草果知母汤对癫痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的:观察中药复方草果知母汤对癫痫大鼠海马神经元超微结构的影响。方法:实验于2005-03/05在广西中医学院中心实验室和广西医科大学电镜室完成。选择雄性SD大鼠32只,随机数字表法分为4组,即正常组、模型组、中药组和西药组;除正常组外,其他组动物均以戊四唑慢性诱导复制癫痫模型,造模同时给药,中药组每天给予草果知母汤(草果10g,知母10g,厚朴10g,半夏10g,黄芩10g,甘草10g等,广西中医学院第一附属医院研制,批号:20050108)灌胃,5g/kg;西药组每天给予苯巴比妥混悬液灌胃,60mg/kg;模型组和正常组每天均以双蒸水灌胃2mL/kg;1次/d,持续5周。从第2周开始,每周末造模后1h,各组抽取2只大鼠,采用透射电镜观察海马区神经元超微结构。结果:纳入大鼠32只,实验过程中,模型组有2只大鼠因惊厥发作而死亡;中药组、西药组各有1只大鼠不明原因死亡,进入结果分析28只。①模型组海马区神经元超微结构损伤显著,从第3周开始,神经元数目逐渐减少,至第5周,海马区出现较多的暗细胞,胶质细胞数目增多,神经元出现髓样变性,周围的线粒体肿胀,线粒体棘及其上的颗粒明显减少,滑面内质网空泡化,粗面内质网膨胀,其上的核糖体数量减少,高尔基体肿胀,胞内溶酶体数量增多,染色质浓染,核仁浓缩、变小,突触的数量明显减少,突触间隙及前后突触体内的囊泡的数量明显减少。②中药组、西药组神经元数目略减少,形态结构未见明显改变。③正常组未见明显改变。结论:戊四唑慢性诱导癫痫发作可致大鼠海马区神经元超微结构明显损伤,草果知母汤具有良好地抗损伤作用。     

草果知母汤对癫痫大鼠行为和海马神经元显微结构的影响

目的：观察中药复方草果知母汤对癫痫大鼠行为和脑海马神经元显微结构的影响。 方法：实验于2005-03／05在广西中医学院中心实验室完成。选择SD雄性大鼠110只，按随机数字表法分成4组，草果知母汤组、苯巴比妥组、模型组各34只（每组10只用于电镜），正常对照组8只（2只用于电镜）。除正常对照组，其他3组均以戊四唑慢性点燃癫痫模型。各组在造模同时即开始给药，草果知母汤组予草果知母汤液（由草果，知母，厚朴，半夏，黄芩，甘草等组成）5g／（kg&;#183;d）灌胃，苯巴比妥组予苯巴比妥混悬液60mg／（kg&;#183;d）灌胃，模型组和正常对照组均以双蒸水灌胃2mL／（ks&;#183;d）；1次／d，持续5周。采用Smialowki 6级评分法进行行为学观察（1级，节律性点头或头部颤搐；6级，强直性惊厥），采用苏木精-伊红染色和光镜技术观察大鼠脑海马神经元的显微结构。 结果：110只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①大鼠行为学观察结果：除正常对照组外，各组大鼠均出现惊厥行为，点燃率为83％。随着点燃周数的增加，惊厥级别不断增高，尤以模型组最为显著，第5周时草果知母汤组、苯巴比妥组惊厥级别均显著低于模型组[2．30&;#177;0．54，1．85&;#177;0.46，5．2&;#177;0.80（P〈0．05）]。②大鼠脑海马神经元数目及显微结构：从第4周开始，与正常对照组比较，模型组脑海马区神经元数目明显减少（P〈0．05-0．01）；与模型组比较，草果知母汤组、苯巴比妥组脑海马区神经元数目显著增多（P〈0．05-0．01），后两组差异未见显著性意义（P〉0.05）。与正常对照组比较，模型对照组的神经元出现不同程度的变性、坏死，重者伴有神经元凋亡；草果知母汤组、苯巴比妥组改变不明显。 结论：草果知母汤对癫痫大鼠有明显的抗惊厥作用，其抗痫疗效与苯巴比妥相似，且能较好地抑制癫痫引起的脑海马神经元形态结构的改变。     

草果知母汤对癫痫大鼠行为和海马神经元显微结构的影响

目的:观察中药复方草果知母汤对癫痫大鼠行为和脑海马神经元显微结构的影响。方法:实验于2005-03/05在广西中医学院中心实验室完成。选择SD雄性大鼠110只,按随机数字表法分成4组,草果知母汤组、苯巴比妥组、模型组各34只(每组10只用于电镜),正常对照组8只(2只用于电镜)。除正常对照组,其他3组均以戊四唑慢性点燃癫痫模型。各组在造模同时即开始给药,草果知母汤组予草果知母汤液(由草果,知母,厚朴,半夏,黄芩,甘草等组成)5g/(kg·d)灌胃,苯巴比妥组予苯巴比妥混悬液60mg/(kg·d)灌胃,模型组和正常对照组均以双蒸水灌胃2mL/(kg·d);1次/d,持续5周。采用Smialowki6级评分法进行行为学观察(1级,节律性点头或头部颤搐;6级,强直性惊厥),采用苏木精-伊红染色和光镜技术观察大鼠脑海马神经元的显微结构。结果:110只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①大鼠行为学观察结果:除正常对照组外,各组大鼠均出现惊厥行为,点燃率为83%。随着点燃周数的增加,惊厥级别不断增高,尤以模型组最为显著,第5周时草果知母汤组、苯巴比妥组惊厥级别均显著低于模型组[2.30±0.54,1.85±0.46,5.21±0.80(P<0.05)]。②大鼠脑海马神经元数目及显微结构:从第4周开始,与正常对照组比较,模型组脑海马区神经元数目明显减少(P<0.05～0.01);与模型组比较,草果知母汤组、苯巴比妥组脑海马区神经元数目显著增多(P<0.05～0.01),后两组差异未见显著性意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型对照组的神经元出现不同程度的变性、坏死,重者伴有神经元凋亡;草果知母汤组、苯巴比妥组改变不明显。结论:草果知母汤对癫痫大鼠有明显的抗惊厥作用,其抗痫疗效与苯巴比妥相似,且能较好地抑制癫痫引起的脑海马神经元形态结构的改变。     

草果知母汤对戊四唑慢性诱导癫痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子p53蛋白表达的影响

目的：动态观察具有调理脾胃气机作用的草果知母汤在阻抗癫痫形成中对大鼠大脑海马区凋亡调控因子p53蛋白表达的影响，分析其抗痫作用的分子生物学途径。方法：实验于2005—03／12在广西中医学院基础医学院中医实验中心完成。选择雄性SD大鼠82只，按随机数字表法分为4组，模型组26只，中药治疗组及西药治疗组各25只，正常对照组6只。模型组及中、西药治疗组均以戊四唑亚惊厥剂量35mg／kg腹腔注射，1次／d，持续4周，诱导癫痫模型。正常对照组同法给予相同剂量的生理盐水。各组在造模同时即开始给药，中药治疗组予草果知母汤液（由草果、知母、厚朴、半夏、黄芩等组成）5g／（kg&;#183;d）灌胃；西药治疗组予苯巴比妥混悬液60mg／（kg&;#183;d）灌胃；模型组和正常组胃饲双蒸水，2mL／（kg&;#183;d）；1次／d，持续5周。采用Smialowki 6级评分法进行行为学观察（1级，节律性点头或头部颤搐；6级，强直性惊厥）。正常对照组在实验第5周末取材，其他各组分别在实验第2，3，4，5周末取材。采用免疫组化PV-600二步法标记p53蛋白阳性细胞，比较各组大鼠脑海马区p53蛋白表达值在癫痫慢性形成过程中的变化。结果：进入结果分析78只，模型组、中药治疗组及西药治疗组各24只，正常对照组6只。①癫痫形成不同时间段惊厥等级得分：模型组大鼠1周后逐渐出现癫痫发作，并随点燃次数不断增强，至第4周出现6级大发作；中、西药治疗组发作次数和级别明显降低，最高级别为4级，且两组间发作级别、次数相比差异无显著性意义（P〉0．05）。②凋亡调控因子p53蛋白标记的阳性细胞数：至实验第3，4，5周，模型组大鼠脑海马区p53蛋白表达数量显著高于正常对照组（P〈0．05～0．01），中、西药治疗组大鼠脑海马区p53蛋白表达数量均显著低于模型组（P〈0．05～0．01）；在相同时间段（2，3，4，5周）中、西药治疗组间比较差异均无显著性意义（P〉0．05）。结论：草果知母汤可有效地阻断癫痫发作，其抗痫作用可能与抑制癫痫形成过程中大鼠脑内凋亡调控因子p53蛋白表达有关。     

草果知母汤对戊四唑慢性诱导癫痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子p53蛋白表达的影响

目的:动态观察具有调理脾胃气机作用的草果知母汤在阻抗癫痫形成中对大鼠大脑海马区凋亡调控因子p53蛋白表达的影响,分析其抗痫作用的分子生物学途径。方法:实验于2005-03/12在广西中医学院基础医学院中医实验中心完成。选择雄性SD大鼠82只,按随机数字表法分为4组,模型组26只,中药治疗组及西药治疗组各25只,正常对照组6只。模型组及中、西药治疗组均以戊四唑亚惊厥剂量35mg/kg腹腔注射,1次/d,持续4周,诱导癫痫模型。正常对照组同法给予相同剂量的生理盐水。各组在造模同时即开始给药,中药治疗组予草果知母汤液(由草果、知母、厚朴、半夏、黄芩等组成)5g/(kg·d)灌胃;西药治疗组予苯巴比妥混悬液60mg/(kg·d)灌胃;模型组和正常组胃饲双蒸水,2mL/(kg·d);1次/d,持续5周。采用Smialowki6级评分法进行行为学观察(1级,节律性点头或头部颤搐;6级,强直性惊厥)。正常对照组在实验第5周末取材,其他各组分别在实验第2,3,4,5周末取材。采用免疫组化PV-600二步法标记p53蛋白阳性细胞,比较各组大鼠脑海马区p53蛋白表达值在癫痫慢性形成过程中的变化。结果:进入结果分析78只,模型组、中药治疗组及西药治疗组各24只,正常对照组6只。①癫痫形成不同时间段惊厥等级得分:模型组大鼠1周后逐渐出现癫痫发作,并随点燃次数不断增强,至第4周出现6级大发作;中、西药治疗组发作次数和级别明显降低,最高级别为4级,且两组间发作级别、次数相比差异无显著性意义(P>0.05)。②凋亡调控因子p53蛋白标记的阳性细胞数:至实验第3,4,5周,模型组大鼠脑海马区p53蛋白表达数量显著高于正常对照组(P<0.05～0.01),中、西药治疗组大鼠脑海马区p53蛋白表达数量均显著低于模型组(P<0.05～0.01);在相同时间段(2,3,4,5周)中、西药治疗组间比较差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:草果知母汤可有效地阻断癫痫发作,其抗痫作用可能与抑制癫痫形成过程中大鼠脑内凋亡调控因子p53蛋白表达有关。     

草果知母汤对戊四唑慢性诱导癫痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:动态观察具有调理中焦脾胃气机作用的草果知母汤在阻抗癫痫形成中对大鼠海马区凋亡调控基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨其抗癫痫作用的分子生物学机制。方法:实验于2005-03/12在广西中医学院基础医学院中医实验中心完成。选择雄性SD大鼠82只,按随机数字表法分为4组:模型组26只,中药治疗组及西药治疗组各25只,正常对照组6只。除正常对照组外,其余各组均以戊四唑亚惊厥剂量35mg/kg腹腔注射诱导癫痫模型,1次/d,持续4周。正常对照组同法给予相同剂量的生理盐水。中药治疗组予草果知母汤(由草果、知母、厚朴、半夏、黄芩等组成)5g/(kg·d)灌胃;西药治疗组给予苯巴比妥混悬液60mg/(kg·d)灌胃;模型组和正常对照组胃饲双蒸水,2mL(kg·d),1次/d,持续5周。采用免疫组化PV-600二步法标记bcl-2、bax蛋白阳性细胞,动态观察各组大鼠海马区Bcl-2、Bax蛋白表达值在癫痫形成过程中的变化。结果:模型组2只因惊厥大发作抽搐致死,中、西药治疗组各死亡1只,解剖无特殊发现,死亡原因不明,共78只大鼠进入结果分析。①模型组大鼠1周后逐渐出现癫痫发作,并随着点燃次数的增加而不断增强,至第4周出现6级大发作;中、西药治疗组发作次数和级别明显降低,最高级别为4级,且两组间发作级别、次数相比差异不显著(P>0.05)②随着点燃周次的增加,Bcl-2蛋白表达呈不断减少的趋势,模型组与正常对照组比较,在实验第3,4,5周,明显低于正常对照组(P<0.05～0.01),中、西药治疗组大鼠海马区Bcl-2蛋白表达数量均明显高于模型组(P<0.05～0.01);在相同时间段(2、3、4、5周),中、西药治疗组间比较,差异不显著(P>0.05)。③bax蛋白表达数随着点燃次数增加呈不断增多的趋势,至实验第3,4,5周,模型组大鼠海马区Bax蛋白表达数量明显高于正常对照组(P<0.05～0.01),中、西药治疗组大鼠海马区Bax蛋白表达数量均明显高于模型组(P<0.05～0.01);在相同时间段(2、3、4、5周),中、西药治疗组间比较,差异不显著(P>0.05)结论:草果知母汤可有效地阻断癫痫发作,其抗痫作用可能与其干预癫痫形成中大鼠脑内凋亡调控因子Bcl-2、Bax蛋白表达有关。     

侧脑室内注射海仁酸建立慢性大鼠颞叶癫痫模型

目的：观察侧脑室内注射海仁酸建立慢性颞叶癫痫大鼠模型的稳定性。方法：实验于2004-03／2005-05在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室完成。选择清洁级SD大鼠40只，雌雄各半。按性别对等比例分为2组，模型组和对照组各20只。模型组大鼠制作慢性颞叶癫痫动物模型，应用立体定向技术，前囟点后1 mm、矢状线旁2 mm（向左或向右）为进针位置。以3 μL／min的速度向该侧侧脑室内注射1g／L的海仁酸溶液15-20 μL，约5min，置留5min。对照组大鼠侧脑室内注入等量生理盐水。观察动物模型的行为学变化，按Ⅴ级癫痫行为标准分级：Ⅰ级：面部肌肉痉挛表现为咀嚼运动；Ⅱ级：颈部肌肉痉挛表现为点头运动；Ⅲ级：一侧前肢阵挛；Ⅳ级：站立伴双前肢阵挛；Ⅴ级：在Ⅳ级的基础上身体向后倒下。根据大癫痫症状表现分为3期：急性期（手术后1-2d）、潜伏期（急性期后10d-3个月）、慢性期（3个月以后）。动态监测动物模型脑电图的变化，并通过光镜和电镜观察不同时期脑海马结构的组织学改变。结果：手术中两组各死亡1只，解剖后发现都是死于颅内出血，模型组1只大鼠死于癫痫持续状态，进入结果分析模型组和对照组分别为18和19只。①行为学观察结果：模型组大鼠在急性发作期出现Ⅳ级以上的癫痫行为，慢性期出现Ⅰ～Ⅲ级的癫痫行为。②脑电图监测结果：模型组大鼠脑电图记录到明显的癫痫样波，急性期表现为丛集性波，慢性期表现为散在发作的棘波，与急性期显著不同的是此期不只进针侧颞叶存在癫痫灶，而是两侧同时同等的存在。③脑海马区组织结构的改变：光镜下可见大量凋亡和固缩的神经元，电镜下发现暗细胞增多及细胞器的水肿样改变。④模型组和对照组大鼠的病死率相近[2只，1只，（P〉0.05）]。结论：大鼠侧脑室内注射海仁酸后，很快引起对侧海马部位的放电，这与人类癫痫中的镜像病灶类似。而且可以表现出癫痫样的行为学和病理学改变，病死率较低，因此，侧脑室内注射微量的海仁酸能建立稳定的慢性颞叶大鼠癫痫模型。     

川芎嗪对急性癫痫大鼠弓状核神经元损伤的保护作用

目的:研究川芎嗪对急性癫痫大鼠弓状核神经元损伤中的保护作用。方法:30只SD大鼠按随机数字表法随机分为对照组、癫痫组和治疗组,采用光、电镜技术和形态计量方法对弓状核神经元进行形态定量研究。结果:①3组间神经元胞体的面积分数、面数密度、神经元胞体和胞核的等效直径无显著性变化。②对照组、癫痫组和治疗组大鼠弓状核暗神经元细胞器体积分数比较:线粒体犤(5.82±0.91),(3.22±0.66),(5.88±0.43)%犦(F=6.89,P<0.05)、粗面内质网犤3.66±0.35),(5.72±0.79),(3.84±0.36)%犦(F=25.28,P<0.05)和溶酶体犤(1.82±0.53),(3.68±0.72),(2.28±0.49)%犦(F=24.64,P<0.05)的体积分数差异有显著性意义。经SNK检验显示,癫痫组线粒体体积分数下降(q=9.96,P<0.05),粗面内质网(q=10.72,P<0.05)和溶酶体(q=7.15,P<0.05)的体积分数增加,其余未见明显差异(q≤3.08,P<0.05)。③治疗组和对照组间暗细胞各细胞器的体积分数和面数密度差异无显著性意义(F≤3.54,P>0.05)。结论:川芎嗪对癫痫脑损伤具有保护作用。     

川芎嗪对癫痫大鼠大脑神经元内氏小体的影响

背景:川芎嗪能对抗中枢神经系统的损伤作用,内氏小体结构的变化可作为神经元受损的标志.目的:探讨川芎嗪对癫痫大鼠大脑皮质神经元内氏小体结构及数目的影响.设计:观察对比实验.单位:咸宁学院医学院生理学教研室.材料:实验于2004-09/2005-03在华中科技大学同济医学院解剖学教研室完成.选择正常健康SD大鼠40只,三四月龄,体质量(250±50)g,雌雄不拘.方法:大鼠麻醉后开颅,暴露大脑皮质记录区域,采用BL-410生物功能实验系统记录左右两侧脑电,应用青霉素诱发青霉素致痫组和川芎嗪10 mg/kg,20 mg/kg,40 mg/kg组大鼠大脑皮质癫痫样放电.手术对照组在麻醉开颅手术1 h后取大脑;青霉素致痫组在青霉素诱发癫痫1 h后取大脑;川芎嗪10 mg/kg,20 mg/kg,40 mg/kg组在青霉素诱发癫痫放电稳定后,再分别腹腔注射川芎嗪10 mg/kg,20 mg/kg,40mg/kg,待抑制作用最明显时取大脑.分别制备脑组织切片,显示大脑皮质神经元内氏小体应用Thionine硫堇染色法,光镜下观察内氏小体结构的变化.采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告系统对内氏小体染色结果进行定量检测,以每组标本15个视野吸光度的平均值作为该组内氏小体染色平均吸光度的测量值.主要观察指标:各组大鼠大脑皮质神经元内内氏小体的结构及数目变化.结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元内氏小体结构的比较:手术对照组可见许多层深蓝色染色的块状或颗粒状内氏小体.青霉素致痫组内氏小体全部溶解或消失.川芎嗪10 mg/kg组内氏小体部分或全部溶解或消失.川芎嗪20 mg/kg组内氏小体数目较青霉素致痫组及川芎嗪10 mg/kg组明显增多.川芎嗪40 mg/kg组可见染成深蓝色、分布均匀呈块状或颗粒状的内氏小体,与手术对照组比较,结构基本恢复正常.②各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元胞质内内氏小体染色平均吸光度的比较:青霉素致痫组的平均吸光度显著低于手术对照组[0.033±0.002,0.756±0.035(t=4.93,P＜0.01)].川芎嗪20,40 mg/kg组的平均吸光度显著高于青霉素致痫组[0.435±0.011,0.658±0.029(t=2.98,5.32,P＜0.01)].川芎嗪40 mg/kg组与手术对照组的平均吸光度相近(t=1.75,P＞0.05).结论:川芎嗪能显著提高癫痫大鼠神经元小体的含量.癫痫的发病过程可能与大脑神经元内氏小体的结构和含量的变化有密切关系,而川芎嗪能使神经元内氏小体的结构和含量得以恢复,调节内氏小体的功能,从而抑制癫痫发作.     

川芎嗪对癫痫大鼠大脑神经元内氏小体的影响

背景：川芎嗪能对抗中枢神经系统的损伤作用，内氏小体结构的变化可作为神经元受损的标志。目的：探讨川芎嗪对癫痫大鼠大脑皮质神经元内氏小体结构及数目的影响。设计：观察对比实验。单位：咸宁学院医学院生理学教研室。材料：实验于2004—09／2005—03在华中科技大学同济医学院解剖学教研室完成。选择正常健康SD大鼠40只，三四月龄，体质量（250&;#177;50）g，雌雄不拘。方法：大鼠麻醉后开颅，暴露大脑皮质记录区域，采用BL-410生物功能实验系统记录左右两侧脑电，应用青霉素诱发青霉素致痫组和川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组大鼠大脑皮质癫痫样放电。手术对照组在麻醉开颅手术1h后取大脑；青霉素致痫组在青霉素诱发癫痫1h后取大脑；川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组在青霉素诱发癫痫放电稳定后，再分别腹腔注射川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg，待抑制作用最明显时取大脑。分别制备脑组织切片，显示大脑皮质神经元内氏小体应用Thionine硫堇染色法，光镜下观察内氏小体结构的变化。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告系统对内氏小体染色结果进行定量检测，以每组标本15个视野吸光度的平均值作为该组内氏小体染色平均吸光度的测量值。主要观察指标：各组大鼠大脑皮质神经元内内氏小体的结构及数目变化。结果：40只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元内氏小体结构的比较：手术对照组可见许多层深蓝色染色的块状或颗粒状内氏小体。青霉素致痫组内氏小体全部溶解或消失。川芎嗪10mg／kg组内氏小体部分或全部溶解或消失。川芎嗪20mg／kg组内氏小体数目较青霉素致痫组及川芎嗪10mg／kg组明显增多。川芎嗪40mg／kg组可见染成深蓝色、分布均匀呈块状或颗粒状的内氏小体，与手术对照组比较，结构基本恢复正常。②各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元胞质内内氏小体染色平均吸光度的比较：青霉素致痫组的平均吸光度显著低于手术对照组[0．033&;#177;0．002，0．756&;#177;0．035（t=4．93，P〈0．01）]。川芎嗪20，40mg／kg组的平均吸光度显著高于青霉素致痫组[0．435&;#177;0．011，0．658&;#177;0．029（t=2．98，5．32，P〈0．01）1。川芎嗪40mg／kg组与手术对照组的平均吸光度相近（t=1．75，P〉0．05）。结论：川芎嗪能显著提高癫痫大鼠神经元小体的含量。癫痫的发病过程可能与大脑神经元内氏小体的结构和含量的变化有密切关系，而川芎嗪能使神经元内氏小体的结构和含量得以恢复，调节内氏小体的功能，从而抑制癫痫发作。     

三七总皂甙对大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:以原代培养的大鼠海马神经细胞缺氧/缺糖再给氧为模型,观察三七总皂甙对神经细胞凋亡的抑制作用。方法:流式细胞术检测凋亡细胞百分率,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内Ca2 浓度,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞LDH的释放。结果:神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧3h时,细胞凋亡百分率明显增高,为19.06%(P<0.01),细胞坏死百分率为6.83%(P<0.01),细胞内Ca2 浓度为169.32nmol/LCa2 浓度(P<0.01),LDH的释放率为27.63%(P<0.01);神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧24h时,细胞凋亡百分率为49.85%(P<0.01),细胞坏死百分率为11.49%(P<0.01),细胞内Ca2 浓度为298.11nmol/L(P<0.01),LDH的释放率为60.35%(P<0.01)。三七总皂甙(25,50mg/L)能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,降低细胞内Ca2 浓度,减少LDH的释放,三七总皂甙的作用随剂量增加而作用增加。结论:三七总皂甙对缺血再灌注损伤后海马神经元的凋亡过程具有抑制作用,这种作用可能与其能降低细胞内Ca2 浓度有关。     

穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的：观察穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元形态和神经元细胞凋亡的影响，并分析其发生机制。方法：实验于2002-11—18／24在广州中医药大学针灸推拿学院针灸治疗学实验室完成。①选用健康纯系雄性SD大鼠40只，1．5～2月龄。喂养1周后按随机抽签法将大鼠分为5组：空白组、模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组，每组8只。模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组大鼠均腹腔注射青毒素4&;#215;10^6 IU／kg造成癫痫持续状态模型；空白组腹腔注射与造模组同等剂量的温生理盐水。以大鼠出现行为和皮质脑电图改变判断造模是否成功。具体方法如下：穴位埋药线组：在造模前3d埋线，选取大鼠大椎、心俞透膈俞（双）穴。用医用羊肠线浸泡于安定液24h后，将药线埋植在穴位的皮下组织或肌层内。常规针刺组：选大椎、心俞透膈俞（双）穴，用美容针，平补平泻，30min／次，1次／d，在造模前5d开始治疗，致痫当天也予治疗。西药组：致痫后即予腹腔注射0．25mg／kg苯妥英钠。空白组和模型组不予治疗。②所有动物均在致痫24h后，取脑，制成石蜡切片。以苏木精-伊红染色光镜下观察癫痫持续状态后大鼠海马神经元形态学改变；以原位细胞凋亡检测法检测穴位埋药线对癫痫持续状态后大鼠海马神经元DNA片段化的影响，每张切片计数3个不同视野（&;#215;400）内的阳性细胞数，取平均数作为细胞凋亡指数。③计量资料差异比较采用t检验。结果：大鼠40只均进入结果分析。①海马神经元细胞形态：空白组大鼠海马神经元细胞形态正常。致痫后24h，模型组、西药组、常规针刺组和穴位埋药线组的大鼠海马神经元细胞均可见不同程度的凋亡表现。②神经元细胞凋亡情况：模型组细胞凋亡指数明显高于空白组[（85．26&;#177;22．76），（11．50&;#177;4．20）个，P〈0、01]；穴位埋药线组、西药组与常规针刺组细胞凋亡指数低于模型组[（25．48&;#177;9、70），（32．00&;#177;5．05），（55．56&;#177;10．11）个1，但只有穴位埋药线组与模型组差异明显（P〈0、01），最接近空白组；3个治疗组细胞凋亡指数相近。结论：穴位埋药线疗法可能通过抑制神经元细胞凋亡起到治疗癫痫的作用。     

穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:观察穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元形态和神经元细胞凋亡的影响,并分析其发生机制。方法:实验于2002-11-18/24在广州中医药大学针灸推拿学院针灸治疗学实验室完成。①选用健康纯系雄性SD大鼠40只,1.5～2月龄。喂养1周后按随机抽签法将大鼠分为5组:空白组、模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组,每组8只。模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组大鼠均腹腔注射青毒素4×106IU/kg造成癫痫持续状态模型;空白组腹腔注射与造模组同等剂量的温生理盐水。以大鼠出现行为和皮质脑电图改变判断造模是否成功。具体方法如下:穴位埋药线组:在造模前3d埋线,选取大鼠大椎、心俞透膈俞(双)穴。用医用羊肠线浸泡于安定液24h后,将药线埋植在穴位的皮下组织或肌层内。常规针刺组:选大椎、心俞透膈俞(双)穴,用美容针,平补平泻,30min/次,1次/d,在造模前5d开始治疗,致痫当天也予治疗。西药组:致痫后即予腹腔注射0.25mg/kg苯妥英钠。空白组和模型组不予治疗。②所有动物均在致痫24h后,取脑,制成石蜡切片。以苏木精-伊红染色光镜下观察癫痫持续状态后大鼠海马神经元形态学改变;以原位细胞凋亡检测法检测穴位埋药线对癫痫持续状态后大鼠海马神经元DNA片段化的影响,每张切片计数3个不同视野(×400)内的阳性细胞数,取平均数作为细胞凋亡指数。③计量资料差异比较采用t检验。结果:大鼠40只均进入结果分析。①海马神经元细胞形态:空白组大鼠海马神经元细胞形态正常。致痫后24h,模型组、西药组、常规针刺组和穴位埋药线组的大鼠海马神经元细胞均可见不同程度的凋亡表现。②神经元细胞凋亡情况:模型组细胞凋亡指数明显高于空白组[(85.26±22.76),(11.50±4.20)个,P<0.01];穴位埋药线组、西药组与常规针刺组细胞凋亡指数低于模型组[(25.48±9.70),(32.00±5.05),(55.56±10.11)个],但只有穴位埋药线组与模型组差异明显(P<0.01),最接近空白组;3个治疗组细胞凋亡指数相近。结论:穴位埋药线疗法可能通过抑制神经元细胞凋亡起到治疗癫痫的作用。     

葛根素对去卵巢大鼠心肌超微结构的影响

目的探讨葛根素对去卵巢大鼠心肌的影响,以期为临床研究更年期心脏疾病提供形态学依据。方法雌性健康SD大鼠32只,分为假手术组、动物模型组、雌激素组和葛根素组。光镜下观看心肌组织学变化,透射电镜下观察心肌超微结构的变化。结果去卵巢后,大鼠心肌细胞核周隙不规则扩张,染色质浓集成块;线粒体嵴融合、消失、排列紊乱、卷曲呈髓鞘样变化,嵴间隙扩张、明显空泡化;闰盘间隙不规则增宽。雌激素、葛根素使上述病变减轻。结论葛根素对去卵巢大鼠心脏有保护作用。     

大鼠海马神经元模拟缺血时谷氨酸诱发电流改变

目的:观察大鼠海马神经元模拟缺血时谷氨酸诱发电流的改变,探讨脑缺血神经元损伤的兴奋毒性机制,为中枢神经损伤的康复提供理论依据。方法:以原代培养的大鼠海马神经元为标本,采用全细胞膜片钳方法观察原代培养大鼠海马神经元模拟缺血时谷氨酸诱发电流改变。结果:当钳制电压为-60mV时,100μmol/L的N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)、α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)分别诱发一内向电流(INMDA,IAMPA),模拟缺血处理后的神经元INMDA、IAMPA明显增大。结论:升高的兴奋性氨基酸激活突触后膜的兴奋性氨基酸受体后引起神经细胞损伤。     

MCI-186对阿尔茨海默病大鼠海马神经元细胞增殖和细胞周期的影响

目的通过MCI-186对阿尔茨海默病大鼠海马神经元细胞增殖和细胞周期的影响进行探讨,来验证MCI-186通过抗细胞凋亡机制发挥其神经保护作用。方法将Wistar雄性大鼠分为5组：正常对照组、假手术组、痴呆组（穹隆海马伞损伤联合Aβ25-35侧脑室注射）、大剂量及小剂量MCI-186治疗组,于第28 d分离海马神经细胞,进行流式细胞仪检测[由计算机测出各组大鼠海马神经元细胞周期含量（G0/G1、S、G2/M）和凋亡率（AR）,并计算增殖指数（PI）=（S＋G2/M）/（G0/G1＋S＋G2/M）×100%]。结果 MCI-186治疗组大鼠海马神经细胞中,G1期细胞数目减少,S期细胞数目增多,PI增加、AR降低;其中小剂量MCI-186治疗组改变更明显。结论 MCI-186会促使静止态G1期细胞活跃并向S期转变,增加DNA合成量,促进细胞增殖,并能抑制细胞凋亡,从而达到保护神经细胞的目的 ,以小剂量MCI-186保护神经细胞作用更强。