中草药作为细胞凋亡诱导剂用于癌症治疗的研究进展

诱导细胞凋亡是细胞毒性抗肿瘤药物最重要的标志之一。某些天然化合物(包括某些植物)通过各种机制诱导肿瘤细胞凋亡。长春花生物碱、紫杉醇、鬼臼毒素、喜树碱等已作为植物提取抗癌剂用于临床。本文通过查阅中草药抗肿瘤的相关文献,对作为肿瘤细胞凋亡诱导剂使用的中草药进行综述,可为抗肿瘤药物的研究提供参考方向和依据。     

新型癌症治疗药物——细胞凋亡诱导剂Elesclomol

近期研究显示，在缺氧状态下，例如在肿瘤细胞中，线粒体会产生大量活性氧簇（ROS），当ROS累积到一定量时会引发细胞凋亡。因此，那些能促进ROS产生的药物可能具有潜在抗癌作用。     

蛇莓提取物调控锌指蛋白217的表达对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨蛇莓提取物对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响,及其作用。方法实验分为对照组(正常培养的T24细胞,未做任何处理)、实验1,2,3,4组(用质量浓度分别为0.05,0.10,0.20和0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)、siNC组[转染锌指蛋白217(ZNF217)阴性对照质粒]、si-ZNF217组(转染ZNF217抑制表达载体质粒)、实验4+pc DNA3.1组(转染ZNF217阳性对照质粒,同时用0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)、实验4+pc DNA3.1-ZNF217组(转染ZNF217过表达载体质粒,同时用0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时荧光定量聚合酶链反应检测ZNF217 mRNA的表达水平。结果对照组、实验1,2,3,4组、si-NC组、si-ZNF217组、实验4+pc DNA3.1组和实验4+pc DNA3.1-ZNF217组的细胞存活率分别为(100.01±6.64)%,(98.16±6.53)%,(90.12±5.38)%,(70.69±4.62)%,(52.31±4.03)%,(100.00±7.12)%,(56.35±5.25)%,(52.16±3.94)%和(83.53±3.10)%,细胞凋亡率分别为(8.41±0.86)%,(9.10±0.90)%,(14.12±1.01)%,(18.23±1.35)%,(22.17±1.61)%,(8.31±0.84)%,(20.16±1.35)%,(22.10±1.41)%和(11.16±1.01)%,ZNF217 mRNA表达水平分别为1.00±0.05,0.98±0.05,0.81±0.05,0.60±0.04,0.34±0.03,1.01±0.05,0.24±0.02,0.75±0.06和0.33±0.03,实验2,3,4组的上述指标与对照组相比,si-ZNF217组的上述指标与si-NC组相比,实验4+pc DNA3.1-ZNF217组的上述指标与实验4+pc DNA3.1组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论蛇莓提取物可能通过下调ZNF217的表达,从而抑制膀胱癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

灵芝孢子油对人肺腺癌LTEP-a2细胞凋亡的影响

目的 观察灵芝孢子油对人肺腺癌细胞LTEP-a2增殖、凋亡与miR-16及其靶基因表达的影响,从miRNA角度揭示灵芝孢子油的抗肿瘤机制.方法 灵芝孢子油处理人肺腺癌细胞LTEP-a2 24和48 h后,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况,real-time PCR 检测miR-16及其靶基因bcl2和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 灵芝孢子油呈剂量、时间性地抑制人肺腺癌LTEP-a2细胞的增殖;当灵芝孢子油浓度达到2 μL·mL-1,细胞形态发生明显变化;Annexin-V/PI双染检测提示,灵芝孢子油在低浓度下就可促进细胞凋亡;灵芝孢子油可显著上调LTEP-a2细胞中miR-16的表达并相应下调bcl2和VEGF基因的表达.结论 灵芝孢子油能显著抑制人肺腺癌细胞LTEP-a2细胞增殖,引起细胞形态学改变.其作用机制之一是上调miR-16的表达、下调Bcl2和VEGF的表达,从而促进肺癌细胞凋亡,达到抗肿瘤的效果.     

灵芝菌丝体多糖对HL-60细胞凋亡的影响

目的：研究灵芝菌丝体粗总多糖(MGLP1)、总多糖(MGLP2)对HL-60细胞凋亡的影响。方法：MGLP1,MGLP2与HL-60细胞共培养,MTT法检测MGLP1,MGLP2对HL-60细胞增殖的抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞检测法定性定量检测细胞凋亡。MGLP1,MGLP2作用于小鼠脾细胞,再将共培养上清液(MGLP1-S-CM, MGLP2-S-CM)作用于HL-60细胞,同法定性定量检测它们对HL-60细胞凋亡的诱导作用。结果：MGLP1, MGLP2在体外对HL-60细胞的增殖无明显的抑制作用,且不能明显的诱导HL-60细胞凋亡。但MGLP1, MGLP2作用于脾细胞的共培养上清液却可以明显的诱导HL-60细胞凋亡。结论：MGLP1, MGLP2无直接促进HL-60细胞凋亡作用,但可通过脾细胞间接诱导HL-60细胞凋亡。     

灵芝酯溶性提取物诱导PC12细胞分化的研究

目的研究灵芝酯溶性提取物对PC12细胞分化的影响。方法采用PC12细胞分散培养法,观察PC12细胞在灵芝的酯溶性提取物及其灵芝酯溶性有效部位B2的诱导下突起生长阳性细胞的百分比,用神经元特异性标记物微管相关蛋白2(MAP2)单克隆抗体进行免疫荧光标记,荧光显微镜下观察MAP2阳性的细胞。结果灵芝酯溶性提取物的浓度为125～500mg·L-1,均可诱导PC12细胞突起生长,其中以500mg·L-1的浓度作用最明显。灵芝提取物与低浓度的NGF合用时对PC12细胞的分化有明显的促进作用。荧光显微镜下MAP2阳性细胞增多。结论灵芝酯溶性提取物能诱导PC12向神经细胞分化。     

葛根提取物诱导K562细胞凋亡

目的 探讨葛根提取物(PL)对慢性粒细胞自血病(CML)细胞株K562的凋亡诱导作用及其可能的分子机制.方法 以不同浓度(0、2.5、5、10和20 mg/ml)PL处理K562细胞,24 h后光镜下观察形态学改变,MTT法测定细胞增殖抑制,Hoechest 33258荧光染色及FITC-Annexin V/PI双染法检测凋亡率变化,半定量RT-PCR及Western blot方法检测Bcr/abl、Bcl-2、p53、Fas/FasL蛋白表达.结果 PL对K562细胞有明显的增殖抑制作用,并观察到典型的细胞凋亡形态变化,细胞凋亡率与浓度呈正相关;不同浓度PL干预后Bcr/abl基因在mRNA和蛋白水平呈浓度依赖性下调,而 Bcl-2基因则无明显变化;p53表达呈浓度依赖性上调;Fas/FasL表达无明显变化.结论 不同浓度PL能有效诱导K562细胞凋亡;其机制可能通过在mRNA和蛋白水平下调Bcr/abl基因,上调p53基因表达而实现.     

灵芝多糖诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的研究

目的：研究灵芝多糖（GLPS）与化疗药氟尿嘧啶联合使用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡作用。方法：MTT法测定细胞毒作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定Caspase-3、Caspase-8酶活性,Western—Blotting法检测细胞色素C、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达情况。结果：灵芝多糖与氟尿嘧啶联合使用具有显著的细胞毒作用;流式细胞术检测,随着GLPS浓度增加,细胞凋亡率升高,Caspase-3、Caspase-8酶活性亦增强;Western-Blotting检测发现GLPS作用后细胞色素C、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达不同程度增加。结论：灵芝多糖与氟尿嘧啶联合使用可通过引起细胞色素C的释放,活化Caspase诱导肝癌细胞凋亡。     

栝楼根提取物诱导 Hela 细胞凋亡的机制研究

目的：探讨栝楼根提取物（ EOT）诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的发生机制。方法采用流式细胞仪定量检测EOT诱导Hela细胞凋亡的发生率;应用Western blot 法和RT-PCR法观察Hela细胞Caspase-3酶原和mRNA表达的变化;用Caspase活性检测试剂盒检测Caspase-3,8,9的活性。结果同一浓度EOT分别作用Hela细胞12、24、36、48和60 h后,细胞凋亡率随着时间的延长而逐渐升高,但长时间（60 h）作用主要导致细胞坏死;在EOT诱导Hela细胞凋亡的过程中,Caspase-3酶原的蛋白表达随着作用时间的延长而逐渐降低;在EOT作用Hela细胞的过程中,Caspase-3 mRNA的表达水平随作用时间的延长而增高;Caspase-3,8,9活性均有时间依赖性增高的趋势,并且Caspase-8和9早于Caspase-3被激活。结论 EOT诱导Hela细胞的凋亡是通过Caspase-3的活化来实现的,且活化的Caspase-8和9共同参与了Caspase-3的激活。     

白英提取物诱导人肝癌BEL—7404细胞凋亡作用

探讨中药白英提取物对肝癌BEL－7404细胞系的凋亡作用。方法 用不同浓度的白英提取物处理肝癌BEL－7404细胞,通过观察细胞形态、DNA凝胶电泳法研究白英提取物诱导肝癌BEL－7404细胞产生凋亡现象。结果 光学显微镜下可见细胞呈凋亡特征性变化,凝胶电泳可见细胞DNA有规律断裂形成梯形图谱。结论 白英可诱导肝癌BEL－7404细胞产生凋亡。     

埃及槲果提取物和云实提取物混合具镇静、强心和防治尿道感染的作用

本品由10～80份埃及槲果或罗氏槲果、10～90份云实组成。在60℃～80℃分别焙烤上述草药的籽，冷却，浸在圣罗勒叶提取液     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的作用观察

目的 观察银杏叶提取物（EGB）对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响,探讨EGB防治糖尿病性视网膜病变的作用机制. 方法 选择健康成年Wistar 大鼠50只, 随机分成正常对照组、模型组、低剂量EGB组、中剂量EGB组、高剂量EGB组.腹腔内注射链脲佐菌素（STZ） 诱发大鼠糖尿病.低、中和高剂量EGB组分别给予EGB溶液50 ,100和200 mg·kg^-1·d^-1,灌胃给药,模型组和正常组均灌胃等体积0.9%氯化钠溶液,均连续12周.制备大鼠视网膜石蜡切片行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 （TUNEL） 法, 检测视网膜神经节细胞凋亡指数（AI）,并对染色结果行计算机图像分析.电镜观察各组神经节细胞的超微结构变化. 结果 模型组大鼠神经节细胞AI比正常对照组显著增加（P＜0.01), 中、高剂量EGB组神经节细胞AI与模型组比较明显减少（P＜0.01),低剂量EGB组神经节细胞AI与模型组比较差异无显著性（P＞0.05）.中、高剂量EGB组神经节细胞超微结构的损害明显减轻. 结论 EGB可以通过抑制视网膜神经节细胞的凋亡来减轻糖尿病性视网膜病变.     

银杏叶提取物对缺血-再灌注细胞凋亡的影响

缺血-再灌注（IR）是一种常见的临床病理生理过程，如心肌梗死、脏器移植、断肢再植以及四肢动脉栓塞等的血管再通，其具体的发生机制仍未阐明。研究发现，细胞凋亡可能在缺血-再灌注损伤（IRI）中起着重要作用。近年来，关于银杏叶提取物（GBE）对IR引起细胞凋亡的影响的研究较多，通过查阅大量文献，发现在动物实验中，GBE可降低不同器官因IR导致的细胞凋亡率的升高，包括肝脏细胞、神经细胞、心肌细胞等，其发生可能是通过对氧化应激的影响及对细胞因子的影响而实现的。     

灵芝孢子油对人肺腺癌LTEP a2细胞凋亡的影响

目的观察灵芝孢子油对人肺腺癌细胞LTEP a2增殖、凋亡与miR 16及其靶基因表达的影响,从miRNA角度揭示灵芝孢子油的抗肿瘤机制。方法灵芝孢子油处理人肺腺癌细胞LTEP a2 24和48 h后,采用CCK 8法检测其对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况,real time PCR 检测miR 16及其靶基因bcl2和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果灵芝孢子油呈剂量、时间性地抑制人肺腺癌LTEP a2细胞的增殖;当灵芝孢子油浓度达到2 μL&;#8226;mL 1,细胞形态发生明显变化;Annexin V/PI双染检测提示,灵芝孢子油在低浓度下就可促进细胞凋亡;灵芝孢子油可显著上调LTEP a2细胞中miR 16的表达并相应下调bcl2和VEGF基因的表达。结论灵芝孢子油能显著抑制人肺腺癌细胞LTEP a2细胞增殖,引起细胞形态学改变。其作用机制之一是上调miR 16的表达、下调Bcl2和VEGF的表达,从而促进肺癌细胞凋亡,达到抗肿瘤的效果。     

银杏叶提取物对三氯乙烯诱导的人角质形成细胞凋亡的影响

目的研究体外培养条件下银杏叶提取物(ginkgo biloba leaf extracts,EGb)对三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)诱导的正常人表皮角质形成细胞(normal human epidernis keratinocyte,NHEK)凋亡的影响。方法体外培养条件下,用中性红吸附试验(NRU)测定TCE对NHEK的中性红吸附减少50%的质量浓度(NR50值)和EGb的最低有效保护质量浓度。用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞仪(flow cytometer,FCM)测定细胞DNA含量并计算凋亡发生率。结果TCE对NHEK的NR50值为4.53(3.92~5.13)mmol/L;用10、50、100、150和200 mg/L EGb预孵育NHEK 2 h时,由2.0 mmol/L TCE引起的细胞活力的下降随EGb剂量的增加逐渐恢复,且150 mg/L为最低有效保护剂量。TCE可引起NHEK的超微结构呈凋亡改变,凋亡发生率呈剂量依赖式增加。与0.125、0.5和2.0 mmol/LTCE暴露组相比,150 mg/L EGb预孵育组,细胞超微结构恢复到正常对照组水平,凋亡发生率明显减少。结论体外培养条件下,EGb可以抑制TCE诱导的NHEK的细胞凋亡。     

固公果根提取物促进结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的 探讨固公果根提取物促进结肠癌细胞凋亡及机制研究。方法 分别采用MTT法、DAPI染色及流式细胞术检测固公果根提取物对结肠癌细胞增殖活性及细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹（Western-Blot）法检测凋亡相关蛋白的活性表达水平。结果 固公果根提取物能显著抑制结肠癌SW620和LOVO细胞增殖,促进两种结肠癌细胞凋亡,上调凋亡相关基因Keap-1、Bax的蛋白表达,下调Nrf2、HO-1以及Bcl2蛋白的表达。结论 固公果根提取物能显著抑制人结肠癌细胞SW620和LOVO增殖、诱导细胞凋亡,其作用机制可能涉及调控凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达,且与激活Nrf2氧化应激通路有关。     

银杏叶提取物对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响。方法:0、5、10、20、50、100、200μg/ml GBE培养细胞48 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0、10、50、200μg/ml GBE培养细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率。结果:5、10、20、50、100、200μg/ml GBE培养细胞48 h后,对细胞生长有明显抑制作用,且呈剂量依赖关系。10、50、200μg/ml GBE培养细胞48 h后细胞凋亡率升高。结论:GBE可一定程度上抑制SGC7901细胞增殖,诱导其凋亡,以前者为主。