热启动双重聚合酶链反应检测淋病奈瑟菌和沙眼衣原体

建立了蜡隔热启动双重聚合酶链反应同时检测临床泌尿生殖道样品的淋病奈瑟菌和沙眼衣原体的方法，对１７５例临床样品进行了检测，其中淋病奈瑟菌阳性２０例，占１１．４％，沙眼衣原体阳性为３９例，占２２．３％，淋病奈瑟菌和沙眼衣原体双重感染为１２例，占６．９％，做了单一ＰＣＲ与双重ＰＣＲ对照，结果完全相符，并对阳性ＰＣＲ产物进行了限制性酶切鉴定，本实验表明，双重ＰＣＲ对于临床检测淋病奈瑟菌和沙眼衣原体是一快捷     

涂片、培养、PCR三种方法检测淋病奈瑟菌比较

涂片、培养、ＰＣＲ三种方法检测淋病奈瑟菌比较杨锦红（温州医学院附属二院检验科，浙江温州３２５０００）孔海深，李雪芬（浙江医科大学附属一院检验科）１材料与方法１．１标本采取来源于浙医大附属一院门诊性病疑似病人。同时取尿道（男性）或宫颈（女性）分泌物３份...     

淋病奈瑟菌PCR检验质量控制结果分析

临床分离的淋病奈瑟菌以无菌生理盐水１０倍系列稀释，制备成不同浓度的菌悬液，作为ＰＣＲ质控 发给广东省部分开展淋病ＰＣＲ检验的实验室，２３个回报结果中，假阳经１７．６％。１０ＣＦＵ淋球菌检出率１５．７％，１０＾２ＣＦＵ检出率２７．２％，１０＾３ＣＦＵ检出率５３．９％。总符合率４４．８％，结果表明，一些实验室不仅存在假阳性问题，而且阳性检出率也不高，应引起主度重视。     

三种检测淋病奈瑟菌方法的比较

三种检测淋病奈瑟菌方法的比较上海第二医科大学瑞金医院检验科（２０００２５）张轶，倪语星淋病奈瑟菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ，ＮＧ）是性传播疾病的主要病原。淋病的诊断主要依靠实验室检查。传统的涂片染色方法敏感性和特异性不高，分离培养法所...     

RT／PCR检测CMLbcr／abl mRNA及α—干扰素治疗后残留病灶观察

应用逆转录／多聚酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）及双扩增ＰＣＲ方法检测了４４例慢性期，缓解期及加速（或）急变期慢性粒细胞白血病患者的ｂｃｒ／ａｂｌ ｍＲＡＮ，所有患者均为阳性。各期患者均以表达ｂ３ａ２融合方式为主。１４例患者单用α－２ｂ干扰素或合用小剂量羟基脲治疗后，１３例患者ｂｃｒ／ａｂｌ ｍＲＮＡ仍阳性，有３例单次扩增结果阴性，提示白血病细胞负荷较低，１例孤立性骨髓外粒细胞白肉瘤患者治疗后复查ｂｃｒ／     

性病诊断的误区——滥用PCR

中国医学科学院全国性病控制中心主任叶顺章教授对目前有些单位为追求经济利益在性病诊断中滥用ＰＣＲ的状况下指出，在条件不具备的情况下，将ＰＣＲ用于性病的诊断易造成大量的假阳性和假阴性，并可导致严重的后果，因此应当慎用ＰＣＲ。ＰＣＲ是近几年出现的一种分子生...     

氟嗪酸治疗女性淋病62例分析

现将消防医院与一附院性病门诊１９９７年１月至１９９８年６月６２例女性淋病患者口服氟嗪酸治疗结果报告如下。１资料与方法１．１一般资料本组患者年龄５～５９岁,其中幼女（１３岁以下）２例,１８～２３岁４０例,２４～２９岁１３例,３０～４０岁５例,４０岁以上...     

淋病奈瑟菌感染诊断技术研究进展

淋病是目前世界上性传播疾病中发病率最高的一种 ,也是近年来我国最常见的性病。淋病奈瑟菌 (Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ ,ＮＧ)除引起泌尿、生殖系粘膜表面的急、慢性化脓性感染外 ,尚可经血行播散导致全身性感染 ,如延误诊治甚至造成患者死亡。及时、正确的诊断至关重要 ,本文仅对现有的诊断方法及其优缺点作一综述。1　涂片法取分泌物涂于玻片上 ,行革兰染色 ,如在多形核细胞内找到革兰阴性双球菌 ,则为阳性。在急性淋菌性尿道炎的患者中 ,涂片镜检大多可查获病原体 ,该法简便易行 ,但敏感性及特异性差 ,且有假阳性 ,尤其…     

套式聚合酶链反应结合直接荧光法检测女性生殖道沙眼衣原体

目的建立一种敏感、特异、快速诊断女性生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）感染的方法。方法应用套式聚合酶链反应（ＮＰＣＲ）技术和直接荧光（ＤＦＡ）法检测女性生殖道沙眼衣原体。对两者结果不符的标本用细胞培养法验证。结果３００份受检标本，ＤＦＡ法阳性７１份，阴性２２９份，ＮＰＣＲ法阳性９０份，阴性２１０份；其中ＮＰＣＲ和ＤＦＡ均为阳性者６８份，另有２２份ＮＰＣＲ阳性，而ＤＦＡ为阴性，再经细胞培养证实系阳性。但另有３份ＤＦＡ阳性，ＮＰＣＲ却为阴性，再经细胞培养证实亦属阳性。综合ＮＰＣＲ与ＤＦＡ并对照细胞培养，结果显示ＮＰＣＲ的敏感性为９６７％（９０／９３），特异性为１００％（２０７／２０７），ＤＦＡ的敏感性为７６３％（７１／９３），特异性为１００％（２０７／２０７）。结论ＮＰＣＲ技术与ＤＦＡ法检测ＣＴ感染，均具有高度特异性、操作简便等优势；ＮＰＣＲ的敏感性优于ＤＦＡ法；ＤＦＡ法具有费用低、重复好的特点。两法结合起来检测ＣＴ，将获得理想的检测效果。     

聚合酶链反应检测克隆性免疫球蛋白重链基因重排

目的建立较简便、敏感的Ｂ细胞恶性肿瘤微小残留病（ＭＲＤ）检测方法。方法根据免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的保守序列设计引物，应用半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）基因扩增技术检测克隆性ＩｇＨ基因重排。结果该方法敏感性达１０－３。６２例Ｂ细胞恶性肿瘤患者，５１例检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，阳性率为８２％，假阴性率为１８％（１１／６２）。同时检测３５例非Ｂ细胞恶性肿瘤患者和２０例正常人均阴性，无假阳性。检测１４例Ｂ细胞非何杰金淋巴瘤患者形态学检查正常的骨髓标本，ＭＲＤ检出率为７１％（１０／１４）。随访５例处于完全缓解期的Ｂ细胞型急性淋巴细胞白血病患者，６个月内ＭＲＤ均阳性，１２个月后３例转阴性，２例持续阳性，１８个月后持续阳性的２例患者均复发，而转阴性的３例仍处于完全缓解状态。结论半巢式ＰＣＲ检测克隆性ＩｇＨ基因重排，方法简便，敏感性和特异性高，可用于Ｂ细胞恶性肿瘤ＭＲＤ检测     

鼻咽癌细胞DNA含量的分析

目的探讨鼻咽细胞复制不同时期ＤＮＡ含量与癌细胞发生发展的关系，为建立现代化诊断方法提供资料。方法本文应用流式细胞仪（ＦＣＭ）对６４例经病理诊断为鼻咽癌（ＮＰＣ）患者的鼻咽细胞进行ＤＮＡ含量测定，并与４１例慢性咽炎患者的鼻咽细胞ＤＮＡ含量进行对照分析。结果ＮＰＣ患者中非整倍体的阳性率为８４．４％；假阴性１５．６％；假阳性７．３％。ＤＮＡ合成期（ＳＰＦ）大于３０％的阳性率为８７．５％；假阴性１２．５％；假阳性９．８％。结论应用ＦＣＭ检测肿瘤细胞周期ＤＮＡ含量，具有快速、准确、自动化程度高的优点，有较好的临床应用前景。     

聚合酶链反应检测沙眼衣原体和解脲脲原体

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１５６例非淋病性尿道炎（ＮＧＵ）和１２８例淋病性尿道炎（ＧＵ）患者进行沙眼衣原体（Ｃｔ）和解脲脲原体（Ｕｎ）检测，其中ＮＧＵ中Ｃｔ、Ｕｕ的阳性率分别为２６．３％、１７．９％，Ｃｔ、Ｕｕ双阳性率为７．７％；ＧＵ患者Ｃｔ、Ｕｕ的阳性率分别为４３．８％、３３．６％，Ｃｔ、Ｕｕ双阳性率的为１６．４％。     

180例女性淋病临床分析

淋病是由革兰氏阴性淋病双球菌又叫淋病奈瑟氏菌引起的性传播性疾病 ,在国内性病统计资料中居首位。现将我院1997年 1月～ 1999年 12月妇科门诊就诊的 180例淋病报告如下。1　临床资料1997年 1月～ 1999年 12月 ,妇科门诊就诊人数共 41893例 ,检查发现淋病感染者 180例 ,占 0 43 %。1 1　诊断依据[2 ] 　 ( 1)患者有不洁性交史 ;( 2 )阴道口有脓性分泌物排出伴搔痒 ,或有尿道炎等症状 ;( 3 )幼儿有外阴潮红、阴道及尿道有脓性分泌物 ,或新生儿眼炎、角膜炎等 ;( 4 )分泌物涂片镜检在多形核细胞内找到革兰氏阴性双球菌或培养淋球菌阳性。1 2…     

聚合酶链反应对活动性肺结核病的诊断价值探讨

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）对结核病的临床诊断价值。方法：本文对１２６例活动性肺结核病人的痰标本进行了检测。结果：发现ＰＣＲ检出率为６０．３％,高于痰培养的４９．２％和痰涂片的３８．１％。但涂阳病人中有２２．９％ＰＣＲ阴性,８２例非结核疾患有２８．１％ＰＣＲ阳性。结论：提示ＰＣＲ阳性结果并非活动性结核病所特有     

淋病奈瑟菌青霉素、四环素耐药的分子检测

淋病奈瑟菌 (ＮｅｉｓｓｅｒｉａＧｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ ,ＮＧ)的青霉素、四环素耐药表型研究 (即药敏分析 )国内已有较多文献报导。但不同的药敏检测方法其检出率的差异颇大。ＮＧ对青霉素、四环素耐药多数分别为获得ＴＥＭ基因和ＴｅｔＭ基因的质粒所致。为精确了解常州地区ＮＧ对青霉素、四环素的耐药状况 ,我们应用以ＴＥＭ基因为靶基因的套式聚合酶链反应 (ｎｅｓｔｅｄＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ ,ｎＰＣＲ)和以ＴｅｔＭ基因为靶基因的ＰＣＲ技术对分离自常州地区的 5 0株ＮＧ进行了分析检测 ,现将结果报告如下…     

PCR技术在女性淋病检测中的应用

ＰＣＲ技术在女性淋病检测中的应用仝连信，刘天云（牡丹江医学院附属三院，１５７０１１）史殿云（牡丹江铁路医院检验科）淋病是临床常见的一种性病，发病率较高，目前对本病的检测方法多用常规的涂片染色及细菌培养。该法对男性急性期病人淋菌阳性检出率在９０％以上，...     

淋病患者血清中HIV抗体检测浅析

本文对淋病患者的血清进行了ＨＩＶ抗体及其相关的免疫球蛋白检测。检测结果显示ＨＩＶ抗体阳性率较高，占４．５％，ＩｇＭ升高占１８．２％，ＩｇＧ升高占４．５％，提示应重视性病患者的ＨＩＶ抗体检测，以预防ＡＩＤＳ在国内蔓延。     

淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲支原体感染3年检测结果分析

目的 调查本地淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲支原体临床感染现状，为临床医生诊断治疗提供可靠的依据。方法 1999－2001年在我院门诊就诊病人共获取泌尿生殖道标本9767份，其中男性标本2304份，女性标本7463份。培养法检测淋病奈瑟菌和解脲支原体，单克隆抗体免疫荧光法检测沙眼衣原体，或男性急性尿道炎患用直接涂片革兰染色法检测淋病奈瑟菌。结果 1999－2001年共计检测标本9767份，男性2304份，三种病原体阳性共1155份，检出阳性率为50．1％；女性7463份，三种病原体阳性共2353份，检出阳性率为31．5％。三种病原体在1999年感染的阳性检出率为33．5％，2000年感染的阳性检出率为34．8％，2001年感染的阳性检出率达到39．2％。在3年中淋病奈瑟菌总的阳性率为13．5％，沙眼衣原体阳性检出率为14％，解脲支原体阳性检出率为24％。在3508份阳性标本中，患年龄分布＜20岁92例，占2．6％；20－30岁1298例，占37％；30－40岁1789例，占51％；＞40岁329例，占9．4％。结论 男性在门诊直接用脓液涂片革兰染色，阳性检出率可达90％以上，无需再做细菌培养，而女性淋病患，细菌培养有十分重要的意义，其阳性检出率不仅明显高于涂片革兰染色法，而且结合临床有较明确的诊断价值。性病感染呈逐年上升趋势，主要集中在青壮年人群，男性主要是淋球菌感染，女性多见沙眼衣原体、解脲支原体单一感染，女性较男性易发生混合感染。提示泌尿生殖道感染病人，仍应重视对这三种病原的检出，及时诊断和治疗由这些病菌引起的性病，防止性传播疾病的扩散。     

PCR和巢式PCR直接检测血清中HIV核酸序列

采用ＰＣＲ和巢式ＰＣＲ方法对５３例ＨＩＶ抗体阳性和阴性标本进行了检测，以扩增ＨＩＶ特异性ＤＮＡ序列，结果美国ＡｂｂｏｔｔＨＩＶ阳性血清２份，新加坡阳性血清２份，国内阳性血清２份及ＨＩＶ－１病毒培养物１份，两套ＰＣＲ扩增反应物均为阳性，对其中一套ＰＣＲ扩增的ｇａｇ基因序列进行巢式ＰＣＲ也为阳性。采自西南边境地区的２３份ＥＬＩＳＡ和ＷＢ阳性血清，各种ＰＣＲ反应均为阳性；１１份ＥＬＩＳＡ可疑阳性、ＷＢ阴性标本中，有两例血清呈ＰＣＲ阳性，探针杂交亦为阳性。而１２例ＳＩＶ、ＳＲＶ及猴血清标本ＰＣＲ反应均为阴性。上述结果表明，采用ＰＣＲ方法检测血清中ＨＩＶ核酸序列是一种很有前途的ＨＩＶ感染诊断方法。     

儿童急性早幼粒细胞白血病PML－RARa基因的检测及意义

作者应用筑巢式逆转录／多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对３４例儿童急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ，Ｍ３）患者进行ＰＭＬ－ＲＡＲａ融合基因的检测，发现１８例初发患者标本中均有融合基因转录本；１３例经全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）诱导缓解（ＣＲ）后的患者中，１２例仍可检测到融合基因的表达；同时对１６例巩固化疗后的患者进行微量残留病（ＭＲＤ）的检测：８例融合基因持续阴性或未次阴性的患者，除ｌ例不久复发外，余均处于良好的ＣＲ状态；而８例融合基因持续阳性或未次阳性的患者，７例已复发，其中３例分别是在ＰＣＲ阳性结果后３，３及４个月复发的。以上结果表明ＰＭＬ－ＲＡＲａ基因检测在儿童ＡＰＬ的诊断，疗效评价及ＭＲＤ监测中同样是一个快速、准确且灵敏的方法。