骨肉瘤中survivin、Caspase-8的表达及其与凋亡的相关性研究

目的探讨survivin mRNA、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法分别采用RT-PCR和免疫组化技术检测40例骨肉瘤及正常组织中survivin mRNA和Caspase-8蛋白的表达,运用TUNEL方法检测细胞凋亡。结果77.5%的骨肉瘤组织survivin mRNA呈阳性表达,显著高于正常组织;Caspase-8蛋白在骨肉瘤和正常组织中的阳性表达率分别为27.5%和85%(P<0.05);在骨肉瘤组织中,survivin mRNA和Caspase-8蛋白表达呈负相关;survivin mRNA阳性的骨肉瘤中细胞凋亡指数明显低于survivin mRNA阴性组(P<0.05);Caspase-8蛋白阳性的骨肉瘤中细胞凋亡指数明显高于Caspase-8蛋白阴性组(P<0.05)。结论survivin、Caspase-8均参与骨肉瘤的发生、发展变化,survivin是通过抑制Caspase-8的活性而发挥其抑制细胞凋亡作用的。     

骨肉瘤VEGF表达及VEGF抗体抑制血管生成的实验研究

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）表达与骨肉瘤血管生成和预后的关系,以及VEGF抗体抑制骨肉瘤细胞OS-732诱导血管生成的作用和可能机制,为以VEGF为靶点治疗骨肉瘤提供实验依据。方法应用免疫组化和形态计量方法,检测80例骨肉瘤VEGF表达、肿瘤微血管密度（MVD）,以及OS-732血管生成相关因子的表达。进一步应用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型观察VEGF抗体对OS-732诱导血管生成及肿瘤细胞生长的抑制作用。结果（1）骨肉瘤VEGF表达与肿瘤微血管密度（MVD）及预后密切相关。（2）OS-732表达VEGF和BFGF,而且VEGF表达强度明显高于BFGF,OS-732具有很强的诱导血管生成能力。（3）VEGF抗体干预实验结果显示VEGF抗体组肿瘤区血管密度明显低于PBS对照组,细胞凋亡指数显著高于PBS对照组,而增殖指数两组差异无统计学意义。同时,VEGF抗体组凋亡的微血管内皮细胞增多,增殖期内皮细胞少见。结论VEGF是骨肉瘤重要的血管生成因子,其表达可能是评估骨肉瘤预后的一项有价值的指标。VEGF抗体能够抑制内皮细胞增殖,促进内皮细胞凋亡,显著抑制骨肉瘤OS-732血管形成,并可能通过抑制血管形成而促进肿瘤细胞凋亡,达到抑制瘤细胞生长的作用。该结果提示VEGF可以作为骨肉瘤抗血管生成治疗的潜在靶分子。     

局部及已转移骨肉瘤中VEGF、p53表达及微血管生成的对照研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和p53在骨肉瘤微血管新生中的作用及对原发骨肉瘤侵袭性转移性的影响.方法采用免疫组织化学方法,检测57例局部原发性骨肉瘤和27例伴发转移的骨肉瘤原发灶标本中VEGF、p53的表达,计算MVD值.比照两骨肉瘤组中VEGF、p53表达,MVD以及其它临床病理因子的差别.结果伴发转移骨肉瘤组VEGF阳性表达率高于局部骨肉瘤组(P=0.0494);p53蛋白表达在两组肿瘤中无显著差别(P＜0.05);伴发转移骨肉瘤组的微血管密度高于局部骨肉瘤组的微血管密度(P=0.0302);件发转移骨肉瘤组中肿瘤平均直径大于局部骨肉瘤组的平均直径(P=0.0350);VEGF和P53表达阳性组与阴性组相比,MVD值高(P=0.0125,P=0.0036);VEGF与P53表达阴阳性一致率为51.2%.VEGF和P53共同阳性表达组MVD值最高(42.7±22.4),而VEGF和P53共同阴性表达组MVD值为最低(23.3±20.1),差别显著(P=0.0077).结论p53和VEGF共同参与骨肉瘤血管生成并有协同作用.VEGF和MVD检测对骨肉瘤早期转移的临床预测有实际意义.     

骨肉瘤组织中Ang-2、VEGF的表达及MVD测定

目的:检测骨肉瘤组织中血管生成素-2( Ang-2)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD).方法:采用RT-PCR技术和Western blot法检测69例骨肉瘤患者和12例正常对照骨组织中Ang-2的表达;采用免疫组化法检测69例骨肉瘤组织中VEGF与CD34的表达,计算MVD;分析Ang-2的表达与VEGF、MVD的关系.结果:骨肉瘤组Ang-2 mRNA的表达量、Ang-2蛋白阳性表达率、VEGF蛋白阳性表达率及MVD均高于对照组(t=8.2 53,x2校正 =11.960和11.470,P均＜0.01).高VEGF表达组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低VEGF表达组(P＜0.01);高MVD组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低MVD组(P＜0.01).结论:Ang-2参与了骨肉瘤的血管生成及调控,在骨肉瘤的发生中起着重要的作用.     

骨肉瘤组织中endocan、VEGF的表达及意义

目的 探讨人骨肉瘤组织中endocan、血管内皮生长因子(VEGF)的表达状况及其与临床病理资料之间的相关性.方法 应用SP法对34例经手术切除和病理证实的骨肉瘤组织中endocan、VEGF蛋白的表达进行检测.结果Endocan在骨瘤组织胞质中呈阳性表达,肿瘤周围的血管内皮细胞呈阳性表达.对照组表达无明显表达.分别记录各组的平均光密度(MOD),采用独立样本的t检验分析,两组之间差异有统计学意义.比较endocan、VEGF的MOD值,经Pearson相关统计分析,两组之间差异有统计学意义.Endocan、VEGF的MOD值与患者年龄及性别无相关性,与患者病程及肺转移有明显相关性;endocan、VEGF的MOD与肿瘤的类型有相关性.结论 Endocan在骨肉瘤组织中有明显的表达,其表达与骨肉瘤的生长、转移有关,提示检测endocan的表达对骨肉瘤的预后判断可能有一定的指导意义.     

骨肉瘤iNOS过度表达与血管生成及预后的关系

目的 探讨骨肉瘤中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的表达及其与血管生成和预后的关系。方法 应用免疫组化方法检测８０例骨肉瘤标本ｉＮＯＳ的表达,ＦⅧ－ＲＡ和ＣＤ３１免疫组化染色显示肿瘤内微血管密度。结果 ８０例骨肉瘤中５２例ｉＮＯＳ阳性（６５％）,肿瘤细胞境质中的巨噬细胞和部分血管内皮细胞均为阳性。ｉＮＯＳ阳性表达和肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）显著正相关,而且ｉＮＯＳ阳性组病人生成率显著低于ｉＮＯＳ阴性     

骨肉瘤VEGF和PCNA表达与微血管密度的关系研究

目的　探讨血管新生在骨肉瘤生长、浸润、转移中的作用。方法　通过对 5 2例骨肉瘤组织标本的研究 ,采用抗人血管内皮生长因子VEGF (VascularEndothlialGrowthFactor)单克隆抗体、抗人增殖细胞核抗原PCNA(Pro1iferatingCellNuclearAntigen)单克隆抗体 ,借助免疫组织化学方法 ,对代表血管新生的肿瘤VEGF表达、微血管密度 (MicrovessleDensity)及代表肿瘤细胞增殖的PCNA的表达进行检测。 结果　VEGF表达和MVD与瘤转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,与肿瘤大小和肿瘤细胞分型无关 (P >0 .0 5 ) ;PCNA表达与骨肉瘤转移有关 (P <0 .0 5 )。结论　骨肉瘤体内血管新生不仅为肿瘤生长提供条件 ,也是其转移的基础。PCNA可作为术后肿瘤转移的预测因子及判断预后的指标     

骨肉瘤p53蛋白过度表达与微血管密度的关系

目的：研究骨肉瘤ｐ５３蛋白过度表达与肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）的关系，以及它们对骨肉瘤预后的影响，方法：应用免疫组化和形态计量的方法检测８０例骨肉瘤ｐ５３蛋白表达以及ＭＶＤ计数。结果：ｐ５３蛋白过度表达与ＭＶＤ密切相关，而且两者均为影响骨肉瘤预后的重要因素，依相对危险度大小依次为ｐ５３〉ＭＶＤ。结论：结果证实ｐ５３基因对ＭＶＤ有调节作用，ｐ５３蛋白过度表达是肿瘤重要的血管生成表型之一，ｐ５３蛋白和     

骨肉瘤组织中骨桥蛋白、COX-2和VEGF表达

目的:探讨骨肉瘤组织中骨桥蛋白(OPN)、环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的临床意义。方法:应用免疫组化方法检测38例骨肉瘤组织中OPN、COX-2和VEGF蛋白表达情况。结果:OPN、COX-2和VEGF蛋白总阳性率分别为60.53%,63.16%,68.42%,在不同恶性级别的骨肉瘤中均具有差异性(P<0.05),而且与肿瘤的恶性程度相关;COX-2,OPN与VEGF表达正相关。结论:OPN,COX-2和VEGF在肿瘤的进展过程中起促进作用,OPN和COX-2是VEGF表达调控因子。OPN可能是肿瘤形成过程中的早期分子事件,可作为监测肿瘤恶性进展的一个生物学标志。     

甲状腺癌中survivin与VEGF因子的表达及其临床意义

目的 探讨甲状腺正常组织和甲状腺癌中survivin和VEGF的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学法学检测20例腺瘤旁正常甲状腺组织和50例甲状腺癌标本中survivin和VEGF的表达.结果 在50例甲状腺癌survivin和VEGF的阳性表达率分别为70%和64%,显著高于甲状腺正常组织.结论 survivin和VEGF在甲状腺癌发生发展中起到重要作用,survivin和VEGF有望成为甲状腺癌诊断和治疗的新靶点.     

Survivin蛋白在骨肉瘤组织中的表达及其意义

目的:探讨骨肉瘤组织中survivin蛋白的表达及其临床意义。方法:本研究收集本院病理科1997年1月～2006年12月临床手术治疗的归档蜡块共26例。其中13例为骨肉瘤组织标本,其余为骨软骨瘤组织标本。采用免疫组织化学SP法检测上述组织中survivin蛋白;survivin蛋白表达水平采用Imagepro-plus5.0软件进行半定量分析。结果:骨肉瘤组织中survivin蛋白表达的平均像素为1174.3±10.0,骨软骨瘤组织中survivin蛋白表达的平均像素为137.9±9.9。骨肉瘤组高于骨软骨瘤组,两者比较差别有统计学意义(t=265.7,P<0.05)。随着肿瘤恶性程度加重,其阳性表达率逐渐增高。结论:survivin蛋白表达与骨肉瘤的病理分级密切相关。随着肿瘤恶性程度的增高,survivin蛋白阳性表达率逐渐增高,检测survivin对于诊断骨肉瘤,判断其恶性程度有一定价值。     

RNA干扰技术特异性抑制骨肉瘤survivin的表达

目的:体外转录合成survivin siRNA,观察其在骨肉瘤细胞株U2-OS中抑制survivin的表达情况.方法:体外转录合成survivin序列特异性双链RNA(dsRNA),转染U2-OS细胞株中,用RT-PCR和Western blot法检测转染前后survivin基因的mRNA和蛋白的表达,MTF法检测细胞增殖,观察U2-OS细胞生物学特性的改变.结果:转染特异性siRNA的细胞其survivin mRNA及蛋白表达均下调,干涉后细胞的增殖受到抑制.结论:体外转录合成特异性survivin siRNA能有效抑制骨肉瘤细胞株U2-OS中survivin的表达,抑制细胞的增殖,RNA干扰技术为骨肉瘤的治疗提供了一种新策略.     

Study on Angiogenesis Factor of Human Osteosarcoma

The rapid growing ofthe solid tumors is usuallydue to the rapid development of blood vessels[1] .Os-teosarcoma emerges a typical clinical appearance ofsolid tumors in which histologicalsections often showa great number of pathological nutritional blood ves-sels. Investigation of the tumor neovascularizationcould not only understand the mechanism of thegrowth and metastasis of osteosarcoma,but also ex-pect to deduce a therapeutic program targeting theneovascularization.Thus,we cultured the huma…     

脑胶质瘤survivin表达及其反义核酸对U251细胞的作用

目的:观察脑胶质瘤患者脑组织生存素(survivin)的表达及其反义寡核苷酸(survivin ASODN)对脑胶质瘤U251细胞生长和凋亡的影响。方法:RT-PCR法检测脑胶质瘤患者脑组织survivin mRNA表达,脂质体介导下,分别以100、300、500 nmol/Lsurvivin ASODN作用于脑胶质瘤U251细胞48 h后,观察细胞形态学,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:脑胶质瘤患者脑组织有survivin mRNA表达,阳性率为76.7%。不同浓度survivin ASODN转染48 h后,细胞生长抑制率分别为(52.24±6.59)%、(36.14±4.01)%和(24.14±5.57)%,凋亡指数分别为(19.46±3.85)%、(38.6±1.85)%和(55.34±3.16)%,与对照组及不同浓度组间比较差异有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:脑胶质瘤患者脑组织有survivin mRNA表达,survivin ASODN以剂量依赖方式抑制脑胶质瘤U251细胞生长,诱导细胞凋亡。     

骨肉瘤组织中微血管密度、VEGF和PCNA检测

目的:研究骨肉瘤组织中微血管密度(MVD)、内皮细胞生长因子(VEGF)及增殖细胞核抗原(PCNA)表 达的生物学意义。方法:用免疫组织化学S P法,测定30例骨肉瘤组织(Ⅰ级15例,Ⅱ、Ⅲ级15例;4a生存13例, 死亡17例)和15例正常骨组织中MVD及VEGF、PCNA表达情况。结果:骨肉瘤组织与正常骨组织,骨肉瘤组织 Ⅱ、Ⅲ级与Ⅰ级,骨肉瘤生存组与死亡组相比,VEGF蛋白表达、MVD、PCNA指数差异有统计学意义(P<0.05)。骨 肉瘤PCNA高表达组与低表达组、骨肉瘤组织VEGF蛋白表达阳性组与阴性组相比,MVD差异有统计学意义(P< 0.05)。结论:VEGF蛋白表达、MVD及PCNA指数可作为反映骨肉瘤分级和预后的指标。     

外周血生存素的表达与结肠癌相关性研究

目的探讨外周血生存素的表达与结肠癌的关系。方法以逆转录-聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定(RT-PCR-ELISA)方法检测95例结肠癌患者外周血生存素mRNA的表达,比较其是否与肿瘤部位、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和临床分期具有相关性。结果 35例(36.8%)结肠癌患者外周血生存素mRNA表达阳性。肿瘤高、中分化及低、未分化生存素mR-NA表达率分别为31.0%、45.0%。浸润深度达浆膜层者外周血生存素mRNA表达率(44.0%)高于侵及黏膜下层及肌层的表达率(20.0%),淋巴结有转移者外周血表达率为47.5%,高于无淋巴结转移的表达率(19.4%)。结论生存素mRNA在外周血的表达与肿瘤分化、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有明显相关性,但与肿瘤部位无明显相关。     

胰腺癌组织survivin和COX-2表达的相关性

目的:探讨凋亡抑制蛋白survivin和环氧化酶-2(COX-2)在胰腺癌组织中的表达与生物学行为之间的关系及二者的相关性.方法:用免疫组织化学Envision法对51例胰腺导管癌survivin和COX-2的表达进行检测.结果:51例胰腺导管癌中survivin蛋白和COX-2蛋白的表达率分别为80.4%和74.5%;两者在11例癌旁非肿瘤胰腺组织中均未发现阳性表达.Survivin的表达与组织学分级有关(P<0.01),而与临床分期和淋巴结转移关系不大(P>0.05);COX-2的表达与临床分期、淋巴结转移有关(P≤0.05),而与组织学分级关系不大(P>0.05);survivin的表达与COX-2的表达密切相关(P<0.05).两者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、部位均无关.结论:Survivin和COX-2密切相关,可能在胰腺癌的发生、发展过程中起关键作用,可能为胰腺癌的治疗提供了新的靶点.     

骨肉瘤血管内皮生长因子表达及微血管密度与肿瘤预后

目的：研究骨肉瘤中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与微血管密度（ＭＶＤ）及其与临床预后的关系。方法：对６９例骨肉瘤患者的临床病理资料进行回顾性研究,应用ＣＤ３４,ＶＥＧＦ（ＪＨ１２１?mＡb对其组织切片分别进行免疫组化染色,并将上述资料与患者预后进行统计学分析。结果：骨肉瘤ＶＥＧＦ表达与ＭＶＤ相关（Ｐ〈０．０５）。骨肉瘤ＶＥＧＦ表达、ＭＶＤ同临床肿瘤大小、边界微小病灶、Ｅｎｎｅｋｉｎｇ外科分期一样