酸小檗碱离子敏感性原位凝胶剂的刺激性低,眼部滞留时间长,具有一定的缓释效果.     

原位凝胶材料OALA对顺铂生物活性的影响

目的 观察原位凝胶材料OALA对肿瘤化疗药物顺铂生物活性的影响,从而为其负载DDP提供实验依据.方法 采用MTT法评价不同浓度的OALA凝胶材料对肿瘤细胞(A549人肺癌细胞、MCF-7人乳腺癌细胞、LOVO人结肠癌细胞)增殖能力的影响;采用MTT法评价OALA凝胶材料对DDP体外细胞毒性的影响;采在不同剂量的DDP作用下及以OALA溶液静脉注射干预,观察动物的死亡率,并与单纯注射DDP组动物死亡率进行比较;建立以EAC荷瘤小鼠模型,观察一定剂量的DDP及其联用OALA凝胶材料对小鼠肿瘤生长状况的影响,采用肿瘤生长抑制率作为其评价指标.结果 随着OALA浓度的增加其对A549、MCF-7及LOVO细胞的增殖抑制作用逐渐增强,具有明确的量效关系;30μg/mL的OALA合用DDP后不会增加或降低药物本身的细胞毒性;OALA能够增加DDP低剂量组动物的死亡率,但对DDP中、高剂量组动物的死亡率无明显影响;OALA对DDP本身的抗肿瘤活性无影响.结论 OALA对顺铂的生物活性基本没有影响.     

复方核黄素眼用即型凝胶的兔眼内药效学研究*

目的 考察复方核黄素眼用即型凝胶的药效作用。方法 在钴蓝光下观察经荧光素纳染色后的复方核黄素眼用即型凝胶在新西兰兔眼表的滞留时间;采用眼刺激评分量表进行评分,考察复方核黄素眼用即型凝胶单次给药后1、24、48和72 h的眼表刺激性及多次给药后第7和14天对眼表造成的累积或持续损害;用0.25%氢氧化钠溶液复制角膜损伤模型,将12只新西兰兔随机分为模型组、滴眼液组和即型凝胶组,模型复制后每组兔右眼分别滴入相应的药物,左眼作为正常空白对照。分别在模型复制后第1、3、5、7天观察 兔的眼角膜损伤恢复情况,第7天将兔处死,取角膜组织进行HE染色,观察组织形态学变化,评估药物对角膜损伤恢复的疗效。结果 复方核黄素眼用即型凝胶眼表滞留时间（306.0±33.3）s比滴眼液的眼表滞留时间（9.67±2.52）s长（P?<0.05）;即型凝胶对兔眼表无刺激性;模型复制成功后,即型凝胶组与模型组比较,损伤恢复状况在第5和第7天差异均有统计学意义（P?<0.05）;模型复制后第7天,与正常空白对照比较,即型凝胶组和滴眼液组的眼表损伤已逐渐恢复。结论 复方核黄素眼用即型凝胶能延长药物的眼表保留时间,不具有眼部刺激性,可促进角膜损伤恢复。     

布洛芬包合物凝胶体外释药行为及体内药代动力学研究

目的 制备布洛芬(ibuprofen,IBU)包合物原位凝胶,并考察体外释药行为和体内药代动力学特点.方法 用冷冻干燥法制备布洛芬.羟丙基-β-环糊精包合物,以泊洛沙姆P407及P188为基质制备温度敏感型原位凝胶,无膜溶出法考察包合物原位凝胶体外释药情况,新两兰白兔肌注布洛芬溶液及包合物原位凝胶,高效液相色谱法(HPLC)测定血药浓度,3P97软件计算药代动力学参数.结果 制得的包合物平均载药量10.24%,体外凝胶溶蚀及药物释放均符合零级动力学,与布洛芬溶液相比,布洛芬包合物原位凝胶能明显使tmax推迟,Cmax降低,t1/2延长,药时曲线下面积(AUC)显著增加.结论 布洛芬包合物原位凝胶体内和体外均具有缓释效果,可作为一种优良的缓释注射剂,更好地发挥布洛芬解热镇痛抗炎作用,同时也为开发难溶性药物的温度敏感原位凝胶提供了借鉴.     

Effect of peritumoral injection of boanmycin hydrochloride within temperature-sensitive in situ gel using Hep-G2 hepatoma nude mice model

Background  Boanmycin hydrochloride, a new antitumor agent, has a short half-life and fast clearance speed in vivo. The aim of this research was to investigate the effectiveness of peritumor injection of boanmycin hydrochloride within temperature-sensitive gel in situ using Hep-G2 hepatoma nude mice model.

Methods  Nude mice with human Hep-G2 tumor in right flank were randomly divided into four groups: normal saline group, in situ gel only group, boanmycin hydrochloride in situ saline group, and boanmycin hydrochloride in situ gel group, and were treated with injection of corresponding agents into peripheral tissue of the tumor. The volume of the tumor and the body weight of the mice were regularly measured, and tumor growth curve was generated. The size, internal echo, and blood flow of the tumors were observed by color Doppler ultrasonography. Histopathologic changes of the tumor after treatment were observed under both optical and transmission electron microscopy.

Results  The tumor growth was significantly inhibited by peritumoral therapy in boanmycin hydrochloride in situ gel group with the tumor inhibitory rate of 86.76%. The blood flow of the tumor was still seen in both normal saline group and in situ gel only group on color Doppler ultrasound. Punctate calcification and dotted blood flow were seen in boanmycin hydrochloride group; however, there was massive calcification and no blood flow in the tumor in the boanmycin hydrochloride in situ gel group. Large areas of necrosis and apoptotic cells were shown by microscopic observation in boanmycin hydrochloride in situ gel group.

Conclusion  Temperature-sensitive boanmycin hydrochloride in situ gel can effectively delay the release of boanmycin hydrochloride and increase its anticancer effects for liver cancer in animal model.